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糜子PmLEA1基因的克隆及其在非生物逆境胁迫下的表达模式分析

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中国种业 2024年第8期 69-78页

作者：任江陵沈力鸿刘宇涵宋健刘思辰乔治军曹晓宁山西农业大学农业基因资源研究中心太原030031 山西农业大学农学院晋中030801 农业农村部黄土高原作物基因资源与种质创制重点实验室山西太原030031 山西农业大学经济作物研究所汾阳032200

LEA蛋白是一类逆境胁迫下诱导产生的蛋白,为了解糜子PmLEA1基因在逆境中的作用,从河曲红糜子中克隆出PmLEA1基因,利用生物信息学方法预测并分析PmLEA1蛋白的性质和结构特征。结果表明,糜子PmLEA1基因全长549bp,编码蛋白的分子量为17863.... 详细信息

LEA蛋白是一类逆境胁迫下诱导产生的蛋白,为了解糜子PmLEA1基因在逆境中的作用,从河曲红糜子中克隆出PmLEA1基因,利用生物信息学方法预测并分析PmLEA1蛋白的性质和结构特征。结果表明,糜子PmLEA1基因全长549bp,编码蛋白的分子量为17863.57Da,氨基酸数目为182个,二级结构以无规则卷曲为主,属亲水性蛋白,其蛋白序列与柳枝稷LEA蛋白序列的同源性最高,无跨膜转运信号,不是膜上受体。实时荧光定量PCR结果表明,PEG-6000、NaCl、甘露醇、ABA、GA、H2O2、IAA、MeJa、SA胁迫下的PmLEA1基因相对表达量均发生不同程度的变化;各胁迫下PmLEA1基因的相对表达量变化在根中最大,叶片次之,茎中相对变化最小,且表达量总体上呈现先升高后降低的变化趋势;PEG-6000胁迫下PmLEA1基因的相对表达量变化量大。上述结果说明,糜子PmLEA1基因参与了抗旱调控和不同激素信号传导过程。研究结果为糜子的遗传改良提供了优良的抗旱基因,并为其他禾本科作物LEA基因的挖掘提供了研究思路。

关键词：糜子 PmLEA1 基因克隆表达模式蛋白性质结构特征

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水通道蛋白在中华绒螯蟹生精细胞的表达及分布特征

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水通道蛋白在中华绒螯蟹生精细胞的表达及分布特征

作者：杜锦梅河北大学

学位级别：硕士

水通道蛋白(Aquaporin,AQP)是一类跨膜蛋白,其作用是在细胞质膜上形成水和小分子溶质的跨膜通道。哺乳动物和鱼类的AQPs在其精子发生和渗透压适应方面发挥着重要的作用。中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)是我国重要的经济蟹类之一,是甲... 详细信息

水通道蛋白(Aquaporin,AQP)是一类跨膜蛋白,其作用是在细胞质膜上形成水和小分子溶质的跨膜通道。哺乳动物和鱼类的AQPs在其精子发生和渗透压适应方面发挥着重要的作用。中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)是我国重要的经济蟹类之一,是甲壳动物的重要代表,AQPs在其精子发生中的表达、分布特征尚不明了;且其繁殖需经历从淡水到海水的生殖洄游过程,成熟精子AQP的类型是否和精巢中的各级生精细胞AQP的类型存在不同,值得探讨。本研究利用分子生物学、细胞生物学等技术方法,研究了AQPs在中华绒螯蟹精巢生精细胞和成熟精子中的表达、分布特征。研究结果将为揭示AQPs在中华绒螯蟹生殖发育过程中的作用奠定基础;为AQPs在甲壳动物中的研究提供基础依据。从中华绒螯蟹精巢组织中克隆了AQP1和AQP3的开放阅读框全长序列,分别为777bp和909 bp,并对AQP1、AQP3进行了生物信息学分析,结果显示,二者均具有两个保守的NPA基序;水通道蛋白的进化关系和物种的进化地位基本一致,且保守性相对较高。利用实时荧光定量PCR技术,分析扣蟹、未成熟蟹、早熟蟹、正常成熟蟹(简称成蟹)精巢组织中AQP1和AQP3的表达量,发现AQP1在扣蟹、未成熟蟹、早熟蟹精巢中的表达量与在成蟹精巢中的表达量有极显著性差异(P0.05)。可见,中华绒螯蟹精巢中AQP1、AQP3的表达呈现发育阶段特异性。分析储精囊中AQP1的表达量,发现早熟蟹储精囊AQP1的相对表达量是成蟹的0.31倍,有显著性差异(P<0.05)。利用免疫荧光技术,研究AQP1、AQP3和AQP4在中华绒螯蟹生精细胞中的分布特征,结果显示,AQP1、AQP3、AQP4在中华绒螯蟹精原细胞、精母细胞、精细胞的细胞质膜中均有分布;成熟精子中,仅发现AQP1的存在,定位于精子顶体头帽部位。综上所述,中华绒螯蟹AQP1、AQP3均具有两个保守的NPA基序,精巢组织中有AQPs的表达和分布,表达量和分布特征因AQP的类型不同也不尽相同;仅AQP1存在于成熟精子中。这些结果为进一步研究AQPs在中华绒螯蟹生殖及渗透调节中的作用奠定了基础。

关键词：水通道蛋白中华绒螯蟹生精细胞基因克隆实时定量PCR 免疫荧光

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基于多特征融合的方面级情感分析算法研究

基于多特征融合的方面级情感分析算法研究

作者：杜锦阳中南财经政法大学

学位级别：硕士

伴随着移动互联网的快速发展,互联网的用户不仅仅是内容的享受者,同时也是制造者。我国拥有巨大的网民群体,这个群体在以极快的速度增长。网民用户会频繁的在各类软件上发表自己的评论与见解,面对着如此大规模且具有情绪表达的文本信息... 详细信息

伴随着移动互联网的快速发展,互联网的用户不仅仅是内容的享受者,同时也是制造者。我国拥有巨大的网民群体,这个群体在以极快的速度增长。网民用户会频繁的在各类软件上发表自己的评论与见解,面对着如此大规模且具有情绪表达的文本信息,完全可以深度挖掘内容的潜在价值来为社会服务。方面级情感分析是一项细粒度的情感分析任务,其目的在于分析预测句子在各个方面对应的情感极性（积极、中立、负面等等）。目前主流的方法是采用深度神经网络对输入句子进行编码,并利用注意力机制获得方面词相关上下文信息的注意力权重来进行分类,虽然取得了出色的成果,但仍存在一定的问题。方面级情感分析对方面词相关的句法结构和上下文信息都比较敏感,同样的方面词在不同的句子结构下会出现不同的判断。随着结构化神经网络的发展,由外部解析器生成的依存句法树已被证明可以提供有效的结构信息,然而,现有的方面级情感分析方法对句法结构特征的利用还有待提高。此外,虽然在最近的研究中图卷积网络（GCN）已经被用于解决和依存句法相关的任务,并取得了优秀的成果,但是依存句法树边（Edge）上的依存标签信息仍然被忽略,依存标签信息包含着重要的关系特征表示,并且对消除歧义有很大帮助。为了解决上述问题,本文提出了一种基于边增强图卷积神经网络模型（Bidirectional Edge-Enhanced Graph Convolution Networks,BE-GCN）。该模型将句子的依存句法树作为图（Graph）引入到图卷积网络中,为模型提供了强大且可靠的句法结构特征,可以有效帮助模型学习方面词相关的上下文信息。其次,通过一个边增强模块对依存句法树边上的依存标签信息进行结合利用,强化了单词间的关系特征表示,使得节点更新信息不再局限于邻接节点,因此较好的提升了节点和边的表示能力。在五个标准的数据集上进行的实验表明,本文提出的模型可以有效的利用句子中的句法结构特征和关系特征,能够训练出更准确地反映方面词与上下文信息之间紧密关系的方面表示,且使用该方面表示的方面级情感分析模型达到了更高的准确率。最终基于以上方法设计开发了一个面向评论的方面级情感分析系统,该系统可以有效的预测评论文本在指定方面下的情感极性,并以简单易操作的界面显示情感分析结果。

关键词：方面级情感分析图卷积神经网络依存句法树

肝癌阿帕替尼耐药细胞株的构建及耐药基因研究

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空军军医大学学报 2024年第7期45卷 763-768页

作者：博伦王祥旭纪洪辰艾丽萍白引苗刘洋张红梅空军军医大学西京医院肿瘤科陕西西安710032 解放军联勤保障部队第九六五医院吉林吉林132011

目的探究肝癌细胞对阿帕替尼的潜在耐药机制。方法选取人SNU-739/SNU-878肝癌细胞系,构建阿帕替尼耐药细胞株。通过细胞活力检测和平板克隆形成实验对亲本及耐药细胞进行药敏试验,利用RNA芯片技术检测亲本及耐药细胞基因表达谱,根据表... 详细信息

目的探究肝癌细胞对阿帕替尼的潜在耐药机制。方法选取人SNU-739/SNU-878肝癌细胞系,构建阿帕替尼耐药细胞株。通过细胞活力检测和平板克隆形成实验对亲本及耐药细胞进行药敏试验,利用RNA芯片技术检测亲本及耐药细胞基因表达谱,根据表达差异筛选出介导阿帕替尼耐药的关键基因;利用qRT-PCR和Western blotting对关键基因进行验证,并通过药敏试验检测关键基因稳定过表达对细胞耐药的影响。结果阿帕替尼耐药细胞株的细胞活力、克隆形成数显著高于亲本细胞(P<0.05);筛选出关键基因氨基甲酰磷酸合成酶1(CPS1),其mRNA及蛋白水平在耐药细胞株中显著下调(P<0.05),过表达CPS1可显著降低肝癌细胞活力及克隆形成能力(P<0.05)。结论CPS1可能是介导肝癌细胞对阿帕替尼耐药的关键基因。

关键词：肝癌阿帕替尼耐药氨基甲酰磷酸合成酶1

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不对称邻二醇的合成及其在有机合成中的应用

化学试剂 1993年第5期15卷 297-301页

作者：杜锦发陈怀宇广东省药物研究所广州510180

综述了不对称邻二醇的合成和选择性转换,以及它在立体控制催化剂和天然产物不对称合成等方面的应用。

关键词：不对称邻二醇合成

珠江三角洲花斑粘土磁学特征及其沉积环境实例研究

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第四纪研究 2024年第5期44卷 1349-1361页

作者：贺辰戋张桂华梁定辉李明坤张俊岭李结涛关燕萍彭莎莎丁盛昌曾提王云鹏欧阳婷萍朱照宇中国科学院广州地球化学研究所有机地球化学国家重点实验室广东广州510640 华南师范大学地理科学学院广东广州510631 中国科学院深地科学卓越创新中心广东广州510640 中国科学院大学地球与行星科学学院北京100049 佛山市南海区西樵镇西樵山风景名胜区管理处办公室广东佛山528211 中国科学院广州地球化学研究所矿物学与成矿学中国科学院重点实验室广东广州510640 中国科学院广州地球化学研究所同位素地球化学国家重点实验室广东广州510640

华南地区珠江三角洲的形成和演变历史是国内外高度关注的重要科学问题,其中,全新世与更新世界线附近“花斑粘土”形成的沉积环境及气候条件是最有兴趣的问题之一。本研究利用珠江三角洲陆地西北部的广东省佛山市西樵山XQS-ZK7钻孔岩芯(... 详细信息

华南地区珠江三角洲的形成和演变历史是国内外高度关注的重要科学问题,其中,全新世与更新世界线附近“花斑粘土”形成的沉积环境及气候条件是最有兴趣的问题之一。本研究利用珠江三角洲陆地西北部的广东省佛山市西樵山XQS-ZK7钻孔岩芯(全长16 m),对花斑粘土及其邻近6.1 m特定层位岩芯进行了AMS14C和OSL测年,同时进行了系统的环境磁学参数测量和粒度分析,并对代表性样品进行了岩石磁学参数测量。其中磁学参数主要包括χlf、χfd%、S_(-300)、HIRM、IRM、κ-T曲线等。将610 cm岩芯自下而上划分为4个层位,第一层年龄约67~60 ka B.P.,第二层年龄约60~59 ka B.P.,第三层(花斑粘土层)年龄约59~49 ka B.P.,这3层分别相当于深海氧同位素MIS 4后半期、MIS 4/MIS 3过渡期和MIS 3早期的沉积层;第四层年龄小于11 ka B.P.,对应于MIS 1早期。缺失MIS 3中后期至MIS 2时期的沉积物。研究结果显示:本地花斑粘土与其下伏沉积物具有一种自下而上从粗到细的“正粒序层理”沉积构造,花斑粘土层中夹有3层灰色砂、粉砂、粘土并含有贝壳碎片,其原始沉积为水成成因类型;从花斑粘土到下伏地层,沉积物颜色由红黄杂色→灰白色→青灰色逐渐变化,与经典的风化作用程度自上而下逐渐减弱的规律一致;花斑粘土层下伏第一层灰色沉积层中的磁性矿物以磁铁矿为主并含部分碎屑赤铁矿,而花斑粘土层则含有较多的成土作用新生成的赤铁矿和针铁矿以及超细磁铁矿;花斑粘土中的亚铁磁性超顺磁(SP)颗粒矿物与高矫顽力不完全反铁磁性矿物同时形成,即原始水成沉积在后期高温高湿环境下经历了强烈的化学风化作用而产生了磁性矿物的转变。据此认为:由于华南地区湿热气候导致的强烈风化成土作用,本地花斑粘土经历了多期水下沉积→暴露地表→差异风化的气候-沉积环境变化过程,其最终形成是在MIS 3升温阶段(尤其是中后期)遭受了强烈风化作用的基础上叠加了MIS 2末次盛冰期海平面大幅度下降的暴露风化作用。这一认识说明珠江三角洲花斑粘土的形成时代与演化过程尚需做进一步深入研究。

关键词：磁学特征沉积环境气候变化花斑粘土珠江三角洲

基于高效液相色谱指纹图谱和多成分定量的大蓟配方颗粒质量评价

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中国药业 2024年第19期33卷 95-101页

作者：丁富娟刘斌赵海燕张明张力伟王煦辰张军鹏孔令红山东省泰安市食品药品检验检测研究院山东泰安271000 山东省泰安市岱岳区疾病预防控制中心山东泰安271000

目的评价不同生产企业不同批次大蓟配方颗粒的质量。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定大蓟配方颗粒中5种有效成分的含量,色谱柱为Agilent Extend C18柱(250 mm×4.6 mm,5µm),流动相为乙腈-甲醇(4∶1,V/V)-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速... 详细信息

目的评价不同生产企业不同批次大蓟配方颗粒的质量。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定大蓟配方颗粒中5种有效成分的含量,色谱柱为Agilent Extend C18柱(250 mm×4.6 mm,5µm),流动相为乙腈-甲醇(4∶1,V/V)-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为330 nm,柱温为30℃,进样量为10µL;建立指纹图谱,通过比对鉴定共有峰,并进行相似度评价,采用聚类分析法(CA)、主成分分析(PCA)法和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法对5个生产企业的17批样品进行分析。结果大蓟配方颗粒的指纹图谱有14个共有峰,指认出了8个峰;CA和PCA将17批大蓟配方颗粒分为4类;OPLS-DA确定了6种差异标志物成分,对其影响显著性排序分别为芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷>峰7>绿原酸>峰9>隐绿原酸>柳穿鱼叶苷。5种成分在各自质量浓度范围内与峰面积线性关系良好(r≥0.9991,n=5);平均加样回收率为95.88%~99.12%,RSD为1.40%~2.00%(n=9)。结论该方法操作简单,方法学考察结果良好,能用于大蓟配方颗粒的质量评价。

关键词：大蓟配方颗粒高效液相色谱指纹图谱多成分定量聚类分析法主成分分析法正交偏最小二乘判别分析法

醇和胺的固-液反相相转移催化对甲苯磺酰化的方法

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化学试剂 1993年第3期15卷 183-183,189页

作者：杜锦发陈怀宇广东省药物研究所广州510180

在碱性水溶液中.4-二甲氨基吡啶能有效地加速含酸性基团的醇和胺的对甲苯磺酰化。此固-液反相相转移催化反应具有反应条件温和,操作简单,反应快,收率高的特点。

关键词：醇胺相转移催化对甲苯磺酰化

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新超导体的第一性原理计算

新超导体的第一性原理计算

作者：杜锦丽东南大学

学位级别：硕士

我们用全势线性缀加平面波方法计算研究了两类新超导体的超导电性。第一部分用双层超格子原胞模型计算三元硅化物CaAlSi的电子能带结构,用带心冻结声子法计算了声子频率及电-声子耦合常数,并讨论了它们的超导电性。考虑到Al,Si原子分布... 详细信息

我们用全势线性缀加平面波方法计算研究了两类新超导体的超导电性。第一部分用双层超格子原胞模型计算三元硅化物CaAlSi的电子能带结构,用带心冻结声子法计算了声子频率及电-声子耦合常数,并讨论了它们的超导电性。考虑到Al,Si原子分布的无序性和完全等价性,以及低频B声子频率的非谐性效应,计算得到稳定的低频B声子频率为1101cm。对超导电性有较大贡献的Ca d态电子与B振动模式间的电-声子耦合常数为0.37。我们的结果与用虚晶近似的结果是一致的。并证明CaAlSi的超导电性可由中等耦合强度的BCS理论来解释。第二部分工作用虚晶模型和考虑了局域自旋密度近似(LSDA)研究具有反钙钛矿结构的新超导体MgCNi的超导电性与磁性随掺杂度的变化。首先用WEIN2K程序包计算了MgCNi的电子能带结构和态密度。计算结果表明,MgCNi中C 2p与Ni 3d轨道杂化使穿越费米面上的Ni 3d能带表现出平面性,费米面落在态密度范霍夫奇异(vHs)峰的右坡上。位于铁磁相变点附近的MgCNi中Ni d电子具有大的自旋涨落,其态密度又接近峰值,因此这两个特点使材料处于不稳定的边缘而产生相变。而后对MgCNi中Mg位分别用Na (空穴)和Al (电子)掺杂,研究MgNaCNi和MgAlCNi ( 0≤x≤0.5)系列化合物的超导电性和磁性变化。研究结果表明:对于空穴掺杂的MgNaCNi,随着掺杂度x的增大,费米面向下方的vHs峰值移动。虽然总态密度增大,但大的自旋涨落使自旋极化向上和向下的态密度分裂开来,破坏了超导库柏对的配对,因而超导电性减弱。在掺杂为x=0.09处,自旋劈裂使MgNaCNi产生磁矩,表现出磁性。对于电子型掺杂MgNaCNi,随着x的增加,费米面向vHs右坡下移,使N(E )不断减小,从

关键词：超导电性能带结构声子频率电-声子耦合磁性掺杂