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泛素连接酶CBLC对乳腺癌发展进程的作用及其分子机制的初步研究

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泛素连接酶CBLC对乳腺癌发展进程的作用及其分子机制的初步研究

作者：李纬玮贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:研究卡西塔斯B谱系淋巴瘤C(Casitas Blineage lymphoma C,CBLC)在不同乳腺癌细胞系及病理组织类型中的表达差异,阐明CBLC对乳腺癌细胞增殖转移的作用,筛选并鉴定CBLC的相互作用蛋白,探索CBLC介导相互作用蛋白泛素降解的分子机制,... 详细信息

目的:研究卡西塔斯B谱系淋巴瘤C(Casitas Blineage lymphoma C,CBLC)在不同乳腺癌细胞系及病理组织类型中的表达差异,阐明CBLC对乳腺癌细胞增殖转移的作用,筛选并鉴定CBLC的相互作用蛋白,探索CBLC介导相互作用蛋白泛素降解的分子机制,为乳腺癌的临床诊断与预后评估提供新的监测指标。方法:从USCS Xena数据库中的TCGA数据集下载相关信息完整的组织CBLC基因表达谱矩阵(FPKM),分析CBLC在乳腺癌不同分子类型、病理分型、TNM分期中的表达水平,及其与乳腺癌患者预后的相关性;通过免疫组化染色观察CBLC在乳腺癌及癌旁组织中的表达水平;qPCR及WB验证5种乳腺癌细胞中CBLC的表达量,并分别使用表达量最低/最高的乳腺癌细胞进行CBLC过表达/敲低后进行划痕、Transwell及CCK-8实验,从细胞增殖、迁移和侵袭多个方面评估CBLC对乳腺癌细胞生物学行为的影响;筛选并鉴定CBLC相互作用蛋白,分析CBLC对相互作用蛋白的m RNA及蛋白水平的影响及其潜在作用机制。结果:各分子分型中,CBLC在Luminal A亚型中的m RNA表达量最高,FPKM均值为3.55,且与其他3种亚型存在显著差异(P<0.05)。各病理组织类型中,CBLC在粘液癌中的m RNA表达量最高,FPKM为4.01,且与其他3种分型存在显著差异(P<0.05)。各乳腺癌细胞类型中,CBLC在MCF7乳腺癌细胞中蛋白表达量最高,在MDA-MB-231中的表达量最低,两组比值为3.49倍(P<0.01),在乳腺癌stage II中表达量较I期降低(P<0.05)。CBLC高表达组乳腺癌患者的中位生存时间是低表达组的2.03倍(P<0.01),CBLC高表达组乳腺癌患者生存时间逾总中位生存时间的ROC曲线下面积达0.81。表型实验显示CBLC过表达能够抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭;反之,敲低CBLC的表达则促进乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。CBLC蛋白与CTTN蛋白具有相互结合作用且共定位于胞质,并能够增强CTTN蛋白水平的泛素化程度并促进其降解;转入CTTN可在一定程度上恢复CBLC稳转MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖、迁移及侵袭表型。结论:CBLC在低恶性、高分化型、低侵袭性乳腺癌中高表达,抑制乳腺癌增殖、迁移与侵袭,在乳腺癌I期到II期进程中表达量下降,与预后良好正相关。CBLC通过增加CTTN的泛素化程度促进CTTN蛋白水平降解;CTTN表达量降低可抑制乳腺癌增殖、迁移与侵袭。

关键词： CBLC 乳腺癌预后评估 CTTN 泛素化降解

乳腺癌组织CBL-B蛋白表达与生物学行为和预后关系

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中华肿瘤防治杂志 2020年第4期27卷 276-282页

作者：邓淳肖斌李纬玮陆景润李林海莫非贵州医科大学医学检验学院临床检验学教研室贵州贵阳550004 中国人民解放军南部战区总医院检验科广东广州510010 贵州医科大学附属医院临床检验中心贵州贵阳550004

目的Casitas B细胞淋巴瘤(Casitas B cell lymphoma,CBL)蛋白家族是一组具有环指结构域(really interesting new gene,RING)的E3泛素连接酶,CBL-B正是其中一员。本研究探讨CBL-B蛋白在乳腺癌组织中表达与预后的关系,为乳腺癌分子机制研... 详细信息

目的Casitas B细胞淋巴瘤(Casitas B cell lymphoma,CBL)蛋白家族是一组具有环指结构域(really interesting new gene,RING)的E3泛素连接酶,CBL-B正是其中一员。本研究探讨CBL-B蛋白在乳腺癌组织中表达与预后的关系,为乳腺癌分子机制研究及改善患者预后提供帮助。方法免疫组化染色检测CBL-B在30例取自台州医院的乳腺癌组织和癌旁组织表达;通过构建过表达CBL-B的MDA-MB-231细胞株与正常的MDA-MB-231细胞株进行Transwell细胞迁移以及细胞侵袭实验;从USCS Xena数据库下载乳腺癌基因表达及临床信息等相关数据共1217例,通过生物信息学分析CBL-B对乳腺癌临床预后的作用。结果免疫组化实验结果显示,CBL-B在正常组织中得分(265.79±37.3)高于乳腺癌组织(205.39±27.6),t=25.67,P<0.001。Transwell迁移小室穿膜细胞数平均值,对照组与实验组分别为78±17、41±14,t=11.401,P=0.001;侵袭小室穿膜细胞数平均值,对照组与实验组分别为83±15、33±12,t=13.020,P=0.001;显示CBL-B蛋白对MDA-MB-231乳腺癌细胞迁移与侵袭能力均呈现抑制作用。在不同分子分型中,除HER2+亚型以外(t=0.689,P=0.481),CBL-B基因表达水平在Luminal A型(2.013±0.721,t=10.283,P=0.013)、Luminal B型(1.974±1.321,t=13.721,P=0.002)和基底样乳腺癌(2.152±1.220,t=12.321,P=0.005)中,均低于正常组织(2.321±0.317)。在不同浸润程度中,CBL-B基因表达水平(2.112±0.542)在混合型乳腺癌中最高,t=15.782,P=0.001;在黏液癌中(1.636±0.624)最低,t=14.212,P=0.001;生存曲线分析结果显示,CBL-B高表达的乳腺癌患者生存率较高,说明CBL-B与乳腺癌预后具有潜在的关联性,P<0.001。结论CBL-B表达水平与乳腺癌患者预后呈正关联,且在乳腺癌中呈现低表达的特点,预示它可能成为影响乳腺癌患者预后的一个新作用靶点。

关键词： CBL-B 乳腺癌分子分型浸润程度临床预后

CBLC在各分型分期乳腺癌中的表达差异及预后分析

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安徽医科大学学报 2020年第3期55卷 415-421页

作者：李纬玮肖斌陆景润邓淳李林海罗昭逊贵州医科大学医学检验学院临床检验学教研室贵阳550004 中国人民解放军南部战区总医院检验科广州510010 贵州医科大学附属贵州省儿童医学中心贵阳550004 贵州医科大学儿科学院贵阳550004

目的阐明CBL原癌基因C(CBLC)在乳腺癌中的生物学作用,为乳腺癌的临床诊断与预后评估提供新的监测指标,为乳腺癌的深入研究和治疗方案拟定提供指导性理论基础。方法从USCS Xena(https://***)中的TCGA数据集下载1104例乳腺癌组织和113例... 详细信息

目的阐明CBL原癌基因C(CBLC)在乳腺癌中的生物学作用,为乳腺癌的临床诊断与预后评估提供新的监测指标,为乳腺癌的深入研究和治疗方案拟定提供指导性理论基础。方法从USCS Xena(https://***)中的TCGA数据集下载1104例乳腺癌组织和113例癌旁组织的基因表达谱矩阵,分析CBLC基因在乳腺癌各分子与病理分型、TNM分期与肿瘤阶段中的表达差异及预后相关性;利用免疫组化染色观察CBLC在30例乳腺癌患者肿瘤及其邻近正常组织中的表达水平;利用MCF7乳腺癌细胞进行划痕实验、Transwell实验及CCK-8实验,观察CBLC对其增殖迁移的作用。结果CBLC在乳腺癌组表达量(P=2.31×10^-20)及H-Score评分(P=0.014)均高于癌旁组,在Luminal A分子分型(P=1.68×10^-4)及黏液癌病理分型(P=4.00×10^-5)中表达量最高,在乳腺癌stageⅠ期至stageⅡ期中表达量呈下降趋势(P=0.0494)。以中位数划分,CBLC高表达组乳腺癌患者的生存率高于低表达组(P=0.054)。CBLC过表达能够抑制乳腺癌细胞增殖和迁移。结论CBLC在乳腺癌各分型分期中的表达具有显著差异,其在低恶性的Luminal A分子分型、高分化型的黏液癌组织病理分型、早期乳腺癌中高表达,与乳腺癌患者生存良好呈正相关,可抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移,可能是新的乳腺癌分子诊断或靶向治疗的潜在靶标。

关键词： CBLC蛋白乳腺癌分型分期预后影响

CBL蛋白家族的结构、功能及其在乳腺癌发展中的作用

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中华医学杂志 2019年第30期99卷 2389-2392页

作者：陆景润李纬玮邓淳肖斌孙朝晖张姝罗昭逊莫非李林海解放军南部战区总医院检验科广州510010 贵州医科大学医学检验学院临床检验学教研室贵阳550004 贵州医科大学儿科学院贵阳550004

CasitasB细胞淋巴瘤(CBL)蛋白家族是一组具有RING(Really Interesting New Gene)指结构域的E3泛素连接酶,包括CBL、CBL-B和CBL-C三个成员.三者在不同肿瘤中的作用各不相同,并与肿瘤的发生发展密切相关.全面总结CBL蛋白家族的生物学功能... 详细信息

CasitasB细胞淋巴瘤(CBL)蛋白家族是一组具有RING(Really Interesting New Gene)指结构域的E3泛素连接酶,包括CBL、CBL-B和CBL-C三个成员.三者在不同肿瘤中的作用各不相同,并与肿瘤的发生发展密切相关.全面总结CBL蛋白家族的生物学功能不仅有助于了解相关肿瘤的发生机制,也有望将CBL作为肿瘤的治疗靶标提供新思路和突破口.现以乳腺癌为例,对CBL蛋白家族的编码基因、蛋白结构、生物学功能及其在乳腺癌中的作用进行综述.

关键词： CBL 泛素化 E3泛素连接酶乳腺癌

Casitas B系淋巴瘤原癌基因在乳腺癌组织中的表达水平及其临床预后分析

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医学研究生学报 2020年第2期33卷 149-154页

作者：陆景润肖斌邓淳李纬玮李林海黄健张姝贵州医科大学医学检验学院贵阳550004 南部战区总医院检验科 510010广州贵州医科大学附属医院临床检验中心贵阳550004 贵州医科大学医学检验学院临床检验学教研室贵阳550004

目的 Casitas B系淋巴瘤原癌基因(CBL)在不同类型乳腺癌中的表达情况及其在乳腺癌患者诊断和预后评估中的作用鲜有报道。文章旨在分析CBL在乳腺癌组织中的表达水平及其在不同分子分型、病理类型、TNM分级和临床分期的乳腺癌组织中的表... 详细信息

目的 Casitas B系淋巴瘤原癌基因(CBL)在不同类型乳腺癌中的表达情况及其在乳腺癌患者诊断和预后评估中的作用鲜有报道。文章旨在分析CBL在乳腺癌组织中的表达水平及其在不同分子分型、病理类型、TNM分级和临床分期的乳腺癌组织中的表达差异,并探讨CBL在乳腺癌患者诊断及临床预后评估中的作用。方法从USCS Xena数据库下载数据,分析乳腺癌组织(1104例)与癌旁组织(113例)中CBL基因的表达差异。分析不同分子分型(三阴性型、HER2+型、Luminal A型、Luminal B型)及不同病理类型(浸润性导管癌、浸润性小叶癌、混合型组织乳腺癌、黏液性癌、其他)的乳腺癌样本中CBL基因的表达量。根据肿瘤体积和临近组织受累范围分为T1、T2、T3、T4、Tx;根据区域淋巴结受累情况分为N0、N1、N2、N3、Nx;根据是否有远处转移分为cM0 (i+)、M0、M1、Mx。按照不同临床分期分为Ι期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期、其他。比较CBL在乳腺癌不同TNM分级和临床分期间的表达,判断CBL基因表达与乳腺癌不同TNM分级及临床分期间是否存在相关性。采用ROC曲线评估CBL对乳腺癌诊断的价值;根据基因表达值的中位数2.152分为高表达组(≥2.152)和低表达组(<2.152),进行生存分析,判断CBL基因是否为生存预后的相关基因。使用免疫组织化学法进一步检测CBL蛋白在乳腺癌组织中的表达水平。结果在不同分子分型的乳腺癌,三阴性型乳腺癌组织中CBL基因的表达量最高(P<0.05);Luminal B型乳腺癌组织CBL基因的表达量较Luminal A型降低(P<0.05)。浸润性导管癌、浸润性小叶癌以及黏液性癌组织中CBL基因的表达水平较混合型组织乳腺癌降低(P<0.05),浸润性导管癌中CBL基因的表达水平高于浸润性小叶癌(P<0.05)。从T1至T3 CBL基因的表达量逐渐降低(P<0.05)。N0中CBL基因的表达量较N1升高(P<0.05)。从Ι期至Ⅲ期CBL基因的表达量逐渐降低(P<0.05)。乳腺癌组织中CBL mRNA诊断乳腺癌的ROC曲线下面积为0.768。CBL基因高表达组生存率较低表达组升高(P<0.05)。CBL基因为预后相关基因,高表达CBL与乳腺癌患者的预后良好呈正相关(P<0.05)。结论 CBL是乳腺癌患者预后良好相关基因,有望成为乳腺癌患者新的临床诊断和预后评估的标志物。

关键词： Casitas B系淋巴瘤原癌基因乳腺肿瘤诊断预后

从乾隆皇帝1775-1776年“法国定制”看中法宫廷交流的私人性

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故宫博物院院刊 2024年第4期 40-52,143页

作者： [法]赵冰李纬文(译) 法国国家科学研究中心东亚文明研究院故宫博物院博士后工作站

“法国定制”是由法国宫廷推动的一种特定历史背景下的奢侈品流通模式。本文通过1775年3月和1776年1月之间乾隆皇帝向法国定制珐琅器的三道谕旨,并结合数条中文和法文档案的分析,考察乾隆皇帝对法国的认知。该个案研究首次展现了以德·... 详细信息

“法国定制”是由法国宫廷推动的一种特定历史背景下的奢侈品流通模式。本文通过1775年3月和1776年1月之间乾隆皇帝向法国定制珐琅器的三道谕旨,并结合数条中文和法文档案的分析,考察乾隆皇帝对法国的认知。该个案研究首次展现了以德·罗边为代表的法国布列塔尼私人贸易网络在中法宫廷交流中的重要作用。

关键词：法国珐琅定制法属东印度公司皮埃尔-路易-阿希尔·德·罗边

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三轴振动激励下悬挂座椅垂向传递率试验研究

声学学报 2024年第2期49卷 209-216页

作者：尹玮倓邱毅浙江大学能源工程学院杭州310058 南安普顿大学工程与物理科学学院英国南安普顿SO171BJ

针对三轴激励下无源空气弹簧悬挂座椅垂向振动传递特性进行了试验研究。其中,垂向激励幅值设置为0.25 m/s^(2)r.m.s.、0.5 m/s^(2)r.m.s.或1.0 m/s^(2)r.m.s.,纵向和横向激励幅值同为0 m/s^(2)r.m.s.、0.5 m/s^(2)r.m.s.或1.0 m/s^(2)r.m.s.;座椅靠背倾角设置为0°、10°或20°。研究表明,垂向和水平方向振动激励幅值的增加均引起悬挂座椅传递率共振频率的降低,并影响座椅有效幅值传递率;在较小幅值(0.25 m/s^(2)r.m.s.)的垂向振动激励下,靠背倾角对该共振频率也有一定影响。此外,垂向和水平振动幅值对座椅传递率的影响存在轴间耦合效应,当垂向振动的幅值增大时,水平振动幅值从0.25 m/s^(2)r.m.s.增大到1.0 m/s^(2)r.m.s.所造成的传递率峰值的变化程度将减小,反之亦然。

关键词：人因工程全身振动多轴振动悬挂座椅靠背倾角座椅传递率

基于零序信号全波形识别的小电流接地系统故障选线方法

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电网技术 2024年第2期48卷 839-850页

作者：袁嘉玮焦在滨西安交通大学电气工程学院陕西省西安市710049

小电流接地系统发生单相接地故障时,故障电流微弱,暂态特征复杂,导致现有选线方法正确率偏低,可靠性较差。该文提出了一种基于零序信号全波形识别的选线方法。首先,介绍了基于故障信号全波形识别的通用方法,指出从波形的角度认识并识别... 详细信息

小电流接地系统发生单相接地故障时,故障电流微弱,暂态特征复杂,导致现有选线方法正确率偏低,可靠性较差。该文提出了一种基于零序信号全波形识别的选线方法。首先,介绍了基于故障信号全波形识别的通用方法,指出从波形的角度认识并识别信号,可以充分利用信号的全部故障信息;其次,选取母线电压和所有馈线电流波形作为待识别信号,并根据电流波形分布特征自适应捕捉信号中特征差异最明显的波形进行故障识别,提出了基于故障信号全波形识别的选线方法;然后,利用改进后的全卷积神经网络来识别不同信号波形,并基于Dice系数对识别出的故障信号波形进行可信赖性评价。最后,PSCAD仿真和真型实验测试结果表明该方法具有很高的选线正确率和可靠性。

关键词：波形长度自适应技术可信度评价故障选线语义分割波形识别

不只南郊一重城——明嘉靖朝北京外城原规划方案考

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建筑史学刊 2024年第2期5卷 69-80页

作者：李纬文故宫博物院

明嘉靖时期北京修筑外城,在多种限制与考虑之下,最终仅包裹城市南郊,未能实现最初规划中的四面围合。但中西方文献与考古资料证明,在规划方案发生变更之前,外城工程的实际施工已触及东郊一面。尽管随后被舍弃,但其遗迹直到近代仍存。此... 详细信息

明嘉靖时期北京修筑外城,在多种限制与考虑之下,最终仅包裹城市南郊,未能实现最初规划中的四面围合。但中西方文献与考古资料证明,在规划方案发生变更之前,外城工程的实际施工已触及东郊一面。尽管随后被舍弃,但其遗迹直到近代仍存。此外,外城城垣并非一道一次成型的包砖夯土城墙,而是带有二次加厚痕迹的夹心墙。

关键词：嘉靖北京外城包砖城垣严嵩普意雅

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