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雪松枝叶弱极性物质的GC-MS分析及抗肿瘤活性

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江苏农业科学 2011年第3期39卷 429-431页

作者：卓盼陈先晖朱峰杜德尧陈凤美徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室江苏徐州221116

95%乙醇回流提取法及拌硅胶淋洗方法得到雪松的石油醚相,采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术分析雪松石油醚相的成分,应用色谱峰面积归一法分析各成分的质量分数。从挥发油检出36个峰,总含量99%以上,被确认为28种化合物,主要成分是维生素... 详细信息

95%乙醇回流提取法及拌硅胶淋洗方法得到雪松的石油醚相,采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术分析雪松石油醚相的成分,应用色谱峰面积归一法分析各成分的质量分数。从挥发油检出36个峰,总含量99%以上,被确认为28种化合物,主要成分是维生素E(35.199%)、1,2-15,16-二环氧十六烷(6.349%)和γ-谷甾醇(10.63%)。Alamar Blue法测定结果表明,雪松挥发物质对人非小细胞肺癌细胞株NCI-H460的抑制作用较大,浓度为100μg/mL时抑制率为(73.45±8.44)%。并用DPPH法测定了挥发性物质的抗氧化活性。

关键词：雪松挥发性物质成分抗肿瘤活性抗氧化活性

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尼可霉素生物合成基因簇的改造及其异源表达

微生物学报 2015年第6期55卷 707-718页

作者：王璐杜德尧李金娥田宇清刘浩牛国清谭华荣天津科技大学生物工程学院教育部工业发酵微生物重点实验室天津300457 中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室北京100101

【目的】异源表达尼可霉素生物合成基因簇,为尼可霉素核苷和肽基缩合机制研究以及尼可霉素与其它核苷类抗生素的组合生物合成奠定基础。【方法】以含有尼可霉素生物合成基因簇的pNIK为出发质粒,通过PCR-targeting的方法,将基因簇中san G... 详细信息

【目的】异源表达尼可霉素生物合成基因簇,为尼可霉素核苷和肽基缩合机制研究以及尼可霉素与其它核苷类抗生素的组合生物合成奠定基础。【方法】以含有尼可霉素生物合成基因簇的pNIK为出发质粒,通过PCR-targeting的方法,将基因簇中san G和san F的启动子替换为组成型hrd B启动子,构建重组质粒pNIKm。通过接合转移的方法分别将pNIK和pNIKm导入天蓝色链霉菌M1146中,获得异源表达菌株M1146-NIK和M1146-NIKm,并通过RT-PCR检测基因簇的表达情况。最后通过抗菌活性实验和产物的分离鉴定,比较M1146-NIK和M1146-NIKm的抗菌活性和尼可霉素的产生情况。【结果】pNIK和pNIKm在异源宿主天蓝色链霉菌M1146成功表达;M1146-NIK和M1146-NIKm均有明显的抗菌活性;M1146-NIK和M1146-NIKm均能产生少量的尼可霉素X、Z和假尼可霉素Z;M1146-NIK大量积累尿苷,而M1146-NIKm大量积累尿苷、核糖基-4-甲酰-4-咪唑-2-酮和吡啶同型苏氨酸。【结论】尼可霉素生物合成基因簇成功异源表达,并分离鉴定了尼可霉素产物及其生物合成中间体。本研究将为尼可霉素核苷和肽基缩合的酶学机制研究以及尼可霉素与其它核苷类抗生素组合合成新型杂合抗生素提供理论依据和指导。

关键词：圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因簇异源表达抗菌活性产物鉴定

Epsilon-变形菌两个特有趋化作用蛋白1265、1363的分子机制研究

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Epsilon-变形菌两个特有趋化作用蛋白1265、1363的分子机制研究

Epsilon-变形菌两个特有蛋白0275-0276调节趋化作用的分子机制研究

中国生物工程学会第二届青年科技论坛暨首届青年工作委员会学术年会

作者：莫然杜德尧高贝乐中国科学院南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室

Epsilon-变形菌纲是革兰氏阴性细菌的一个重要类群。目前对于海洋环境发现的Epsilon-变形菌的研究主要来自深度基因测序拼接的基因序列分析,初步揭示了水环境中Epsilon-变形菌适应环境的特殊代谢通路。Epsilon-变形菌是一类具有强运动... 详细信息

Epsilon-变形菌纲是革兰氏阴性细菌的一个重要类群。目前对于海洋环境发现的Epsilon-变形菌的研究主要来自深度基因测序拼接的基因序列分析,初步揭示了水环境中Epsilon-变形菌适应环境的特殊代谢通路。Epsilon-变形菌是一类具有强运动能力的细菌,其基因组编码大量趋化作用蛋白,趋化作用蛋白之间精密配合,形成高效的趋化系统感知环境因子的变化,并且及时调控鞭毛的运动方向,使得这类细菌能快速感受不同的环境变化并有效传递信号,对环境做出快速的相应。Epsilon-变形菌主要以核心磷酸化-去磷酸化信号转导系统调节鞭毛运动。作用模式如下:跨膜传感蛋白与Che V或Che W偶联蛋白相互作用,随后偶联蛋白作用于Che AY激酶,Che AY以ATP作为磷酸基团供体,将CheY蛋白磷酸化,CheZ蛋白则将CheY去磷酸化,CheY的磷酸化与去磷酸化决定了鞭毛的运动方向。除此核心趋化作用通路外,Epsilon-变形菌还进化出了许多特有的非核心趋化蛋白,参与调节鞭毛运动。我们前期的工作筛选到了两个在Epsilon-变形菌中特有的蛋白,1265和1363。1265和1363的敲除突变株在细菌趋化实验中的趋化能力显著弱于野生型,但在软琼脂平板上两株突变株均表现出与野生型类似的运动能力。结果表明Epsilon-变形菌中特有蛋白1265和1363作为一类新型趋化信号转导蛋白,很可能在趋化作用系统中参与磷酸化信号转导过程。对这类新型趋化信号转导蛋白的筛选与功能研究,为探究Epsilon-变形菌在不同水环境中的适应机制,以及在优势生态位驱动生物地球化学循环提供了重要的信息。

关键词： Epsilon-变形菌趋化作用磷酸化信号转导

来源： cnki会议评论

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Epsilon-变形菌两个特有蛋白0275-0276调节趋化作用的分子机制研究

正调控基因sanG及结构基因sanF-X对尼可霉素产生的影响

中国生物工程学会第二届青年科技论坛暨首届青年工作委员会学术年会

作者：茶桂宏杜德尧高贝乐中国科学院南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室中国科学院大学

Epsilon-变形菌纲(Epsilon-proteobacteria)是革兰氏阴性细菌中的一个重要的类群,分布广泛,包括人和动物的重要致病菌以及深海极端环境富集的菌株。宏基因分析发现Epsilon-变形菌编码了大量与趋化性(Chemotaxis)相关的膜传感蛋白,这些... 详细信息

Epsilon-变形菌纲(Epsilon-proteobacteria)是革兰氏阴性细菌中的一个重要的类群,分布广泛,包括人和动物的重要致病菌以及深海极端环境富集的菌株。宏基因分析发现Epsilon-变形菌编码了大量与趋化性(Chemotaxis)相关的膜传感蛋白,这些蛋白很可能在Epsilon-变形菌适应不同生存环境中起着重要作用,以感受不同的环境变化并有效传递信号,在极端环境适应中发挥着重要作用。目前对细菌趋向运动的信号转导途径研究较多,但是趋向运动基因的转录调控尤其是专一的调控因子还未见报道。我们课题组之前的研究工作筛选到了许多与Epsilon-变形菌鞭毛运动相关的基因,其中有两个基因组上相连的基因0275和0276的敲除突变菌株在软琼脂培养基上表现出明显的运动能力减弱;RNA-seq及荧光定量RT-q PCR实验发现0275与0276对趋化作用基因che VAW操纵子的表达有正调控作用。本课题拟对0275和0276的蛋白功能进行研究,鉴定这个潜在的双组份调控系统是如何感应上游信号并调控趋化基因表达的分子机理,并以此为例揭示这类细菌进化出的特有蛋白在环境适应性中的关键作用。

关键词： Epsilon-变形菌趋化作用双组份调控系统信号转导

来源： cnki会议评论

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正调控基因sanG及结构基因sanF-X对尼可霉素产生的影响

木蹄层孔菌子实体化学成分及对肿瘤细胞的抑制作用的研究

2012年第五届全国微生物遗传学学术研讨会

作者：杜德尧牛国清谭华荣中国科学院微生物研究所微生物资源国家重点实验室

尼可霉素是一类核苷肽类抗生素,由于其结构与几丁质合成酶的天然底物UDP-N-乙酰葡萄糖胺类似,能竞争性抑制该酶的活性。由于几丁质是真菌、昆虫和酵母细胞壁的重要结构组分,因此尼可霉素表现出极佳的抗真菌、杀昆虫和杀螨虫的活性。同... 详细信息

尼可霉素是一类核苷肽类抗生素,由于其结构与几丁质合成酶的天然底物UDP-N-乙酰葡萄糖胺类似,能竞争性抑制该酶的活性。由于几丁质是真菌、昆虫和酵母细胞壁的重要结构组分,因此尼可霉素表现出极佳的抗真菌、杀昆虫和杀螨虫的活性。同时尼可霉素对哺乳动物、蜜蜂、植物无毒或者毒性极低,在自然界中易被降解,因而尼可霉素是一种理想的农用抗生素。本实验室之前的研究结果表明sanG是圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成的途径特异性调控基因,通过调控sanO-SanV和sanN-sanI两个转录单元的转录而正调控尼可霉素的生物合

关键词：尼可霉素生物合成基因启动子调控机制

来源： cnki会议评论

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菌物学报 2012年第5期31卷 775-783页

作者：黄天姿杜德尧陈永强袁博鞠秀云冯友建王力蒋继宏徐州师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室江苏徐州221116

运用硅胶、sephadexLH-20等柱色谱,从木蹄层孔菌子实体的乙醇提取物分离得到12个化合物,通过单体的理化性质、NMR和MS技术鉴定单体的结构为3-十六碳酸酯-7,22-二烯麦角甾醇(1),十八烷酸(2),棕榈酸(3),7,22-二烯麦角甾-3-酮(4),麦角甾-7,... 详细信息

运用硅胶、sephadexLH-20等柱色谱,从木蹄层孔菌子实体的乙醇提取物分离得到12个化合物,通过单体的理化性质、NMR和MS技术鉴定单体的结构为3-十六碳酸酯-7,22-二烯麦角甾醇(1),十八烷酸(2),棕榈酸(3),7,22-二烯麦角甾-3-酮(4),麦角甾-7,22-二烯-3-醇(5),5,8-过氧麦角甾-6,22-二烯-3-醇(6),3,3-二甲氧基-7,22-二烯麦角烷(7),28-乙酰白桦脂醇(8),白桦脂醇(9),β-羟基十八烷酸(10),9,10-二羟基十八烷酸(11),瑞香素(12)。采用AlamarBlue法检测单体化合物对人肺癌细胞NCI-H460和人胃癌细胞SGC-7901的抑制活性。结果表明,化合物4对NCI-H460细胞株的抑制活性最高,化合物9对SGC-7901的抑制活性最高。

关键词：木蹄层孔菌化学成分人肺癌细胞NCI—H 460 人胃癌细胞SGC-7901 瑞香素

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无源声呐水下多目标融合跟踪方法

声学学报 2024年第3期49卷 501-512页

作者：梁国龙张博宇齐滨郝宇杜致尧李想哈尔滨工程大学水声技术全国重点实验室哈尔滨150001 工业和信息化部海洋信息获取与安全工信部重点实验室(哈尔滨工程大学) 哈尔滨150001 哈尔滨工程大学水声工程学院哈尔滨150001

针对海洋环境噪声导致弱目标在不同子频带检测结果差异较大,致使以全频带探测结果为输入的跟踪算法出现性能退化的问题,提出一种子带融合跟踪方法。该方法利用改进的高斯混合概率假设密度滤波器对各频率子带输出的方位估计结果进行跟踪... 详细信息

针对海洋环境噪声导致弱目标在不同子频带检测结果差异较大,致使以全频带探测结果为输入的跟踪算法出现性能退化的问题,提出一种子带融合跟踪方法。该方法利用改进的高斯混合概率假设密度滤波器对各频率子带输出的方位估计结果进行跟踪,并采用广义协方差交集准则对子带跟踪结果进行融合,以获得综合各子带信息的跟踪结果。仿真结果表明,所提方法可以提高弱目标在各子带信噪比不均衡情况下的跟踪能力,且运算时间与对比方法较为接近。海试数据处理结果进一步验证了所提方法的有效性。

关键词：无源声呐广义协方差交集高斯混合概率假设密度滤波器子带融合跟踪

基于机器学习模型的女子沙滩排球制胜因素研究

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基于机器学习模型的女子沙滩排球制胜因素研究

作者：杜德坤首都体育学院

学位级别：硕士

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地铁底架截面布局优化设计

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作者：杜德雷大连交通大学

学位级别：硕士