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作者：束安梅南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病最常见的微血管并发症,炎症在DN进展中扮演重要角色。在代谢性炎症反应过程中往往伴随着巨噬细胞的浸润、活化,进一步加重肾小球内皮细胞的炎性损伤。RAGE/RhoA/ROCK信号通路是巨噬细... 详细信息

目的:糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病最常见的微血管并发症,炎症在DN进展中扮演重要角色。在代谢性炎症反应过程中往往伴随着巨噬细胞的浸润、活化,进一步加重肾小球内皮细胞的炎性损伤。RAGE/RhoA/ROCK信号通路是巨噬细胞与肾内皮细胞交互作用的核心环节,产生的炎性介质是促进糖尿病肾损伤的重要物质基础。本论文通过自发性糖尿病小鼠肾脏RAGE过表达模型、AGEs致肾内皮细胞-巨噬细胞共培养损伤模型,利用蛋白抑制、过表达等技术,以生地、山茱萸的特征成分梓醇、马钱苷及其配伍为研究对象,深入阐明巨噬与内皮细胞交互应答的分子机制,为DN的防治提供新的思路和方法。方法:1.整体动物研究:取雄性KK/Ay小鼠(8周龄),高脂高糖饲料喂养2周后,将血糖值≥11.1 mmol/L的小鼠作为DM小鼠,尾静脉注射腺相关病毒(rAAV-DJ-mRAGE-IRES-ZsGreen),2周后将尿蛋白升高10倍以上、腺相关病毒在肾脏成功富集的作为RAGE过表达的DN小鼠。造模成功的小鼠随机分为:模型组、氨基胍组(100 mg/kg/d)、梓醇低、高剂量组(50、100 mg/kg/d)、马钱苷低、高剂量组(50、100 mg/kg/d)和梓醇-马钱苷配伍组(梓醇50 mg/kg/d+马钱苷50 mg/kg/d),另取未注射腺相关病毒的KK-Ay小鼠作为DN对照组,取健康C57BL/6J小鼠作为空白组,每组6只。按上述分组灌胃给药8周,空白组、DN对照组和模型组小鼠灌胃给予等量生理盐水,测定指标:①脱颈椎处死小鼠,横切肾脏皮质部位,分别于10%中性福尔马林和2.5%Gluta中固定,进行HE、Masson染色及透射电镜观察肾小球结构;②眼眶取血检测血清中MCP-1、M-CSF、IL-12、IL-10水平;③免疫组化和Western blot法检测肾皮质中Occludin、VE-Cadherin的蛋白表达;④免疫组化法检测肾脏中巨噬细胞标记蛋白EDA1的表达,Western blot法检测肾脏中巨噬细胞M1/M2型极化标记蛋白iNOS、Arg-1的表达;⑤Western blot法检测肾皮质中AGEs-RAGE/RhoA/ROCK通路蛋白的表达。2.体外细胞研究:(1)AGEs致内皮-巨噬细胞共培养损伤模型建立:于37℃、5%CO2培养箱中体外培养小鼠肾小球内皮细胞和巨噬细胞。①采用不同浓度AGEs(50、100、200、400 mg/L)分别刺激内皮细胞和巨噬细胞,另设空白组和0-BSA(200 mg/L)阴性对照组,CCK-8法检测0-BSA和不同浓度的AGEs对细胞活力的作用;②AO/EB染色法检测不同浓度AGEs对内皮细胞凋亡的影响;③不同浓度AGEs刺激Transwell培养板中内皮细胞,Western blot法检测内皮细胞RAGE蛋白的表达,并在光镜下观察共培养中的巨噬细胞形态;④不同浓度AGEs刺激Transwell培养板中巨噬细胞,Western blot法检测巨噬细胞RAGE蛋白的表达,并在光镜下观察共培养中的内皮细胞形态。(2)梓醇、马钱苷及其配伍对AGEs刺激肾内皮细胞介导巨噬细胞迁移、极化的影响:基于AGEs刺激肾内皮细胞介导巨噬细胞共培养模型,加入不同浓度(1、10 μM)梓醇、马钱苷及其配伍(梓醇、马钱苷1:1混合)。①ELISA和Western blot法检测AGEs刺激内皮细胞分泌MCP-1、M-CSF、ICAM-1水平;②结晶紫染色法观察AGEs刺激内皮细胞介导共培养中的巨噬细胞迁移率;③免疫荧光和Western blot法检测AGEs刺激内皮细胞介导共培养中的巨噬细胞M1型极化标记蛋白iNOS、CD16/32以及M2型极化标记蛋白CD206、Arg-1的表达。(3)梓醇、马钱苷及其配伍对AGEs刺激巨噬细胞介导内皮细胞损伤的影响:基于AGEs刺激巨噬细胞介导内皮细胞共培养模型,加入不同浓度(1、10μM)梓醇、马钱苷及其配伍(梓醇、马钱苷1:1混合)。①ELISA法检测AGEs刺激巨噬细胞分泌TNF-α、IL-6、IL-12、IL-10水平;②免疫荧光和Western blot法检测AGEs刺激巨噬细胞介导共培养中的内皮细胞Occludin、VE-Cadherin的蛋白表达。(4)梓醇、马钱苷及其配伍调控内皮-巨噬细胞交互作用的机制研究:①基于内皮-巨噬细胞共培养模型,加入不同浓度(1、10 μM)梓醇、马钱苷及其配伍(梓醇、马钱苷1:1混合),Western blot法检测RAGE、RhoA、ROCK蛋白表达;②用RAGE、RhoA、ROCK慢病毒转染内皮细胞,分为空白组、模型组、RAGE过表达组、RAGE过表达+梓醇-马钱苷配伍组、RhoA过表达组、RhoA过表达+梓醇-马钱苷配伍

关键词：糖尿病肾病内皮细胞巨噬细胞梓醇马钱苷 RAGE/RhoA/ROCK

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梓醇调控糖酵解改善KK-Ay自发性糖尿病小鼠睾丸病变的作用及机制

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中国药房 2023年第7期34卷 784-789,795页

作者：陈玉萍束安梅许惠琴蒋鸣朱逸晖江苏医药职业学院基础医学部江苏盐城224005 南京中医药大学药学院南京210023

目的基于晚期糖基化终末产物(AGEs)及其受体(RAGE)介导的糖酵解过程,研究梓醇对KK-Ay自发性糖尿病小鼠睾丸病变的改善作用及机制。方法以高脂饲料喂养的KK-Ay自发性糖尿病小鼠作为糖尿病模型,随机分为模型组、梓醇组(100 mg/kg)、氨基胍... 详细信息

目的基于晚期糖基化终末产物(AGEs)及其受体(RAGE)介导的糖酵解过程,研究梓醇对KK-Ay自发性糖尿病小鼠睾丸病变的改善作用及机制。方法以高脂饲料喂养的KK-Ay自发性糖尿病小鼠作为糖尿病模型,随机分为模型组、梓醇组(100 mg/kg)、氨基胍组(AGEs抑制剂,100 mg/kg)和FPS-ZM1组(RAGE抑制剂,1 mg/kg),并将同期饲养的C57BL/6J小鼠作为正常组,每组6只。梓醇组和氨基胍组小鼠灌胃相应药物,正常组和模型组小鼠灌胃等量生理盐水,FPS-ZM1组小鼠以1 mL/g腹腔注射相应药物,连续8周。末次给药后,检测小鼠体质量、空腹血糖和24 h摄食量、饮水量、尿量以及睾丸脏器系数、精子活力;观察小鼠睾丸组织病理形态学和超微结构;检测小鼠睾丸组织中还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)和糖代谢产物水平,并进行通路的富集分析;检测小鼠血清和睾丸组织中AGEs水平,睾丸组织中RAGE、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平以及糖酵解关键限速酶[己糖激酶(HK)、磷酸果糖激酶(PFK)、丙酮酸激酶(PK)、LDH]相应mRNA表达水平。结果经梓醇干预后,KK-Ay自发性糖尿病小鼠的一般体征、睾丸脏器系数及精子活力均显著改善(P<0.05或P<0.01);生精小管中各层生精细胞的形态以及超微结构均有所改善;睾丸组织中GSH、SOD、LDH水平,糖代谢产物果糖-1,6-二磷酸、3-磷酸甘油酸、3-磷酸甘油醛、乳酸、丙酮酸水平,以及HK、PFK、PK、LDH mRNA表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01);血清和睾丸组织中AGEs水平、睾丸组织中RAGE蛋白表达水平和Bax/Bcl-2均显著降低(P<0.05或P<0.01)。经氨基胍和FPS-ZM1干预后,小鼠上述大部分指标均显著改善(P<0.05或P<0.01)。结论梓醇对KK-Ay自发性糖尿病小鼠睾丸病变有明显的改善作用,其作用机制可能与上调AGEs/RAGE信号通路介导的糖酵解有关。

关键词：梓醇糖酵解糖尿病睾丸病变晚期糖基化终末产物晚期糖基化终末产物受体

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以案例为基础的护理药理学混合式教学改革实践

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中华护理教育 2023年第10期20卷 1185-1189页

作者：陈玉萍王春桃束安梅蒋鸣陈根林吴隽松江苏医药职业学院基础医学部江苏省盐城市224005

目的探讨以案例为基础的护理药理学混合式教学改革的方法与效果。方法将教学改革前的某职业院校2020级1班护理专业高职学生设为对照组(n=53),采用传统的章节讲授、课后辅以习题巩固的教学方法;将教学改革后的2021级1班设为试验组(n=50)... 详细信息

目的探讨以案例为基础的护理药理学混合式教学改革的方法与效果。方法将教学改革前的某职业院校2020级1班护理专业高职学生设为对照组(n=53),采用传统的章节讲授、课后辅以习题巩固的教学方法;将教学改革后的2021级1班设为试验组(n=50),采用以案例为基础的线上线下混合式教学模式。课程结束后,采用问卷调查两组的用药护理核心胜任力及自主学习能力。结果试验组用药护理核心胜任力、自主学习能力得分高于对照组(P<0.05)。结论以案例为基础的护理药理学混合式教学可提升教学效果,提高高职学生自主学习能力。

关键词：护理药理学案例教学混合式教学核心胜任力高职教育

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梓醇抑制AGEs刺激肾内皮细胞介导巨噬细胞活化的作用研究

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中国药理学通报 2020年第11期36卷 1513-1519页

作者：束安梅高雨嫣朱逸晖王威许惠琴杜秋陈璟吕高虹卢金福南京中医药大学药学院江苏省中药药效与安全性评价重点实验室江苏南京210023

目的探讨梓醇(catalpol,Cat)抑制晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)刺激肾内皮细胞(MGECs)介导巨噬细胞(RAW264.7)活化的作用。方法RAW264.7种于Transwell小室,MGECs种于下层孔板共培养,设置空白组、模型组、Cat组(1.0、10.0μmol·L^-1),另设氨基胍组(aminoguanidine,Ami)作为阳性对照。加入药物预孵1 h后,用AGEs刺激下层孔板中的MGECs 48 h。采用ELISA法检测MCP-1、M-CSF、IL-12、TNF-α的分泌水平;结晶紫染色法观察RAW264.7迁移;免疫荧光法检测巨噬细胞iNOS和CD206的荧光表达;Western blot法检测ICAM-1、iNOS、CD16/32、CD206、Arg-1的蛋白表达。结果与模型组相比,Cat明显抑制MGECs的MCP-1、M-CSF、ICAM-1表达(P<0.05,P<0.01),降低RAW264.7的IL-12、TNF-ɑ分泌(P<0.05,P<0.01),减少RAW264.7迁移(P<0.01),下调iNOS、CD16/32和上调CD206、Arg-1蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论Cat可通过抑制AGEs刺激MGECs表达MCP-1、M-CSF和ICAM-1,减少巨噬细胞向肾内皮细胞的迁移及分泌炎症因子,降低巨噬细胞M1型极化、促进其向M2型极化,减轻糖尿病肾病炎症反应。

关键词：梓醇晚期糖基化终末产物巨噬细胞内皮细胞糖尿病肾病炎症

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山茱萸新苷对糖尿病肾病模型小鼠的保护作用及机制

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中国药房 2024年第4期35卷 395-400页

作者：王威甘啸阳许惠琴朱逸晖束安梅富莹雪喻斌吕高虹南京中医药大学药学院/江苏省中药药效与安全性评价重点实验室南京210023

目的探讨山茱萸新苷对糖尿病肾病(DN)模型小鼠的保护作用及潜在机制。方法将雄性KK-Ay小鼠以高脂高糖饲料喂养2周复制DN小鼠模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组、氨基胍组(阳性对照,100 mg/kg)、山茱萸新苷组(100 mg/kg),另取雄性C57... 详细信息

目的探讨山茱萸新苷对糖尿病肾病(DN)模型小鼠的保护作用及潜在机制。方法将雄性KK-Ay小鼠以高脂高糖饲料喂养2周复制DN小鼠模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组、氨基胍组(阳性对照,100 mg/kg)、山茱萸新苷组(100 mg/kg),另取雄性C57BL/6J小鼠作为正常组,每组6只。各药物组小鼠灌胃相应药液,正常组和模型组小鼠灌胃等体积生理盐水,每天1次,连续8周。检测各组小鼠空腹血糖(FBG)、24 h尿蛋白,血清白细胞介素12(IL-12)、IL-10、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平,观察其肾组织病理损伤、纤维化改变和肾小球微观结构,检测其肾皮质中晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达情况。结果与正常组比较,模型组小鼠肾皮质可见明显的炎症细胞浸润和纤维化改变,肾小球系膜增生严重且基底膜有大量不规则块状暗色致密物沉积;其FBG、24 h尿蛋白水平,血清IL-12、BUN、Scr水平,肾皮质RAGE、COL-Ⅳ、i NOS蛋白的表达量均显著升高,血清IL-10水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,各药物组小鼠肾脏病理损伤、纤维化改变及肾小球微观结构均有明显改善,上述各定量指标均普遍好转(P<0.05或P<0.01)。结论山茱萸新苷对DN模型小鼠具有一定的保护作用,可抑制炎症反应,降低尿蛋白水平,缓解肾脏纤维化;上述作用可能与抑制晚期糖基终末产物/RAGE信号通路有关。

关键词：山茱萸新苷糖尿病肾病晚期糖基化终末产物/晚期糖基化终末产物受体信号通路炎症肾脏纤维化

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基于线上平台的机能学实验混合式教学模式探讨

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天津职业大学学报 2023年第6期32卷 76-80页

作者：束安梅朱石兵陈玉萍江苏医药职业学院江苏盐城224005

随着“互联网+”的迅速普及,机能学实验传统的教学模式已无法满足高职院校医学学生的发展需求,利用信息技术提升教学水平成为实验教学模式改革的新趋势。从机能学实验教学现状分析入手,探讨基于线上平台的混合式教学模式在机能学实验教... 详细信息

随着“互联网+”的迅速普及,机能学实验传统的教学模式已无法满足高职院校医学学生的发展需求,利用信息技术提升教学水平成为实验教学模式改革的新趋势。从机能学实验教学现状分析入手,探讨基于线上平台的混合式教学模式在机能学实验教学中的实施策略,将职教云、虚拟仿真实验教学平台与线下实践操作相结合,应用于课前导学、课堂教学、课后反馈及评价考核上,并明确了线上+线下混合式教学的应用需要进一步完善的工作,推进现代信息技术与实验教学的深度融合,为今后的医学实验类课程教学提供借鉴。

关键词：线上平台机能学实验混合式教学模式

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六灵解毒丸对急性咽炎的治疗作用研究

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南京中医药大学学报 2020年第6期36卷 846-852页

作者：高雨嫣束安梅朱逸晖姚瑶龚剑吕高虹王恒斌罗年翠许惠琴南京中医药大学药学院江苏南京210023 江苏省中药药效与安全性评价重点实验室江苏南京210023 雷允上药业集团有限公司江苏苏州215009

目的研究六灵解毒丸对急性咽炎的治疗作用。方法采用向幼龄大鼠咽部喷雾15%氨水的方法制备大鼠急性咽炎模型。将造模成功的大鼠随机分为5组,即模型组、蓝芩口服液组、六灵解毒丸3个剂量组(4.375、8.75、17.5 mg/kg),每天灌胃给药1次。... 详细信息

目的研究六灵解毒丸对急性咽炎的治疗作用。方法采用向幼龄大鼠咽部喷雾15%氨水的方法制备大鼠急性咽炎模型。将造模成功的大鼠随机分为5组,即模型组、蓝芩口服液组、六灵解毒丸3个剂量组(4.375、8.75、17.5 mg/kg),每天灌胃给药1次。空白组与模型组大鼠每天用生理盐水灌胃1次。各组均连续灌胃7 d。实验期间观察大鼠体质量、咽喉红肿等体征。给药结束后,用HE染色法观察大鼠咽部病变情况,取血清和咽黏膜下的结缔组织检测炎症因子的表达情况。采用小鼠毛细血管通透性与耳肿胀实验研究六灵解毒丸的抗炎作用。结果与空白组相比,模型组大鼠时常抓挠口咽部且体质量增长缓慢,咽部明显红肿,组织结构异常,有大量结缔组织增生和炎症细胞浸润。给予大鼠六灵解毒丸后,大鼠体质量增长加快,咽部红肿程度下降,组织结构有明显改善,黏膜下层腺体结构正常,未见结缔组织增生与炎症细胞浸润。六灵解毒丸能明显下调大鼠血清与组织中的IL-1β、IL-6、TNF-α水平(P<0.05~0.01)。另外,六灵解毒丸对二甲苯所致小鼠耳肿胀和乙酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性升高均有显著的抑制作用(P<0.05~0.01),其中六灵解毒丸中、高剂量组抑制耳肿胀作用明显优于蓝芩口服液。结论六灵解毒丸对于急性咽炎具有良好的治疗作用,其机制可能与下调IL-1β、IL-6、TNF-α水平相关。在临床等效剂量下,六灵解毒丸的作用略优于蓝芩口服液,表明六灵解毒丸有较好的治疗急性咽炎的作用。

关键词：六灵解毒丸急性咽炎 IL-1β IL-6 TNF-α

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交旅融合模式下的旅游公路景观规划设计探讨以海南环岛旅游公路环新英湾支线项目为例

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中华建设 2025年第1期 72-74页

作者：束倩上海市政工程设计研究总院(集团)有限公司

当前，旅游已成为推动区域经济增长的重要引擎之一。公路交通作为旅游业发展的基础性支撑和先决条件，连接着各个景点、地区及游客目的地，扮演着促进地区经济发展和文化交流的关键角色。随着海南省西部地区儋洋一体化发展的升温，海南...

当前，旅游已成为推动区域经济增长的重要引擎之一。公路交通作为旅游业发展的基础性支撑和先决条件，连接着各个景点、地区及游客目的地，扮演着促进地区经济发展和文化交流的关键角色。随着海南省西部地区儋洋一体化发展的升温，海南环岛旅游公路环新英湾支线应运而生，顺应了其必将兼顾交通和旅游的双重功能，使其完成“景致吸引力”对“交通流动性”的超越，从而催生全新的发展动能。本文通过对环新英湾旅游公路沿线景观资源的全面梳理，提出了景观规划方案，探讨了交通与旅游共融发展的实现途径，凸显了其在推动区域一体化发展、提升旅游体验和保护自然生态等方面的重要意义。

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城市居民低碳生活行为的影响因素研究——以南京市为例

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干旱区资源与环境 2025年第1期 49-59页

作者：郑晓奇李婷婷束晨王佳英吴雨竹史开梅南京邮电大学经济学院南京邮电大学理学院

分析城市居民低碳生活行为的影响因素有助于居民家庭生活低碳转型。文中基于计划行为理论，构建了城市居民低碳生活行为影响因素的理论模型，对江苏省南京市城市居民开展问卷调查，运用多元线性回归模型、Shapley分解、中介效应检验和... 详细信息

分析城市居民低碳生活行为的影响因素有助于居民家庭生活低碳转型。文中基于计划行为理论，构建了城市居民低碳生活行为影响因素的理论模型，对江苏省南京市城市居民开展问卷调查，运用多元线性回归模型、Shapley分解、中介效应检验和异质性分析进行假设检验。研究发现：低碳行为态度、主观规范、知觉行为控制对居民实施低碳生活行为有显著正向影响，其影响大小依次为知觉行为控制、主观规范和低碳行为态度；行为意愿在主观规范和知觉行为控制对低碳生活行为的影响中承担中介作用。在相同消费者偏好下，高耗能产品和低耗能产品分别带给消费者的效用大小对比决定了低耗能产品对高耗能产品的替代水平。异质性分析表明当居民具有大专及以上文凭、月收入大于个税起征点5000元、拥有南京市户口的特征之一时，其行为态度、知觉行为控制和主观规范对实施低碳生活行为都具有显著正向影响。据此，文中提出如下建议进一步推动城市居民低碳生活行为：1)重视并激发居民低碳生活主观能动性。2)为居民提供利于实施低碳生活行为的外部环境。3)针对不同居民群体制定差异化低碳行为促进政策。

关键词：低碳生活行为南京市计划行为理论多元线性回归分析 Shapley分解

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提高公共交通需求量的灵敏度分析方法

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公路交通科技 2000年第3期17卷 63-67页

作者：安梅高自友北方交通大学北京100044

对 3种交通模式 (公交车 ,一般机动车 ,自行车 )的城市混合交通均衡配流模型进行了灵敏度分析 ,建立各交通模式的需求及路段流量与公共交通各项特性指标的线性的近似关系式 ;然后提出合理分配投资金额以使公交需求量达到最大的整数线性... 详细信息

对 3种交通模式 (公交车 ,一般机动车 ,自行车 )的城市混合交通均衡配流模型进行了灵敏度分析 ,建立各交通模式的需求及路段流量与公共交通各项特性指标的线性的近似关系式 ;然后提出合理分配投资金额以使公交需求量达到最大的整数线性规划模型 ,并设计了求解算法 ;最后进行了数值试验 ,实验结果给出了公交车需求与舒适度、转车次数及票价 3个参数的近似关系式。

关键词：均衡配流分离函数灵敏度分析公共交通需求量

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