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红花苷对模拟微重力下细胞迁移的作用

中医杂志 2013年第1期54卷 55-58页

作者：李静陈军钱彦方石菲杜挺媛孙喜庆海军总医院中医科北京市海淀区阜成路6号100048 陕西中医学院针灸推拿系中国人民解放军第四军医大学航空航天医学系

目的观察红花苷修复模拟微重力下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞迁移抑制的作用并探讨其机制。方法 MTT比色法选出红花苷干预HUVECs的最佳浓度;模拟失重-2D回转仪模拟失重培养HUVECs,分为正常重力对照组、模拟微重力组、红花苷微重力组... 详细信息

目的观察红花苷修复模拟微重力下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞迁移抑制的作用并探讨其机制。方法 MTT比色法选出红花苷干预HUVECs的最佳浓度;模拟失重-2D回转仪模拟失重培养HUVECs,分为正常重力对照组、模拟微重力组、红花苷微重力组。采用透膜侵袭小室模型检测细胞迁移;激光共聚焦显微镜观察红花苷干预后细胞骨架纤维状肌动蛋白(F-actin)的形态及对黏着斑(FAs)的影响。结果与正常重力对照组比较,模拟微重力组细胞迁移数下降(P<0.01);红花苷微重力组较模拟微重力组细胞迁移数增加(P<0.05)。正常重力对照组的F-actin呈现明显极化、微丝集结成束,模拟微重力可导致F-actin骨架重构,极化下降并呈现弥散特点;而红花苷微重力组的F-actin排列有序,伪足较模拟微重力组增多,方向性显著增强。模拟微重力组较正常重力对照组FAs数量(VN)、面积(VA)及FAs到细胞边缘距离(DS)显著降低(P<0.05);红花苷微重力组较模拟微重力组VN、VA、DS显著升高(P<0.05)。结论红花苷可改善模拟微重力作用导致的HUVECs迁移抑制,修复模拟微重力作用导致的HUVECs骨架F-actin的重构,改善FAs的生成及定位。

关键词：模拟微重力人脐静脉内皮细胞红花苷细胞骨架细胞迁移

模拟失重下小鼠成骨细胞功能相关miRNA生物信息学预测

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航天医学与医学工程 2012年第6期25卷 407-411页

作者：胡泽兵王冰曹新生杜挺媛张舒第四军医大学航空航天生物动力学教研室航空航天医学国家教育部重点实验室陕西西安710032

目的应用生物信息学方法预测模拟失重环境下与小鼠成骨细胞功能变化相关的miRNAs。方法收集并整理已报道的针对模拟失重环境下小鼠成骨细胞内mRNAs表达变化的基因芯片检测数据,分析差异表达显著的mRNAs,搜集其基因组定位信息;在miRBase... 详细信息

目的应用生物信息学方法预测模拟失重环境下与小鼠成骨细胞功能变化相关的miRNAs。方法收集并整理已报道的针对模拟失重环境下小鼠成骨细胞内mRNAs表达变化的基因芯片检测数据,分析差异表达显著的mRNAs,搜集其基因组定位信息;在miRBase数据库中查找处于这些基因组位置上的内含子miRNAs,并应用靶基因预测、GO富集分析和KEGG pathway富集分析进行后续miRNA功能预测。结果鉴定出5种与宿主mRNA共处同一转录单元的潜在内含子miRNAs。结论预测出的5种内含子miRNAs在模拟失重环境所致成骨细胞功能变化中具有潜在调控作用,为进一步实验研究提供数据支持和理论指导。

关键词：模拟失重生物信息学 microRNAs 成骨细胞

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两种新型抗荷服对下体负压耐力的影响

航天医学与医学工程 2013年第1期26卷 24-28页

作者：张毅杨长斌高原杜挺媛吴萍吴斌谷志明孙喜庆第四军医大学航空航天医学系航空航天医学教育部重点实验室陕西西安710032 中国航天员科研训练中心北京100094

目的确定绳索拉紧式和充气式2套不同类型抗荷服提高下体负压耐力的有效压力制度。方法22名健康志愿者,随机平均分为2组,分别穿着绳索拉紧式和充气式抗荷服测定各自选定的高、低2种压力制度时的下体负压耐力,同时观察血压、心率、心脏泵... 详细信息

目的确定绳索拉紧式和充气式2套不同类型抗荷服提高下体负压耐力的有效压力制度。方法22名健康志愿者,随机平均分为2组,分别穿着绳索拉紧式和充气式抗荷服测定各自选定的高、低2种压力制度时的下体负压耐力,同时观察血压、心率、心脏泵血功能及自主神经功能的变化。绳索拉紧式抗荷服选定20～30 mmHg和30～40 mmHg两种压力制度,充气式抗荷服选定30～40 mmHg和40～50mmHg两种压力制度。结果穿着绳索拉紧式抗荷服时高、低2种压力制度下志愿者下体负压耐受时间和累计应激指数较对照组均显著增加(P<0.01),平均动脉压和每搏量呈升高趋势,心率呈降低趋势,但均未达到显著水平。穿着充气式抗荷服时高、低2种压力制度下志愿者下体负压耐受时间和累计应激指数较对照组均显著增加(P<0.01),平均动脉压和每搏量呈升高趋势,心率在高压力制度组呈降低趋势。结论两种抗荷服在各自的高、低压力制度下均可显著提高下体负压耐力,改善心血管功能,且高压力制度效果更明显。

关键词：抗荷服下体负压立位耐力头高位倾斜

流体剪切应力对模拟微重力下MG-63细胞骨架系统的影响

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航天医学与医学工程 2012年第4期25卷 235-238页

作者：杜挺媛张舒曹新生王冰第四军医大学航空航天医学国家教育部重点实验室陕西西安710032

目的观察水平回转模拟微重力(modeled microgravity,MMG)后人骨肉瘤MG-63细胞受流体剪切应力(flow shear stress,FSS)作用后细胞骨架的改变,探讨模拟微重力情况下骨质丢失的细胞学机制。方法 MG-63成骨细胞采用回转器水平回转培养48 h... 详细信息

目的观察水平回转模拟微重力(modeled microgravity,MMG)后人骨肉瘤MG-63细胞受流体剪切应力(flow shear stress,FSS)作用后细胞骨架的改变,探讨模拟微重力情况下骨质丢失的细胞学机制。方法 MG-63成骨细胞采用回转器水平回转培养48 h模拟微重力效应,同时设静止培养为对照组。之后,细胞随机分为两组,一组利用流室系统实施FSS,FSS设为1.5 Pa,作用时间60 min,另一组无FSS作用。细胞经过免疫荧光染色后,激光共聚焦显微镜观察细胞骨架系统的变化。结果 FSS作用后,MG-63细胞微丝和微管的形态和分布均发生变化,微丝可见多束状排列,荧光强度增强,出现粗的应力纤维;微管可见其极性中心移向细胞质外缘,细胞外层荧光量加重,有少量束状结构出现。MMG后,MG-63细胞的细胞骨架发生解聚和重排,微丝向核周集聚;微管发生断裂,变短,弯曲等变化。MMG后,再给予FSS刺激,微丝未能形成应力纤维,仅见微丝、微管在应力方向有拉长。结论 1.5 Pa,60 min流体剪切应力未能在回转模拟微重力后成骨细胞内诱导形成应力纤维。

关键词：模拟微重力回转器流体剪切应力 MG-63细胞细胞骨架

回转模拟失重对静脉内皮细胞血管生成能力的影响及内皮型一氧化氮合成酶的作用

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航天医学与医学工程 2013年第2期26卷 83-86页

作者：石菲王永春杜挺媛卢东源张舒孙喜庆第四军医大学航空航天医学系航空航天生物动力学教研室航空航天医学教育部重点实验室陕西西安710032

目的观察回转器模拟失重对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC-C)血管生成能力的影响,并分析探讨可能涉及的关键信号分子内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitricoxide synthetase,eNOS)的作用。方法体... 详细信息

目的观察回转器模拟失重对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC-C)血管生成能力的影响,并分析探讨可能涉及的关键信号分子内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitricoxide synthetase,eNOS)的作用。方法体外培养HUVEC-C,随机分为回转模拟失重组、1 G静止对照组及回转+抑制剂组,选用内皮型一氧化氮合成酶的特异性抑制剂L-NAME(N-nitro-L-arginine methyl es-ter hydrochloride)。Matrigel胶小管形成实验观察不同处理组HUVEC-C血管生成能力的变化情况。RT-PCR和Western blot分别检测模拟失重前、后HUVEC-C中eNOS mRNA和蛋白的表达变化。结果24 h模拟失重使HUVEC-C的血管生成能力较对照组明显增强(P<0.01),且这种增强效应可以被L-NAME所抑制。模拟失重24 h后,HUVEC-C中eNOS mRNA和蛋白的表达均显著高于对照组(P<0.05)。结论回转模拟失重可以诱导HUVEC-C血管生成能力增强,其发生机制与eNOS表达上调有关。

关键词：模拟失重回转器内皮细胞血管生成内皮型一氧化氮合成酶

+Gz暴露后大鼠脑皮层Beclin-1和LC3的表达变化

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航天医学与医学工程 2013年第2期26卷 131-133页

作者：武岳王永春曹新生杜挺媛詹皓孙喜庆第四军医大学航空航天医学院航空航天生物动力学教研室陕西西安710032 空军航空医学研究所北京100142

目的探讨+Gz暴露后大鼠脑皮层自噬相关标志物Beclin-1和LC3表达的变化。方法雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、+10 Gz/3 min暴露组和+10 Gz/5 min暴露组。+Gz暴露组分别于暴露后6 h、24 h取脑皮层组织,采用RT-PCR和Western Blot方法分别... 详细信息

目的探讨+Gz暴露后大鼠脑皮层自噬相关标志物Beclin-1和LC3表达的变化。方法雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、+10 Gz/3 min暴露组和+10 Gz/5 min暴露组。+Gz暴露组分别于暴露后6 h、24 h取脑皮层组织,采用RT-PCR和Western Blot方法分别测定自噬相关基因Beclin-1和LC3 mR-NA及蛋白表达的变化。结果与对照组相比,两组+Gz暴露后6 h脑皮层Beclin-1和LC3 mRNA及蛋白表达均显著增强(P<0.01),暴露后24 h其表达量仍显著增加(P<0.05)。+10 Gz/5 min组较+10Gz/3 min组表达增加更为明显(P<0.05)。结论 +10 Gz暴露可诱导脑皮层自噬相关标志物Beclin-1和LC3的高表达,提示高+Gz应激促进了脑皮层自噬的发生,且随着暴露时间的延长,自噬表达更显著。

关键词： +Gz暴露自噬 Beclin-1 LC3 脑皮质

骨碎补总黄酮对大鼠成骨细胞增殖、分化及细胞外信号调节激酶表达的影响

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中华地方病学杂志 2016年第11期35卷 803-807页

作者：尹文哲杜挺媛谷守滨吕成倩褚艳杰哈尔滨医科大学第二附属医院骨科哈尔滨150086 中国人民解放军第四军医大学动物实验中心西安710032

目的观察骨碎补总黄酮（totalflavonoidsindrynariafortunei，TFDF）对大鼠成骨细胞增殖、分化及细胞外信号调节激酶（***，ERK）表达的影响。方法选择10月龄SD雄性大鼠，按体质量采用随机数字表法分为5组：空白对照组，阳性对照组，低... 详细信息

目的观察骨碎补总黄酮（totalflavonoidsindrynariafortunei，TFDF）对大鼠成骨细胞增殖、分化及细胞外信号调节激酶（***，ERK）表达的影响。方法选择10月龄SD雄性大鼠，按体质量采用随机数字表法分为5组：空白对照组，阳性对照组，低、中、高剂量组，每组8只。空白对照组给予等溶生理盐水灌胃；阳性对照组给予蒸馏水配制的骨松宝溶液，灌胃剂量为5．710g·kg-1·d-1；低、中、高剂量组给予蒸馏水配制的TFDF溶液，灌胃剂量分别为0．054、0．108、0．216g·kg-1·d-1。5组连续灌胃8d，末次灌胃后1．5h，大鼠麻醉处死，无菌心脏取血，提取上清，同组混匀，56℃水浴30min灭活补体，滤膜除菌分装血清用于成骨细胞培养。成骨细胞来自3～5日龄SD乳鼠股骨，DMEM培养液冲洗骨髓腔，吹打制备单细胞悬液，采用三维细胞培养系统体外培养大鼠成骨细胞。在无血清DMEM培养后，分别用含上述血清的培养基培养，采用倒置相差显微镜观察成骨细胞形态学变化，噻唑蓝（MTT）法检测成骨细胞增殖情况，对硝基苯磷酸盐（PNPP）法测定碱性磷酸酶（AIP）活性，PCR法测定ERK1、ERK2mRNA表达。结果成骨细胞增殖能力组间比较差异有统计学意义（F=8．850，P〈0．05），其中阳性对照组，低、中、高剂量组（0．329±0．004、0．302±0．038、0．342±0．010、0．353±0．006）明显高于空白对照组（0．272±0．005，P均〈0．05）。中、高剂量组高于低剂量组（P均〈O．05）。成骨细胞ALP活性组间比较差异有统计学意义（F=13．406，P〈0．05），其中阳性对照组，中、高剂量组[（15．60±0．38）、（14．62±0．36）、（13．48±0．18）U／mgpro]明显高于空白对照组、低剂量组[（6．34±0．16）、（8．68±0．35）U／mg pro，P均〈0．05]，低剂量组高于空白对照组（P〈0．05）。成骨细胞ERKl、ERK2mRNA表达组间比较，差异有统计学意义（F=19．452、15．306，P均〈0．05），其中阳性对照组（2．407±0．022、2．026±0．014）、中剂量组（2．385±0．018、2．018±0．020）明显高于空白对照组（1．032±0．016、0．968±0．018，P均〈0．05）。结论TFDF可促进成骨细胞的分化成熟，其作用机制可能与ERK通路相关。

关键词：细胞培养骨碎补总黄酮细胞外信号调节激酶成骨细胞

间断性水平位站立对尾吊大鼠胫骨骨小梁结构影响的micro-CT评价

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中国骨质疏松杂志 2013年第5期19卷 431-434页

作者：胡泽兵周涛王冰曹新生杜挺媛张舒第四军医大学航空航天生物动力学教研室航空航天医学教育部重点实验室西安710032 第四军医大学口腔医院显微CT实验室西安710032

目的应用micro-CT研究尾吊大鼠胫骨骨小梁微结构的变化,以此评价间断性水平位站立对抗模拟失重导致的骨微结构退化的效果。方法 24只SD雄性大鼠随机等分为3组:对照组(CON组)、尾吊组(SUS组)、水平位站立对抗组(ST组)。尾吊组大鼠始终保... 详细信息

目的应用micro-CT研究尾吊大鼠胫骨骨小梁微结构的变化,以此评价间断性水平位站立对抗模拟失重导致的骨微结构退化的效果。方法 24只SD雄性大鼠随机等分为3组:对照组(CON组)、尾吊组(SUS组)、水平位站立对抗组(ST组)。尾吊组大鼠始终保持约30°头低位及后肢自由悬垂不负重状态,水平位站立对抗组在尾吊处理的基础上,大鼠每天固定时间水平站立1 h。实验3周后处死各组大鼠,取其右侧胫骨行micro CT扫描及三维重建,对其骨微结构进行定量分析。结果选定感兴趣区(ROI)行定量分析及三维可视化后,与CON组相比,SUS组胫骨骨体积分数(BVF)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(***)均显著降低,而骨表面积/体积(BS/BV)、骨小梁间隙(***)及骨小梁模式因子(Trabecular Pattern Factor,TPF)均显著升高;ST组的变化介于SUS组和CON组之间;三维可视化图像结果与物理参数结果趋势一致。应用One-Way ANOVA分析及多重比较LSD-t检验,三组各参数之间统计学差异显著(P<0.05)。结论间断性水平位站立可明显减弱尾吊大鼠胫骨的微结构退化和骨质丢失,而micro CT可以有效地辨别胫骨松质骨微结构的精细变化。

关键词：尾吊大鼠间断性水平位站立 micro-CT 胫骨微结构

模拟失重和流体剪切应力对成骨细胞细胞骨架的影响

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模拟失重和流体剪切应力对成骨细胞细胞骨架的影响