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脑心肌炎病毒感染Hela细胞的内吞途径

西北农业学报 2020年第2期29卷 189-197页

作者：刘杨许淑娟李琼毅刘翊忠西北民族大学生物医学研究中心兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院兰州730030

旨在探究脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)是否通过内吞途径以及通过何种内吞途径感染细胞,分别采用内吞途径抑制剂、网格蛋白抑制剂、巨胞饮途径抑制剂和肌动蛋白抑制剂作用于Hela细胞后接种EMCV,通过TCID50、qRT-PCR和W... 详细信息

旨在探究脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)是否通过内吞途径以及通过何种内吞途径感染细胞,分别采用内吞途径抑制剂、网格蛋白抑制剂、巨胞饮途径抑制剂和肌动蛋白抑制剂作用于Hela细胞后接种EMCV,通过TCID50、qRT-PCR和Western blot等方法检测病毒感染是否受影响。结果显示,内吞途径抑制剂和肌动蛋白抑制剂作用于Hela细胞后,TCID50、qRT-PCR和Western blot等检测结果提示EMCV的感染受到抑制。表明EMCV可通过肌动蛋白参与的内吞途径感染Hela细胞。

关键词：肌动蛋白脑心肌炎病毒人宫颈癌细胞

禽冠状病毒IBV细胞适应性及其相关机制研究进展

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病毒学报 2019年第5期35卷 836-846页

作者：周雪雁李琼毅曹欣乔自林西北民族大学生物医学研究中心兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院兰州730124

禽冠状传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)的细胞适应性研究是探索IBV的感染传播机制及采用传代细胞生物反应器放大培养生产IBV疫苗的基础,是改进IBV疫苗生产工艺,提高IBV疫苗生产效率的关键。本文就目前IBV病毒的细... 详细信息

禽冠状传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)的细胞适应性研究是探索IBV的感染传播机制及采用传代细胞生物反应器放大培养生产IBV疫苗的基础,是改进IBV疫苗生产工艺,提高IBV疫苗生产效率的关键。本文就目前IBV病毒的细胞适应性、适应细胞机制、敏感细胞受体研究历史和现状进行综述,为进一步对IBV潜在的物种间传播机制、细胞适应性改造或筛选及细胞适应性毒株疫苗研制提供理论指导。

关键词：禽冠状病毒传染性支气管炎病毒(IBV) 细胞适应性疫苗研制

MAVS全长及其截短体真核表达载体的构建和鉴定

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浙江农业学报 2024年

作者：玉妹毕冬琳郑天倚李琼毅西北民族大学生命科学与工程学院

建立线粒体抗病毒蛋白（Mitochondrial antiviral-signaling protein，MAVS）全长及截短体的真核表达载体，并检测其在HEK293细胞中的表达，为后续探索MAVS在病毒逃逸机制研究中提供重要的实验材料。首先，分析NCBI数据库中人源MAVS的... 详细信息

建立线粒体抗病毒蛋白（Mitochondrial antiviral-signaling protein，MAVS）全长及截短体的真核表达载体，并检测其在HEK293细胞中的表达，为后续探索MAVS在病毒逃逸机制研究中提供重要的实验材料。首先，分析NCBI数据库中人源MAVS的全长设计截短体引物，通过PCR从cDNA模板中扩增出MAVS全长及不同截短体的基因片段，并将其克隆到pcDNA3.1-3xflag载体中。随后，将构建好的载体转染到HEK-293细胞中，利用RT-PCR技术检测扩增产物大小与目的大小进行对比，Western blot技术检测MAVS蛋白在293细胞中的表达情况。结果表明，成功构建了全长MAVS(MAVS-FL)及其截短体MAVS-△C、MAVS-△CP、MAVS-PBD、MAVS-△Tm的真核表达载体，Western blot结果表明，构建的载体蛋白在HEK-293中能够有效表达。本研究成功构建了MAVS全长及其截短体的真核表达载体，并在HEK-293细胞中表达了这些蛋白，为后续研究MAVS蛋白的功能和抗病毒机制提供重要实验材料。

关键词：线粒体抗病毒蛋白真核表达载体截短体构建蛋白表达

鸡肠道微生物菌群的建立发育、分布和生理学意义

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微生物学报 2020年第4期60卷 641-652页

作者：周雪雁李琼毅丁功涛诺茹·伊扎·诺丁西北民族大学生物医学研究中心甘肃兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730124 马来西亚标准与工业研究所工业生物技术研究中心马来西亚雪兰莪州40700

鸡的胃肠道具有复杂的微生物菌群,该微生物菌群与宿主的肠道和整体健康密切相关,为了全面揭示鸡肠道微生物菌群的组成及其功能,本文对鸡肠道微生物菌群的建立发育、各肠段群落的分布及其生理学意义进行综述,从而为鸡肠道功能菌株的分离... 详细信息

鸡的胃肠道具有复杂的微生物菌群,该微生物菌群与宿主的肠道和整体健康密切相关,为了全面揭示鸡肠道微生物菌群的组成及其功能,本文对鸡肠道微生物菌群的建立发育、各肠段群落的分布及其生理学意义进行综述,从而为鸡肠道功能菌株的分离及有效利用,合理调控微生物菌群-宿主相互作用,提高饲料转化率和改善肠道健康提供理论依据。

关键词：肠道微生物菌群建立发育空间分布生理学意义

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习近平党的纪律建设思想论析

理论观察 2018年第10期 18-20页

作者：李琼毅重庆工商大学

纪律严明是党的光荣传统和独特优势,加强纪律建设是全面从严治党的治本之策。习近平党的纪律建设思想是习近平新时代中国特色社会主义思想的重要组成部分,是新时代解决党内突出纪律问题的迫切需要。利用文献研究法和理论联系实际研究法... 详细信息

纪律严明是党的光荣传统和独特优势,加强纪律建设是全面从严治党的治本之策。习近平党的纪律建设思想是习近平新时代中国特色社会主义思想的重要组成部分,是新时代解决党内突出纪律问题的迫切需要。利用文献研究法和理论联系实际研究法,在探讨习近平党的纪律建设思想的理论渊源的基础上,较为全面的梳理了习近平党的纪律建设思想的深刻内涵,阐述了重大意义。

关键词：习近平党的纪律建设深刻内涵重大意义

思想政治教育视域下培养大学生健康社会心态的路径研究

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中文科技期刊数据库（文摘版）教育 2023年第1期 25-27页

作者：李琼毅重庆幼儿师范高等专科学校重庆404047

社会心态是一种社会意识,是对社会现实的反映,是测量国家发展和国家文明程度的“晴雨表”。大学生作为未来国家建设的接班人,其社会心态的优良不仅直接关系到他们自身未来发展,更是直接影响着国家的繁荣和社会的稳定。当前,我国大学生... 详细信息

社会心态是一种社会意识,是对社会现实的反映,是测量国家发展和国家文明程度的“晴雨表”。大学生作为未来国家建设的接班人,其社会心态的优良不仅直接关系到他们自身未来发展,更是直接影响着国家的繁荣和社会的稳定。当前,我国大学生的社会心态总体上呈现出积极向上的态势,但同时也存在不容忽视的问题。思想政治教育作为高校进行德育的主要手段,因此,是培养大学生学生健康社会心态的重要途径。本文总结了大学生社会心态存在的主要问题,分析了思想政治教育对培养大学生社会心态的积极作用,并在此基础上提出了思想政治教育视域下培养大学生健康社会心态的途径。

关键词：思想政治教育大学生社会心态培养路径

TRIM家族蛋白在病毒感染中作用的研究进展

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微生物学报 2023年第4期63卷 1356-1364页

作者：杨东亮毕冬琳杨晓莉柏家林李琼毅西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730030 西北民族大学生物医学研究中心、生物工程与技术国家民委重点实验室甘肃兰州730030

三基序蛋白家族(tripartite motif,TRIM)是参与不同细胞功能的一大类具有E3泛素连接酶活性的蛋白质,在宿主抗病毒免疫应答中发挥着重要的作用。TRIM家族蛋白可通过提高宿主固有免疫应答或直接降解病毒蛋白发挥抗病毒活性;部分病毒有时... 详细信息

三基序蛋白家族(tripartite motif,TRIM)是参与不同细胞功能的一大类具有E3泛素连接酶活性的蛋白质,在宿主抗病毒免疫应答中发挥着重要的作用。TRIM家族蛋白可通过提高宿主固有免疫应答或直接降解病毒蛋白发挥抗病毒活性;部分病毒有时也可利用TRIM家族蛋白调控细胞因子表达促进自身感染。本文综述了TRIM家族蛋白在病毒复制中的作用及相关机制的研究进展,为研究病毒感染机制提供参考。

关键词：三基序蛋白家族 E3泛素连接酶脑心肌炎病毒甲型流感病毒乙型肝炎病毒

利用慢病毒包装小窝蛋白-1过表达稳定细胞株的构建

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中国生物制品学杂志 2022年第2期35卷 164-169页

作者：刘杨许淑娟李琼毅刘翊忠西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室甘肃兰州730030 西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730030

目的利用慢病毒包装构建过表达小窝蛋白-1(Caveolin-1)的稳定细胞株。方法PCR扩增仓鼠肾细胞BHK-21中Caveolin-1基因,克隆至pTRIP-CMV载体中,构建重组表达质粒pTRIP-Cav1,将其与对照质粒pTRIP-EGFP分别经LipofectamineTM 2000介导转染HEK-293T细胞,收集包装的慢病毒并转导至BHK-21细胞,构建过表达Caveolin-1的细胞株BHK-Cav1及过表达绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的对照细胞株BHK-EGFP。Western blot、qRT-PCR、免疫荧光法验证细胞株的稳定性及过表达特性,同时检测细胞活力。结果经双酶切及测序鉴定,重组表达质粒pTRIP-Cav1构建正确。与BHK-21细胞比较,各代次BHK-EGFP细胞中EGFP荧光明显,BHKCav1细胞中Caveolin-1蛋白表达水平增加,mRNA水平显著增加(P0.05)。结论成功构建了Caveolin-1过表达细胞株BHK-Cav1,其具有较好的稳定性,为下一步研究病毒通过Caveolin依赖型内吞途径感染BHK-21细胞奠定了基础。

关键词：小窝蛋白-1 慢病毒仓鼠肾细胞BHK-21 细胞株稳定性

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泡型棘球蚴组织的体外培养技术及应用

国外医学（寄生虫病分册） 2005年第4期32卷 159-161页

作者：李琼毅史大中兰州大学基础医学院病原生物学教研室兰州730000

泡型棘球蚴病是一种严重危害牧区人民健康和畜牧业发展的寄生虫病。虽然科学工作者已成功建立了泡球蚴感染的动物模型,但为了能在分子水平上研究泡球蚴的致病机制,体外培养渐渐受到大多数学者的青睐。该文就泡球蚴组织的体外培养作一综... 详细信息

泡型棘球蚴病是一种严重危害牧区人民健康和畜牧业发展的寄生虫病。虽然科学工作者已成功建立了泡球蚴感染的动物模型,但为了能在分子水平上研究泡球蚴的致病机制,体外培养渐渐受到大多数学者的青睐。该文就泡球蚴组织的体外培养作一综述,并展望其发展前景。

关键词：泡型棘球蚴组织体外培养泡型棘球蚴病致病机制