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基于“转录组-成分靶标-表型基因”多维网络全局式探索化湿败毒方抗心肌损伤潜在作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：李玮婕钟余特宫恬夏聪王萍宋丽娟中国中医科学院中药研究所道地药材与品质保障全国重点实验室国家药品监督管理局中医药研究与评价重点实验室

目的：基于“转录组-成分靶标-表型基因”多维网络全局式探索化湿败毒方抗心肌损伤的作用机理。方法：基于中医药百科全书（The Encyclopedia of Traditional Chinese Medicine， ETCM 2.0， http://***/ETCM2/front/）及中医药整合药... 详细信息

目的：基于“转录组-成分靶标-表型基因”多维网络全局式探索化湿败毒方抗心肌损伤的作用机理。方法：基于中医药百科全书（The Encyclopedia of Traditional Chinese Medicine， ETCM 2.0， http://***/ETCM2/front/）及中医药整合药理学研究平台（Integrative Pharmacology-based Research Platform of Traditional Chinese Medicine， TCMIP v2.0， http://***/TCMIP/***/Home/Login/***）收集化湿败毒方成分预测靶标集；基于CNKI及PubMed数据库挖掘化湿败毒方抗COVID-19的临床优势症状表型，基于CTD数据库收集多柔比星临床副作用症状，并利用HPO数据库及SoFDA数据平台（http://***/Syndrome/front/#/）收集表型相关基因。构建“转录组-成分靶标-表型基因”多维分子网络，并计算网络节点拓扑特征值，筛选网络核心节点，并开展功能挖掘阐释方药作用机理。在此基础之上，基于多柔比星诱导心肌损伤动物模型，开展药效学评价和机制验证。65只SPF级C57BL/6J雄性小鼠，随机分为5组：正常对照组（Control）、多柔比星诱导模型组（DOX）、化湿败毒方低、中、高给药组（HBF-L/M/H），各组13只。用于转录组测序采用H&E及Masson染色进行组织病理学检测、RT-PCR检测心脏组织中纤维化指标、western lotting检测蛋白表达检测。结果：基于ETCM 2.0及TCMIP v2.0共得到1044个化湿败毒方候选靶标；基于CTD数据库、HPO数据集及SoFDA数据平台，共得到1223个方药潜在效应靶标集；心脏转录组测序（RNA-seq），以P-value<0.05，FC＞1.5/<0.667为筛选标准，共获得214个多柔比星诱导心肌损伤相关基因，58个化湿败毒方效应基因。多维分子网络构建与分析后，发现化湿败毒方干预心肌损伤的相关作用机制主要与机体免疫-炎症失衡相关，其次参与细胞代谢，心肌细胞功能及纤维化，血管生成、收缩与血小板活化，DNA合成、代谢与修复，以及细胞死亡与氧化应激反应，改善射血分数降低、心肌纤维化、心肌炎、高油酸三脂血症、动/静脉血栓形成等心血管系统异常性疾病。动物实验表明，化湿败毒方可通过抑制多柔比星诱导后心肌组织NLRP3、Caspase-1、ASC、GSDMD异常高表达（P<0.05），改善TGF-β1、SMAD3及α-SMA纤维化指标mRNA水平的异常升高（P<0.05），发挥抗心肌纤维化作用。结论：化湿败毒方可通过多成分、多靶点、多效应改善心肌损伤，其中抑制NLRP3炎症小体激活途径为其优势药效环节，为后续靶向治疗药物的开发提供新思路。

关键词：化湿败毒方心肌损伤多柔比星药效环节免疫-炎症失衡网络

从“效应-靶标”互作关联视角探讨消肿止痛贴的功效机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第13期30卷 106-113页

作者：毛鹏李玮婕李春霞马旺明张彦琼许海玉陕西摩美得气血和制药有限公司陕西咸阳712000 中国中医科学院中药研究所北京100700 国家药品监督管理局中医药研究与评价重点实验室北京100700

目的:从“效应-靶标”互作关联视角探讨消肿止痛贴的功效机理。方法:基于中国学术期刊全文数据库(CNKI)和PubMed数据库收集消肿止痛贴组方药材沙蒿子、水蔓菁、薄荷脑中所含的化学成分信息,利用中医药百科全书(ETCM 2.0,http://***/ETCM... 详细信息

目的:从“效应-靶标”互作关联视角探讨消肿止痛贴的功效机理。方法:基于中国学术期刊全文数据库(CNKI)和PubMed数据库收集消肿止痛贴组方药材沙蒿子、水蔓菁、薄荷脑中所含的化学成分信息,利用中医药百科全书(ETCM 2.0,http://***/ETCM2/front/#/)收集其透皮吸收特性,筛选Golden Triangle为Accepted的成分预测候选靶标谱预测。利用中医药整合药理学研究平台(TCMIP v2.0),依据化合物结构相似性原理,预测其候选靶标谱。同时,利用SoFDA数据平台收集消肿止痛贴功效相关的症状与其相关基因信息。进一步,利用上述方药候选靶标与其功效相关基因之间的相互作用信息,构建消肿止痛贴的“效应-靶标”互作关联网络,通过计算网络节点拓扑特征值,筛选网络核心靶标,并开展功能挖掘,阐释消肿止痛贴的功效机制。结果:基于ETCM 2.0及TCMIP v2.0数据库共得到165个方药候选靶标,基于SoFDA数据库收集到清热、消肿、止痛功效相关症状及其1744个相关基因。网络构建与分析发现,消肿止痛贴的核心效应靶标主要参与调节机体的“免疫-炎症”平衡、维持物质与能量代谢稳态、血液循环和神经系统功能,与该方清热、消肿、止痛功效紧密关联。其中,消肿止痛贴-清热功效组具有清热解毒、抗菌消炎之功,其核心效应靶标群的生物学功能与矫正病原体诱导机体“免疫-炎症”失衡有关;消肿止痛贴-消肿功效组具有利水消肿、软坚散结之功,其核心效应靶标群的生物学功能与改善微循环障碍有关;消肿止痛贴-止痛功效组具有化瘀解滞、活血止痛之功,其核心效应靶标群与纠正神经系统和物质及能量代谢紊乱有关。结论:消肿止痛贴清热、消肿和止痛的功效可能与其作用于相关候选靶标,从而矫正“神经-免疫-血管轴”失衡,调节神经元兴奋性和炎症反应,干预物质和能量代谢密切相关。相关研究结果为明确消肿止痛贴的优势疗效环节和辅助其临床精准定位奠定理论基础。

关键词： “效应-靶标”关联网络消肿止痛贴清热消肿止痛

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基于“病-方”互作网络探索尪痹片干预膝骨关节炎临床优势分期与潜在作用机制

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中国中药杂志 2024年第14期49卷 3924-3935页

作者：李玮婕张彦琼周书繁夏聪敏王萍吴卓耘曲洋周春玲许海玉中国中医科学院中药研究所道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700 辽宁上药好护士药业(集团)有限公司辽宁桓仁117201 中国中医科学院广安门医院北京100053 北京中医药大学第三附属医院北京100029 国家药品监督管理局中医药研究与评价重点实验室北京100700

从“病-方”互作网络探索尪痹片干预膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)临床优势分期及潜在作用机制。首先,基于临床指南和专家共识并结合中医证候本体及多维定量关联计算平台(SoFDA)分别收集KOA发作期、缓解期和康复期3个临床分期及... 详细信息

从“病-方”互作网络探索尪痹片干预膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)临床优势分期及潜在作用机制。首先,基于临床指南和专家共识并结合中医证候本体及多维定量关联计算平台(SoFDA)分别收集KOA发作期、缓解期和康复期3个临床分期及尪痹片相关症状及基因集,同时基于中医药百科全书数据库(ETCM 2.0)收集尪痹片所含成分候选靶标谱,分别获得疾病靶标分子库和方药候选靶标集。其次,采用Jaccard和余弦相似度分别对“药物治疗与疾病临床症状”“药靶与疾病基因”“富集通路”间相似度评价,在尪痹片干预KOA“病-方”互作关联网络构建与分析后,提取方药干预不同临床分期网络,挖掘其作用特点。最后,采用脂多糖(LPS)诱导SW1353细胞考察方药作用机制。结果显示,基于SoFDA收集到KOA发作期、缓解期和康复期及尪痹片临床治疗症状及基因92/3921、138/3708、139/3800、196/3946个,基于ETCM 2.0得到260个尪痹片所含化学成分预测靶标集。“疾病分期-药物”对应性评价发现,尪痹片与KOA缓解期在“药物治疗与疾病临床症状”“药靶与疾病基因”“富集通路”3个层次具有最高相似度,其次为康复期;网络构建分析发现,尪痹片的核心效应靶标共同矫正不同分期机体“免疫-炎症”失衡,并发挥镇痛和骨保护作用,缓解膝关节疼痛、关节肿胀、酸痛、乏力、功能障碍等症状。在KOA发作期和缓解期方药核心效应靶标尤其发挥抗氧化作用,在康复期方药核心效应靶标发挥调节物质与能量代谢紊乱及血管保护作用。基于体外细胞模型发现,尪痹片通过磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)信号通路可抑制白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎症因子释放及Bax/Bcl-2表达。该研究为进一步明确尪痹片临床优势分期与辅助临床精准定位提供了理论依据。

关键词：尪痹片膝骨关节炎临床优势分期发作期缓解期康复期

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中药复方抗呼吸道病毒性疾病研究进展

生物医学转化 2024年第1期5卷 37-47页

作者：马旺明李玮婕王萍李兵许海玉江西中医药大学江西南昌330004 中国中医科学院中药研究所北京100700 中国中医科学院国家药品监督管理局中医药研究与评价重点实验室北京100700

近年来,据不完全统计,由病原微生物引起的所有呼吸道疾病中,由病毒导致的急性呼吸道感染约占80%,是目前世界范围内发病率最高的疾病。呼吸道病毒,如严重急性呼吸系统综合征冠状病毒(SARS-CoV)、SARS-CoV-2,甲型流感病毒和呼吸道合胞病毒... 详细信息

近年来,据不完全统计,由病原微生物引起的所有呼吸道疾病中,由病毒导致的急性呼吸道感染约占80%,是目前世界范围内发病率最高的疾病。呼吸道病毒,如严重急性呼吸系统综合征冠状病毒(SARS-CoV)、SARS-CoV-2,甲型流感病毒和呼吸道合胞病毒等,对社会公共卫生安全构成较大威胁,目前,还没有开发出特效药。由于中药具有多组分多靶点的协同作用,在呼吸道病毒疾病的预防、治疗康复和保健方面具有独特的优势,近年来,许多临床医生和研究人员从不同层面对中药治疗呼吸道病毒疾病进行了一系列研究和探索,对中医药的临床疗效和治疗机制有了更清晰的认识。本文通过综述中医药治疗呼吸道病毒疾病的临床疗效研究和作用机制,为中医药更好治疗呼吸道病毒疾病提供有力的证据,以期推动中医药的发展及其在呼吸道病毒疾病方面的潜在应用。

关键词：呼吸道病毒流感病毒冠状病毒中药复方临床疗效与评价作用机制

基于组方规律和分子靶点的雄激素性脱发治疗中药发现

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药物评价研究 2023年第11期46卷 2301-2308页

作者：许佳李欣李玮婕张益生王萍代丹宋坪中国中医科学院广安门医院北京100053 中国中医科学院中药研究所北京100700

目的通过治疗雄激素性脱发(AGA)方剂的组方用药规律分析,并结合网络靶标反向查找中药,发现治疗AGA的有效中药,为处方发现提供依据。方法以“脱发”为关键词,在中医药百科全书在线数据库(ETCM v2.0)检索古代方剂和中成药,按照排除标准进... 详细信息

目的通过治疗雄激素性脱发(AGA)方剂的组方用药规律分析,并结合网络靶标反向查找中药,发现治疗AGA的有效中药,为处方发现提供依据。方法以“脱发”为关键词,在中医药百科全书在线数据库(ETCM v2.0)检索古代方剂和中成药,按照排除标准进行筛选后,采用中医传承辅助系统(v2.5)开展用药频次、药性理论、关联规则等分析。利用文献检索AGA相关通路及靶点,反向查找靶点所对应的中药,对2部分中药进行交集,按照中药材对应靶点个数进行排序,在中医药整合药理学研究平台(TCMIP v2.0)收集排名前20味中药的化学成分,用Cytoscape 3.8.0软件构建“中药-成分-靶点-通路”网络图,并进行可视化。结果分析得出传统组方中治疗脱发的高频次中药为当归、川芎、熟地黄、茯苓、附子、白术等,核心组合10个,使用频次>10的关联规则6个。依据数据库分析富集靶点个数最多的中药为枸杞子、山药、半夏、地黄等,同时富集4条通路及雄激素受体(AR)、II型5α-还原酶(SRD5A2)基因的中药为丹参,其发挥作用的成分为丹参环庚三烯酚酮、胡萝卜苷、齐墩果醇酸、丹参醛、丹酚酸B。结论针对AGA的中药主要以补肝血、养血滋阴类为主。丹参可能是治疗AGA的潜在有效中药材,并可能是通过丹参环庚三烯酚酮、胡萝卜苷、齐墩果醇酸、丹参醛、丹酚酸B等成分发挥作用。

关键词：雄激素性脱发组方规律分子靶点中药整合药理学丹参

从VEGF/VEGFR2/PI3K/AKT信号轴所介导的血管新生调控网络探索白虎加桂枝汤干预类风湿关节炎热证的作用及其机制

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药学学报 2022年第4期57卷 1044-1053页

作者：李聪翀张彦琼李玮婕毛霞刘毓东马兆臣林雅林娜福建中医药大学药学院福建福州350122 中国中医科学院中药研究所北京100700

出自《金匮要略》的热痹经方白虎加桂枝汤(BHGZD)临床治疗类风湿关节炎(RA)的疗效确切。但针对该方的作用机制研究多围绕调节机体炎症反应和免疫功能等方面,对其抑制滑膜血管新生的药效与机制尚未见报道。本研究采用转录组学数据挖掘、... 详细信息

出自《金匮要略》的热痹经方白虎加桂枝汤(BHGZD)临床治疗类风湿关节炎(RA)的疗效确切。但针对该方的作用机制研究多围绕调节机体炎症反应和免疫功能等方面,对其抑制滑膜血管新生的药效与机制尚未见报道。本研究采用转录组学数据挖掘、生物网络分析与“动物-细胞”实验验证相整合的研究策略,探讨BHGZD干预RA热证滑膜血管过度新生病理环节的潜能和分子机制。动物福利和实验过程均遵循中国中医科学院实验动物伦理委员会的规定。网络分析结果表明, BHGZD干预RA热证的候选网络靶标显著参与多条血管新生调节相关通路。其中,血管内皮生长因子A-血管内皮生长因子受体2 (VEGFA-VEGFR2)信号通路包含多个BHGZD候选网络靶标,如VEGF、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝-苏氨酸激酶(AKT)等。进一步的实验验证结果表明, BHGZD可有效降低佐剂诱导性关节炎热证大鼠膝关节滑膜中血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)的表达,血清中VEGF的水平、内皮性一氧化氮合酶(eNOS)的活性,关节组织中磷酸化血管内皮生长因子受体2 (p-VEGFR2)、p-PI3K以及p-AKT蛋白的表达水平,升高血清中内皮抑素(endostatin)的水平,并显著减少HUVEC、MH7A细胞的迁移和侵袭活性,及HUVEC细胞的管腔形成活性。综上所述, BHGZD具有缓解RA热证滑膜血管过度新生的潜能,其作用机制可能与干预VEGF/VEGFR2/PI3K/AKT信号通路相关。

关键词：白虎加桂枝汤类风湿关节炎热证滑膜血管新生转录组学网络药理学

从“炎症—免疫”网络探索白虎加桂枝汤干预类风湿关节炎的作用机制

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从“炎症—免疫”网络探索白虎加桂枝汤干预类风湿关节炎的作用机...

作者：李玮婕北京中医药大学

学位级别：硕士

目的本研究针对复杂性疾病类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA),选择临床治疗痹证的经典名方白虎加桂枝汤(Baihu-Guizhi decoction,BHGZD作为研究对象,开展全基因组表达谱芯片检测与网络药理学分析的整合研究,按照“BHGZD化学成分库... 详细信息

目的本研究针对复杂性疾病类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA),选择临床治疗痹证的经典名方白虎加桂枝汤(Baihu-Guizhi decoction,BHGZD作为研究对象,开展全基因组表达谱芯片检测与网络药理学分析的整合研究,按照“BHGZD化学成分库的建立→候选靶标预测→“疾病基因-药物候选靶标”相互作用网络的建立和分析→BHGZD干预RA的关键网络靶标筛选及作用机制挖掘→实验验证”的研究路线,从“炎症-免疫”网络角度切入,初步鉴定该方的物质基础,揭示该方干预RA的作用机制并筛选其关键靶标。方法1.佐剂诱导性关节炎(Adjuvant-Induced Arthritis,AIA)动物模型的构建及BHGZD干预RA的药效学评价1.1 AIA动物模型的建立选用健康6～7周龄(体重200±20g)的雄性Lewis大鼠,每只大鼠尾根单次皮内注射0.1mL完全弗氏佐剂,建立AIA大鼠模型。1.2动物分组、给药及取材雄性Lewis大鼠54只,随机分为6组,分别为正常对照(Con)组(n=9)、AIA模型组(n=9)、低、中、高BHGZD干预组和甲氨蝶呤(MTX)干预组(n=6/组)。BHGZD三个给药剂量为5.4、10.7、21.4g·kg-1,分别相当于0.5、1、2倍临床等效剂量;甲氨喋呤给药剂量为0.2mg·kg-1,相当于临床等效剂量。大鼠给药容积按照1mL/100g体重灌胃,从免疫当天开始给药,BHGZD干预组每给药6天,间歇1天;甲氨蝶呤每给药3天,间歇1天;Con组和AIA模型组灌服等体积蒸馏水,各组动物给药至造模第25天。第26天处死动物,取关节、肝肾、滑膜等组织按操作要求进行处置。1.3关节炎评价对AIA大鼠关节炎严重程度、疼痛阈值、关节组织病理学变化进行检测和评价,明确该方对RA的干预效果。采用苏木素-伊红(HE)染色法分别对AIA大鼠肝脏组织和肾脏组织进行染色,镜下观察各组大鼠肝、肾受损情况,并计算肝、肾指数。2.全基因组表达谱芯片检测与网络药理学分析的整合研究2.1全基因组表达谱芯片检测及差异表达基因筛选采用Agilent表达谱芯片配套试剂盒(Low Input Quick Amp Labeling Kit)提取大鼠关节滑膜组织的RNA样本,并用RNeasy mini kit纯化标记后的cRNA。采用全基因组表达谱芯片检测技术(Agilent Whole Rat Genome Microarray 4×44K),利用R软件中Limma包对芯片检测原始数据进行归一化,计算基因组间表达量差异倍数(Fold-change)及T检验(Student's t-test),以Fold Change≤0.5或Fold Change≥2,T-test P-value<0.05为标准,筛选AIA模型组与Con组大鼠关节滑膜组织之间的差异表达基因,获得AIA病相关基因集。。2.2 BHGZD化学成分库的建立用超高速液相色谱谱飞行时间质谱联用技术(ultra-fast liquid chromatography-quadrupole-time-of-flight tandem mass spectrometry,UFLC-Q-TOF-MS/MS),对BHGZD 水液中化学成分进行鉴定;从台湾中医药资料库TCM Data base@Taiwan获取BHGZD五中药的化学成分信息。2.3 BHGZD所含化学成分的候选靶标预测于课题组前期建立的方法,预测BHGZDD含化学成分的候选靶标。2.4 RA相关分子-BHGZD候选靶标相互作用网络的构建和分析合相关数据库收集的RA相关分子信息及AIA发病相关基因,基于BHGZD所含中药及其相应候选靶标分子的相互作用,建立“RA相关分子-BHGZD候选靶标”相互作网络。算每个节点的网络拓扑特征值(节点连接度、节点介度和节点紧密度);筛选连接度大于所有节点连接度中位值两倍的节点,为网络中的hub节点,并进行直接相互作用络的构建;选取上述拓扑特征值均大于相应中位值的节点,为网络中的关键hub节点。得上述关键网络hub节点所参与的通路信息,通过统计学计算和通路富集分析,选与RA相关的通路。。***对预测信号轴的调控作用验证用蛋白印迹反应(western blot,WB)检测TLR4-c-Fos-IL2--TNF-α信号轴中TLR4(Toll-样受体 4,Toll-like receptor 4)、c-Fos/APP1(原癌基因,Fos proto-oncogene/AP-1 transcription factor subunit)、IL2(白介素2,,interleukin 2)和TNF-α(肿瘤坏死因子-α,tumor necrosis factor-alpha)在AIA

关键词：白虎加桂枝汤类风湿关节炎全基因组表达谱网络药理学实验验证中药

从MMP9/IL-1β信号通路探讨蒙古族药那如-3对神经病理性疼痛“启动期”神经炎症的干预机制

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中国中药杂志 2023年第15期48卷 4173-4186页

作者：周方婷宗瑛李元滨曹人郦侯吴琼许丽婷杨菲顾艳丽苏晓慧郭秋岩李玮婕熊慧王超林娜广州中医药大学中药学院广东广州510405 中国中医科学院中药研究所北京100700 北京中医药大学东直门医院北京100700 内蒙古医科大学内蒙古呼和浩特010110 中国中医科学院青蒿素研究中心北京100700 中南民族大学药学院湖北武汉430074

神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)表型相似而病理过程的序贯性神经炎症机制各异,将神经炎症抑制在“启动期”具有重要意义并成为近年来NP治疗和药物研发的新方向。蒙古族药那如-3(Naru-3)临床治疗三叉神经痛、坐骨神经痛等NP短期即... 详细信息

神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)表型相似而病理过程的序贯性神经炎症机制各异,将神经炎症抑制在“启动期”具有重要意义并成为近年来NP治疗和药物研发的新方向。蒙古族药那如-3(Naru-3)临床治疗三叉神经痛、坐骨神经痛等NP短期即效,但其镇痛的药效学特点及机制尚不明确。该研究建立模拟临床周围神经损伤的脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)模型并采用行为学检测、副作用评估、网络分析及实验验证等方法探讨Naru-3治疗NP的药效机制。药效学结果显示,Naru-3能提高SNL动物“启动期”基础痛敏阈值(机械痛敏、热辐射痛敏),缓解自发痛,而对正常动物基础痛敏阈值、生理及病理状态下动物的运动协调功能无明显影响。靶组织初筛结果表明Naru-3能抑制小鼠福尔马林实验第二时相伤害性反应并降低脊髓炎症因子表达。网络分析发现Naru-3治疗NP具有协同性且与MMP9、IL1B等核心靶标相关。实验进一步以背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)、病变脊髓节段为研究对象,聚焦于诱导小胶质细胞神经炎症的核心靶标,采用免疫印迹、免疫荧光、激动剂、拮抗剂、行为学等技术方法发现Naru-3发挥NP镇痛作用的机制可能与其负向调节MMP9/IL-1β信号通路介导的“启动期”小胶质细胞p38/IL-1β炎症环路相关。相关研究丰富了Naru-3治疗NP的生物学内涵,并为其临床合理用药提供了参考。

关键词：蒙古族药那如-3 神经病理性疼痛神经炎症“启动期” 小胶质细胞活化 MMP9/IL-1β信号通路机制

白脉软膏调控神经活动配体-受体及HIF-1信号通路改善背根神经节慢性压迫大鼠慢性疼痛的作用及机制研究

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中国中药杂志 2023年第23期48卷 6457-6474页

作者：周方婷宗瑛侯吴琼李森森杨菲许丽婷毛霞刘毓东苏晓慧万红叶欧阳竞锋郭秋岩李玮婕王震王超林娜中国中医科学院中药研究所北京100700 广州中医药大学中药学院广东广州510405 中国中医科学院针灸研究所北京100700 中国中医科学院医学实验中心北京100700 中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700

具“舒筋活络”核心功效的白脉软膏临床干预疼痛、痉挛、僵硬等症状的白脉病疗效显著,但其药效学特点及机制尚不明确。该研究建立模拟临床的腰椎间盘髓核突出压迫神经的大鼠L4背根神经节慢性压迫(chronic compression of dorsal root ga... 详细信息

具“舒筋活络”核心功效的白脉软膏临床干预疼痛、痉挛、僵硬等症状的白脉病疗效显著,但其药效学特点及机制尚不明确。该研究建立模拟临床的腰椎间盘髓核突出压迫神经的大鼠L4背根神经节慢性压迫(chronic compression of dorsal root ganglion,CCD)模型,采用行为学、副作用评估、网络分析、拮抗剂及分子生物学验证等方法初步探讨白脉软膏治疗CCD的药效及机制。药效学研究表明,白脉软膏能明显改善CCD模型大鼠的痛敏阈值(机械痛敏、热痛敏、冷痛敏),改善步态行为,且无耐受性及明显的毒副作用;靶组织初筛结果显示白脉软膏能抑制小鼠福尔马林实验第二时相伤害性反应,升高正常小鼠的热板阈值,并降低脊髓炎症因子表达;网络分析发现白脉软膏治疗CCD具有协同性且与下行抑制/易化系统及神经炎症相关。实验进一步采用行为学、免疫印迹、免疫荧光等技术发现白脉软膏发挥CCD镇痛作用可能与其调节CHRNA7、ADRA2A、ADRB2等神经活动配体-受体(神经配基)以及降低脊髓小胶质细胞HIF-1信号通路核心调控元件NOS2/p-ERK/PI3K的表达相关。相关研究初步揭示了白脉软膏治疗白脉病的“舒筋活络”机制,并为其临床合理用药及深入研究提供了参考。

关键词：白脉软膏腰椎间盘突出症神经配基神经炎症舒筋活络

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