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铜绿假单胞菌DN1参与石油烃降解基因功能及趋化性研究

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铜绿假单胞菌DN1参与石油烃降解基因功能及趋化性研究

作者：李艳鹏西北大学

学位级别：硕士

石油烃化合物的污染治理是亟待解决的问题,微生物修复是一种理想的方法,而目前烃类污染物的成分复杂及疏水特性限制了降解菌对其摄取和降解。本研究以铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)DN1作为出发菌株,对其参与石油烃化合物降解及... 详细信息

石油烃化合物的污染治理是亟待解决的问题,微生物修复是一种理想的方法,而目前烃类污染物的成分复杂及疏水特性限制了降解菌对其摄取和降解。本研究以铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)DN1作为出发菌株,对其参与石油烃化合物降解及趋化性过程中的关键基因展开功能探索,以期揭示微生物如何摄取利用烃类污染物的分子转运机制,进而实现烃类污染物修复。前期的研究表明,铜绿假单胞菌DN1具有降解原油、烷烃和芳烃的能力。为进一步了解其降解机制,首先利用比较基因组学手段预测分析了6株石油烃降解菌株中烷烃羟化酶、环羟基化双加氧酶及趋化系统,比对结果显示:石油烃降解菌的降解酶系统呈现多样性,但这些基因的同源性及分布之间存在一定差异,在一定程度上影响并决定了菌株底物降解谱的多样性。其次,我们通过气相色谱技术检测了菌株DN1对原油和不同正构烷烃的降解情况,同时利用RT-qPCR技术监测了烷烃羟化酶基因的实时表达,并通过同源重组技术构建基因缺失突变株进一步研究其基因功能。实验结果表明:DN1能够利用原油和链长为8-40个碳原子的多种正构烷烃作为唯一碳源,降解率高达85%。RT-qPCR分析显示,五种烷烃羟化酶基因可以被C至C的正构烷烃诱导,且不同正构烷烃条件下基因表达量不同。而在所有的正构烷烃中,alkB基因表达基本上调,尤其是长链烷烃如C和C存在的条件下。同时,长链烷烃(C-C)诱导下cyp153表达水平显著提高,而两个almA基因仅在链长为C以上的烷烃存在时表达量上调。此外,基因敲除实验表明,alkB在广谱的烷烃生物降解中可能起关键作用,其它的羟化酶系统确保了链长为C-C的正构烷烃能被利用。将多株具有降解能力的铜绿假单胞菌的AlkB氨基酸序列进行比对分析发现其同源性约99.65%。甲基受体趋化蛋白(methyl-accepting chemotaxis proteins,MCPs)在细菌接收和感应外界化学信号刺激中发挥了重要作用。前期菌株DN1在荧蒽诱导下转录组学分析表明,部分mcp基因表达量上调,其中包括mcp04325,mcp10445,mcp28325,mcp29160等。在此基础上,我们研究了菌株DN1中部分mcp突变株对不同芳烃、烷烃及中间代谢产物的趋化特性,通过其趋化特性的改变,进一步利用蛋白外源表达及等温滴定热量技术(ITC)验证其结合能力。实验结果表明:菌株DN1对检测的不同中间产物、芳烃及烷烃基本上都具有趋化特性,推测趋化性可能与烃类化合物降解密切相关,其有助于烃类化合物的降解。同时部分mcp突变株趋化性表型显示mcp00975、mcp04325、mcp10445基因缺失导致菌株对原儿茶酸及部分长链烷烃的趋化性明显减弱;mcp04325基因缺失使菌株对荧蒽和芘的趋化性略微减弱,mcp00975和mcp04325的缺失使菌株对萘和菲的趋化性减弱。进一步通过构建双/三突变株,检测趋化表型,发现三突变株对原儿茶酸的趋化性影响最大,趋化性减弱率最高。比较而言,在这三个基因中mcp04325基因缺失对原儿茶酸趋化性影响最大,但对Mcp04325蛋白进行外源表达纯化,通过ITC未能检测到Mcp04325蛋白与原儿茶酸之间有明显的结合能力,推测mcp04325基因可以介导趋化性,但是不具有与原儿茶酸分子结合能力,其确切机制还有待于进一步研究。

关键词：铜绿假单胞菌株DN1 烃类污染物烷烃羟化酶趋化性甲基受体趋化蛋白

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国内搏击赛事发展现状及市场化策略研究

国内搏击赛事发展现状及市场化策略研究

作者：李艳鹏武汉体育学院

学位级别：硕士

自1979年国家体委开展“武术对抗项目”试点以来,武术搏击相对应的赛事开始萌芽,经过近30年探索发展,武术搏击赛事开启了商业化、市场化运作之路。《中国武术发展五年规划（2016-2020年）》明确指出:以散打项目为突破口,开发武术项目商... 详细信息

自1979年国家体委开展“武术对抗项目”试点以来,武术搏击相对应的赛事开始萌芽,经过近30年探索发展,武术搏击赛事开启了商业化、市场化运作之路。《中国武术发展五年规划（2016-2020年）》明确指出:以散打项目为突破口,开发武术项目商业化赛事,激发市场活力,打造散打、终极格斗、自由搏击、泰拳等商业性赛事活动,培育有竞争力和国际影响力的知名品牌商业赛事。这不仅为国内搏击赛事发展提供了广阔天地和有力的政策支持,而且对搏击赛事的职业化、市场化明确了方向。本文通过文献资料法、专家访谈法、录像观察法、问卷调查法以及数理分析法等研究方法对我国搏击赛事的现状、特征、运营等几个方面进行分析研究,旨在为国内搏击赛事的良性发展提供理论依据和可行性对策。研究认为:1、与国外品牌赛事相比,国内赛事缺乏缺少专业的运营团队和规模化发展的营销理念。2、国内非商业赛事的举办,主要是武术运动管理中心主办,各地方承办的非盈利赛事,参与人群有限,观众参与度低;剩余主要为C类赛事,赛事规模有限,辐射范围小,周期短。3、国内搏击赛事主要集中在武术传统地区和东部沿海地区,当地政府放宽或者取消审批政策,加快了这些搏击赛事市场化的进程,打造了很多诸如《FF信赢天下》、《昆仑决》、《武林风》和《勇士的荣耀》大型品牌赛事。4、搏击赛事市场化的发展,核心是能让大众所认同,刺激其消费需求。借鉴国外搏击类赛事的运营策略,实行职业化,市场化。引进成熟赛事规则的包装策略,以市场营销的角度展现竞技对抗项目的暴力美学、彰显中国武术克柔技法的特点,推动国内搏击赛事市场化发展,并逐步与国际搏击赛事接轨。5、搏击赛事市场化不能仅仅定位于商业性,也要关注其文化性,才能打造出有血有肉的赛事品牌。

关键词：搏击赛事发展现状市场化策略

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外墙保温装饰一体板的性能研究及施工工艺

外墙保温装饰一体板的性能研究及施工工艺

作者：李艳鹏南京理工大学

学位级别：硕士

建筑节能、环境保护要求的日渐提高,世界各国越发重视建筑节能技术。建筑围护结构的保温也成为了建筑节能重要的一个方面,并且地位也日渐得到提升。本文主要是解决新型保温装饰一体板作为建筑围护结构的新形式,其保温节能标准是否符合... 详细信息

建筑节能、环境保护要求的日渐提高,世界各国越发重视建筑节能技术。建筑围护结构的保温也成为了建筑节能重要的一个方面,并且地位也日渐得到提升。本文主要是解决新型保温装饰一体板作为建筑围护结构的新形式,其保温节能标准是否符合国家相关节能标准要求,其材料选择、制备、施工、应用等方面与传统的保温系统比较功能性优势如何体现,在市场推广、施工应用方面有什么问题和困难。本文结合工程实际应用采用了试验性能分析、抽样调查、文献研究等方法研究分析了新型保温装饰一体板制备、性能、施工工艺、工程应用情况,研究了其与传统的保温和装饰工程对比所体现的新工艺、新方法、综合性功能优势,如何更加节约能源、促进环境保护,更加能适应现代建筑行业外墙保温装饰技术发展的新要求。本课题主要研究新型保温装饰一体板,属于新型材料技术施工应用领域。研究发现本材料避免了各种防水保温材料的缺点,即防水、防火又保温还更具装饰性。作为新型高性能的防水保温复合材料,其制备技术、施工工艺独特创新。有效克服了目前我国外墙保温常规做法存在诸多问题,更适用于现代建筑防水、保温、装饰等综合性工程。

关键词：外墙保温一体板建筑节能施工工艺

大型汽轮发电机转子轴的修复再制造及疲劳寿命预测

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大型汽轮发电机转子轴的修复再制造及疲劳寿命预测

作者：李艳鹏中北大学

学位级别：硕士

本文以大型汽轮发电机转子轴为研究对象,针对其在发电厂运行过程中已经存在的转子轴轴承轴颈的过度磨损问题,采用激光熔覆的再制造修复方案进行加工再制造,并且对再制造后转子轴进行疲劳寿命预测分析。具体工作内容如下:本文先采用响应... 详细信息

本文以大型汽轮发电机转子轴为研究对象,针对其在发电厂运行过程中已经存在的转子轴轴承轴颈的过度磨损问题,采用激光熔覆的再制造修复方案进行加工再制造,并且对再制造后转子轴进行疲劳寿命预测分析。具体工作内容如下:本文先采用响应曲面分析法设计并开展一系列的激光熔覆参数试验,从而确定在转子轴基材上熔覆预制镍基合金粉末的最佳生产工艺参数。利用Desigh-Expert软件中Response Surface模块对最终数据进行方差定量分析,得出结论是在维持送粉量不变的时候,熔覆层高度对激光功率与扫描速度的响应都比较明显;用金相显微镜对多道搭接熔覆试样的表面形态和横截面质量进行了检测和定性分析,从而确定最佳的熔覆工艺参数组合:激光功率2000 W,送粉量84 g?min,扫描速度5 mm?s,在此参数下获得的熔覆试样具有高质量的熔覆层,无气孔和裂纹,且表面光滑。其次针对实现激光熔覆过程的自动化,对其中的激光扫描路径进行了研究。根据转子轴熔覆区域的特点提出基于等弧长插补法的扫描路径与基于等距离的“弓”字形扫描路径,研究对比表明前者更符合实际工程生产需求。最后分别建立受损转子轴、再制造转子轴的三维模型进行有限元静力学分析,得出激光熔覆的修复处理方式显著提升了转子轴的物理性能,并结合应力疲劳寿命理论利用Ncode软件对再制造转子轴进行疲劳寿命预测分析,得出的再制造寿命稳定可靠。

关键词：激光熔覆工艺参数扫描路径规划疲劳寿命预测

考虑生鲜损耗和保鲜努力的生鲜农产品期权供应链研究

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考虑生鲜损耗和保鲜努力的生鲜农产品期权供应链研究

作者：李艳鹏华中师范大学

学位级别：硕士

随着经济的发展,国民生活水平日益提高,生鲜农产品在人们日常生活消费品中的比重逐渐增大,如何实现生鲜农产品的高效流通,已然被人们所关注。生鲜农产品作为一种易逝品,存在流通过程中易损耗、产品新鲜度容易被外界环境影响、具有一定... 详细信息

随着经济的发展,国民生活水平日益提高,生鲜农产品在人们日常生活消费品中的比重逐渐增大,如何实现生鲜农产品的高效流通,已然被人们所关注。生鲜农产品作为一种易逝品,存在流通过程中易损耗、产品新鲜度容易被外界环境影响、具有一定的生命周期等特点,所以对于生鲜农产品供应链的管理提出了很高的要求,如何减少流通过程中的生鲜损耗,降低供应链的市场风险成为人们研究的热点,学者们研究热点主要集中在如何实现供应链协调。生鲜农产品作为一种易逝品,本文在生鲜损耗的基础上开展研究。首先分析了生鲜农产品在批发价格契约条件下,生鲜农产品供应链中各成员决策问题;然后在供应链中引入期权契约,分别探讨了两种决策模式下的订货策略,分情况讨论了分散决策模式下供应商缺货的情况,确定零售商的最优订货策略以及供应商的最优生产策略,并确定了相应的契约参数,实现生鲜农产品供应链的协调;同时,考虑到保鲜努力对降低数量损耗和提高产品新鲜度的影响,文章将保鲜努力引入期权供应链,保鲜努力能够很好的将市场需求函数、数量损耗函数、新鲜度函数三者结合起来,在提高生鲜农产品新鲜度的同时,刺激消费者市场需求,最后,文章确定相关的契约参数,实现生鲜农产品供应链协调。本文在考虑生鲜损耗的基础上建立期权契约模型,将期权契约引入生鲜农产品供应链中,能够降低经营成本和市场风险。同时,在供应链中引入保鲜努力因子,将数量损耗函数、市场需求函数、新鲜度函数三者联系起来,更加贴合实际情况。本文的研究一定程度上弥补了生鲜农产品供应链研究的不足,有利于丰富该领域学术理论的内容,为生鲜农产品供应链提供新的研究视角,具有一定的理论价值及现实意义。

关键词：生鲜农产品生鲜损耗保鲜努力期权契约供应链协调

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双阀芯电液比例多路阀流场及阀口特性分析

双阀芯电液比例多路阀流场及阀口特性分析

作者：李艳鹏燕山大学

学位级别：硕士

随着工程机械和数字化技术的发展,智能型工程机械必将成为未来的发展方向。基于负载口独立控制技术的可编程式双阀芯电液比例多路阀作为智能型工程机械一种控制元件,其性能直接影响了整机的操控性、可靠性等性能。因此对双阀芯电液比例... 详细信息

随着工程机械和数字化技术的发展,智能型工程机械必将成为未来的发展方向。基于负载口独立控制技术的可编程式双阀芯电液比例多路阀作为智能型工程机械一种控制元件,其性能直接影响了整机的操控性、可靠性等性能。因此对双阀芯电液比例多路阀特性展开研究显得十分必要。本文主要从工程应用的角度出发,以某系列双阀芯电液比例多路阀为研究对象,对其内部流场分布以及阀口特性进行理论仿真及实验研究,为国产双阀芯电液比例多路阀的研制提供一定理论基础。综述双阀芯电液比例多路阀国内外研究现状,分析了目前国内对双阀芯电液比例多路阀的研究基础,指出了双阀芯电液比例多路阀流场分布以及阀口特性研究的必要性。对双阀芯电液比例多路阀主阀和先导阀流场分布进行了分析。采用CFD流场仿真技术,分析了主阀和先导阀速度、流线、压力及湍动能等分布情况,并对不同阀口开度和入口流量下主阀和先导阀流场分布以及阀口射流角等关键参数变化规律进行了分析。对主阀和先导阀压降特性、阀口流量系数和稳态液动力进行了分析。对主阀和先导阀阀口过流面积进行了数学解析,分析了不同阀口开度和入口流量下的阀口压降特性,并在此研究基础上对先导阀和主阀流量系数进行了分析。利用CFD壁面积分方法,得到了不同阀口开度和入口流量下主阀和先导阀稳态液动力变化规律。对主阀进口节流时流场分布以及阀口压降特性进行了PIV实验验证。根据相似理论,完成实验模型的设计并搭建了双阀芯电液比例多路阀主阀内部流场2D-PIV可视化实验台,针对不同阀口开度和入口流量下主阀进口节流时内部速度矢量图分布情况以及阀口压降特性进行了实验分析,实验结果与仿真结果基本一致。

关键词：电液比例多路阀 CFD流场仿真压降特性流量系数稳态液动力 PIV实验

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链路选择与负载均衡的研究设计

链路选择与负载均衡的研究设计

作者：李艳鹏北京交通大学

学位级别：硕士

信息时代网络的迅速发展,使得人们对带宽的需求日益增长。为了解决企业网与Internet接入的可靠性、稳定性问题,同时拓展带宽,越来越多的企业网通过多个出口与外部网络相连接。链路负载均衡不仅可以应对部分链路故障,选择正常链路转发流... 详细信息

信息时代网络的迅速发展,使得人们对带宽的需求日益增长。为了解决企业网与Internet接入的可靠性、稳定性问题,同时拓展带宽,越来越多的企业网通过多个出口与外部网络相连接。链路负载均衡不仅可以应对部分链路故障,选择正常链路转发流量,还可以实现多链路高效协同工作,较好地利用多条网络的带宽资源,优化全局吞吐量,改善用户体验。本文主要对有线网络链路负载均衡以及WLAN环境下无线链路选择与负载均衡进行了研究,优化了系统吞吐量,主要工作包括：(1)有线链路选择和负载均衡方面,本文基于华三通信技术公司(H3C)出方向链路负载均衡项目进行了研究与开发。基于功能需求分析,对链路负载均衡模块进行了框架设计,能够满足丰富的链路负载均衡配置需求,在该框架基础上编程实现了动态就近性报文指导转发方案。动态就近性方案(Proximity)基于链路的实时状况,综合考虑网络延迟、网络跳数、剩余带宽、费用大小等因素,结合用户为上述因素配置的不同权重,经动态就近性算法线性加权处理,获得不同链路的总代价(Totalcost),依据Totalcost大小对链路进行升序排序,优先选择总代价最小的链路进行报文转发,并生成动态就近性表项。最后搭建实验环境对多链路负载均衡的选路算法进行了测试,并对测试结果进行了分析。(2)无线链路选择与负载均衡方面分别研究了无线站点在单AP和多AP两种情形下的接入问题。首先,在单AP可供接入的情形下,克服IEEE802.11MAC层接入协议仅仅保证无线站点接入AP次数公平,而不保证接入时间公平从而导致AP吞吐量异常的不足,提出一种保证时间公平MAC层接入算法,能够有效改善AP吞吐量。然后,研究了有多个AP可供接入时无线站点如何选择AP接入的问题,提出一种基于时间公平的多AP接入方法,以最大化所有AP净吞吐量的总和为目标,由AC控制无线站点与哪个AP进行接入。ns2仿真结果表明,论文工作达到预期目标。

关键词：多链路负载均衡接入策略吞吐量优化

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德顺堂医药连锁公司战略选择与保障措施研究

德顺堂医药连锁公司战略选择与保障措施研究

作者：李艳鹏河北大学

学位级别：硕士

二十世纪九十年代中期,由于西方工业国家产业资本大量投向发展中国家,使得发展中国家经济保持了高速增长,作为发展中国家领头羊的中国,经济更是保持了百分之十左右的高速增长。在当时那种经济形势下,我国药品连锁企业应运而生,并在短短... 详细信息

二十世纪九十年代中期,由于西方工业国家产业资本大量投向发展中国家,使得发展中国家经济保持了高速增长,作为发展中国家领头羊的中国,经济更是保持了百分之十左右的高速增长。在当时那种经济形势下,我国药品连锁企业应运而生,并在短短二十余年时间内取得了长足的发展,根据国家食品药品监督管理总局(CFDA)执业药师资格认证中心发布,截至2015年年底,社会零售药店共计433873家,销售总额为3004亿元,同期连锁药店数量为3973家,排名前一百的连锁药店共有约1190亿的销售额,占到当年销售总额近百分之四十,由此我们不难看出,药店连锁经营模式正在成为药店零售领域的主流。本文通过回顾我国药品连锁经营企业的发展历程,介绍了我国连锁药店的发展现状。然后简述了唐山市德顺堂医药连锁有限公司的成立及发展历程,并对其经营现状作出分析,通过借鉴国内典型企业成功案例的经验,运用SWOT分析方法,明确公司内部的优劣势以及公司在市场中的机会与威胁,为公司在未来经营过程中给自己精准定位,选择经营策略等方面提供参考。最后,根据以上方案,制定出使德顺堂公司未来经营模式顺利实施的保障措施,为公司在未来的市场竞争中立于不败之地打下坚实基础。

关键词：连锁药店定位策略

基于粒子群和禁忌搜索算法求解作业车间调度优化问题

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基于粒子群和禁忌搜索算法求解作业车间调度优化问题

作者：李艳鹏大连交通大学

学位级别：硕士

伴随着科学技术的进步与发展,科技改变世界的观念已经深入人心。怎样让企业尽快的享受到科技带来的便利,促使企业的生产管理方式由粗放型到节约型的转变,以此增强企业间的竞争力,降低企业的生产成本,这些是各个企业所面临的严重问题。... 详细信息

伴随着科学技术的进步与发展,科技改变世界的观念已经深入人心。怎样让企业尽快的享受到科技带来的便利,促使企业的生产管理方式由粗放型到节约型的转变,以此增强企业间的竞争力,降低企业的生产成本,这些是各个企业所面临的严重问题。企业在现实的生产中,如何安排高效快捷的方案策略满足企业生产的需要,这是企业赖以生存的关键所在,这就要求企业必须改善其本身的调度方案才能够在日益激烈的竞争中独占鳌头。车间调度问题的实质就是要怎样分配现有的资源来满足企业正常的生产,也就是说怎样的处理好工件,设备加工的顺序以及时间之间的关系,使其最大化的利用设备,提高生产效率。对车间调度问题的研究具有极其重要的科研和生产价值。本文将粒子群和禁忌搜索这两种算法进行融合,设计出了一种崭新的算法—基于禁忌搜索的粒子群算法,然后利用此混合算法对实际的车间调度问题进行研究。由于禁忌搜索在起始阶段比较的依靠初始解,在算法的初期就会因为信息量的不足,使算法的收敛速度以及求解精度大大的降低,与粒子群算法相比较,粒子群算法操作简单且易于实现,全局寻优能力较强,但是到后期收敛速度慢等特点,因此将粒子群算法的全局最优解作为禁忌搜索算法的初始解,这样就减少了禁忌搜索对初始解的高度依赖性,由于禁忌搜索算法具有较强的局部搜索能力,这样就很好的解决了粒子群算法在后期很难收敛的问题,从而加快了算法的求解速度和精度,提高了算法的优化性能。本论文重点对粒子群和禁忌搜索这两种算法进行融合,最后提出并建立了一套完整的混合算法—禁忌搜索的粒子群算法。本文最后实现了一个利用禁忌搜索的粒子群算法求解作业车间调度问题的模拟系统,使用了调度问题中的经典实例进行测试分析,通过与经典算例的实际比较分析,评估了该混合算法的效率,最后把该混合型算法应用到车间调度的模拟系统中,结果显示禁忌搜索的粒子群算法有很好的收敛精度,是可行的,而且求解的效率更高,与传统的调度算法相比较,体现了明显的优越性,仿真结果证明了该算法的有效性。

关键词：粒子群算法禁忌搜索算法作业车间调度混合调度