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趋化因子SDF-1对人牙周膜干细胞增殖、迁移及分化的影响

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趋化因子SDF-1对人牙周膜干细胞增殖、迁移及分化的影响

作者：杜令倩山东大学

学位级别：硕士

目的：趋化因子SDF-1因能够募集间充质干细胞（MSCs）、调控其增殖和分化,而在组织再生中发挥着重要作用。然而,它对人牙周膜干细胞（PDLSCs）的作用仍然不清楚。从人牙周韧带组织中分离的PDLSCs,属于成体间充质干细胞,在适当的培... 详细信息

目的：趋化因子SDF-1因能够募集间充质干细胞（MSCs）、调控其增殖和分化,而在组织再生中发挥着重要作用。然而,它对人牙周膜干细胞（PDLSCs）的作用仍然不清楚。从人牙周韧带组织中分离的PDLSCs,属于成体间充质干细胞,在适当的培养条件下能分化为成牙骨质样细胞、成骨细胞、脂肪细胞和胶原形成细胞,并且在动物牙周缺损模型中能够再生成牙骨质／牙周韧带样结构。因此PDLSCs被认为是牙周组织再生的种子细胞并被用于以干细胞为基础的牙周组织再生工程中。人PDLSCs上趋化因子受体的表达、趋化因子对PDLSCs所起的趋化效应以及其在组织修复过程的后续效应可能是牙周组织再生中一个至关重要的过程。本研究的目的是探讨趋化因子SDF-1受体CXCR4的在人PDLSCs上的表达及SDF-1对人PDLSCs生长活性、增殖、迁移与分化潜能的影响。方法：利用有限稀释法从因正畸需要而拔除的健康前磨牙中分离、培养人PDLSCs。利用免疫细胞化学染色的方法检测波形丝蛋白和角蛋白及间充质干细胞表而标志STRO-1在PDLSCs上的表达。利用实时定量PCR及免疫细胞化学染色的方法检测趋化因子SDF-1受体CXCR4在PDLSCs上的表达。利用MTT检测方法及BrdU掺入法检测SDF-1对PDLSCs生长活性及增殖状态的影响。利用实时定量PCR的方法检测SDF-1对PDLSCs分化相关因子Ⅰ型胶原蛋白（ColⅠ）和碱性磷酸酶（ALP）表达的影响。利用24孔的Transwell细胞培养室来检测SDF-1对PDLSCs的趋化效应。所有数据均使用SPSS13.0软件包进行统计学单因素方差分析。P值小于0.05被认为具有统计学意义。结果：免疫细胞化学检测证实人PDLSCs广谱角蛋白阴性表达、波形丝蛋白阳性表达,且间充质干细胞标志STRO-1呈阳性表达。实时定量PCR分析证实人PDLSCs在mRNA水平上表达趋化因子受体CXCR4;定性免疫细胞化学检测显示人PDLSCs在蛋白水平上表达受体CXCR4。与单独使用培养基比较,SDF-1增强了人PDLSCs的生长活性与增殖状态（P＜0.05）。实时定量PCR表明,SDF-1能够显著增加Co1Ⅰ的表达水平（P＜0.01）,对ALP的表达水平无明显影响（P＞0.05）。与空白对照组相比,在100ng/m1与400ng/ml之间,趋化因子SDF-1能够明显促进PDLSCs的迁移（P＜0.05）,最大的促迁移浓度是200ng/ml。使用CXCR4中和抗体处理后,PDLSCs的增殖及迁移效应明显受到抑制（P＜0.05）。结论：在本实验中我们证实人PDLSCs表达趋化因子受体CXCR4,趋化因子SDF-1对PDLSCs有剂量依赖性的趋化效应,这种趋化效应可能是通过其特异性受体CXCR4介导的。趋化因子SDF-1可能具有将PDLSCs募集到被破坏的牙周组织中的潜力,并通过促进这些干细胞的活性、增殖及影响其分化能力来促进破坏的牙周组织再生。

关键词：牙周膜干细胞 SDF-1 趋化效应牙周组织再生

人牙周膜干细胞的分离鉴定及骨形态发生蛋白-2对其趋化效应的研究

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华西口腔医学杂志 2012年第1期30卷 13-17页

作者：杜令倩杨丕山赵宁葛少华山东大学口腔医院牙周科山东大学第二医院牙周科山东省口腔生物医学重点实验室济南250012

目的研究人牙周膜干细胞(PDLSCs)对骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的趋化反应。方法通过有限稀释法分离、培养人PDLSCs,利用免疫荧光染色检测人PDLSCs波形丝蛋白及干细胞表面标志物STRO-1的表达,检测人PDLSCs多向分化能力,通过克隆形成实验和5... 详细信息

目的研究人牙周膜干细胞(PDLSCs)对骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的趋化反应。方法通过有限稀释法分离、培养人PDLSCs,利用免疫荧光染色检测人PDLSCs波形丝蛋白及干细胞表面标志物STRO-1的表达,检测人PDLSCs多向分化能力,通过克隆形成实验和5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)共培养的方法检测其干细胞特性。利用24孔的Transwell细胞培养室来检测人PDLSCs对BMP-2的趋化反应,光镜下计迁移至滤膜下侧面的不同视野的细胞数。结果人PDLSCs抗波形丝蛋白染色阳性,表达干细胞表面标志物STRO-1,体外诱导培养的人PDLSCs能够向成骨细胞和成脂细胞分化,具有较高的自我更新能力,并在体外呈克隆状生长。在100、200 ***-1 BMP-2实验组,Transwell细胞培养室中迁移的细胞数目显著多于空白对照组(P<0.01)。结论 BMP-2对人PDLSCs有趋化效应。

关键词：骨形态发生蛋白-2 牙周膜干细胞趋化作用

艾塞那肽对人牙周膜干细胞增殖、迁移和成骨分化的影响

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上海口腔医学 2020年第3期29卷 225-230页

作者：梁乾宇杜令倩张睿丁田葛少华山东大学口腔医学院山东省口腔组织再生重点实验室山东济南250012 山东大学口腔医学院牙周病科山东济南250012 山东大学第二医院口腔科山东济南250033

目的:探讨艾塞那肽(exendin-4,EX-4)对人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells, PDLSCs)增殖、迁移和成骨分化的影响.方法:通过有限稀释法体外分离、培养PDLSCs.通过克隆形成实验,定向诱导成骨、成脂分化,鉴定其干细胞特性.通... 详细信息

目的:探讨艾塞那肽(exendin-4,EX-4)对人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells, PDLSCs)增殖、迁移和成骨分化的影响.方法:通过有限稀释法体外分离、培养PDLSCs.通过克隆形成实验,定向诱导成骨、成脂分化,鉴定其干细胞特性.通过免疫荧光染色检测PDLSCs表面EX-4受体GLP-1R(glucagon-like peptide-1 receptor)的表达.利用5、10、20或50 nmol/L EX-4体外刺激PDLSCs,通过CCK-8、Transwell实验和碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性测试,研究不同浓度EX-4对PDLSCs增殖、迁移和成骨分化的影响.应用实时定量PCR检测成骨相关基因ALP、runt相关转录因子2(runt related transcription factor 2,Runx2)和骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达.采用Graphpad Prims 6.0软件包对数据进行统计学分析.结果:成功分离、培养***-1R在PDLSCs表面阳性表达,不同浓度EX-4对PDLSCs的增殖能力无显著影响(P>0.05),10 nmol/L EX-4可显著促进PDLSCs迁移、ALP活性及成骨相关基因的表达(P<0.05).结论:10 nmol/L EX-4可促进PDLSCs迁移和成骨分化.

关键词：牙周膜干细胞艾塞那肽成骨分化

生长激素释放肽对牙周膜干细胞增殖、凋亡影响的研究

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口腔医学 2022年第8期42卷 681-687页

作者：王婷杜令倩山东大学齐鲁医学院口腔医学院·口腔医院综合科山东省口腔组织再生重点实验室山东省口腔生物材料与组织再生工程实验室山东济南250012 山东大学第二医院口腔科山东济南250033

目的观察生长激素释放肽(Ghrelin)对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)增殖、凋亡的影响,探究其可能机制。方法通过流式细胞术对培养的PDLSCs进行表面抗原鉴定,采用茜素红及油红O染色鉴定PDLSCs多向分化能力。CC... 详细信息

目的观察生长激素释放肽(Ghrelin)对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)增殖、凋亡的影响,探究其可能机制。方法通过流式细胞术对培养的PDLSCs进行表面抗原鉴定,采用茜素红及油红O染色鉴定PDLSCs多向分化能力。CCK-8检测Ghrelin对PDLSCs增殖效应的影响;活死细胞染色检测Ghrelin作用下细胞状态;流式细胞术AnnexinV-FITC/PI双染法、TUNEL染色分别检测Ghrelin及其受体GHS-R1α拮抗剂D-Lys3-GHRP-6(DLS)对饥饿诱导下PDLSCs凋亡的作用。结果本研究中所培养的PDLSCs为间充质来源的多能干细胞。100、200 ng/mL Ghrelin能够显著促进PDLSCs的增殖(P<0.05)。Ghrelin可抑制饥饿诱导的细胞死亡及凋亡,且凋亡抑制效应可以被DLS所逆转。结论 Ghrelin促进PDLSCs增殖,抑制无血清饥饿诱导的细胞凋亡,可能与Ghrelin激活PDLSCs细胞表面受体GHS-R1α有关。

关键词：生长激素释放肽增殖凋亡牙周膜干细胞

Y-27632对人牙周膜干细胞增殖、凋亡、迁移、分化及干性维持的影响

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Y-27632对人牙周膜干细胞增殖、凋亡、迁移、分化及干性维持的影响

局部应用SDF-1对大鼠牙周缺损模型中干细胞募集及骨再生的促进作用研究

第十一次全国牙周病学学术会议

作者：王婷康文燕杜令倩葛少华山东大学口腔医学院山东大学口腔医院牙周科山东大学第二附属医院

目的:Y-27632是Rho相关激酶(ROCK)的抑制剂,能够通过调节肌动蛋白微丝骨架重构,参与细胞的增殖、凋亡、迁移、分化等许多的细胞生命活动。PDLSCs是从牙周膜组织中分离出来的间充质干细胞,具有多向分化潜能,在组织再生中起着重要的作用...

目的:Y-27632是Rho相关激酶(ROCK)的抑制剂,能够通过调节肌动蛋白微丝骨架重构,参与细胞的增殖、凋亡、迁移、分化等许多的细胞生命活动。PDLSCs是从牙周膜组织中分离出来的间充质干细胞,具有多向分化潜能,在组织再生中起着重要的作用。本研究是在体外培养PDLSCs的基础上,观察不同浓度Y-27632对PDLSCs增殖、凋亡、迁移、分化及干性维持等生物学行为的影响,并探讨其促进PDLSCs增殖的作用机制。方法:通过有限稀释法分离培养PDLSCs,通过CCK8和EdU实验、细胞凋亡实验、迁移试验、ALP活性检测、茜素红染色、油红O染色和qRT-PCR检测Y-27632对PDLSCs增殖、凋亡、迁移、成骨成脂分化及干性维持的影响。通过Western blot实验探讨Y-27632促进PDLSCs增殖的作用机制。结果:增殖实验结果表明10μM和20μM Y-27632促进PDLSCs的增殖,且浓度为20μM时促进细胞增殖的效应达到高峰。细胞凋亡的结果表明Y-27632对PDLSCs的凋亡无明显影响。迁移实验结果表明Y-27632能够增强PDLSCs的迁移能力。ALP活性实验、茜素红染色和qRT-PCR的结果表明Y-27632能够明显降低细胞的ALP活性,抑制矿化结节的形成,减少钙盐的沉积并下调成骨相关基因的表达水平。油红O染色和qRT-PCR的结果表明Y-27632促进脂滴的形成,并上调成脂相关基因的表达。qRT-PCR检测干性的结果显示Y-27632上调细胞干性相关基因的表达水平。Western blot结果发现Y-27632上调p-ERK的表达水平,同时,U0126能使上调的p-ERK的表达水平下降。结论:Y-27632促进PDLSCs的增殖、迁移、成脂分化及干性维持,但抑制ALP活性及矿化结节的形成。同时研究证明Y-27632促进PDLSCs增殖的机制是ERK信号通路密切相关。

关键词：

来源： cnki会议评论

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局部应用SDF-1对大鼠牙周缺损模型中干细胞募集及骨再生的促进作...

李红梅教授运用“分期疗法”治疗寒凝血瘀型子宫腺肌病痛经的经验总结

第十次全国牙周病学学术会议

作者：葛少华刘红蕊李敏启杜令倩杨丕山山东大学口腔医学院山东省口腔生物医学重点实验室牙周科

目的研究以胶原膜为载体的SDF-1局部应用能否促进干细胞募集及骨再生。材料和方法在大鼠的双侧下颌制备颊侧骨缺损,将SDF-1与胶原膜复合,置于缺损区后评价SDF-1对干细胞募集、炎症反应、血管生成、破骨过程、支架材料降解及骨再生的影...

目的研究以胶原膜为载体的SDF-1局部应用能否促进干细胞募集及骨再生。材料和方法在大鼠的双侧下颌制备颊侧骨缺损,将SDF-1与胶原膜复合,置于缺损区后评价SDF-1对干细胞募集、炎症反应、血管生成、破骨过程、支架材料降解及骨再生的影响。结果 SDF-1能促进宿主来源的间充质干细胞和造血干细胞归巢至创区,并能显著减轻炎症反应。不仅如此,SDF-1能促进血管生成、诱导早期的破骨过程、加速胶原降解及提高骨再生的质和量。结论局部应用SDF-1是一种简单无创有效地促进牙周再生的策略。

关键词：

来源： cnki会议评论

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李红梅教授运用“分期疗法”治疗寒凝血瘀型子宫腺肌病痛经的经验...

作者：孔令倩黑龙江中医药大学

学位级别：硕士

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健康照明与儿童近视防控的研究进展

眼科新进展 2024年第2期44卷 155-158页

作者：令倩王义仓邵毅南昌大学第一附属医院眼科江西省南昌市330006 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科上海市200030

近视在我国发病率较高,是影响儿童视觉健康的重要因素。现有的研究表明,过长的屏幕使用时间和过少的户外活动是儿童近视的重要诱因,这些危险因素都与光照参数,如光照强度、时常、频率、光谱有关。并且,不当的夜间照明也会对儿童的昼夜... 详细信息

近视在我国发病率较高,是影响儿童视觉健康的重要因素。现有的研究表明,过长的屏幕使用时间和过少的户外活动是儿童近视的重要诱因,这些危险因素都与光照参数,如光照强度、时常、频率、光谱有关。并且,不当的夜间照明也会对儿童的昼夜节律、睡眠产生影响并导致近视。现对屏幕时间、户外活动、光照属性以及昼夜节律的临床研究以及流行病学资料进行综述,为儿童近视预防提供一些建议与指导。

关键词：儿童近视光照屏幕时间昼夜节律

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金融依存度对经济增长的影响研究

金融依存度对经济增长的影响研究

作者：杜小倩兰州财经大学

学位级别：硕士

随着国际金融一体化的不断加速,金融机构、金融市场和金融体系之间的互联互通显著增强,国际经济关系更为密切,金融依存度保持在较高水平并有所波动。另外,由于美联储可能降息以及美国利率政策和美元走势的不确定性,导致市场波动加大,进... 详细信息

随着国际金融一体化的不断加速,金融机构、金融市场和金融体系之间的互联互通显著增强,国际经济关系更为密切,金融依存度保持在较高水平并有所波动。另外,由于美联储可能降息以及美国利率政策和美元走势的不确定性,导致市场波动加大,进一步加剧依赖外部债务的国家的融资压力。在此背景下,一国金融业的发展策略是更多地依赖本国还是外国,在很大程度上取决于金融依存度对一国经济增长的影响,因此本文对这一问题进行研究,为一国金融业的发展路径提供参考依据。论文首先对金融依存度进行概念界定,在此基础上梳理了国内外对金融依存度与经济增长之间关系的研究,发现存在金融依存度有利于经济增长与不利于经济增长两种结论。接着,论文以经济相互依赖理论、国际债务理论、金融深化论和金融抑制论为理论依据,在对主要经济体的金融依存度和经济增长状况进行分析的基础上,探讨了金融依存度影响经济增长的理论机制,认为金融依存度主要通过货币政策、经济波动及金融市场三条途径影响经济增长:金融依存度越高,国家自主制定货币政策进行宏观调控的能力越差,不利于经济增长;金融依存度越高,一国经济受其他国家及国际社会的影响越大,经济波动越大,不利于经济增长;金融依存度越高,一国金融市场越动荡,不利于经济增长。然后,论文以全球94个国家2000-2022年的面板数据为样本,构建固定效应模型,实证检验了金融依存度对经济增长的影响及影响路径,并对不同经济体进行了异质性检验。实证研究发现,无论是从总体上看,还是分别从发达经济体、转型经济体和发展中经济体这三类不同发展水平经济体来看,金融依存度的增加均对经济增长产生负面影响,其中对发达经济体的负面影响最小,发展中经济体次之,转型经济体最大;从小国、中等国家规模和大国这三类不同规模国家来看,金融依存度的增加均对经济增长产生负面影响,其中对小国负面影响最小,中等规模国家次之,大国最大;从影响路径来看,金融依存度通过货币政策、经济波动、金融市场三条渠道影响经济增长,其中金融市场在此过程中的影响最大,经济波动次之,货币政策最弱。最后,论文提出构建多元化金融体系、强化金融监管和治理力度、促进金融创新、推动经济结构调整、积极参与国际合作、实施因地制宜政策、强化金融教育和培育金融科技复合型人才等对策建议,以应对金融依存度对经济增长可能带来的负面影响,促进经济持续健康发展。

关键词：金融依存度经济增长发达经济体转型经济体发展中经济体