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马尾松针叶聚戊烯醇体外和体内抗氧化活性研究(英文)

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林产化学与工业 2013年第4期33卷 15-21页

作者：郑光耀何玲高丽萍连燕霞谢衡薄采颖李若达中国林业科学研究院林产化学工业研究所生物质化学利用国家工程实验室国家林业局林产化学工程重点开放性实验室江苏省生物质能源与材料重点实验室江苏南京210042 中国药科大学药理学教研室江苏南京210009 中健行集团有限公司广东乐昌512229

研究马尾松针叶聚戊烯醇体外和体内的抗氧化活性,体外测定其对羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)和二苯基苦基苯肼自由基(DPPH·)的清除能力,以及对肝匀浆和肝线粒体自发性及Fe2+诱导性脂质过氧化的抑制作用,体内测定大鼠血清、... 详细信息

研究马尾松针叶聚戊烯醇体外和体内的抗氧化活性,体外测定其对羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)和二苯基苦基苯肼自由基(DPPH·)的清除能力,以及对肝匀浆和肝线粒体自发性及Fe2+诱导性脂质过氧化的抑制作用,体内测定大鼠血清、肝匀浆和心匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量变化。结果表明:马尾松针叶聚戊烯醇能够有效抑制大鼠肝匀浆和肝线粒体脂质过氧化及肝线粒体肿胀程度,清除·OH、O-2.和DPPH·半数抑制浓度(IC50)分别为34.87、27.13、58.23 mg/L,增强大鼠血清、肝脏和心脏中SOD、GSH-Px活性和降低MDA含量(p<0.05)。马尾松针叶聚戊烯醇在体外和体内具有明显的抗氧化活性,为马尾松针叶聚戊烯醇在药物中的应用提供依据。

关键词：松针聚戊烯醇抗氧化脂质过氧化清除自由基

马尾松树皮提取物对顺铂所致体外人胚肾细胞毒性的保护作用

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中国中药杂志 2013年第17期38卷 2868-2873页

作者：冯冬茹戴青辰谢衡李若达郑光耀王金发王宏斌中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室广东广州510275 广东嵩珍营养源研究所广东广州510645

目的:体外探讨马尾松树皮提取物(PMBE)对顺铂所致肾毒性的保护作用,并初步探究其作用机制。方法:体外培养人胚肾细胞HEK293,用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)方法分别检测PMBE、顺铂对HEK293细胞生长的影响,以及PMBE对顺铂所致HEK293细胞毒性的... 详细信息

目的:体外探讨马尾松树皮提取物(PMBE)对顺铂所致肾毒性的保护作用,并初步探究其作用机制。方法:体外培养人胚肾细胞HEK293,用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)方法分别检测PMBE、顺铂对HEK293细胞生长的影响,以及PMBE对顺铂所致HEK293细胞毒性的保护作用;并检测各组细胞内的活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,以及过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和硫氧还蛋白酶(TrxR)的活性。结果:PMBE低浓度下促进HEK293细胞生长,较高浓度下对细胞产生轻微毒性;顺铂抑制HEK293细胞生长,使细胞内ROS,MDA含量升高,GSH含量降低,同时降低SOD,CAT和TrxR酶活性;加入PMBE预保护后,在一定范围内降低顺铂对HEK293细胞的损伤,降低ROS,MDA含量,升高GSH含量,以及提高SOD,CAT和TrxR酶活性。结论:一定浓度的PMBE对顺铂所致人胚肾细胞的毒性有保护作用,其机制可能与PMBE的抗氧化性密切相关。

关键词：马尾松树皮提取物顺铂人胚肾细胞肾毒性抗氧化性

松针叶绿素-胡萝卜素软膏对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及其对免疫功能的影响

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肿瘤防治研究 2012年第11期39卷 1324-1327页

作者：郑光耀何玲周涛涛李若达薄采颖谢学容中国林业科学研究院林产化学工业研究所生物质化学利用国家工程实验室国家林业局林产化学工程重点开放性实验室南京210042 中国药科大学药理学教研室中健行集团有限公司

目的探讨松针叶绿素-胡萝卜素软膏对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及其对免疫功能的影响,为其进一步研发提供实验依据。方法采用小鼠移植性S180肉瘤模型,观察和测定松针叶绿素-胡萝卜素软膏(400、600、800 mg/kg)单独给药和联合环磷酰胺给... 详细信息

目的探讨松针叶绿素-胡萝卜素软膏对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及其对免疫功能的影响,为其进一步研发提供实验依据。方法采用小鼠移植性S180肉瘤模型,观察和测定松针叶绿素-胡萝卜素软膏(400、600、800 mg/kg)单独给药和联合环磷酰胺给药时的抑瘤率和免疫器官指数,并通过测定荷瘤小鼠血清半数溶血值、廓清指数以及吞噬系数来评价其对免疫功能的影响。结果松针叶绿素-胡萝卜素软膏中、高剂量组有显著抑瘤效果(P<0.05,P<0.01),低、中剂量组对环磷酰胺有显著的协同增效作用(P<0.05,P<0.01)。松针叶绿素-胡萝卜素软膏可显著提高荷瘤小鼠以及环磷酰胺化疗导致的血清半数溶血值(P<0.01)、廓清指数K和吞噬系数α值下降(P<0.05)。结论松针叶绿素-胡萝卜素软膏能抑制小鼠移植性S180肉瘤生长,提高环磷酰胺化疗效果,其机制可能与增强机体免疫功能有关。

关键词：松针提取物抑瘤率协同增效免疫功能

马尾松树皮提取物对四氯化碳损伤肝细胞的保护作用

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时珍国医国药 2015年第2期26卷 322-327页

作者：冯冬茹蒋婷蔡懿谢衡李若达郑光耀王金发王宏斌中山大学生命科学学院教育部基因工程重点实验室广东广州510275 广东嵩珍营养源研究所广东广州510645

目的体外探讨马尾松树皮提取物(Pinus massoniana bark extract,PMBE)对四氯化碳(CCl4)损伤人正常肝细胞(L-02)的保护作用及其对血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达的影响。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,细胞形态观... 详细信息

目的体外探讨马尾松树皮提取物(Pinus massoniana bark extract,PMBE)对四氯化碳(CCl4)损伤人正常肝细胞(L-02)的保护作用及其对血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达的影响。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,细胞形态观察、荧光染色、Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,对细胞内丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性、培养上清液中谷草转氨酶(AST)和丙谷转氨酶(ALT)水平分别进行检测,酶联免疫吸附法(ELISA)、逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)及Western免疫印迹法检测细胞内HO-1活性、HO-1 m RNA及蛋白表达情况。结果与CCl4损伤组比较,PMBE预处理组细胞存活率、GSH含量和相关抗氧化酶类水平升高,细胞凋亡和坏死比率、MDA含量及上清液中AST和ALT活性降低,HO-1活性、HO-1 m RNA和蛋白表达水平均上调,但与CCl4损伤组无明显差异。结论 PMBE对CCl4损伤L-02细胞有保护作用,其机制可能与HO-1的表达密切相关。

关键词：马尾松树皮提取物人正常肝细胞L-02 四氯化碳血红素加氧酶-1 肝损伤

马尾松树皮提取物对乙醇诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用

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时珍国医国药 2015年第9期26卷 2110-2112页

作者：冯冬茹蔡懿谢衡李若达郑光耀王金发王宏斌中山大学生命科学大学院生物防治国家重点实验室广东植物资源重点实验室广东广州510275 广东嵩珍营养源研究所广东广州510645

目的体外探讨马尾松树皮提取物(Pinus massoniana Bark Extracts,PMBE)对乙醇损伤人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)的保护作用及PMBE是否通过调控生长分化因子15(Growth Differentiation Factors 15,GDF-15)的表达从而发挥其作用。方法 60μg/ml的PMBE与HUVEC共培养12 h后加入4%(V/V)浓度的乙醇作用12 h进行各项研究:MTT法检测细胞存活率;观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;分别检测细胞内ROS水平、超氧化物含量及SOD活性,细胞培养液上清中的NO含量;RT-PCR检测细胞内GDF-15的mRNA表达及Western Blot检测细胞内GDF-15的蛋白表达情况。结果与4%乙醇组相比,PMBE能明显提高细胞存活率,降低细胞早期凋亡和坏死比例,ROS水平及超氧化物含量降低,SOD活性及培养液上清中NO含量升高,GDF-15的mRNA表达水平降低,GDF-15的蛋白表达水平降低。结论 PMBE对乙醇损伤HUVEC具有保护作用,其机制可能与影响GDF-15的表达水平相关。

关键词：马尾松树皮提取物人脐静脉内皮细胞乙醇保护作用生长分化因子15

马尾松树皮提取物对癌细胞内硫氧还蛋白还原酶的影响

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时珍国医国药 2012年第10期23卷 2480-2482页

作者：冯冬茹李琳谢衡李若达郑光耀王金发王宏斌中山大学生命科学学院教育部基因工程重点实验室广东广州510275 广东嵩珍营养源研究所广东广州510645

目的探索马尾松树皮提取物(PMBE)对体外培养的人肺腺癌细胞Glc-82、肝癌细胞Bel-7402和宫颈癌细胞Hela内的硫氧还蛋白还原酶(TrxR)的抑制作用。方法运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、酶联免疫吸附法(ELISA)、NADPH还原反应和DCF荧光法检... 详细信息

目的探索马尾松树皮提取物(PMBE)对体外培养的人肺腺癌细胞Glc-82、肝癌细胞Bel-7402和宫颈癌细胞Hela内的硫氧还蛋白还原酶(TrxR)的抑制作用。方法运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、酶联免疫吸附法(ELISA)、NADPH还原反应和DCF荧光法检测细胞存活率及癌细胞内的TrxR浓度、TrxR活性和活性氧(ROS)水平。结果 MTT和ELISA检测未见PMBE所引起的三种癌细胞内TrxR蛋白含量的明显升高;在生理条件及氧胁迫下,PMBE均可显著抑制三种癌细胞内的TrxR活性;ROS测定说明氧胁迫下PMBE不能有效降低三种癌细胞内的ROS水平。结论 PMBE能够有效抑制人体呼吸、消化和生殖系统的三种癌细胞内的TrxR活性,并降低了其对氧胁迫的耐受性。

关键词：马尾松树皮提取物癌细胞硫氧还蛋白还原酶氧胁迫

马尾松树皮提取物对小鼠B16黑色素瘤细胞中黑色素生成抑制效果及其机制的初步研究

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时珍国医国药 2012年第1期23卷 148-151页

作者：冯冬茹杨水军谢衡李若达郑光耀王金发王宏斌中山大学生命科学学院教育部基因工程重点实验室广东广州510275 广东嵩珍营养源研究所广东广州510645

目的探讨马尾松树皮提取物(Pinus massoniana bark extract,PMBE)抑制小鼠B16黑色素瘤细胞中黑色素的生成效果及其分子机制。方法 10～50μg/ml的PMBE与小鼠B16黑色素瘤细胞共培养后进行各项细胞学研究:MTT法检测PMBE对细胞的毒性;以左... 详细信息

目的探讨马尾松树皮提取物(Pinus massoniana bark extract,PMBE)抑制小鼠B16黑色素瘤细胞中黑色素的生成效果及其分子机制。方法 10～50μg/ml的PMBE与小鼠B16黑色素瘤细胞共培养后进行各项细胞学研究:MTT法检测PMBE对细胞的毒性;以左旋多巴为底物测定PMBE对酪氨酸酶(TYR)活性的抑制作用;DCM法检测PMBE对细胞ROS的清除能力;比色法测定PMBE对细胞内黑色素生成的抑制效果以及对细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、GSH/GSSG的影响;RT-PCR检测酪氨酸酶及其相关蛋白1(TRP-1)和2(TRP-2)在mRNA水平表达量的影响。结果 PMBE对小鼠B16黑色素瘤细胞的增殖无明显影响,并可显著减少细胞内的黑色素含量。另外,PMBE对活性氧具有很强的清除能力,同时可上调细胞内GSH/GSSG比率,从而增强细胞的还原力。PMBE还对酪氨酸酶活性表现出了一定的抑制效果,但这种抑制却并不发生在mRNA水平。结论 PMBE对小鼠B16黑色素瘤细胞内黑色素生成具有显著抑制效果并主要通过降低酪氨酸酶活性和清除活性氧来实现。

关键词：马尾松树皮提取物黑色素小鼠B16黑色素瘤细胞酪氨酸酶

马尾松树皮提取物体外诱导肺腺癌GLC-82细胞凋亡的机制（英文）

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中华中医药杂志 2015年第11期30卷 4134-4140页

作者：张锦宏冯冬茹谢衡李若达王金发刘兵中山大学生科院生物防治和基因工程教育部重点实验室广州510275 广州医科大学医学遗传与细胞生物学教研室广州511436 广州嵩珍营养源研究所广州510645

目的:探讨马尾松树皮提取物(Pinus massoniara bark extract,PMBE)在体外抑制肺腺癌GLC-82细胞生长的机制。方法:通过CCK-8法分析了PMBE对GLC-82细胞的生长活力影响;AO/EB染色、透射电镜和流式细胞术检测了PMBE诱导的肺腺癌细胞GLC-82... 详细信息

目的:探讨马尾松树皮提取物(Pinus massoniara bark extract,PMBE)在体外抑制肺腺癌GLC-82细胞生长的机制。方法:通过CCK-8法分析了PMBE对GLC-82细胞的生长活力影响;AO/EB染色、透射电镜和流式细胞术检测了PMBE诱导的肺腺癌细胞GLC-82的凋亡;Western blot检测PMBE处理GLC-82细胞后caspase-8、caspase-9、caspase-3、Bcl-2和Bid蛋白表达水平的变化。结果:PMBE在体外抑制肺腺癌GLC-82细胞的生长具有时间和剂量依赖性;通过荧光显微镜、透射电镜和流式细胞术证实PMBE诱导了GLC-82细胞的凋亡;细胞周期分析结果说明PMBE可以显著减少S期的GLC-82细胞;免疫杂交发现PMBE可以诱导caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白的激活,并下调Bcl-2和Bid蛋白的表达。结论:PMBE可能通过激活caspase-8从而激活Bid蛋白,进一步激活caspase-9来诱导肺腺癌GLC-82细胞的凋亡。

关键词：马尾松树皮提取物 GLC-82 凋亡 Caspase Bid Bcl-2

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松树皮多酚的亚临界水提取及抗氧化活性初探

林产化学与工业 2011年第6期31卷 73-77页

作者：薄采颖郑光耀陈琰周维纯李若达谢学容中国林业科学研究院林产化学工业研究所生物质化学利用国家工程实验室国家林业局林产化学工程重点开放性实验室江苏南京210042 中国药科大学药理学教研室江苏南京210009 中健行集团有限公司广东乐昌512229

采用亚临界水从松树皮中提取多酚,考察了反应条件对多酚得率的影响,并与超声波辅助提取法和热回流提取法进行了比较,同时测定了亚临界水提取所得松树皮提取物的DPPH自由基清除能力。结果表明:亚临界水提取松树皮多酚的最佳工艺条件为:... 详细信息

采用亚临界水从松树皮中提取多酚,考察了反应条件对多酚得率的影响,并与超声波辅助提取法和热回流提取法进行了比较,同时测定了亚临界水提取所得松树皮提取物的DPPH自由基清除能力。结果表明:亚临界水提取松树皮多酚的最佳工艺条件为:提取温度150℃、提取时间5 min、液料比20∶1(mL∶g)、提取压力4 MPa,多酚的提取得率为4.86%,1次提取且相同液料比条件下,比超声波辅助提取法和热回流提取法分别提高了33.52%和37.68%。亚临界水提取所得松树皮提取物对DPPH自由基具有良好的清除效果,其半数抑制质量浓度(IC50)为7.10 mg/L,抗氧化性高于常用抗氧化剂BHA(7.82 mg/L)。

关键词：松树皮亚临界水多酚 DPPH