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纳米孔道单分子检测结直肠癌MicroRNAs

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化学学报 2017年第11期75卷 1087-1090页

作者：胡正利杜冀晖应佚伦彭岳一曹婵龙亿涛华东理工大学化学与分子工程学院结构可控先进功能材料及其制备教育部重点实验室上海200237 深圳大学附属南山医院中心实验室深圳518052

MicroRNA(miRNA)可用于癌症的早期诊断、预后判断,其分析检测具有重要临床意义.结直肠癌的发生、发展与miRNA 21、miRNA 92等的异常表达明显相关.本研究设计了以poly(d T)n为引导链的DNA探针(probe)并尝试使用α-溶血素(α-HL)纳米孔道... 详细信息

MicroRNA(miRNA)可用于癌症的早期诊断、预后判断,其分析检测具有重要临床意义.结直肠癌的发生、发展与miRNA 21、miRNA 92等的异常表达明显相关.本研究设计了以poly(d T)n为引导链的DNA探针(probe)并尝试使用α-溶血素(α-HL)纳米孔道单分子检测方法检测结直肠癌miRNAs.miRNA·probe复合物分子穿过α-HL纳米孔道限域空间时,由于probe链长、序列不同导致probe-α-HL相互作用不同,miRNA 92·probe 92、miRNA 21·probe 21、miRNA 16·probe 16输出为形态、阻断时间不同的多台阶特征信号,实现了三种miRNAs的有效区分.实验证明,此方法可以用于检测血清实际样品.因此,未来有望使用α-HL构建miRNA超灵敏单分子生物传感器.

关键词： microRNA α-溶血素纳米孔道限域空间单分子生物传感器

新生儿缺氧缺血性脑病细胞因子的变化及临床意义

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中国免疫学杂志 2002年第4期18卷 278-280页

作者：杜冀晖苏卓娃陈实深圳市南山人民医院中心实验室深圳518052 深圳市南山妇幼保健院深圳518052

目的：研究新生儿缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）患儿细胞因子ＩＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＩＬ－６的变化及其与ＨＩＥ严重程度的关系和临床意义。方法：用ＥＬＩＳＡ方法测定了５０例ＨＩＥ患儿血浆及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）体外培养产... 详细信息

目的：研究新生儿缺氧缺血性脑病（ＨＩＥ）患儿细胞因子ＩＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＩＬ－６的变化及其与ＨＩＥ严重程度的关系和临床意义。方法：用ＥＬＩＳＡ方法测定了５０例ＨＩＥ患儿血浆及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）体外培养产生的细胞因子ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＩＬ－６的水平。结果：ＨＩＥ患儿血浆及ＰＢＭＣ体外培养产生的ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β水平均显著高于对照组；而且重度ＨＩＥ患儿急性期血浆及ＰＢＭＣ体外培养产生的ＴＮＦ－α、ＩＬ－β和ＩＬ－６水平均显著高于对照组和轻度ＨＩＥ组，其恢复期血浆ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β则显著降低，但血浆ＩＬ－６水平仍明显高于对照组。结论：ＨＩＥ患儿血浆及激活的ＰＢＭＣ产生的ＴＮＦ－α和ＩＬ－１β水平与ＨＩＥ的严重程度有关，ＩＬ－６的产生可能与脑损伤后的修复机制有关，测定这些细胞因子对病情的监测具有一定意义。

关键词：新生儿缺氧缺血性脑病肿瘤坏死因子-α 白介素-1β 白介素-6

免疫球蛋白改善新生儿缺氧缺血性脑病患者意识、肌张力障碍

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中国临床康复 2003年第16期7卷 2340-2341页

作者：杜冀晖苏卓娃乐新陈实深圳市南山人民医院中心实验室广东省深圳市518052 深圳市南山区妇幼保健院广东省深圳市518052

目的探讨静脉注射免疫球蛋白(IVIG)改善新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患者意识、肌张力障碍的临床疗效及其作用机制。方法将40例HIE患儿随机分为IVIG治疗组及常规治疗组,比较两组患儿临床症状、体征消失及住院时间;并采用ELISA法检测患儿... 详细信息

目的探讨静脉注射免疫球蛋白(IVIG)改善新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患者意识、肌张力障碍的临床疗效及其作用机制。方法将40例HIE患儿随机分为IVIG治疗组及常规治疗组,比较两组患儿临床症状、体征消失及住院时间;并采用ELISA法检测患儿治疗前后外周血单个核细胞(PBMC)产生肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的水平。结果与常规治疗组相比,IVIG治疗组患儿意识、肌张力障碍等症状消退时间及住院时间较常规治疗组均显著缩短犤(36±11)hvs(55±20)h,(34±18)hvs(50±19)h,(252±37)hvs(280±50)h,t=2.04～3.63,P<0.05犦。IVIG治疗后患儿PBMC产生前炎症细胞因子水平明显低于治疗前犤TNF-α:(1.0±1.6)μg/Lvs(4.2±3.8)μg/L,IL-1β:(1.1±1.5)μg/Lvs(3.4±3.8)μg/L,IL-6:(0.8±1.4)μg/Lvs(3.0±3.2)μg/L,P<0.01犦,而常规治疗前后无明显差异。结论IVIG早期应用对改善HIE患儿意识、肌张力障碍具有较好疗效,可能是通过抑制PBMC产生TNF-α,IL-1β和IL-6等损伤性细胞因子发挥作用。

关键词：免疫球蛋白新生儿缺氧缺血性脑病意识障碍肌张力障碍静脉注射

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流式细胞术检测药物抗铜绿假单胞菌效应

中国药房 2007年第13期18卷 986-988页

作者：周蓓潘伟光杜冀晖深圳市第六人民医院深圳市518052

目的:探索建立流式细胞术(FCM)检测哌拉西林/他唑巴坦抗铜绿假单胞菌效应的方法。方法:以碘化丙啶(PI)为荧光染料,用FCM检测铜绿假单胞菌标准菌株ATCC27853在不同浓度哌拉西林/他唑巴坦(TZPP)作用下各管平均荧光强度(MFI),并寻找其最佳... 详细信息

目的:探索建立流式细胞术(FCM)检测哌拉西林/他唑巴坦抗铜绿假单胞菌效应的方法。方法:以碘化丙啶(PI)为荧光染料,用FCM检测铜绿假单胞菌标准菌株ATCC27853在不同浓度哌拉西林/他唑巴坦(TZPP)作用下各管平均荧光强度(MFI),并寻找其最佳试验条件。结果:TZPP浓度范围为0·125～64μg·mL-1时,细菌MFI值随药物浓度的升高而呈上升趋势。结论:FCM可用于检测药物抗铜绿假单胞菌的效应,并为进一步的药敏试验提供基础。

关键词：流式细胞术哌拉西林/他唑巴坦铜绿假单胞菌检测抗菌效应

合成肽VAR2特异性结合循环肿瘤细胞的检测及临床应用

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基础医学与临床 2023年第11期43卷 1662-1667页

作者：余宏丁利杰刘厚聪王纪东杜冀晖华中科技大学协和深圳医院临床医学转化中心广东深圳518052 深圳大学医学部广东深圳518052

目的探讨疟疾蛋白(VAR2)合成肽特异性结合循环肿瘤细胞(CTCs)的检测及临床应用。方法选择疟疾蛋白VAR2CSA功能结构域肽段序列合成VAR2多肽;基于纳米微流控技术富集CTCs,利用VAR2合成肽对富集细胞进行检测,建立一种新型CTCs检测方案。用... 详细信息

目的探讨疟疾蛋白(VAR2)合成肽特异性结合循环肿瘤细胞(CTCs)的检测及临床应用。方法选择疟疾蛋白VAR2CSA功能结构域肽段序列合成VAR2多肽;基于纳米微流控技术富集CTCs,利用VAR2合成肽对富集细胞进行检测,建立一种新型CTCs检测方案。用细胞免疫荧光染色、流式细胞测量术及肿瘤细胞掺入回收实验,分析VAR2合成肽与不同组织来源肿瘤细胞特异性结合、回收效率,并与免疫荧光原位杂交(imFISH)检测法进行比较。选取22例结直肠癌患者与22名健康者,利用VAR2合成肽检测两者外周血CTCs。比较不同TNM分期患者CTCs阳性检出率。结果合成肽VAR2可以与人结肠癌细胞系SW620、人乳腺癌细胞系MCF7和人食管鳞癌细胞系KYSE180不同组织来源的肿瘤细胞特异性结合,合成肽VAR2检测100个SW620、MCF7、KYSE180肿瘤细胞掺入3 mL外周血中的回收率分别为82.8%±8.41%、56.2%±3.57%、86.6%±8.19%,与imFISH法检测法比较,差异无统计学意义。合成肽VAR2检测50、100、200个3种不同肿瘤细胞的回收率与掺入肿瘤细胞的数量没有明显相关性。合成肽VAR2检测临床结直肠癌患者外周血样本CTCs阳性率为63.6%,高于健康受试者组CTCs阳性率的0.0%,同时与侵袭深度、淋巴结转移、远处转移及临床分期相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论合成肽VAR2可实现对不同组织来源、非抗体依赖性的特异性CTCs检测,对于肿瘤患者临床分期、病情评估具有一定的临床应用价值。

关键词：循环肿瘤细胞疟疾蛋白VAR2CSA(VAR2) 非抗体依赖性结直肠癌临床分期

静脉注射免疫球蛋白对新生儿缺氧缺血性脑病PBMC产生促炎细胞因子的影响

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上海免疫学杂志 2003年第6期23卷 417-418页

作者：杜冀晖苏卓娃陈实深圳市南山人民医院中心实验室深圳518052 深圳市南山区妇幼保健院深圳518052

为探讨静脉注射免疫球蛋白 (IVIg )对新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE )患儿外周血单个核细胞 (PBMC )产生促炎细胞因子TNF α、IL 1β和IL 6的影响及其在HIE治疗中的免疫调节作用机制 ,本文采用ELISA测定了IVIg治疗前后HIE患儿PBMC产生TNF ... 详细信息

为探讨静脉注射免疫球蛋白 (IVIg )对新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE )患儿外周血单个核细胞 (PBMC )产生促炎细胞因子TNF α、IL 1β和IL 6的影响及其在HIE治疗中的免疫调节作用机制 ,本文采用ELISA测定了IVIg治疗前后HIE患儿PBMC产生TNF α、IL 1β和IL 6的水平 ,以及IVIg在体外对其PBMC产生促炎细胞因子水平的直接影响。结果显示 ,IVIg治疗后患儿PBMC产生促炎细胞因子水平明显低于治疗前 (P <0 0 1) ,而常规治疗前后无明显差异。IVIg在体外直接加入患儿PBMC培养体系 ,其PBMC产生促炎细胞因子水平亦明显降低。与常规治疗组相比 ,IVIg治疗组患儿临床症状、体征消失及住院时间均明显缩短 (P <0 0 5或P <0 0 1)。提示IVIg可能是通过抑制PBMC产生TNF α、IL 1β和IL 6等损伤性细胞因子 ,在HIE的治疗中发挥免疫调节作用 ,可作为常规治疗的有益补充。

关键词：脑缺氧脑缺血免疫球蛋白类静脉内促炎细胞因子

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喘息样支气管炎患儿的免疫功能变化及意义

广东医学 1998年第1期19卷 30-31页

作者：杜冀晖苏卓娃陈实包忠宪深圳市南山人民医院中心实验室 518052

对30例喘支患儿及20例正常对照儿童的细胞免疫和体液免疫功能进行了检测。结果显示，与正常对照相比，喘支患儿外周血T细胞亚群CD+8比例明显增高（P＜0．01），CD+4／CD+8明显降低（P＜0．05）；外周血单个核细胞体外培养上清液中干扰... 详细信息

对30例喘支患儿及20例正常对照儿童的细胞免疫和体液免疫功能进行了检测。结果显示，与正常对照相比，喘支患儿外周血T细胞亚群CD+8比例明显增高（P＜0．01），CD+4／CD+8明显降低（P＜0．05）；外周血单个核细胞体外培养上清液中干扰素Ⅱ型（IFN－r）、白细胞介素-2（IL-2）水平均明显低于正常对照（P＜0．01，P＜0．05）；喘支患儿血清IgA明显降低（P＜0．01）。提示T细胞免疫调节功能紊乱及TH1细胞活性降低在喘支的发生中起着一定作用，和临床应用免疫调节剂提供了依据。

关键词：支气管炎 T细胞亚群儿童免疫功能

雷公藤多甙对白细胞介素-1β诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364基质金属蛋白酶-3、c-Jun基因表达的影响

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中华实验外科杂志 2007年第12期24卷 1578-1580页

作者：蔡安季马文松苏卓娃陈群杨宇杜冀晖广东医学院附属深圳南山医院骨一科深圳518052

目的观察雷公藤多甙对白细胞介素（IL）-1β诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364基质金属蛋白酶-3（MMP3）、c—Jun mRNA表达的影响。方法选择不同浓度的雷公藤多甙作用IL-1β刺激的大鼠滑膜细胞株RSC-364，37℃，5％CO2的环境下培养48h，运用... 详细信息

目的观察雷公藤多甙对白细胞介素（IL）-1β诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364基质金属蛋白酶-3（MMP3）、c—Jun mRNA表达的影响。方法选择不同浓度的雷公藤多甙作用IL-1β刺激的大鼠滑膜细胞株RSC-364，37℃，5％CO2的环境下培养48h，运用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清的MMP3和实时聚合酶链反应（real—time PCR）检测分析细胞中的c—Jun mRNA表达。结果不同浓度的雷公藤多甙（0、5、10、20mg／L）对IL-1β刺激的大鼠滑膜细胞株RSC-364分泌MMP3的水平依次是198、176、140、115μg／L，c—Jun mRNA表达分别是1．17×10^6、3．31×10^5、9．32×10^4、2．81×10^4 copies／ml，即呈现明显地抑制。重要的是：c—Jun mRNA表达抑制呈现明显的剂量依赖性。结论雷公藤多甙治疗类风湿性关节炎的有效的作用机制，可能与其抑制MMP3、c—Jun基因的表达相关。

关键词：雷公藤多甙 IL-1β MMP3 滑膜细胞

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小球藻电介质电泳特性的实验研究

传感技术学报 1995年第1期8卷 27-32页

作者：李乃弘陆祖宏闵光伟杜冀晖东南大学生物科学与医学工程系南京210096

生物电介质电泳(Biological Dielectrophoresis)是指生物微粒在非均匀电场中,因介质极化而受电场力的作用,产生宏观位移运动的现象.本文运用针状电极,首次对小球藻(chlorella pyrenodiosa)的电介质电泳特性进行了研究.通过在50Hz～1MH... 详细信息

生物电介质电泳(Biological Dielectrophoresis)是指生物微粒在非均匀电场中,因介质极化而受电场力的作用,产生宏观位移运动的现象.本文运用针状电极,首次对小球藻(chlorella pyrenodiosa)的电介质电泳特性进行了研究.通过在50Hz～1MHz频率范围内对小球藻细胞收集率频谱的测量,发现在100HZ和1MHZ附近存在两个特征收集谱峰.还对影响小球藻收集率的因素进行了初步的实验研究,实验结果对于研制基于介质电泳的微生物传感器具有指导意义.

关键词：小球藻电介质电泳电介质极化实验