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基因CfATG6和CfATG14参与调控果生刺盘孢细胞自噬和致病力

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微生物学报 2024年第4期64卷 1289-1305页

作者：姚权李河中南林业科技大学、南方人工林病虫害防控国家林业和草原局重点实验室、森林有害生物防控湖南省重点实验室、森林生物资源与有害生物综合管理湖南省普通高等学校重点实验室湖南长沙410004

【目的】炭疽病是油茶的主要病害,由刺盘孢属的多种真菌引起,其中果生刺盘孢分布范围最广、分离率最高,是油茶炭疽病的主要致病菌。研究自噬相关蛋白CfAtg6和CfAtg14的生物学功能,为进一步揭示果生刺盘孢通过细胞自噬调控致病的分子机制... 详细信息

【目的】炭疽病是油茶的主要病害,由刺盘孢属的多种真菌引起,其中果生刺盘孢分布范围最广、分离率最高,是油茶炭疽病的主要致病菌。研究自噬相关蛋白CfAtg6和CfAtg14的生物学功能,为进一步揭示果生刺盘孢通过细胞自噬调控致病的分子机制,并为油茶炭疽病的防治提供理论基础。【方法】根据同源重组原理,通过聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)介导的方法,在果生刺盘孢中敲除基因CfATG6和CfATG14,并进一步获得回补菌株ΔCfatg6-C和ΔCfatg14-C。【结果】酵母双杂交试验结果显示,果生刺盘孢蛋白CfAtg6和CfAtg14可能存在互作关系。生物学表型测定结果表明,相较于野生型和回补菌株,突变体ΔCfatg6和ΔCfatg14均表现出营养生长速率显著减慢,附着胞形成率分别只有野生型的5%和18%;突变体ΔCfatg6和ΔCfatg14致病力均极显著减弱,造成的油茶叶片病斑面积少于野生型和回补菌株的1/3;CfATG6和CfATG14基因缺失突变体均丧失转运和降解CfAtg8蛋白的能力,并对细胞壁胁迫更敏感。突变体ΔCfatg6的分生孢子产量显著降低,仅为野生型的20%左右;氧化胁迫试验结果表明,相较于野生型和回补菌株,过氧化氢对突变体的生长抑制率升高10%左右。内质网压力胁迫试验表明,ΔCfatg14对二硫苏糖醇抑制率升高5%以上。【结论】自噬相关基因CfATG6和CfATG14参与调控了果生刺盘孢生长发育、细胞自噬和致病力。

关键词：果生刺盘孢细胞自噬 CfATG6 CfATG14 致病力

油茶果生刺盘孢组蛋白乙酰化转移酶Rtt109生物学功能

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菌物学报 2024年第4期43卷 40-51页

作者：王成玉姚权李河中南林业科技大学、南方人工林病虫害防控国家林业和草原局重点实验室、森林有害生物防控湖南省重点实验室、森林生物资源与有害生物综合管理湖南省普通高等学校重点实验室湖南长沙410004

炭疽病是油茶的主要病害,造成巨大经济损失。果生刺盘孢是油茶炭疽病优势致病菌。本研究旨在探讨果生刺盘孢中组蛋白乙酰化转移酶Rtt109的生物学功能,为油茶炭疽病防治提供理论依据。通过构建基因敲除载体,根据同源重组原理,敲除目标基... 详细信息

炭疽病是油茶的主要病害,造成巨大经济损失。果生刺盘孢是油茶炭疽病优势致病菌。本研究旨在探讨果生刺盘孢中组蛋白乙酰化转移酶Rtt109的生物学功能,为油茶炭疽病防治提供理论依据。通过构建基因敲除载体,根据同源重组原理,敲除目标基因CfRTT109,进一步筛选获得突变体ΔCfrtt109;构建CfRTT109基因回补质粒,转化至突变体ΔCfrtt109,通过荧光筛选回补菌株。生物学表型测定结果显示:相比于野生型,突变体ΔCfrtt109生长速率下降了51.23%,分生孢子的形成率下降了71.89%;在含有5.0mmol/L内质网胁迫剂二硫苏糖醇的PDA培养基中,突变体ΔCfrtt109的生长抑制率为50.75%,显著高于野生型和回补菌株;荧光定量PCR结果表明,与野生型和回补菌株相比,内质网相关的基因HAC1、SCJ1与PDI1基因在突变体中显著上调表达;在含有DNA损伤试剂甲基磺酸甲酯的PDA培养基中,突变体ΔCfrtt109停止生长;进一步研究发现,在甲基磺酸甲酯胁迫下,突变体ΔCfrtt109中的DNA损伤修复基因RHM52、RHM54与REV1表达量上调幅度显著低于野生型;致病力测定结果显示,突变体ΔCfrtt109在油茶叶上形成的病斑面积减小了77.60%,在苹果上减少了89.91%。综上所述,组蛋白乙酰化转移酶CfRtt109参与调控果生刺盘孢营养生长、分生孢子形成、内质网胁迫和DNA损伤胁迫应答以及致病力。

关键词：果生刺盘孢组蛋白乙酰化转移酶生长发育非折叠蛋白反应致病力

果生刺盘孢G蛋白信号调控因子CfRGS4基因的生物学功能

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菌物学报 2024年

作者：胡秋月曹凌雪李河中南林业科技大学南方人工林病虫害防控国家林业和草原局重点实验室森林有害生物防控湖南省重点实验室

果生刺盘孢Colletotrichum fructicola是油茶炭疽病的优势病原菌。研究果生刺盘孢G蛋白信号调节因子CfRGS4基因的生物学功能，为揭示病菌致病机制以及防治油茶炭疽病提供理论依据。构建CfRGS4基因敲除载体片段，利用PEG介导的原生质体... 详细信息

果生刺盘孢Colletotrichum fructicola是油茶炭疽病的优势病原菌。研究果生刺盘孢G蛋白信号调节因子CfRGS4基因的生物学功能，为揭示病菌致病机制以及防治油茶炭疽病提供理论依据。构建CfRGS4基因敲除载体片段，利用PEG介导的原生质体转化和抗性筛选及PCR电泳验证，获得果生刺盘孢CfRGS4基因敲除突变体及回补菌株。对野生型、ΔCfrgs4和ΔCfrgs4-C进行观察，结果表明：相较于野生型，突变体ΔCfrgs4-1和ΔCfrgs4-2在PDA培养基上的生长速率下降了24%和22%，在MM培养基上下降了22%和20%；分生孢子萌发率降低了65%和70%；附着孢形成率降低了24%和17%；在含有400 μg/mL CR的细胞胁迫剂上，突变体ΔCfrgs4-1和ΔCfrgs4-2的生长抑制率为14%和11%；与野生型相比，突变体菌落表现出被水浸润的现象，荧光定量PCR结果显示，突变体ΔCfrgs4中菌丝疏水相关基因CU1和MHP1基因均显著上调表达；在含有200 μg/mL ABTs的PDA平板和PDB培养基中，突变体ΔCfrgs4的胞外漆酶和过氧化物酶活性显著降低；突变体ΔCfrgs4-1和ΔCfrgs4-2在含有2.5 mol/L (30%和31%)和5 mol/L Cu2+(73%和75%)的PDA培养基上的抑制率均显著高于野生型；在致病力测定中，突变体ΔCfrgs4-1和ΔCfrgs4-2在油茶叶片上造成的病斑面积减小了40%和48%，在苹果上造成的病斑面积减小了48%和55%。综上所述，G蛋白信号调控因子CfRGS4基因参与调控果生刺盘孢的生长发育、表面疏水性、附着胞形成、胞外漆酶和过氧化物酶活性、Cu2+耐受性及致病性。

关键词：果生刺盘孢油茶 CfRGS4基因致病力

CfPALH基因参与调控果生刺盘孢应答高pH值胁迫和致病力

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分子植物育种 2024年

作者：田丰张盛培姚权李河中南林业科技大学南方人工林病虫害防控国家林业和草原局重点试验室

果生刺盘孢是南酸枣炭疽病的主要致病菌之一。为探究果生刺盘孢中pH相关基因CfPALH的生物学功能，本研究根据同源重组原理，在果生刺盘孢中敲除目标基因CfPALH，经PCR验证获得正确的突变体ΔCfpalh，并进一步构建pYF11:: CfPALH回补质... 详细信息

果生刺盘孢是南酸枣炭疽病的主要致病菌之一。为探究果生刺盘孢中pH相关基因CfPALH的生物学功能，本研究根据同源重组原理，在果生刺盘孢中敲除目标基因CfPALH，经PCR验证获得正确的突变体ΔCfpalh，并进一步构建pYF11:: CfPALH回补质粒，将其导入突变体原生质体中，筛选成功回补菌株ΔCfpalh-C。对上述菌株进行生物学表型测定的结果显示，相较于WT和回补菌株，突变体ΔCfpalh在CM培养基和MM培养基上营养生长速率分别下降了14%和31%，分生孢子产量仅有WT和回补菌株ΔCfpalh-C的75%，突变体附着胞形成率不到30%。所有试验菌株在pH 5.0的CM培养基上，生长速率均被促进，而ΔCfpalh的生长速率相较于WT和ΔCfpalh-C，增加了5%。在pH为7.0和9.0的条件下，各菌株均出现生长抑制，其中突变体的抑制率远高于WT和回补菌株，且相较于WT和回补菌株，ΔCfpalh在南酸枣叶片上造成的病斑直径显著减少。综上所述，pH相关基因CfPALH参与调控了果生刺盘孢的生长发育、高pH值胁迫响应以及致病力。本研究为进一步阐述果生刺盘孢致病分子机制以及南酸枣炭疽病的防治提供理论基础。

关键词：南酸枣果生刺盘孢 CfPALH 致病力

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基于折纸的被动触发双稳态机器人手

工程设计学报 2024年

作者：李河舟方杰钱武黄龙谢霆聪徐锦涛湖南省送变电工程有限公司长沙理工大学汽车与机械工程学院

传统机器人手通常需要驱动器实现连续地提供保持抓握状态的扭矩或力。若驱动器失效，则机器人手无法稳定地保持抓握状态，即无法稳定的抓取物体。针对传统机器人手需要驱动器实现稳定抓取物体的问题，提出了一种基于折纸的被动触发双稳... 详细信息

传统机器人手通常需要驱动器实现连续地提供保持抓握状态的扭矩或力。若驱动器失效，则机器人手无法稳定地保持抓握状态，即无法稳定的抓取物体。针对传统机器人手需要驱动器实现稳定抓取物体的问题，提出了一种基于折纸的被动触发双稳态机器人手。该机器人手由具有抓握运动的单自由度对称折纸机构和具有双稳态特性的驱动机构组成。在折纸机构和驱动机构运动学建模的基础上，根据抓握状态的要求，给出了机器人手的结构设计过程，通过设置扭转弹簧的刚度参数可对能量壁垒实现高度可调。通过对机器人手样机在三种不同高度进行的跌落捕获实验，跌落高度由低到高，实验结果分别为机器人手样机的抓握运动没有被触发、机器人手样机成功抓握物体以及尽管触发了抓握运动但未能将物体保持在机器人手样机内，验证了该机器人手的双稳态特性和抓握性能。结果表明，基于折纸的被动触发双稳态机器人手能够在无驱动的条件下稳定地抓取特定大小的物体，根据外部冲击大小的不同验证了能量壁垒的存在。所提出的机器人手能够根据特定的抓握任务进行定制，因为它的双稳态性能可以通过调节扭转弹簧的刚度参数来轻松调整。这对于被动式和自适应机器人操作中具有潜在的应用前景。

关键词：机器人手双稳态折纸被动触发

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互动仪式链视域下中文说唱的互动研究

艺术科技 2024年第4期37卷 155-157页

作者：李河上海理工大学出版印刷与艺术设计学院上海200093

目的:2022年7月,爱奇艺的说唱IP在产业化思维的指导下,完成了模式迭代,并成功推出了独家在线综艺节目《中国说唱巅峰对决》。截至2023年7月,该节目累计播放量已达4.1亿。Cool Cloud Interactive的数据显示,在2022年暑期档,《中国说唱巅... 详细信息

目的:2022年7月,爱奇艺的说唱IP在产业化思维的指导下,完成了模式迭代,并成功推出了独家在线综艺节目《中国说唱巅峰对决》。截至2023年7月,该节目累计播放量已达4.1亿。Cool Cloud Interactive的数据显示,在2022年暑期档,《中国说唱巅峰对决》以18.57%的全端播放市场份额夺得冠军。文章探究互动仪式链如何影响中文说唱文化的发展、传承以及互动模式,分析互动对中文说唱文化的意义和功能,以及如何塑造身份认同、社会互动,旨在为中文说唱文化的发展提供理论支持和实践建议。方法:文章在柯林斯的互动仪式链视角下,深入探究《说唱巅峰对决》构建完整互动仪式链的过程。融合深度访谈和网络民族志,形成一套综合的虚拟民族志研究方法,为研究亚文化提供多种视角,为类似说唱节目的发展提供参考。结果:文章基于互动仪式链视角探讨用户的虚拟在场行为。互动仪式扮演桥梁的角色,将集体情感转变为个体情感能量。通过持续的虚拟互动,个体情感能量逐渐累积,从而培养出具有强大凝聚力的群体认同。结论:《中国说唱巅峰对决》是一档专注于说唱音乐的亚文化综艺节目,其成功归功于精心设计的互动仪式链。研究表明,具备互动功能的在线视频平台将独立的个体融合成一个有机整体。在这个网络化的亚文化社群中,用户在虚拟情境下进行节奏感十足的对话,从而产生了更强烈的情感凝聚力和瞬间的集体愉悦感。有效的互动仪式充当了一种媒介,将集体的情感转化为个体的情感能量。在持续的虚拟互动下,个体情感能量不断累积,从而培养出具有高度黏着力的群体认同。

关键词：互动仪式链身份认同中文说唱

超大断面明挖隧道主体结构台车整体式浇筑施工技术研究

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中文科技期刊数据库（全文版）工程技术 2024年第4期 33-37页

作者：李河山中铁隆工程集团有限公司四川成都610045

施工作业台车主要用于在隧道掘进、隧道壁防水和加固过程中。在隧道壁的加固施工中包括初砌和结构钢筋铺设等,根据施工内容不同,通常采用不同的台车,或者能够适应两种或两种以上施工的综合台车。对全断面明挖隧道主体台车整体式浇筑施... 详细信息

施工作业台车主要用于在隧道掘进、隧道壁防水和加固过程中。在隧道壁的加固施工中包括初砌和结构钢筋铺设等,根据施工内容不同,通常采用不同的台车,或者能够适应两种或两种以上施工的综合台车。对全断面明挖隧道主体台车整体式浇筑施工关键技术进行研究可以很好的弥补这一现状,对往后同类型隧道建设具有重要借鉴意义和良好的推广前景。

关键词：隧道浇筑台车

大学生群体在观看网络直播中的付费打赏行为研究

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西部广播电视 2024年第7期45卷 41-45页

作者：李河利成都理工大学传播科学与艺术学院

观看网络直播已经成为年轻人的主要娱乐休闲方式之一。在网络直播中,用户给主播打赏虚拟礼物成为一种主要互动模式。作为无固定收入的大学生也是打赏行为的主要参与群体,其打赏动机、影响因素等方面一直受到学界广泛关注。本文探讨研究... 详细信息

观看网络直播已经成为年轻人的主要娱乐休闲方式之一。在网络直播中,用户给主播打赏虚拟礼物成为一种主要互动模式。作为无固定收入的大学生也是打赏行为的主要参与群体,其打赏动机、影响因素等方面一直受到学界广泛关注。本文探讨研究大学生群体打赏直播行为必要性的同时,分析影响大学生群体观看网络直播时进行付费打赏的主要因素,并结合实际提出相关建议。

关键词：大学生直播经济符号消费准社会互动

共通感“一般”的研究旨趣及其观念史的研究方法

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唐都学刊 2024年第1期40卷 11-17页

作者：李河成陕西师范大学哲学学院西安710119

共通感研究的公共逻辑只有回归到历史生生“一般”的批判中才能消解“普遍”统合的凝固与固化。从语源而论,一般(general)“生生”自证的语文学追溯指向普遍(universal)符合他证的消解。从共通感研究的学术史而言,由普遍统合的本体论到... 详细信息

共通感研究的公共逻辑只有回归到历史生生“一般”的批判中才能消解“普遍”统合的凝固与固化。从语源而论,一般(general)“生生”自证的语文学追溯指向普遍(universal)符合他证的消解。从共通感研究的学术史而言,由普遍统合的本体论到存在论的哲学转向,期待“史”或“事”生生“一般”的哲学提炼。该研究旨趣倒逼向从思想史到观念史研究方法的革新与运用。观念史作为方法体现出历史一般的散点透视且边界分立的包容。共通感“一般”的研究旨趣及其思想史的研究方法是对普遍目的的符合或因果决定论等等知识学的突破。

关键词：共通感一般观念史