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甲状腺组织的显微拉曼光谱与双光子成像研究

甲状腺组织的显微拉曼光谱与双光子成像研究

作者：李钻芳福建师范大学

学位级别：硕士

本文概述了国内外共聚焦显微拉曼光谱技术与双光子荧光成像技术在肿瘤及其它疾病诊断中的研究情况,以离体人体甲状腺正常组织和病变组织为研究对象,实验比较研究了人体正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿以及乳头状甲状腺癌组织的显微拉曼... 详细信息

本文概述了国内外共聚焦显微拉曼光谱技术与双光子荧光成像技术在肿瘤及其它疾病诊断中的研究情况,以离体人体甲状腺正常组织和病变组织为研究对象,实验比较研究了人体正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿以及乳头状甲状腺癌组织的显微拉曼光谱,初步探讨了利用显微拉曼光谱技术进行甲状腺癌诊断的可行性。结果显示,三种不同甲状腺组织的拉曼光谱存在显著差异,而且组织切片的表面增强拉曼光谱信号更为丰富。本文还利用钛宝石飞秒激光技术,研究了甲状腺正常组织与病变组织的双光子激发荧光与二次谐波图像,进一步从微观结构图像和光谱信息等方面揭示甲状腺正常与病变组织的差异。研究表明共聚焦激光拉曼光谱技术与双光子激发荧光/二次谐波成像技术在甲状腺疾病的早期诊断中有重要的潜在应用,有望成为甲状腺疾病或其它恶性肿瘤早期无损诊断的一种有效方法。

关键词：甲状腺组织拉曼显微光谱双光子荧光成像诊断

电针调控细胞周期相关蛋白对局灶性脑缺血大鼠皮质细胞增殖的影响

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中国康复医学杂志 2016年第7期31卷 729-733页

作者：陈斌李钻芳林如辉陶静陈立典福建中医药大学福州市350122 福建省康复技术重点实验室福建中医药大学康复医学院

目的:通过细胞周期相关蛋白探讨电针对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠皮质细胞增殖的促进作用,阐明其治疗脑缺血的可能机制。方法:将45只雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)、模型(MCAO)及电针(MCAO+EA)组,以Zea Longa法制备大鼠局灶性脑缺血... 详细信息

目的:通过细胞周期相关蛋白探讨电针对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠皮质细胞增殖的促进作用,阐明其治疗脑缺血的可能机制。方法:将45只雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)、模型(MCAO)及电针(MCAO+EA)组,以Zea Longa法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,通过TTC和Neu N染色观察电针对脑缺血大鼠的神经保护作用,使用Brdu免疫组化法观察电针对梗死侧皮质细胞的增殖作用情况,应用Western blot和RT-PCR检测梗死侧皮质细胞周期相关蛋白的表达。结果:电针"曲池"、"足三里"两穴可明显减轻脑缺血大鼠的脑梗死体积和神经元损伤;促进梗死侧神经细胞的增殖;并且提高细胞周期相关蛋白的表达。结论:电针可通过调控细胞周期相关蛋白的表达,缓解脑缺血所引起的神经损伤,同时促进梗死侧皮质的神经细胞增殖,来实现对脑缺血的治疗作用。

关键词：电针脑缺血增殖

电针通过促进突触再生改善脑缺血再灌注损伤大鼠的学习记忆功能

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南方医科大学学报 2024年第12期44卷 2317-2326页

作者：林如辉夏金言马小涵李钻芳福建中医药大学科技创新与转化中心福建福州350122 福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122

目的探讨电针百会、神庭对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用机制。方法将雄性SD大鼠48只随机分为假手术组、模型组、电针组和非穴组,12只/组。采用Longa法制备局灶性缺血损伤大鼠模型。电针干预大鼠百会、神庭穴7d。观察大鼠神经功... 详细信息

目的探讨电针百会、神庭对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用机制。方法将雄性SD大鼠48只随机分为假手术组、模型组、电针组和非穴组,12只/组。采用Longa法制备局灶性缺血损伤大鼠模型。电针干预大鼠百会、神庭穴7d。观察大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积变化、学习记忆功能、海马CA1区病理变化、神经元及突触超微结构,并计数突触密度、血清血清γ-氨基丁酸(GABA)、海马组织中GABAARα1、钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、突触素1(SYN1)和突触后致密蛋白-95(PSD-95)蛋白及mRNA表达情况、SYN1和PSD-95表达水平。结果与模型组比较,电针组大鼠神经功能缺损评分降低(1.75±0.45 vs1.50±0.67,P<0.05);脑梗死体积降低(11.25±6.22 vs 3.51±2.21,P<0.05);逃避潜伏期降低下降(62.65±5.12 vs 51.83±6.19,P<0.05)及穿越平台次数增加(1.17±0.75 vs 3.17±0.75,P<0.05);缺血侧海马CA1区神经细胞数量增加;突触间隙宽度相对变小,突触小体相对增加(2.00±0.11 vs 4.00±0.25,P<0.05);血清中GABA含量上升(3.90±0.75vs 5.54±0.35,P<0.05)海马组织中GABAARα1、SYN1和PSD-95 mRNA表达水平升高(P<0.05);CaMKⅡmRNA表达水平下降(P<0.05)。结论电针百会、神庭可改善脑缺血再灌注损伤大鼠学习记忆功能,其机制可能通过促进突触再生,上调GABAARα1、SYN1和PSD-95表达,下调CaMKⅡ表达有关。

关键词：脑中动脉缺血再灌注损伤电针学习记忆功能突触再生突触可塑性

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电针百会、神庭对大脑中动脉栓塞大鼠学习记忆功能和前额叶皮层GABAA受体及PSD-95表达的影响

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中国康复医学杂志 2023年第6期38卷 730-736页

作者：夏金言李钻芳杨嘉誉林如辉福建中医药大学中西医结合研究院福建省福州市350122 福建中医药大学科技创新与转化中心福建中医药大学康复医疗技术国家地方联合工程研究中心

目的:观察电针百会、神庭对MCAO大鼠学习记忆功能及前额叶皮层γ-氨基丁酸A型(gamma-aminobutyric acid,GABAA)受体及突触后密度蛋白-95(postsynaptic density protein-95,PSD-95)表达的影响,探讨电针对MCAO大鼠学习记忆功能的影响及作... 详细信息

目的:观察电针百会、神庭对MCAO大鼠学习记忆功能及前额叶皮层γ-氨基丁酸A型(gamma-aminobutyric acid,GABAA)受体及突触后密度蛋白-95(postsynaptic density protein-95,PSD-95)表达的影响,探讨电针对MCAO大鼠学习记忆功能的影响及作用机制。方法:改良Longa线栓阻塞法制备左侧大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,将造模成功的雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成模型组、电针组(百会、神庭)和电针非穴组,同时另设假手术组,每组10只。电针组和非穴组进行连续7d电针干预,假手术组和模型组不做任何处理。采用小动物磁共振成像仪检测干预前后大鼠脑梗死体积变化;Morris水迷宫评价大鼠学习记忆功能;HE染色观察缺血侧前额叶皮层病理变化;Western Blot法检测缺血侧前额叶皮层GABAA受体及PSD-95蛋白表达水平。结果:干预前各组大鼠脑梗死体积无显著性差异(P>0.05),随着干预时间延长,与模型组和非穴组相比,电针组行为学评分明显降低(P0.05)。结论:电针百会、神庭能有效减轻脑缺血后神经损伤,改善学习记忆功能,可能与增加其前额叶皮层神经元数量,促进GABAA受体及PSD-95表达有关。

关键词： γ-氨基丁酸A型受体突触后密度蛋白-95 电针脑缺血损伤学习记忆功能障碍

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甲状腺组织的双光子荧光成像

中国激光 2009年第3期36卷 765-768页

作者：李钻芳黄祖芳陈荣力超林少俊陈燕坪福建师范大学医学光电科学与技术教育部重点实验室福建福州350007 福建省肿瘤医院病理科福建福州350014

分别对离体新鲜的正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿组织以及甲状腺乳头状癌组织进行自体双光子激发荧光(TPEF)和二次谐波(SHG)成像的研究。从双光子图像可知,正常甲状腺组织中滤泡大小较均匀,形态较相似,结节性甲状腺肿滤泡大小不等,而... 详细信息

分别对离体新鲜的正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿组织以及甲状腺乳头状癌组织进行自体双光子激发荧光(TPEF)和二次谐波(SHG)成像的研究。从双光子图像可知,正常甲状腺组织中滤泡大小较均匀,形态较相似,结节性甲状腺肿滤泡大小不等,而甲状腺癌组织则为大量的实质性癌细胞团结构,结果与标准组织学苏木精-伊红(H&E)染色图相一致。此外,正常甲状腺组织和结节性甲状腺肿在胶原分布上存在一定差别。研究表明,双光子荧光成像技术可在微观结构上分辨出正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿组织以及甲状腺乳头状癌组织的形态学差异,并有望成为甲状腺微创、快速诊断的有效方法。

关键词：医用光学与生物技术双光子荧光成像甲状腺组织

DHL细胞中5-ALA代谢PpⅨ的定位分析

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光学学报 2009年第6期29卷 1605-1608页

作者：陈冠楠黄祖芳陈荣林居强杨坤涛李钻芳华中科技大学光电子科学与工程学院湖北武汉430074 福建师范大学医学光电科学与技术教育部重点实验室福建福州350007

采用共聚焦显微技术中的双光子激发荧光方法获得DHL细胞中5-氨基酮戊酸(5-ALA)代谢原卟啉Ⅸ(PpⅨ)荧光图像。结合Rhodaminel23、DioC6(3)和LysoTracker Green三种细胞器荧光探针的使用,采用双标的标记方法观察DHL细胞中5-ALA代谢PpⅨ在... 详细信息

采用共聚焦显微技术中的双光子激发荧光方法获得DHL细胞中5-氨基酮戊酸(5-ALA)代谢原卟啉Ⅸ(PpⅨ)荧光图像。结合Rhodaminel23、DioC6(3)和LysoTracker Green三种细胞器荧光探针的使用,采用双标的标记方法观察DHL细胞中5-ALA代谢PpⅨ在DHL细胞的定位分布,进而利用Matlab软件对获得的定位的融合荧光图像进行相关系数计算。通过Matlab软件编写程序对获得的定位图像进行边缘检测、提取和分割等处理,汁算获得的线粒体相关系数r=0.564;内质网相关系数r=0.465;溶酶体相关系数r=0.366;可以认为5-ALA代谢PpⅨ在线粒体、内质网、溶酶体三种细胞器区域均有分布,但PpⅨ在不同细胞器聚集程度存在比较大的差异,经过3 h的孵育代谢PpⅨ主要积聚于线粒体,而溶酶体中积聚的最少。研究表明双光子激发荧光可成为定性或定量研究DHL细胞中5-ALA代谢PpⅨ以及PpⅨ在细胞定位的重要方法。

关键词：医用光学与生物技术双光子激发荧光 5-ALA PpⅨ DHL细胞细胞定位定量分析

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离体甲状腺组织的显微拉曼光谱

中国医药指南 2011年第34期9卷 349-351页

作者：李钻芳福建中医药大学福建中西医结合研究院国家中医药三级科研实验室-中药药理(细胞结构与功能)实验室福建福州350108

拉曼光谱技术能够提供各种物质的"指纹图谱",已经成为分析各种物质结构的重要手段,在肿瘤疾病诊断方面得到广泛的应用。本文测定了离体正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿以及乳头状甲状腺癌组织的显微拉曼光谱,从光谱的角度分析比较了3种... 详细信息

拉曼光谱技术能够提供各种物质的"指纹图谱",已经成为分析各种物质结构的重要手段,在肿瘤疾病诊断方面得到广泛的应用。本文测定了离体正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿以及乳头状甲状腺癌组织的显微拉曼光谱,从光谱的角度分析比较了3种组织结构上的差异。结果表明,整体上癌组织的拉曼峰强度低于正常与结肿组织,且位于1660cm-1和1449cm-1的拉曼峰的强度比值I1660/I1449,可用以区分癌变组织和正常组织。癌组织与正常组织、结节性甲状腺肿在1084cm-1、1585cm-1、2934cm-1、2875cm-1等峰强度上存在较大差异,而正常甲状腺组织与结节性甲状腺肿组织的拉曼光谱差异并不大。

关键词：甲状腺组织显微拉曼

APP/PS1双转基因AD模型小鼠海马区磁共振波谱和超微结构分析

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中国实验动物学报 2020年第2期28卷 236-241页

作者：邢敏毛敬洁陈文列李钻芳福建中医药大学中西医结合研究院福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福州350122

目的观察APP/PS1转基因鼠海马区中代谢物的变化与超微病理改变之间的联系,使该基因鼠更好地应用于阿尔茨海默病(AD)的实验研究。方法通过新物体识别实验比较APP/PS1转基因鼠和同龄、同背景野生鼠的学习记忆能力;通过氢质子磁共振波谱(1H... 详细信息

目的观察APP/PS1转基因鼠海马区中代谢物的变化与超微病理改变之间的联系,使该基因鼠更好地应用于阿尔茨海默病(AD)的实验研究。方法通过新物体识别实验比较APP/PS1转基因鼠和同龄、同背景野生鼠的学习记忆能力;通过氢质子磁共振波谱(1HMRS)检测比较两组海马区N-乙酰天冬氨酸(NAA)、肌醇(mI)、胆碱(Cho)和谷氨酸(Glu)等代谢物的含量;通过透射电镜观察神经细胞和星形胶质细胞的超微结构。结果与野生鼠相比,转基因鼠学习记忆能力下降,两组间差异有统计学意义(P<0.05);海马区NAA与肌酸(Cr)比值明显减少(P<0.05),mI/Cr和Cho/Cr增加(P<0.05);神经细胞和星形胶质细胞线粒体变性、固缩,次级溶酶体数量增加,星形胶质细胞过度活化、吞噬营养障碍性突触。结论APP/PS1转基因小鼠海马区NAA、mI、Cho等代谢物的变化可以反映AD病变过程中β-淀粉样蛋白诱发的异常炎症反应和突触结构的破坏等病理特征,为APP/PS1基因鼠更好地应用于AD研究提供实验依据。

关键词：阿尔茨海默病 APP/PS1转基因鼠磁共振波谱透射电镜超微结构

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激光偏振性对亚心形扁藻生物效应的影响

光学学报 2009年第3期29卷 778-780页

作者：雷晋萍陈伟炜陈荣欧琳王丽姜蔡长美李钻芳福建师范大学激光与光电子技术研究所福建省光子技术重点实验室医学光电科学与技术教育部重点实验室福建福州350007

实验研究了偏振与非偏振激光对亚心形扁藻的促长作用、叶绿素含最以及色素粗提物吸收光谱等生物学效应的影响。采用488 nm,70 mW输出功率的氩激光,辐照亚心形扁藻,隔天取样进行细胞计数,培养至第6天提取叶绿素,测量叶绿素含量并扫描叶... 详细信息

实验研究了偏振与非偏振激光对亚心形扁藻的促长作用、叶绿素含最以及色素粗提物吸收光谱等生物学效应的影响。采用488 nm,70 mW输出功率的氩激光,辐照亚心形扁藻,隔天取样进行细胞计数,培养至第6天提取叶绿素,测量叶绿素含量并扫描叶绿素的吸收光谱。实验结果表明,偏振激光与非偏振激光辐照对藻细胞密度、生长速率的促长作用区别不显著;偏振性与否对叶绿素含量的累积没有明显的区别;激光偏振性对色素粗提物的吸收光谱没有影响。激光偏振性与否均可对亚心形扁藻的生物效应产生有效的作用,激光偏振性与激光生物效应关系的研究有待于进一步深入。

关键词：生物光子学激光生物效应激光偏振性亚心形扁藻