检索结果-南通市图书馆

Caenorhabditis elegans源β1,4-半乳糖基转移酶的异源表达、酶学性质及活性位点研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

Caenorhabditis elegans源β1,4-半乳糖基转移酶的异源表达、酶学...

作者：李靖璇南京农业大学

学位级别：硕士

糖基化（glycosylation）是人体内一种重要的蛋白质翻译后修饰调控机制,它决定了蛋白质的功能,在炎症、细胞黏附和内吞等重要过程中发挥着关键作用。通过糖基化作用可生成多种低聚糖。其中,N-乙酰乳糖胺（Lac NAc）是一种独特的酰基氨基... 详细信息

糖基化（glycosylation）是人体内一种重要的蛋白质翻译后修饰调控机制,它决定了蛋白质的功能,在炎症、细胞黏附和内吞等重要过程中发挥着关键作用。通过糖基化作用可生成多种低聚糖。其中,N-乙酰乳糖胺（Lac NAc）是一种独特的酰基氨基糖,该结构的合成需要将半乳糖（Gal）转移至N-乙酰氨基葡萄糖（Glc NAc）上。Lac NAc是许多糖蛋白的抗原成分,也是抗病毒药物的活性成分。然而,从天然来源中分离此类寡糖是极其困难的,复杂的合成路线使化学合成方法也不利于大规模工业化生产。因此,基于半乳糖基转移酶获取高纯度Lac NAc是目前公认的最有效的方法。β1,4-半乳糖基转移酶（β4GalT）是近年来研究最多的糖基转移酶之一。目前已报道的该功能酶大多来源于微生物、哺乳动物和植物,关于无脊椎动物的相关报道很少,秀丽线虫（Caenorhabditis elegans,***）来源的β1,4-半乳糖基转移酶则至今还未被报道过。***是常用的实验模式生物,其基因组序列已知,并且根据以往研究发现来源于***的酶可用于探讨人类多种疾病的致病机理。从***中挖掘新的β1,4-半乳糖基转移酶可为工业化生产Lac NAc提供重要的工具酶,对未来进一步了解β1,4-半乳糖基转移酶家族的特性也具有重要作用。因此,本课题克隆了来源于***的β1,4-半乳糖基转移酶,测定了其活性、酶学特性及糖基受体的底物特异性,并通过定点突变技术对其活性位点进行了研究,具体研究内容如下:1.重组β1,4-半乳糖基转移酶的克隆表达、活性初测及酶学性质研究以Caenorhabditis elegans基因组为模板克隆β4GalT1直系同源物,将其命名为CeGalT1,经PCR扩增后得到基因大小为1106 bp的DNA片段,并通过表达纯化后得到分子量为44.7 k Da的目的蛋白,其表达量为18.35 mg/L。以UDP-Gal/UDP-GalNAc作为糖基供体,4MU-Glc NAc作为糖基受体通过LC-MS和MALDI-To F-MS初步测定CeGalT1可以将Gal转移至Glc NAc上,生成Lac NAc结构,转化率为47%,但无法合成Lacdi NAc结构,即不能将GalNAc转移至Glc NAc上。对该酶最适温度与最适p H的研究表明,CeGalT1的最适温度为30°C,最适p H位于6.0-7.0之间;Mg和Mn可明显提高酶的活性;Ni、Zn、Co和Cu会抑制酶的活性,而Ca的存在与否对酶的活性没有明显影响。经测定,重组蛋白CeGalT1转移Gal至4MU-Glc NAc的K值为644±71μM,反应最大速率为0.001234±0.00014μM/min,k/K值为3.41。2.重组β1,4-半乳糖基转移酶CeGalT1的糖基受体底物特异性研究以单糖4MU-Glucose、p Np-α-mannose及p Np-β-mannose为糖基受体时,重组β1,4-半乳糖基转移酶CeGalT1均无法将Gal或GalNAc转移至糖链末端。因为以4MU-Glc NAc作为糖基受体时初步测定CeGalT1无法将GalNAc转移至Glc NAc上,所以本章仅以UDP-Gal作为糖基供体,测试了以N-链寡糖为糖基受体时CeGalT1的转移活性。结果表明,以含末端Glc NAc的天然N-链寡糖如A2、A3为糖基受体时,CeGalT1可以将Gal转移至末端Glc NAc上;对于末端为岩藻糖的N-链寡糖如M3,CeGalT1则无法起作用。此外,由于复杂N-链寡糖HRP N-glycan中既含有以岩藻糖为末端的糖链结构也含有以Glc NAc为末端的糖链结构,所以选择以HRP N-glycan为糖基受体进一步验证CeGalT1的底物特异性,结果表明,CeGalT1可以将Gal转移至HRP N-glycan中的末端Glc NAc上,而不能将Gal转移至HRP N-glycan中的末端葡萄糖或岩藻糖上。以上研究表明,当以葡萄糖和岩藻糖为末端单糖时,CeGalT1不能将Gal或GalNAc转移上去;而以Glc NAc为末端单糖时,CeGalT1仅具有半乳糖转移活性,特异性将Gal转移至Glc NAc上,生成Lac NAc结构。3.重组β1,4-半乳糖基转移酶CeGalT1的活性位点及突变体的酶学特性研究通过同源蛋白序列比对,确定重组β1,4-半乳糖基转移酶CeGalT1的保守序列氨基酸为第267位异亮氨酸（Ile,I）和第268位缬氨酸（Val,V）,故将其分别突变为酪氨酸（Tyr,Y）和苯丙氨酸（Phe,F）后得到单突变体CeGalT1-V268F及双突变体CeGalT1-I267Y/V268F,两

关键词： Caenorhabditis elegans β1,4-半乳糖基转移酶酶学性质活性位点

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

基于预测控制的电动汽车快充模块热管理策略

电源学报 2022年

作者：李靖璇鲁岩松朱翀卢徐张希上海交通大学机械与动力工程学院

电动汽车快充充电桩在高功率工作下功率器件容易超温造成安全隐患，而现有的冷却策略采用基于规则控制的强制风冷方式，散热风扇转速大且产生较大的环境噪声。为了保护模块核心器件的热安全同时优化冷却调节策略，本文提出了一种基于数... 详细信息

电动汽车快充充电桩在高功率工作下功率器件容易超温造成安全隐患，而现有的冷却策略采用基于规则控制的强制风冷方式，散热风扇转速大且产生较大的环境噪声。为了保护模块核心器件的热安全同时优化冷却调节策略，本文提出了一种基于数据驱动模型预测控制的电动汽车快充模块优化热管理方法。该方法采用数据驱动构建基于长短期记忆神经网络(LSTM)的模块温度分布的预测模型，并结合模型预测控制(MPC)对风扇转速进行调控，优化快充模块热管理策略并降低风扇噪声。经过实验测试，验证了该方法在保证各关键器件不超温的同时，有效降低风扇平均转速1293r/min，降低平均噪声4.99dB，保障了核心器件热安全性以及散热风扇耐久性。

关键词：模型预测控制长短期记忆神经网络快充模块热管理风扇降噪

同方期刊数据库评论

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

公路桥梁检测质量控制与检测技术的应用实践

中文科技期刊数据库（文摘版）工程技术 2023年第11期 69-72页

作者：李靖璇河北雄安京翼质量检测服务有限公司河北保定071700

公路桥梁施工,除了要有较大的机器设备,以及施工材料之外,还必须有相关技术的支持。而检测技术,是保证公路桥梁施工质量和安全的重要环节。在具体的检测工作中,必须运用一种科学、合理的检测技术,以此保证检测结果的精确度,进而达到有... 详细信息

公路桥梁施工,除了要有较大的机器设备,以及施工材料之外,还必须有相关技术的支持。而检测技术,是保证公路桥梁施工质量和安全的重要环节。在具体的检测工作中,必须运用一种科学、合理的检测技术,以此保证检测结果的精确度,进而达到有效控制路桥施工质量的目的。然而,在新的条件下,由于各种因素的限制,使得检测工作仍然存在着一些不足之处,这给检测工作及其自身的发展带来了很大的障碍。所以,文章首先概述了新时期公路工程检测,并指出了公路桥梁工程检测技术的意义,其次进一步分析了新时期公路桥梁检测技术的应用,最后从实践出发,就如何在实践中运用质量管理,做好新时期公路桥梁检测质量控制作了一些探讨分析,以希望起到借鉴意义。

关键词：新时期公路桥梁检测技术质量控制

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

希望之光从这里点亮 005

中国新闻出版广电报

作者：王坤宁李靖璇

九月的北京，秋高气爽，又一个收获季节即将来临。9月11日～14日举办的全国部分音像电子出版社社长总编辑总经理岗位调训班，让来自全国136家音像电子出版单位的147位负责人接受了全面深入、生动实用的培训。通过培训，大家充了电、鼓...

九月的北京，秋高气爽，又一个收获季节即将来临。9月11日～14日举办的全国部分音像电子出版社社长总编辑总经理岗位调训班，让来自全国136家音像电子出版单位的147位负责人接受了全面深入、生动实用的培训。通过培训，大家充了电、鼓足劲，满怀信心踏上新征程。《中国新闻出版

关键词：

在线全文

cnki报纸

学校读者我要写书评

暂无评论

出版设备：从传统出版跨入数字时代 003

中国新闻出版广电报

作者：王坤宁李靖璇

10年前，磁盘书稿大约只占许多出版社书稿总量的30%~50%，如今所有的出版社书稿都已经是全部磁盘化了，编辑不用纸和笔，就完全可以实现现代彩色出版的专业要求。　　 10年来随着计算机技术的飞速发展和普及。我国出版物的生产过程正发...

10年前，磁盘书稿大约只占许多出版社书稿总量的30%~50%，如今所有的出版社书稿都已经是全部磁盘化了，编辑不用纸和笔，就完全可以实现现代彩色出版的专业要求。　　 10年来随着计算机技术的飞速发展和普及。我国出版物的生产过程正发生着引人注目的变化。出版界通过计算

关键词：

工作要求对网约配送员不安全行为的影响--消极情绪的中介作用

在线全文

cnki报纸

学校读者我要写书评

暂无评论

现代商业 2022年第5期 162-165页

作者：何建华肖之多李靖璇北京师范大学珠海分校广东珠海519087

为减少网约配送员的不安全行为,改善即时配送行业的安全绩效,基于工作要求-控制模型,建立网约配送员工作要求、消极情绪与不安全行为的关系假设模型。结果表明:工作要求对网约配送员不安全行为有显著正向影响;消极情绪对网约配送员不安... 详细信息

为减少网约配送员的不安全行为,改善即时配送行业的安全绩效,基于工作要求-控制模型,建立网约配送员工作要求、消极情绪与不安全行为的关系假设模型。结果表明:工作要求对网约配送员不安全行为有显著正向影响;消极情绪对网约配送员不安全行为有显著正向影响;消极情绪在工作要求与不安全行为之间起到中介作用。研究结论为网约配送员不安全行为发生原因进行了探讨,并为提升互联网即时配送行业安全绩效提供政策建议。

关键词：工作要求网约配送员不安全行为工作要求-控制模型

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

精品化才是网络文学与影视融合正路 003

中国新闻出版广电报

作者：张君成王坤宁李靖璇

8月10日，作为中国“网络文学+”大会平行主题论坛之一的“网络文学+影视融创共进”论坛，以“打造优质现实主义IP，传播新时代中国故事”为主旨，探讨网络文学与影视“联姻”的新机遇。在专家们看来，当下行业机遇与挑战并存，走精品...

8月10日，作为中国“网络文学+”大会平行主题论坛之一的“网络文学+影视融创共进”论坛，以“打造优质现实主义IP，传播新时代中国故事”为主旨，探讨网络文学与影视“联姻”的新机遇。在专家们看来，当下行业机遇与挑战并存，走精品化路线，走内容取胜的道路，才是网络文学与

关键词：

在线全文

cnki报纸

学校读者我要写书评

暂无评论

全民阅读载满希望走进春天 004

中国新闻出版广电报

作者：王坤宁牛春颖李靖璇赵新乐

“倡导全民阅读”历史性地写入政府工作报告，成为今年两会上最令新闻出版界代表委员欢欣鼓舞的字眼。这是政府、社会机构、各界人士多年来不遗余力推广践行的收获，这是对代表委员连续多年呼吁的强力回应。两会上，40多位全国政协委员...

“倡导全民阅读”历史性地写入政府工作报告，成为今年两会上最令新闻出版界代表委员欢欣鼓舞的字眼。这是政府、社会机构、各界人士多年来不遗余力推广践行的收获，这是对代表委员连续多年呼吁的强力回应。两会上，40多位全国政协委员联合提案，尽快出台《全民阅读促进条例》?

关键词：

基于GC-MS及HPLC-PDA对四花青皮活性成分的分析

在线全文

cnki报纸

学校读者我要写书评

暂无评论

中国医院药学杂志 2023年第12期43卷 1355-1360页

作者：彭梦蝶李靖璇邹师琪陈柏忠杨婉玲陈小晶余智芊郑国栋广州医科大学药学院广东广州511436 广东新宝堂生物科技有限公司广东江门529000

目的:对四花青皮挥发性化学成分进行GC-MS分析,并结合HPLC-PDA对其6种主要活性成分进行定量分析。方法:采用水蒸气蒸馏法提取四花青皮中的挥发油,结合GC-MS分析其化学成分及相对含量,进一步建立HPLC方法同时测定四花青皮中6种活性成分... 详细信息

目的:对四花青皮挥发性化学成分进行GC-MS分析,并结合HPLC-PDA对其6种主要活性成分进行定量分析。方法:采用水蒸气蒸馏法提取四花青皮中的挥发油,结合GC-MS分析其化学成分及相对含量,进一步建立HPLC方法同时测定四花青皮中6种活性成分辛弗林、橙皮苷、川陈皮素、3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黄酮、橘皮素、5-羟基-6,7,8,3′,4′-五甲氧基黄酮的含量。结果:采用GC-MS分析从四花青皮中分离鉴定出的38种挥发性化合物,包括25种萜烯类、2种酯类、4种醇类、2种醛类、2种酚类、3种其他化合物。其中主要成分为柠檬烯(55.45%)、γ-松油烯(16.18%)、2-(甲氨基)苯甲酸甲酯(5%)、α-蒎烯(2.84%)以及β-蒎烯(2.75%)等。HPLC-PDA定量结果显示,四花青皮中活性成分以黄酮类为主,其中以橙皮苷的含量最高,多甲氧基黄酮类中,橘皮素、3,5,6,7,8,3′,4′-七甲氧基黄酮、川陈皮素的含量较高,而5-羟基-6,7,8,3′,4′-五甲氧基黄酮含量较低。结论:建立了四花青皮的GC-MS和HPLC-PDA的分离鉴定方法,该法简便易行,可为四花青皮药材的深入质量评价及体内药效物质的阐明提供有效数据。

关键词：四花青皮挥发油活性成分 GC-MS HPLC-PDA