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爪哇棒束孢MSC-F1对柑橘全爪螨的毒力测定及液体发酵工艺优化

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中国生物防治学报 2024年

作者：杜丹超刘顺明蒲占湑吕佳鹿连明浙江省柑橘研究所

爪哇棒束孢Isaria javanica MSC-F1对柑橘全爪螨具有强致病性，该生防菌株的研发对柑橘全爪螨的防治具有重要意义。本研究为了提高爪哇棒束孢MSC-F1液体发酵产孢量，为固相产孢提供优质种子液，以产孢量为指标，应用单因素筛选和多因素... 详细信息

爪哇棒束孢Isaria javanica MSC-F1对柑橘全爪螨具有强致病性，该生防菌株的研发对柑橘全爪螨的防治具有重要意义。本研究为了提高爪哇棒束孢MSC-F1液体发酵产孢量，为固相产孢提供优质种子液，以产孢量为指标，应用单因素筛选和多因素正交试验对菌株MSC-F1进行培养条件和培养基成分优化。结果表明，菌株MSC-F1最适培养条件：温度29 ℃、转速200 r/min、接种量16%、装液量50 mL/250 mL，培养时间5 d和pH 6.0；最适培养基配方：葡萄糖45 g/L 、大豆粉15 g/L和NaCl 0.50 g/L，发酵优化后产孢量较优化前提高了5.80倍。室内致死性试验表明，菌株MSC-F1分生孢子悬浮液浓度越高，对柑橘全爪螨的致死效果越好。在接种后第8 d，对柑橘全爪螨成螨的LC50为1.69×107个孢子/mL，孢子浓度为1.0×108个孢子/mL下的LT50为6.45 d。综上所述，爪哇棒束孢MSC-F1对柑橘全爪螨致死效果优良，且经发酵工艺优化可以大幅提高产孢量，可为该生防菌株进一步产业化开发奠定基础。

关键词：爪哇棒束孢发酵优化生物防治柑橘全爪螨致死效果

三种侵染柑橘木虱的蜡蚧菌属真菌的生物学特性

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浙江农业学报 2016年第10期28卷 1738-1744页

作者：鹿连明杜丹超胡秀荣蒲占湑黄振东陈国庆浙江省农业科学院浙江柑桔研究所浙江黄岩318020

菌株ZJLA08、ZJLP09和ZJLSP07为从柑橘木虱虫体中分离纯化的蜡蚧菌属真菌,经鉴定分别为渐狭蜡蚧菌Lecanicillium attenuatum、刀孢蜡蚧菌Lecanicillium psalliotae及1个新种Lecanicillium sp.,均对柑橘木虱具有强致病性。为明确这3个菌... 详细信息

菌株ZJLA08、ZJLP09和ZJLSP07为从柑橘木虱虫体中分离纯化的蜡蚧菌属真菌,经鉴定分别为渐狭蜡蚧菌Lecanicillium attenuatum、刀孢蜡蚧菌Lecanicillium psalliotae及1个新种Lecanicillium sp.,均对柑橘木虱具有强致病性。为明确这3个菌株的生物学特性,测定了温度、光照和紫外照射等条件对菌株生长、产孢和孢子萌发的影响。结果表明:25~30℃是菌株生长、产孢和孢子萌发的适宜温度;光照对菌株生长和孢子萌发影响不显著,但适当的光照有利于菌株产孢,如在连续光照条件下培养7 d后,菌株ZJLSP07、ZJLA08和ZJLP09的产孢量依次为6.72×108、6.13×108、10.38×108个·m L^(-1);紫外照射对3个菌株的生长、产孢和孢子萌发均产生显著的抑制作用,如紫外照射60 min对菌株ZJLSP07、ZJLA08和ZJLP09的产孢抑制率分别达38.32%、51.17%和32.41%,对孢子萌发的抑制率分别为81.43%、87.35%和78.14%;湿度高有利于菌株孢子的萌发,如在相对湿度为62%时,菌株ZJLSP07、ZJLA08和ZJLP09的孢子萌发率相比饱和湿度条件下分别下降了84.31%、86.21%和77.47%。在测试的3个菌株中,菌株ZJLP09的菌丝生长速率、产孢量、孢子萌发率等均显著高于其他2个菌株,且其对高温、低湿和紫外照射等具有更强的抗逆性。

关键词：柑橘木虱蜡蚧菌紫外照射孢子萌发

基于超高效液相色谱-串联质谱技术的柑橘黑点病菌(Diaporthe citri)发育关联代谢物分析

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微生物学报 2023年第6期63卷 2472-2487页

作者：蒲占湑朱莉杜丹超胡秀荣鹿连明黄振东浙江省柑橘研究所浙江台州318000

【目的】柑橘黑点病是柑橘间座壳菌(Diaporthe citri)引起的真菌性病害,是危害柑橘的重要病害之一,D. citri在生长发育过程中经历菌丝生长(10 d, T1)、分生孢器形成(20 d, T2)和分生孢器产孢(30 d, T3)三个阶段。通过不同发育阶段代谢... 详细信息

【目的】柑橘黑点病是柑橘间座壳菌(Diaporthe citri)引起的真菌性病害,是危害柑橘的重要病害之一,D. citri在生长发育过程中经历菌丝生长(10 d, T1)、分生孢器形成(20 d, T2)和分生孢器产孢(30 d, T3)三个阶段。通过不同发育阶段代谢组分析,挖掘病原菌发育过程中标记物、关键代谢物,为黑点病菌产孢机制、代谢调控等深入研究提供依据。【方法】利用超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography/tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)技术分析了D. citri发育过程中的代谢变化,采用主成分分析(principal component analysis, PCA)和正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis, OPLS-DA),筛选出了显著差异代谢物并进行了KEGG (Kyoto encyclopedia of genes and genomes)富集分析。【结果】D. citri生长发育的3个阶段共鉴定出1 090种代谢物,基于二重筛选条件(VIP≥1,fold change≥2和fold change≤0.5),T1 vs. T2、T2 vs. T3、T1 vs. T3比较组分别筛选出265、456和580个显著差异代谢物,差异代谢物主要是有机酸、甘油酯类、脂肪酸和氨基酸等物质,病原菌在生长发育过程中形态发育与代谢物变化密切相关。亚油酸及其代谢产物[inolenicacid、13-过氧化羟基-9Z,11E-十八碳二烯酸[(±)13-HpODE]、(9S,10E,12Z)-9-羟基十八碳-10,12-二烯酸[9(S)-HODE]、9-氧代-10E,12Z-十八碳二烯酸(9-oxo ODE)、13-氧代-9Z,11E-十八碳二烯酸(13-oxo ODE)、9-过氧化羟基-9Z,11E-十八碳二烯酸[(±)9-HpODE]、9,12,13-三羟基-十八碳单烯酸[9(S),12(S),13(S)-Tri HOME]和(±)9,10-二羟基-12Z-十八碳烯酸(9,10-Di HOME)、γ-linolenic acid]和花生四烯酸及其代谢物[脂氧素B4 (LXB4)、15-酮基-前列腺素F2a (15-keto prostaglandin F2α)、20-羧基-白三烯B4 (20-carboxy LTB4)和15-脱氧-δ12,14-前列腺素J2 (15-deoxy-δ-12,14-PGJ2)]可能与D. citri产孢机制有关。【结论】D. citri在生长发育过程中形态发育与代谢物变化密切相关,氧化脂类代谢物(亚油酸及其代谢产物和花生四烯酸及其代谢物)是D. citri产孢的关键代谢物。

关键词：柑橘黑点病代谢组分析代谢物超高效液相色谱-串联质谱

INPLANT软件在冷却水管网设计中的应用

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石油化工设计 2019年第3期36卷 32-34,I0002页

作者：杜丹超中国石化工程建设有限公司

冷却水系统是炼化装置公用工程的重要组成部分,对于装置平稳运行以及建设投资和操作费用都有重要影响.文章结合工程案例,介绍了应用INPLANT软件进行冷却水管网设计计算的方法.通过与已建成装置的实际运行数据进行对比,其结果表明,采用IN... 详细信息

冷却水系统是炼化装置公用工程的重要组成部分,对于装置平稳运行以及建设投资和操作费用都有重要影响.文章结合工程案例,介绍了应用INPLANT软件进行冷却水管网设计计算的方法.通过与已建成装置的实际运行数据进行对比,其结果表明,采用INPLANT软件可以指导冷却水管网的优化设计,并且可以节省投资减少能量浪费.

关键词：冷却水管网 INPLANT软件管径优化

海洋放线菌A3202的分离鉴定及其对柑橘采后病害的防效

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植物保护学报 2014年第3期41卷 327-334页

作者：鹿连明杜丹超程保平胡秀荣陈国庆浙江省农业科学院柑橘研究所台州318026 广东省农业科学院植物保护研究所广州510640

为获得用于防治柑橘采后病害的海洋放线菌,以柑橘青霉病菌Penicillium italicum、柑橘绿霉病菌***和柑橘炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides为指示菌,对分离到的25株海洋放线菌进行筛选。通过平板对峙法测定拮抗菌株的抑菌谱,并测... 详细信息

为获得用于防治柑橘采后病害的海洋放线菌,以柑橘青霉病菌Penicillium italicum、柑橘绿霉病菌***和柑橘炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides为指示菌,对分离到的25株海洋放线菌进行筛选。通过平板对峙法测定拮抗菌株的抑菌谱,并测定其发酵产物粗提物对柑橘果实采后病害的防效,根据形态特征、培养特征、生理生化特征及16S rDNA序列对其进行鉴定。结果表明,分离自鳞笠藤壶Tetraclita squamosa的菌株A3202对3种指示菌均具有强抑菌活性,对供试13种植物病原菌的菌丝生长具有不同程度的抑制作用,尤其对柑橘青霉病菌和柑橘绿霉病菌的抑制作用最强,抑菌带宽度分别可达2.33±0.05cm和2.32±0.10cm。该菌株800mg/L粗提物溶液对接种后7 d的柑橘青霉病、柑橘绿霉病和柑橘炭疽病的相对防效均可达100%。初步鉴定该菌株为放线菌中的米修链霉菌Streptomyces misionensis。

关键词：海洋放线菌分离鉴定柑橘采后病害相对防效

淡紫紫孢菌ZJPL08可湿性粉剂研制及对柑橘木虱的毒力分析

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2024年第5期50卷 747-757页

作者：杜丹超朱莉蒲占湑刘顺民陈国庆鹿连明浙江省柑橘研究所浙江台州318020

淡紫紫孢菌(Purpureocillium lilacinum)ZJPL08对柑橘木虱具有强致病性,以该菌为材料的生防菌制剂研发对柑橘木虱的防治具有重要意义。本研究以淡紫紫孢菌ZJPL08为有效成分,进行载体、润湿剂、紫外保护剂等的筛选,确定了淡紫紫孢菌ZJPL0... 详细信息

淡紫紫孢菌(Purpureocillium lilacinum)ZJPL08对柑橘木虱具有强致病性,以该菌为材料的生防菌制剂研发对柑橘木虱的防治具有重要意义。本研究以淡紫紫孢菌ZJPL08为有效成分,进行载体、润湿剂、紫外保护剂等的筛选,确定了淡紫紫孢菌ZJPL08可湿性粉剂的最佳配方:淡紫紫孢菌ZJPL08分生孢子粉10.00%(有效成分)、十二烷基硫酸钠3.00%(润湿剂)、木质素磺酸钠5.00%(分散剂)、腐殖酸0.25%(紫外保护剂)、氯化钙0.10%(孢子萌发促进剂)、黄原胶0.05%(黏着剂)和硅藻土81.60%(载体)。在此条件下制得的淡紫紫孢菌ZJPL08可湿性粉剂孢子含量为3.25×10^(10)个/g,悬浮率为85.67%,润湿时间为86.22 s,细度为95.39%粉剂过300目筛,pH值为6.65,产品各项指标符合国家农药制剂产品要求。半田间防效试验结果表明,该制剂1500倍液处理能有效防治柑橘木虱,防效达97.78%,与对照药剂30%噻虫嗪可湿性粉剂1000倍液(100%防效)相比无显著差异,但显著高于1.80%阿维菌素乳油1500倍液(78.33%防效)。综上所述,本研究研制的淡紫紫孢菌ZJPL08可湿性粉剂对柑橘木虱具有较好的防效,在替代化学农药防治柑橘木虱上具有良好的应用前景。

关键词：淡紫紫孢菌可湿性粉剂柑橘木虱生物防治

一种有机无机复合环保融雪剂的制备及性能研究

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现代化工 2014年第12期34卷 66-67,69页

作者：王萌李晓林杜丹超郑广宇张立群北京化工大学有机无机复合材料国家重点实验室北京100029

以无机盐和有机盐为主要成分,加少量缓蚀剂研制了环保型融雪剂,讨论了原料的选择及配比对产品融雪效果及金属腐蚀性的影响,并进行了融雪试验、金属腐蚀试验和植物腐蚀试验。结果表明,该融雪剂对金属、植物等基本无腐蚀,达到了环境保护... 详细信息

以无机盐和有机盐为主要成分,加少量缓蚀剂研制了环保型融雪剂,讨论了原料的选择及配比对产品融雪效果及金属腐蚀性的影响,并进行了融雪试验、金属腐蚀试验和植物腐蚀试验。结果表明,该融雪剂对金属、植物等基本无腐蚀,达到了环境保护的基本要求。各方面的性能均优于市售融雪剂及氯化钠等氯盐融雪剂。

关键词：融雪剂环保融冰金属腐蚀

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杨梅新害虫——油茶黑胶粉虱的发生与防治

现代园艺 2012年第17期35卷 78-79页

作者：杜丹超陈卫民浙江省柑桔研究所黄岩318020

油茶黑胶粉虱（Aleurotrachelus camelliae kuwana）,属同翅目粉虱科,又名槠黑粉虱、槠黑漆粉虱、小黑粉虱。属同翅目,粉虱科。近几年来,在浙江杨梅产区均发现不同程度的油茶黑胶粉虱危害。该虫原来危害普通油茶,并诱发油茶煤污病,受害... 详细信息

油茶黑胶粉虱（Aleurotrachelus camelliae kuwana）,属同翅目粉虱科,又名槠黑粉虱、槠黑漆粉虱、小黑粉虱。属同翅目,粉虱科。近几年来,在浙江杨梅产区均发现不同程度的油茶黑胶粉虱危害。该虫原来危害普通油茶,并诱发油茶煤污病,受害严重时整株油茶发黑,造成油茶落花落果,影响产量。现该虫为害杨梅,实属新纪录。现将该虫特征及防治技术简介如下。

关键词：发生与防治粉虱科油茶杨梅新害虫落花落果同翅目煤污病

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蜡蚧菌的遗传多样性及其对柑橘木虱的致病性

浙江大学学报（农业与生命科学版） 2015年第1期41卷 34-43页

作者：鹿连明程保平杜丹超胡秀荣蒲占湑陈国庆浙江省柑桔研究所浙江台州318026 广东省农业科学院植物保护研究所广州510640

为探究蜡蚧菌(Lecanicillium lecanii)的遗传多样性、对柑橘木虱的致病性及其影响因素,对19个不同寄主种类和地理来源的蜡蚧菌菌株进行随机引物扩增多态性DNA(randomly amplified polymorphic DNA,RAPD)分析,并对其ITS1-5.8SrDNA-ITS2和... 详细信息

为探究蜡蚧菌(Lecanicillium lecanii)的遗传多样性、对柑橘木虱的致病性及其影响因素,对19个不同寄主种类和地理来源的蜡蚧菌菌株进行随机引物扩增多态性DNA(randomly amplified polymorphic DNA,RAPD)分析,并对其ITS1-5.8SrDNA-ITS2和β-tubulin基因进行测序分析及构建系统发育树,同时测定菌株的生长速度、产孢量、孢子萌发率等生物学特性及对柑橘木虱的致病性。结果显示:蜡蚧菌种内存在丰富的遗传多样性,不同菌株的生长速度、产孢量和孢子萌发率等生物学特性及对柑橘木虱致病性均表现出明显的差异,但未发现彼此之间及其与菌株的寄主种类和地理来源之间具有相关性。在显微镜下观察菌株ZJVL-A对柑橘木虱的侵染过程发现,吸附在寄主体表的分生孢子可在接种后16h萌发入侵,42h后菌丝侵入血腔并在其中增殖,54h后可引起寄主死亡,60h后菌丝侵染并破坏寄主的内部组织器官,最后覆盖在虫体表面的菌丝又产生大量的分生孢子。本研究为进一步了解蜡蚧菌对柑橘木虱的致病机制,为开发用于柑橘木虱田间防治的生物制剂提供了依据。

关键词：蜡蚧菌遗传多样性柑橘木虱致病性