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百草枯诱导PC12细胞损害和miR-133b表达的变化

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中华劳动卫生职业病杂志 2011年第1期29卷 2-6页

作者：李煌元吴思英福建医科大学公共卫生学院福建省重点建设大学环境与健康重点学科环境与健康研究所毒理学与化学物安全性评价研究室职业与环境卫生学系福州350004 福建医科大学公共卫生学院福建省重点建设大学环境与健康重点学科环境与健康研究所毒理学与化学物安全性评价研究室公共卫生学院流行病与卫生统计学系福州350004

目的探讨百草枯（P0）对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞毒性作用和对miR-133b表达的影响。方法以50、100、300μmol／LPQ分别处理PCI2细胞24h，用噻唑蓝（MTT）法检测PCI2细胞毒性；以100、300μmol／LP0分别处理PCI2细胞24h，用Anne... 详细信息

目的探讨百草枯（P0）对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞毒性作用和对miR-133b表达的影响。方法以50、100、300μmol／LPQ分别处理PCI2细胞24h，用噻唑蓝（MTT）法检测PCI2细胞毒性；以100、300μmol／LP0分别处理PCI2细胞24h，用AnnexinV．FITC／PI法流式细胞仪检测细胞凋亡，用荧光定量反转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测miR-133b相对表达水平。结果与对照组比较，100、300μmol／LPQ处理细胞24h后细胞存活率明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。与对照组比较，100、300μmol／LPQ处理细胞24h后细胞凋亡率明显升高，差异有统计学意义（P〈0．01）。300μmol／LPQ处理细胞24h可诱导细胞miR-133b表达，差异有统计学意义（P〈0．05）.结论PQ致PCI2细胞损害和细胞凋亡时miR-133b的表达上调。

关键词：百草枯细胞毒性试验 PC12细胞基因表达

基于单细胞RNA测序分析百草枯诱导小鼠大脑帕金森样改变的转录组特征

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环境与职业医学 2023年第9期40卷 1005-1013页

作者：郭振坤张雅婷翁雅丽吴思英李煌元福建医科大学公共卫生学院/福建省环境因素与肿瘤重点实验室福建福州350122

[背景]百草枯(PQ)是世界上使用最广泛的除草剂之一,是帕金森病(PD)的危险因素之一,但其致PD发病的机制不甚清楚。单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术可从基因层面研究细胞异质性,为探究PQ致PD发病机制提供深入见解。[目的]通过scRNA-seq分析P... 详细信息

[背景]百草枯(PQ)是世界上使用最广泛的除草剂之一,是帕金森病(PD)的危险因素之一,但其致PD发病的机制不甚清楚。单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术可从基因层面研究细胞异质性,为探究PQ致PD发病机制提供深入见解。[目的]通过scRNA-seq分析PQ染毒小鼠大脑细胞分群情况,以及与PD样改变相关细胞亚群参与的生物学过程,为揭示PQ致小鼠大脑PD样改变的机制研究提供线索。[方法]6只雄性6周龄C57BL/6小鼠随机分为对照组和实验组,每组3只,分别以0(生理盐水)、10.0 mg·kg^(-1) PQ腹腔注射染毒,每隔2 d 1次,连续10次注射造模;染毒结束后,取小鼠大脑,进行scRNA-seq。根据不同细胞类型的基因表达特征进行细胞分群,利用生物信息学工具筛选PD相关细胞亚群,并对其特征基因进行基因注释(GO)富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析以及基因集富集分析(GSEA)、蛋白互作网络分析、转录因子预测等。最后,对PD相关细胞亚群在PQ处理组和对照组间的差异基因进行GO和KEGG分析等,分析这些基因可能参与的生物学过程。[结果]测序数据符合质控标准,共获取55779个细胞,所有细胞降维分析结果显示其可以被进一步分为37个聚类,包括5种主要的细胞类型;根据每个亚群排名前20特征基因KEGG分析,筛选出特异表达的Cluster 33亚群(多巴胺能神经元)与PD显著相关。GO分析结果显示该亚群生物学功能方面主要富集神经递质转运和对神经递质的调控,GSEA分析结果显示酪氨酸代谢通路和脑组织神经活动配体-受体相互作用通路显著富集,转录调控网络分析结果显示差异表达转录因子有39个。进一步分析PQ处理对该亚群的影响,结果表明PQ处理影响多巴胺神经元亚群代谢通路、内吞和Ras相关蛋白1(Rap1)信号通路和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路等;GO分析显示差异基因与离子运输、突触组装调节等生物学过程有关,并参与了细胞质和突触等细胞组分的形成。[结论]研究初步绘制了PQ暴露后小鼠大脑单细胞转录组图谱,并筛选出特异表达的Cluster33亚群(多巴胺能神经元)与PD显著相关,其生物学功能改变可能是PQ致小鼠大脑PD样改变的机制之一。

关键词：单细胞转录组百草枯小鼠大脑帕金森病转录特征

公共卫生与预防医学类硕士研究生就业现状分析与思考——以福建医科大学为例

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福建医科大学学报（社会科学版） 2023年第1期24卷 35-39页

作者：张洁郭振坤李煌元福建医科大学健康学院福建福州350122 福建医科大学公共卫生学院福建福州350122

以福建医科大学2017—2021年毕业的公共卫生与预防医学类硕士研究生作为研究对象。通过问卷调查,综合分析近5年毕业生的就业单位、岗位、薪酬和就业满意度等情况,发现公共卫生与预防医学类硕士研究生就业总体态势良好,但也存在毕业生就... 详细信息

以福建医科大学2017—2021年毕业的公共卫生与预防医学类硕士研究生作为研究对象。通过问卷调查,综合分析近5年毕业生的就业单位、岗位、薪酬和就业满意度等情况,发现公共卫生与预防医学类硕士研究生就业总体态势良好,但也存在毕业生就业满意度一般、专业与岗位不匹配、受工作单位重视不够等问题。就如何提高公共卫生与预防医学类研究生就业质量提出建议。

关键词：公共卫生与预防医学研究生就业现状

溴氰菊酯对γ-GCS活力和谷胱甘肽含量影响

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中国公共卫生 2012年第12期28卷 1587-1589页

作者：李煌元吴思英石年福建医科大学公共卫生学院环境与健康研究所职业与环境卫生学系福建福州350004 华中科技大学同济医学院卫生毒理学系教育部环境与健康重点实验室福建医科大学公共卫生学院环境与健康研究所流行病与卫生统计学系

目的探讨溴氰菊酯(DM)对PC12细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)活力和谷胱甘肽(GSH)含量的影响。方法用0、1、10、100μmol/L DM处理PC12细胞6或12 h后用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞毒性;用0、10、100μmol/L DM处理PC12细胞6或... 详细信息

目的探讨溴氰菊酯(DM)对PC12细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)活力和谷胱甘肽(GSH)含量的影响。方法用0、1、10、100μmol/L DM处理PC12细胞6或12 h后用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞毒性;用0、10、100μmol/L DM处理PC12细胞6或12 h后,超速离心分离细胞胞质碎片,邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生高效液相色谱(HPLC)荧光法检测组织中γ-GCS酶活力和GSH含量。结果 100μmol/L DM处理细胞6、12 h的细胞存活率为(0.862±0.053)、(0.746±0.101),均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.001);与对照组γ-GCS酶活力(1.78±0.26)pmol/106细胞.min比较,10、100μmol/L DM处理细胞6 h组γ-GCS酶活力为(1.66±0.20)、(1.73±0.09)pmol/106细胞.min,差异均无统计学意义;与对照组GSH含量(10.18±0.23)pmol/106细胞比较,10、100μmol/L DM处理细胞6 h GSH含量为(10.19±1.18)、(10.26±0.29)pmol/106细胞,差异均无统计学意义;与对照组γ-GCS酶活力(1.94±0.19)pmol/106细胞.min和GSH含量(9.57±0.39)pmol/106细胞比较,10μmol/L DM处理细胞12 h组γ-GCS酶活力(1.73±0.21)pmol/106细胞.min和GSH含量(9.72±0.41)pmol/106细胞差异均无统计学意义,100μmol/L DM处理细胞12 h组γ-GCS酶活力(1.62±0.09)pmol/106细胞.min差异有统计学意义(P=0.006)。结论较高浓度的DM处理细胞较长时间才抑制γ-GCS酶活力,可能与DM的细胞毒性作用有关。

关键词：溴氰菊酯(DM) γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS) 谷胱甘肽(GSH) 邻苯二甲醛柱前衍生高效液相色谱荧光法

福建省沿海地区18~44岁居民超重/肥胖现状及其影响因素分析

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中国公共卫生 2022年第6期38卷 771-774页

作者：徐兴燕陈诗颖蔡莹莹林少炜李煌元吴思英福建医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系福建福州350122 厦门市海沧区海沧街道石塘社区卫生服务中心福建医科大学公共卫生学院预防医学系

目的了解福建省沿海地区18~44岁居民超重/肥胖现状及其影响因素,为制定相应的干预措施提供科学依据。方法于2018年7月—2019年4月采用分层随机整群抽样方法在福建省福州连江县、马尾区、福清市、长乐市和泉州南安市5个沿海地区抽取6638... 详细信息

目的了解福建省沿海地区18~44岁居民超重/肥胖现状及其影响因素,为制定相应的干预措施提供科学依据。方法于2018年7月—2019年4月采用分层随机整群抽样方法在福建省福州连江县、马尾区、福清市、长乐市和泉州南安市5个沿海地区抽取6638名18~44岁常住居民进行问卷调查和体格检查。结果福建省沿海地区调查的6150名18~44岁居民中,超重1317人,超重率为21.41%;肥胖455人,肥胖率为7.40%。福建省沿海地区超重/肥胖组居民的高血压、糖尿病和高脂血症患病率分别为5.64%、1.91%和1.81%,均高于非超重/肥胖组。居民的1.24%、0.63%和0.58%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。多因素非条件logistic回归分析结果显示,年龄35~44岁、文化程度初中及以下、婚姻状况为已婚和饮酒≥2次/周是福建省沿海地区18~44岁居民超重/肥胖的危险因素;女性是福建省沿海地区18~44岁居民超重/肥胖的保护因素。结论福建省沿海地区18~44岁居民的超重率和肥胖率相对较低但仍不容忽视,性别、年龄、文化程度、婚姻状况和饮酒频率是该沿海地区18~44岁居民超重/肥胖的主要影响因素。

关键词：超重肥胖影响因素沿海地区

镉的雌性性腺毒性与雌激素受体关系的实验研究

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镉的雌性性腺毒性与雌激素受体关系的实验研究

作者：李煌元福建医科大学

学位级别：硕士

目的：研究镉的雌性大鼠性腺毒性(镉对大鼠动情周期和垂体、卵巢的性激素的分泌功能的影响)，以及雌性大鼠性腺毒性与雌激素受体之间的关系。方法： (1)30只成年雌性SD大鼠按体重随机分为三组，每组10只，染毒剂量分别为0、0.2... 详细信息

目的：研究镉的雌性大鼠性腺毒性(镉对大鼠动情周期和垂体、卵巢的性激素的分泌功能的影响)，以及雌性大鼠性腺毒性与雌激素受体之间的关系。方法： (1)30只成年雌性SD大鼠按体重随机分为三组，每组10只，染毒剂量分别为0、0.25、1.0mg／kg，亚慢性皮下注射染毒，每天1次，每周5天，连续6周。染毒第20天开始每天二次用阴道脱落细胞涂片法连续观察并记录动情周期;(2)24只成年雌性SD大鼠按体重随机分为三组，每组8只，染毒剂量分别为0、0.5、1.0 mg／kg(以Cd计)。每天以1ml药液／kg鼠重等容量腹腔注射，每天1次，连续染毒7天后处死抠眼球采血制备血清放射免疫测定黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)、孕酮(P)和雌二醇(E);另一批24只成年雌性SD大鼠同上剂量分组，染毒至14天处死抠眼球采血制备血清放射免疫测定LH、FSH、P、E，观察染镉对大鼠血清性激素的变化;通过亚慢性染毒(剂量为0、0.5、1.0 mg／kg，每周6天，共5周)，应用GnRH刺激试验观察GnRH注射前及注射后40分钟血清中LH、FSH含量。 (3)成年雌性SD大鼠用常规方法去除卵巢，迅速取出子宫，匀浆、低温高速离心分离制备子宫细胞质雌激素受体，作为体外雌激素受体放射性配基结合试验的受体样品;①运用正交实验设计(L(4))进行单剂量配基结合试验研究两因素— 锡的雌性性腺毒性与雌激素受体关系的实验研究中文摘要一隔的浓度和预先孵育时间对EZ结合ER的影响，即给予不同的锅浓度(0，10一，，10一5 or 10一‘M)和预先孵育不同时IbJ(0，30，60，90 min)，在存在或缺乏200倍过量的己烯雌酚于4℃条件下孵育16一18小时后用活性炭葡聚糖(DCC)吸附分离游离的3H一EZ，用Packard Tri一Carb 2300TR型液体闪烁计数仪测量放射性强度(dPm)，计算最大结合位点数(Bmax);②进一步用多剂量配基结合试验研究福对EZ结合ER能力的影响，用不同的锅浓度(0，10一:，，10一5 0r10一7M)，在存在或缺乏200倍过量的己烯雌酚于4℃条件下孵育16一18小时后用活性炭葡聚糖(DCC)吸附分离游离的‘，H一EZ，用液体闪烁计数仪测量放射性强度(dpm)，按照Scatchard方法运用软件计算最大结合位点数(Bmax)和平衡解离常数(Kd);③用竞争结合抑制试验，计算锅的IC油值并以己烯雌酚为参照品计算相对亲和力(RBA)，研究隔与ER的结合能力。结果: (1)高剂量组大鼠动情间期和动情周期异常率较其他剂量组明显增高 (P0 .05);而血清中EZ含量，染毒7天的高剂量组显著低于对照组，染毒14天高、低剂量组均显著低于对照组(P0.05)，注射GnRH 后，血清中LH、FSH水平较注射前明显升高，并有统计学意义(P0.05)，体外福孵育不同时间(0，30，60，90 min) 对EZ与ER的最大结合位点数(Bmax)的改变也未见显著性意义(P>0.05)，同时也未见体外不同浓度的福与孵育不同时间有交互作用(P>0 .05)，这些结果均表明福尚未影响EZ与ER的结合;(4)体外不同浓度的福(0，10一3，10一5 or 10一，M)，各组之间Bmax值未见显著性差异。对各组之间Kd值作单因素方差分析，也未见显著性差异。这些结果表明锡未影响E:与ER的结合能力。其中锅对Bmax值的影响与前面的结果相一致;(5) DES竞争结合的的半数抑制浓度(IC。。)为3.802x1o一，。M，与以往文献报道(2.25 x 10一，。士0.05‘10一10M)相一致，说明该实验可靠。而随着CdCI，浓度的不断增高，与大鼠胞浆ER结合的3H一EZ并没有明显的下降，但有下降的趋势，所以氯化福的半数抑制浓度(IC。。)约为10一‘0一3M之间，Cd与ER结合的相对亲和力(RBA) 约为DES的10一6一10一，

关键词：镉,性腺毒性,动情周期,性激素,促性腺激素,GnRH刺激试验,环境内分泌干扰物,放射性配基竞争结合试验,雌激素受体

miRNAs在地塞米松诱导肝细胞脂肪变性中的作用

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miRNAs在地塞米松诱导肝细胞脂肪变性中的作用

2017环境与公共健康学术会议暨中国环境科学学会环境医...

作者：龚瑞杰刘凤琼李煌元福建医科大学

目的:利用芯片筛选在地塞米松致脂肪肝中发挥作用的miRNAs及mRNAs,进一步探讨miRNA-23a-3p/LPIN1通路是否介导地塞米松促肝脂肪变作用。方法:（1）300nmol/L地塞米松和DMSO处理HepG2细胞进行芯片分析,确定差异miRNA和mRNA;（2）对差异表... 详细信息

目的:利用芯片筛选在地塞米松致脂肪肝中发挥作用的miRNAs及mRNAs,进一步探讨miRNA-23a-3p/LPIN1通路是否介导地塞米松促肝脂肪变作用。方法:（1）300nmol/L地塞米松和DMSO处理HepG2细胞进行芯片分析,确定差异miRNA和mRNA;（2）对差异表达mRNA进行GO和KEGG分析;（3）M/rbase,Miranda和Targetscan预测miR-23a-3p靶基因,选定靶基因LPIN1;（4）双荧光素酶实验验证miR-23a-3p与LPIN1的关系;（5）300nmol/L地塞米松处理HepG2细胞:a.油酸诱导实验,评估肝细胞脂肪变情况;b.PCR检测miR-23a-3p及LPIN1基因的表达高低;（6）Gain-of-loss function实验探讨miR-23a-3p及LPIN1的相对调控关系。结果:（1）芯片结果显示107 miRNAs和655 mRNAs存在差异表达;（2）GO分析:选择与脂质代谢相关的前10条go通路;Pathway分析:选择差异mRNAs富集的前10条与代谢相关的Pathway通路;（3）靶基因预测:通过前述芯片分析结果,选择差异表达的LPIN1基因作为目的基因,并通过信息预测和筛选发现miR-23a-3p是LPIN1的潜在靶基因;（4）双荧光素酶实验证实LPIN1为miR-23a-3p靶基因;（5）a.地塞米松处理后的HepG2细胞内甘油三酯集聚,出现大量脂肪滴;b.PCR检测miR-23a-3p表达上调,LPIN1上调,miR-23a-3p对LPIN1的具体调控机制,需结合Western blot及gain-of-loss function实验进一步证实。结论miRNA-23a-3p可能通过下调靶基因LPIN1的表达介导地塞米松诱导脂肪肝的形成。（青年基金,No.81503171）

关键词：地塞米松 miRNA-23a-3p LPIN1 脂肪肝表观遗传毒理学

来源： cnki会议评论

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溴氰菊酯对PC12细胞活性氧生成的影响

中华劳动卫生职业病杂志 2008年第11期26卷 654-658页

作者：李煌元钟玉芳石年华中科技大学同济医学院教育部环境与健康重点实验室华中科技大学同济医学院卫生毒理学系武汉430030 上海大学环境与化学学院环境污染与健康研究所福建医科大学公共卫生学院、环境与健康研究所毒理学与化学物安全性评价研究室、职业与环境卫生学系

目的研究溴氰菊酯（DM）对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞活性氧（ROS）生成的影响。方法对培养的PC12细胞分别进行处理：（1）终浓度为0、10和100μmol／L的DM分别处理PC12细胞1、6和12h（两因素析因设计）；（2）终浓度为0、10和10... 详细信息

目的研究溴氰菊酯（DM）对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞活性氧（ROS）生成的影响。方法对培养的PC12细胞分别进行处理：（1）终浓度为0、10和100μmol／L的DM分别处理PC12细胞1、6和12h（两因素析因设计）；（2）终浓度为0、10和100μmol／L的DM分别处理PC12细胞1、6、24h或24、48h；（3）PC12细胞分别在终浓度为10mmol／L乙酰半胱氨酸（NAC）预处理2h、终浓度为500μmol／L的DL-甲硫氨酸磺酰亚胺（BSO）及终浓度为40μmol／L的叔丁基对苯二酚（tBHQ）预处理16h，再给予10μmol／L DM作用6h。所有处理结束时，用2’，7’-二氯荧光黄双乙酸酯（DCFH-DA）探针法测定细胞ROS含量。结果DM诱导ROS生成呈剂量和时间效应关系。10μmol／LDM处理组PC12细胞增加ROS的DCF荧光强度，是溶剂对照组的2．24倍，差异有统计学意义（P〈0．01）。而分别用NAC、BSO及tBHQ预先处理PC12细胞均能明显降低DM所增加的ROS，分别是DM组的22％、62％、38％，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论DM能诱导PC12细胞ROS生成增高，胞内巯基水平和抗氧化功能降低可能是ROS生成增高的影响因素。

关键词：溴氰菊酯活性氧组分巯基试剂 PC12细胞

溴氰菊酯对大鼠脑组织自由基生成和转录因子Nrf2表达的影响

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中华劳动卫生职业病杂志 2009年第10期27卷 593-596页

作者：李煌元石年吴思英黄新福建医科大学公共卫生学院福建省重点建设大学环境与健康重点学科环境与健康研究所毒理学与化学物安全性评价研究室职业与环境卫生学系福州350004 华中科技大学同济医学院教育部环境与健康重点实验室卫生毒理学系福建医科大学公共卫生学院环境与健康研究所肿瘤流行病学研究室流行病与卫生统计学系中国科学院福建省物质结构所

目的研究溴氰菊酯（DM）诱导大鼠脑组织中自由基生成和对转录因子Nrf2的影响。方法（1）8只大鼠随机分成4组，即橄榄油对照组、DM染毒组、叔丁基对苯二酚（tBHQ）组和tBHQ＋DM组。在预先喂饲雄性大鼠tBHQ3d后，用12．50mg／kg DM染毒大... 详细信息

目的研究溴氰菊酯（DM）诱导大鼠脑组织中自由基生成和对转录因子Nrf2的影响。方法（1）8只大鼠随机分成4组，即橄榄油对照组、DM染毒组、叔丁基对苯二酚（tBHQ）组和tBHQ＋DM组。在预先喂饲雄性大鼠tBHQ3d后，用12．50mg／kg DM染毒大鼠5d，用电子自旋共振（ESR）直接法测定海马组织中的自由基。（2）18只雄性大鼠分为3组，分别给予橄榄油及3．13、12．50mg／kg DM连续染毒5d，用Western blot方法测定大脑皮层和海马细胞质或细胞核中Nrf2蛋白水平。结果（1）DM染毒组大鼠与tBHQ＋DM组大鼠海马中自由基水平增高，分别是对照组的2．45倍和2．97倍，差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）低、高剂量DM染毒大鼠大脑皮层的细胞质中Nrf2蛋白表达水平增高，分别是对照组的1．68倍和1．34倍；细胞核中的Nrf2蛋白表达呈剂量-效应关系性增高，分别是对照组的1．51倍和2．29倍，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。（3）低、高剂量DM染毒大鼠海马组织的细胞质Nrf2蛋白表达呈剂量-效应关系性增高，分别是对照组的2．26倍和3．58倍；细胞核中的Nrf2蛋白表达也增高，分别是对照组的2．42倍和2．45倍，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论DM染毒能诱导大鼠海马组织中自由基生成，DM能诱导大脑皮层和海马组织中的Nrf2蛋白表达。

关键词：除虫菊酯类自由基转录因子大脑皮质