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饥饿条件下活性氧通过PINK1/Parkin通路调控人牙周膜细胞的线粒体自噬

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华西口腔医学杂志 2022年第6期40卷 645-653页

作者：范智博金珂李胜鸿徐洁徐晓梅西南医科大学附属口腔医院正畸科泸州646099 绵阳市中心医院口腔科绵阳621099

目的探究人牙周膜细胞(hPDLC)在饥饿条件下活性氧(ROS)与PINK1/Parkin通路介导hPDLC线粒体自噬的具体机制。方法分离培养正常牙周组织的hPDLSC,利用Earle’s平衡盐溶液(EBSS)模拟饥饿环境诱导hPDLC线粒体自噬,利用N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC... 详细信息

目的探究人牙周膜细胞(hPDLC)在饥饿条件下活性氧(ROS)与PINK1/Parkin通路介导hPDLC线粒体自噬的具体机制。方法分离培养正常牙周组织的hPDLSC,利用Earle’s平衡盐溶液(EBSS)模拟饥饿环境诱导hPDLC线粒体自噬,利用N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)抑制ROS生成以探讨ROS在hPDLC线粒体自噬的作用,利用环孢素A(CsA)抑制PINK1/Parkin通路以研究ROS与PINK1/Parkin通路在饥饿条件下激活hPDLC中的作用。采用流式细胞术及JC-1线粒体膜电位检测试剂盒,检测线粒体膜电位;采用透射电镜观察线粒体自噬体的生成及线粒体形态变化;采用线粒体红色荧光探针定位线粒体,溶酶体绿色荧光探针定位溶酶体;采用DCFH-DA ROS荧光探针检测ROS生成强度;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中线粒体自噬基因(Tomm20、Timm23)及PINK1/Parkin通路的表达水平,采用蛋白质印迹(Western blot)检测细胞中线粒体自噬蛋白(Tomm20、Timm23)及PINK1/Parkin通路蛋白表达水平。结果EBSS饥饿作用30 min后,诱导激活hPDLC线粒体自噬的作用最强,ROS表达增加,且线粒体自噬相关基因(Tomm20、Timm23)下调(P<0.001),PINK1/Parkin通路表达上调(P<0.001)。NAC抑制ROS的产生后,自噬被抑制,同时Tomm20、Timm23表达上调(P<0.001,P<0.05),PINK1/Parkin通路表达下调(P<0.001,P<0.05)。而当CsA抑制PINK1/Parkin通路表达时(P<0.05,P<0.05),自噬被逆转,同时Tomm20、Timm23表达上调(P<0.001,P<0.01)。结论ROS在饥饿条件下主要通过PINK1/Parkin通路增强hPDLC线粒体自噬。

关键词： Earle’s平衡盐溶液活性氧线粒体自噬人牙周膜细胞 PINK1/Parkin通路

柚皮素通过基质细胞衍生因子1/趋化因子受体4信号轴对脂多糖作用下人牙周膜干细胞抗炎、成血管和成骨分化能力的影响

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华西口腔医学杂志 2023年第2期41卷 175-184页

作者：李胜鸿彭世元罗小玲王奕佩徐晓梅西南医科大学附属口腔医院正畸科泸州646000 口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室泸州646000 简阳市人民医院口腔科简阳641400 自贡市第一人民医院口腔科自贡643000

目的探究柚皮素(Nar)对脂多糖(LPS)刺激下的人牙周膜干细胞(hPDLSCs)抗炎、成血管和成骨能力的影响及其机制。方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕试验和Transwell实验研究hPDLSCs的增殖和迁移能力。采用碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红... 详细信息

目的探究柚皮素(Nar)对脂多糖(LPS)刺激下的人牙周膜干细胞(hPDLSCs)抗炎、成血管和成骨能力的影响及其机制。方法采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕试验和Transwell实验研究hPDLSCs的增殖和迁移能力。采用碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红染色、管腔形成实验、酶联免疫吸附实验(ELISA)、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白印迹实验(Western blot)检测hPDLSCs抗炎、成血管和成骨分化能力。结果10μmol/L Nar可减轻10μg/mL LPS刺激的hPDLSCs炎症反应,促进其增殖、迁移和成血管分化,0.1μmol/L Nar可有效恢复10μg/mL LPS刺激的hPDLSCs成骨能力。加入CXCR4抑制剂AMD3100后,Nar促进抗炎和成骨分化的作用降低,炎性hPDLSCs成血管分化升高。结论Nar促进了hPDLSCs抗炎、成血管和成骨分化,该作用与基质细胞衍生因子1/趋化因子受体4信号轴有关。

关键词：柚皮素炎性人牙周膜干细胞抗炎成骨成血管

高迁移率族蛋白B1及ERK1/2通路对张应力下人牙周膜细胞自噬的影响

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中国组织工程研究 2023年第10期27卷 1560-1566页

作者：张闵白书林李胜鸿范智博谢乙加徐晓梅西南医科大学附属口腔医院正畸科四川省泸州市646000 西南医科大学口颌面修复重建和再生实验室四川省泸州市646000 内江市第一人民医院正畸科四川省内江市641000

背景:正畸牙移动骨重塑的机械力信号转导通路及其调控机制是正畸生物力学和生物学研究的热点。目前正畸牙移动过程中张力侧牙周膜细胞对机械刺激反应的复杂分子信号网络机制尚不太明确。目的:探究正畸牙移动过程中张应力作用下高迁移率... 详细信息

背景:正畸牙移动骨重塑的机械力信号转导通路及其调控机制是正畸生物力学和生物学研究的热点。目前正畸牙移动过程中张力侧牙周膜细胞对机械刺激反应的复杂分子信号网络机制尚不太明确。目的:探究正畸牙移动过程中张应力作用下高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein 1,HMGB1)和ERK1/2通路对人牙周膜细胞自噬的影响。方法:选取第3-5代生长状态良好的人牙周膜细胞,施加周期性张应力,利用免疫荧光观察HMGB1在细胞中的分布情况,RT-qPCR及Westernblot检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1和HMGB1的表达水平,完成张应力加载后分别提取胞核蛋白和胞浆蛋白,Westernblot分别检测胞核及胞浆中HMGB1蛋白水平。为探究HMGB1通过何种机制参与调控细胞自噬,使用丙酮酸乙酯(HMGB1胞浆抑制剂)进行细胞处理,通过免疫荧光、RT-qPCR和Western blot检测细胞自噬水平。最后,选用PD98059抑制ERK1/2通路,通过RT-qPCR以及Western blot检测自噬水平变化,探讨HMGB1通过ERK1/2通路调控自噬的机制。结果与结论:(1)通过体外张应力加载,诱导了人牙周膜细胞内自噬水平升高,HMGB1的表达增加,同时HMGB1发生了由胞核到胞质的转位;(2)人牙周膜细胞通过HMGB1核质转位机制参与张应力作用下自噬的调控;(3)使用ERK1/2通路抑制剂PD98059显著抑制了张应力作用下HMGB1引起的细胞自噬;(4)结果表明,张应力作用下HMGB1从细胞核转移到细胞质,并通过ERK1/2途径调节自噬,维持人牙周膜细胞的稳态和牙周动态平衡。

关键词：张应力牙周膜细胞正畸牙移动 HMGB1 自噬 ERK1/2 稳态

一种融合知识图谱的图注意力神经网络谣言实时检测方法

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数据分析与知识发现 2024年第6期8卷 95-106页

作者：王根生朱奕李胜江西财经大学国际经贸学院南昌330013 江西财经大学人文学院南昌330013 江西财经大学财税与公共管理学院南昌330013

【目的】提高社交媒体中谣言实时检测的准确率,降低谣言传播危害。【方法】提出一种融合知识图谱的图注意力神经网络谣言实时检测方法。首先,通过知识蒸馏从外部知识图谱中获取文本内容的背景知识;其次,通过点互信息把文本和背景知识转... 详细信息

【目的】提高社交媒体中谣言实时检测的准确率,降低谣言传播危害。【方法】提出一种融合知识图谱的图注意力神经网络谣言实时检测方法。首先,通过知识蒸馏从外部知识图谱中获取文本内容的背景知识;其次,通过点互信息把文本和背景知识转化为加权图结构表示,利用一种考虑边权重的图注意力神经网络从加权图中学习文本的非连续语义特征;然后,通过预训练语言模型BERT学习文本的连续语义特征,利用嵌入方法把用户和内容统计特征转化为连续向量表示;最后,融合所有特征,输入全连接神经网络中进行谣言检测。【结果】在两个公开的社交媒体谣言数据集PHEME和WEIBO上的实验结果表明,所提方法的准确率分别达到了92.1%和84.0%,优于对比基线方法。【局限】所提方法没有融合帖子中可能附加的图片或视频信息,不能进行多模态融合的谣言检测。【结论】融合背景知识可以补充短文本的语义表示,融合用户和内容统计特征可以辅助文本语义特征作决策,提高检测的准确率。

关键词：谣言实时检测图注意力神经网络知识图谱语义特征统计特征用户特征

职业预备教育:体系化视野下中职高质量发展的办学定位

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职教论坛 2024年第8期40卷 5-12页

作者：李胜浙江工业大学教育学院浙江杭州310058

高中阶段教育高质量发展要求中职转向职业预备教育定位,这一办学定位受启示于普通高中教育的办学定位。一方面,产业升级使得就业年限延后、人们升学意愿愈加强烈,职业预备教育的内部驱动力逐渐积聚;另一方面,高等职业教育的规模化内涵... 详细信息

高中阶段教育高质量发展要求中职转向职业预备教育定位,这一办学定位受启示于普通高中教育的办学定位。一方面,产业升级使得就业年限延后、人们升学意愿愈加强烈,职业预备教育的内部驱动力逐渐积聚;另一方面,高等职业教育的规模化内涵式发展,特别是职业本科教育的突破,职业预备教育的外部条件也逐渐完善。职业预备教育定位的学理依据是智能化时代职业活动变化推动了职业知识结构变革。产业一线岗位理论技术的增加与高端技能养成的复杂性使得技术技能人才培养的周期延长了,需要重新思考与设计学校职业教育的学制。体系化视野下,支撑职业预备教育定位的关键改革思路包括促进中职实现从就业能力到技术素养的课程模式转型、发挥职教高考制度在中职人才培养质量监测与中高职课程衔接方面的作用以及稳步推进高等教育体系建设,为中职创设优质升学空间。

关键词：职业预备教育现代职业教育体系中等职业教育高质量发展办学定位

类型教育视域下职业知识生产机制:问题表征、结构要素与建设路径

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中国高教研究 2024年第5期 93-100页

作者：李胜刘晓浙江工业大学教育科学与技术学院浙江杭州310023

类型教育视域下,职业教育课程内容开发中存在的对普通学科知识的移植现象,反映的问题实质是职业教育从学徒制形式发展到学校化时期,职业知识生产机制对学术知识生产机制的“依附”。职业教育高质量发展需要建设独立形态的职业知识生产机... 详细信息

类型教育视域下,职业教育课程内容开发中存在的对普通学科知识的移植现象,反映的问题实质是职业教育从学徒制形式发展到学校化时期,职业知识生产机制对学术知识生产机制的“依附”。职业教育高质量发展需要建设独立形态的职业知识生产机制,推动课程建设走向深水区。基于类型教育的比较分析框架,从知识对象、生产主体以及社会建制三方面结构要素来把握职业知识生产机制的内涵:由职业知识产品、职业知识生产者、职业知识生产实体以及联结这些要素的各种制度与观念体系构成的系统,该系统的运行目的与动力都是职业知识生产。实践层面的职业知识生产机制建设路径是:“挖掘”“培训”以及“培养”职业知识生产者队伍、打造系列专门化的职业知识生产社会建制、建设促进职业知识生产活动长期稳定运行的机制。

关键词：类型教育职业教育职业知识知识生产

异速生长模型是生物学定律吗?——来自“进化偶然性论题”的挑战

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自然辩证法通讯 2024年第7期46卷 17-23页

作者：李胜辉河南大学哲学与公共管理学院河南开封475004

生物学中究竟有无定律一直是个充满争议的话题。最近,有学者试图表明生态学中的“异速生长模型”可以被视为定律,而反对者则基于约翰·比蒂的“进化偶然性论题”对其提出了挑战。这一挑战指出,异速生长模型可以被还原为几何学和物理学定... 详细信息

生物学中究竟有无定律一直是个充满争议的话题。最近,有学者试图表明生态学中的“异速生长模型”可以被视为定律,而反对者则基于约翰·比蒂的“进化偶然性论题”对其提出了挑战。这一挑战指出,异速生长模型可以被还原为几何学和物理学定律,因而它们不能被视为生物学定律。对它的一种回应是,在异速生长模型还原为物理学定律的过程中,作为“桥接定律”的生物物理学概括可能成为生物学定律。然而,对该回应的分析表明,其中的生物物理学概括是否存在还有待证明;即使可能存在,它们也是充满例外的偶适概括,仍会遭遇进化偶然性论题的挑战。因而,异速生长模型不能被视为生物学定律。

关键词：异速生长模型进化偶然性论题还原桥接定律