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延边黄牛体细胞克隆囊胚中总基因组RNA的提取

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湖北农业科学 2010年第2期49卷 260-262页

作者：张宇任玲玲韩岩方南洙李钟淑延边大学农学院吉林龙井133400

以延边黄牛体细胞克隆囊胚为试验材料,采用试剂盒GMS12106的使用方法提取试材的总基因组RNA,在琼脂糖凝胶电泳检测后,得到最适的囊胚数为5个。通过试验发现,生殖细胞的特殊生理结构限制了RNA提取的效果。为提取完整、纯度高的RNA,采用... 详细信息

以延边黄牛体细胞克隆囊胚为试验材料,采用试剂盒GMS12106的使用方法提取试材的总基因组RNA,在琼脂糖凝胶电泳检测后,得到最适的囊胚数为5个。通过试验发现,生殖细胞的特殊生理结构限制了RNA提取的效果。为提取完整、纯度高的RNA,采用链蛋白酶对囊胚的透明带进行了消化处理,最终得出链蛋白酶处理的最适时间为10min,提取的RNA质量好,可为后续试验奠定基础。

关键词：延边黄牛体细胞克隆囊胚 RNA提取

不同受体胞质对延边黄牛体细胞核移植效率的影响

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西南农业学报 2011年第1期24卷 286-288页

作者：朱玉霞王玉涵李钟淑方南洙延边大学农学院吉林延吉133000

为确定延边黄牛体细胞核移植过程中卵母细胞的最佳去核时期,本试验选取体外成熟22 h的中期(MⅡ期)卵母细胞与体外成熟28 h的末期(TⅡ期)卵母细胞进行化学辅助去核操作,并将去核的卵母细胞作为受体构建重构胚,后期观察发育情况。结果显... 详细信息

为确定延边黄牛体细胞核移植过程中卵母细胞的最佳去核时期,本试验选取体外成熟22 h的中期(MⅡ期)卵母细胞与体外成熟28 h的末期(TⅡ期)卵母细胞进行化学辅助去核操作,并将去核的卵母细胞作为受体构建重构胚,后期观察发育情况。结果显示,M期卵母细胞的显核率与TⅡ期卵母细胞的显核率无显著差异;但是TⅡ期卵母细胞所得重构胚的卵裂率及囊胚率均显著高于MⅡ期卵母细胞所得重构胚的卵裂率及囊胚率。综上所述,卵母细胞体外成熟28 h后的TⅡ期可作为延边黄牛核移植去核操作的理想时期,在TⅡ期卵母细胞中选择化学辅助去核法去核能够提高延边黄牛体细胞克隆的效率。

关键词：体外成熟 MⅡ期 TⅡ期化学辅助去核延边黄牛

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抗氧化剂对牛重组胚发育的影响

抗氧化剂对牛重组胚发育的影响

谷氨酰胺对延边黄牛体细胞克隆重组胚发育的影响

东北三省及内蒙古地区遗传学研究进展学术研讨会

作者：尹多林涛韩岩李钟淑方南洙延边大学农学院

氧或含氧的高反应活性分子统称为活性氧(ROS)。虽然氧对一切需氧生物是不可或缺的,但是高浓度氧会引起氧中毒。氧中毒是由于氧在机体内大量地被转变为活性氧自由基,后者可以进攻和损坏细胞膜、蛋白质、酶和DNA等,最终导致细胞损伤或死亡... 详细信息

氧或含氧的高反应活性分子统称为活性氧(ROS)。虽然氧对一切需氧生物是不可或缺的,但是高浓度氧会引起氧中毒。氧中毒是由于氧在机体内大量地被转变为活性氧自由基,后者可以进攻和损坏细胞膜、蛋白质、酶和DNA等,最终导致细胞损伤或死亡,这种伤害是导致体细胞核移植早期胚胎发育受阻的重要原因之一。

关键词：小分子硫醇抗氧化剂延边黄牛重组胚体细胞核移植

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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江苏农业科学 2011年第5期39卷 266-268页

作者：柳海星尹多庄利利李钟淑姜成国臧科研金世元方南洙延边大学农学院动物科学系吉林省延边州畜牧总站吉林省龙井市牧业管理局吉林省敦化市畜牧站

为了提高延边黄牛体细胞克隆重组胚发育率,研究了在体外培养液中添加不同浓度的谷氨酰胺对克隆重组胚发育率的影响。试验中选择成熟培养2022 h的卵母细胞,脱颗粒细胞后选择排出第一极体的卵母细胞进行去核与注核操作,然后将融合、激活... 详细信息

为了提高延边黄牛体细胞克隆重组胚发育率,研究了在体外培养液中添加不同浓度的谷氨酰胺对克隆重组胚发育率的影响。试验中选择成熟培养2022 h的卵母细胞,脱颗粒细胞后选择排出第一极体的卵母细胞进行去核与注核操作,然后将融合、激活后的卵母细胞在添加不同浓度谷氨酰胺的体外培养液中进行培养。结果显示,体外培养液中添加浓度为1.0 mmol/L的谷氨酰胺能够显著提高延边黄体细胞克隆牛重组胚的发育率,表明在体外培养中添加谷氨酰胺能提高延边黄牛体细胞克隆效率。

关键词：延边黄牛体细胞克隆谷氨酰胺重组胚发育

不同来源的牛皮肤成纤维细胞原代培养效果对核移殖胚发育的影响

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中国畜牧杂志 2009年第19期45卷 21-24页

作者：孙焕林方南洙胡艳明林涛刘佳丽孔金超李钟淑延边大学农学院动物遗传育种与繁殖实验室吉林龙井133400

培养延边黄牛不同部位(耳部和腹部)和不同品种(黑白花、利木赞、延边黄牛)耳部的皮肤成纤维细胞,观察原代培养效果并用其核移植,探讨原代培养效果与囊胚发育率的关系。以组织块贴壁率、组织块发育率、组织块的细胞贴壁率作为原代培养效... 详细信息

培养延边黄牛不同部位(耳部和腹部)和不同品种(黑白花、利木赞、延边黄牛)耳部的皮肤成纤维细胞,观察原代培养效果并用其核移植,探讨原代培养效果与囊胚发育率的关系。以组织块贴壁率、组织块发育率、组织块的细胞贴壁率作为原代培养效果的衡量标准;传3～5代后进行核移植,分别统计囊胚发育率。结果表明:延边黄牛腹部皮肤的生长效果明显好于耳部皮肤,并且囊胚发育率高于耳部皮肤。利木赞牛皮肤生长效果明显好于延边黄牛和黑白花,延边黄牛与黑白花差异不显著。与之对应,利木赞囊胚发育率显著高于延边黄牛与黑白花,延边黄牛与黑白花差异不显著。

关键词：原代培养成纤维细胞核移植牛

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牛精子头部显微注射受精试验

国外畜牧科技 1993年第1期20卷 5-6页

作者：后藤和文方南洙李钟淑

牛体外受精研究发展迅速。利用体外受精技术,可使体外培养成熟的牛卵泡卵子受精,并培养发育成囊胚,将新鲜的或经过冷冻、解冻后移植给受体牛,最终获得犊牛。利用附睾尾部精子进行体外受精时,受精率在种公牛之间没有差异,而利用射出精子... 详细信息

牛体外受精研究发展迅速。利用体外受精技术,可使体外培养成熟的牛卵泡卵子受精,并培养发育成囊胚,将新鲜的或经过冷冻、解冻后移植给受体牛,最终获得犊牛。利用附睾尾部精子进行体外受精时,受精率在种公牛之间没有差异,而利用射出精子时个体间则差异很大。显微受精可以得到稳定而高的受精率,并缩小精子方面所引起的受精率差异。目前,显微受精有以下三种方法:透明带开孔法、卵黄周隙精子注入法、卵细胞质精子注入法。本文所报道的显微受精试验是用卵细胞质精子注入法。

关键词：牛人工授精精子授精

猪黄体不同发育时期活性氧水平及多种抗氧化酶mRNA表达量变化规律的研究

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中国畜牧兽医 2019年第3期46卷 818-823页

作者：高见红李闯乔佳琦方南洙李钟淑柳海星延边大学农学院延吉133000 延边州畜牧总站延吉133002

试验旨在研究活性氧(ROS)及抗氧化酶基因表达在猪黄体组织发育及退化过程中的变化规律,为诠释猪黄体抗氧化机制补充理论基础并提供新的思路。试验所用卵巢采自延吉屠宰场,将黄体从卵巢剥离后,通过其形态大小将黄体初步分为初期、中期、... 详细信息

试验旨在研究活性氧(ROS)及抗氧化酶基因表达在猪黄体组织发育及退化过程中的变化规律,为诠释猪黄体抗氧化机制补充理论基础并提供新的思路。试验所用卵巢采自延吉屠宰场,将黄体从卵巢剥离后,通过其形态大小将黄体初步分为初期、中期、后期以及白体,然后通过检测孕酮水平准确区分中期及后期黄体;通过冰冻切片及DHE荧光染色技术检测各时期黄体ROS水平,通过实时荧光定量PCR对各时期黄体内锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、过氧化氢酶(CAT)以及谷胱甘肽过氧化氢酶(GPx)的mRNA表达量进行检测。结果表明:猪黄体内ROS水平随猪黄体周期性发育进程出现规律性升高,即后期ROS水平显著高于其他时期(P0.05)。Mn-SOD、GPx1及GPx4基因的表达水平随黄体的发育进程则出现规律性的下降:初期及白体中这几个基因的表达水平显著高于中期与后期(P0.05)。综合上述试验结果,ROS、Mn-SOD及GPx与猪黄体发育及退化有关;而ROS水平与Mn-SOD及GPx的表达水平呈现出相反的规律。

关键词：猪黄体活性氧锰超氧化物歧化酶谷胱甘肽过氧化物酶

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奶牛繁殖性状的育种值估计

中国奶牛 2007年第9期 19-23页

作者：李钟淑杨薇吴昊方南洙张沅延边大学农学院中国农业大学

利用北京市8个荷斯坦奶牛群的头胎繁殖性状资料,用BLUP法估计了公牛繁殖力的育种值。利用20头公牛的2299头与配母牛头胎繁殖性状资料,估计了公牛雄性繁殖力的育种值。利用19头公牛的2001头女儿的头胎繁殖性状资料,估计了公牛雌性繁殖力... 详细信息

利用北京市8个荷斯坦奶牛群的头胎繁殖性状资料,用BLUP法估计了公牛繁殖力的育种值。利用20头公牛的2299头与配母牛头胎繁殖性状资料,估计了公牛雄性繁殖力的育种值。利用19头公牛的2001头女儿的头胎繁殖性状资料,估计了公牛雌性繁殖力的育种值。分别比较了考虑场、年、季之间互作效应的和未考虑场、年、季之间互作效应的育种值估计准确性,分析了不同场、不同输精年份、不同输精月份对公牛繁殖力的影响。结果表明,考虑场、年、季之间互作效应时的准确性最高,未考虑时的准确性最低;本文中不同场、年、季水平对公牛繁殖力的影响是显著的。结论:估计公牛繁殖性能的育种值时,应事先或模型中加以剔除这些固定效应。

关键词：奶牛繁殖性状育种值 BLUP法

细胞松弛素B对延边黄牛体细胞核移植效率的影响

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河南农业科学 2009年第4期38卷 123-126页

作者：宋君博林涛胡艳明李钟淑方南洙延边大学农学院吉林龙井133400

探讨融合液、激活液中添加细胞松弛素B(CCB)对延边黄牛体细胞核移植效率的影响,以摸索适合延边黄牛体细胞核移植的电融合、激活条件。结果表明,融合液中添加7.5μg/mL CCB组的桑葚胚及囊胚发育率显著高于其他3组;激活液中添加5.0μg/mL... 详细信息

探讨融合液、激活液中添加细胞松弛素B(CCB)对延边黄牛体细胞核移植效率的影响,以摸索适合延边黄牛体细胞核移植的电融合、激活条件。结果表明,融合液中添加7.5μg/mL CCB组的桑葚胚及囊胚发育率显著高于其他3组;激活液中添加5.0μg/mL的CCB组的卵裂率、桑葚胚及囊胚发育率显著高于其他3组;融合液、激活液中同时添加CCB的囊胚发育率高于单独添加组,但是差异不显著。

关键词：细胞松弛素B 体细胞核移植融合液激活液延边黄牛