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鸡新型干扰素chIFN-λ3a的表达与抗病毒效果评价

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鸡新型干扰素chIFN-λ3a的表达与抗病毒效果评价

作者：李沛恒吉林农业大学

学位级别：硕士

干扰素(Interferon,IFN)是机体在病毒感染时诱导产生的一种细胞因子,在天然免疫中发挥重要作用。目前可分为三类,包括I型干扰素、II型干扰素、III型干扰素。其中III型干扰素(IFNλs)主要在宿主黏膜细胞发挥重要作用。目前在猪、猴、鼠... 详细信息

干扰素(Interferon,IFN)是机体在病毒感染时诱导产生的一种细胞因子,在天然免疫中发挥重要作用。目前可分为三类,包括I型干扰素、II型干扰素、III型干扰素。其中III型干扰素(IFNλs)主要在宿主黏膜细胞发挥重要作用。目前在猪、猴、鼠等许多物种中均发现IFNλs及其亚型,但鸡IFNλs(chIFNλ)报道较少,仅发现了chIFN-λ3。本实验室前期在进行chIFN-λ的研究过程中,发现了一种新的鸡源III型干扰素剪接体chIFN-λ3a。本研究在此基础上,通过瞬时过表达对其活性进行初步验证,利用杆状病毒/昆虫细胞表达系统进行表达和纯化,开展其抗病毒活性研究,以期为chIFN-λ3a的抗病毒机制研究与临床应用奠定坚实基础。具体方法和结果如下:(1)chIFN-λ3a真核质粒构建、表达和抗病毒效果评价基于前期获得的chIFN-λ3a基因,将其亚克隆至真核表达载体pc DNA3.1中,获得重组质粒pc DNA3.1-chIFN-λ3a,同时用同样的方法构建pc DNA3.1-chIFN-λ3作为对照。酶切与测序鉴定正确后,将质粒通过脂质体转染法转染至DF-1细胞中进行表达验证,Western blot检测表明chIFN-λ3a和chIFN-λ3成功表达。在此基础上,利用病毒感染实验分析chIFN-λ3a对VSV-GFP病毒的抑制效果,结果表明,瞬时表达chIFN-λ3a和chIFN-λ3均可以抑制VSV-GFP病毒在DF-1细胞中的增殖。(2)chIFN-λ3a在重组杆状病毒中的表达和鉴定为探究不同杆状病毒表达载体的表达能力,选择三种载体p Fast Bac1、p Fast Bac-Dual、p Fast Bac-DN(为本实验室改造),在chIFN-λ3a基因3’端添加Strep标签后,进行昆虫细胞密码子优化并合成,通过双酶切分别与三种载体连接,获得三种重组穿梭质粒,经蓝白斑筛选后,挑取转座成功的重组杆粒,PCR验证正确后,转染至SF-9细胞中并通过Western blot检测目的蛋白表达。结果表明,三种载体均能成功表达目的蛋白,经不同接毒量和不同时间条件的筛选,p Fast Bac1作为载体目的蛋白表达量最高,因此,确定以该载体作为目的蛋白表达的最佳载体。(3)重组chIFN-λ3a的纯化及抗病毒效果评价以实验(2)确定的最佳载体进行目的蛋白的大量表达,利用Strep亲和层析柱进行纯化,获得chIFN-λ3a,纯度为42%。纯化后的chIFN-λ3a进行干扰素活性测定后,孵育DF-1细胞,12 h后感染VSV-GFP(Vesicular Stomatitis Virus-GFP)病毒(0.01 MOI),通过荧光观察法、流式细胞术、结晶紫染色进行chIFN-λ3a抗病毒活性分析。接种H9N2亚型禽流感病毒(5 MOI)进行抗病毒活性验证。结果显示chIFN-λ3a可抑制VSV-GFP、H9N2亚型禽流感病毒增殖,表明利用重组杆状病毒-昆虫系统成功表达了chIFN-λ3a,且具有抗病毒活性。

关键词： Ⅲ型干扰素 chIFN-λ3a 蛋白纯化 VSV-GFP 抗病毒效果评价

联邦学习场景下带标签噪声的图像分类问题研究

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联邦学习场景下带标签噪声的图像分类问题研究

作者：李沛恒电子科技大学

学位级别：硕士

引信体微小零件多工位连续冷镦成形工艺优化及数值仿真研究

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引信体微小零件多工位连续冷镦成形工艺优化及数值仿真研究

作者：李沛恒重庆理工大学

学位级别：硕士

发火控制系统是引信中最重要的功能系统,具有接收目标背景信息及发射飞行中环境力或直接接收弹药控制系统控制的重要作用,其可靠度要求极高;引信体零件采用的传统挤压或热镦工艺通常需要经过多道加工工序,生产周期长,生产效率低,能源消... 详细信息

发火控制系统是引信中最重要的功能系统,具有接收目标背景信息及发射飞行中环境力或直接接收弹药控制系统控制的重要作用,其可靠度要求极高;引信体零件采用的传统挤压或热镦工艺通常需要经过多道加工工序,生产周期长,生产效率低,能源消耗多,材料利用率低,易受加工误差影响,废品率高,针对引信体微小零件的加工工艺进行研究,对于提高生产效率和产品质量具有重要意义。多工位冷镦加工工艺将传统镦挤工艺与连续模压工艺相结合,是一种无切削或少切削的冷挤压加工工艺,可以实现金属材料的多个工位连续加工,具有高精度、高效率、高质量,高自动化程度的生产特点,同时利用冷作硬化的原理,可将零件强度大幅提升,现已被广泛与应用于各种小型紧固件,异形件的加工中。本文所研究引信体零件个体整体外形复杂,并带有微小齿形结构,成形更为困难,本课题借助Deform-3D有限元成形软件,结合扫描电子显微镜技术以及维氏显微硬度测试系统,优化多工位冷镦工艺方案并对试制的引信体零件样品进行显微组织观察分析及硬度测试,以探索引信体零件冷镦成形的变形规律。本文主要研究成果如下:(1)通过对引信体零件结构的分析,设计两种多工位连续冷镦成形的方案,并根据成形方案设计冷镦模具,用Auto CAD绘制了模具图纸,用UG三维绘图软件建立模具三维模型,将等效模型导入Deform-3D体积成形模拟软件,对不同工位成形情况分别进行成形模拟,以提高研究效率,降低开模试模成本。结合材料变形特性及模拟结果,比较设计两方案中不同工位材料充型情况、材料流速、应力应变分布及模具载荷情况等,最终得出合理的成形方案:(1)镦平(2)一次缩径(3)二次缩径(4)镦球头(5)挤齿,总共五工位。(2)根据模拟仿真结果得出的优化工艺,制作出冷镦模具,投入工厂多工位高速冷镦机进行产品试制,生产效率达到70件/分,生产成本为0.4元/件,所需操作员只需一人,相比原有旧工艺的15件/分,成本2.2元/件大幅提升了生产速度,降低了生产成本。制成的产品表面规整光洁,无飞边、错位、断裂等缺陷,将所制引信体零件检验尺寸,结果质量稳定,零件各处尺寸能保证在公差范围内,符合使用要求,总体合格率在95%以上。(3)对所制样品进行显微分析及硬度测试,验证仿真结果中的应变分布以与实际变形带来的组织变化及性能变化之间的关系,所得引信体显微形貌整体呈现晶粒细化,部分表面呈现明显纤维状结构,零件表面最高硬度可达277HV0.1,整体硬度都在200HV0.1以上,相比坯料原始硬度100HV0.1有了大幅度提升。

关键词：引信体塑性成形冷镦数值模拟有限元分析 DEFORM

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高功率微波介质击穿问题的时域谱元法分析

高功率微波介质击穿问题的时域谱元法分析

作者：李沛恒南京理工大学

学位级别：硕士

近年来无线通信设备逐渐小型化、复杂化,为了实现更大的工作带宽,设备的传输功率不断增大。大功率运行期间的固体和气体介质的击穿对电子设备都是有害的,一旦发生击穿,极有可能导致电子器件的损毁。因此,使用数值方法来模拟高功率微波... 详细信息

近年来无线通信设备逐渐小型化、复杂化,为了实现更大的工作带宽,设备的传输功率不断增大。大功率运行期间的固体和气体介质的击穿对电子设备都是有害的,一旦发生击穿,极有可能导致电子器件的损毁。因此,使用数值方法来模拟高功率微波作用下的击穿问题,具有十分重要的现实意义。论文选用时域谱元法(Spectral Element Time-Domain,简称SETD)作为仿真使用的数值方法。此方法作为时域有限元(FETD)方法的一种特殊形式,将谱方法和有限元相结合,兼具了谱方法的高精度及有限元的灵活性的特点。本文的工作主要概括为两部分:第一部分对高功率微波作用下的非线性电导率介质模型进行了仿真分析。介质的非线性表现在电导率是一个随电场变化的函数,文章采用时域谱元法对耦合非线性电导率的麦克斯韦方程进行推导,将隐式的不动点迭代作为求解此非线性问题的方法,并与蛙跳迭代进行了对比。通过具体算例验证了使用时域谱元法分析此问题的准确性,接着研究了由于非线性现象产生的奇次谐波问题,最后对介质窗口击穿进行了仿真分析。第二部分对高功率微波作用下的气体介质的击穿问题进行了仿真分析。为了准确地模拟这一过程,基于时域谱元法,将麦克斯韦方程和电子流体方程进行耦合求解。首先研究了波导中不同比例的空气和六氟化硫混合气体对击穿的影响,结果表明击穿时间随六氟化硫浓度的增加而延后;接着,将非线性电导率介质与气体击穿相结合,对比分析了高功率微波作用下非线性电导率介质窗对窗内背景气体的击穿产生的影响。

关键词：时域谱元法微波击穿介质击穿气体击穿高功率微波

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《四库全书总目》论书画

四库学 2022年第1期 108-120,169页

作者：李沛恒故宫博物院

经过清代从顺治到乾隆以来对书画著作的搜集整理,书画著作得以大量问世。这为四库修书征集择取书画著作打下了良好的基础。本文即从《四库全书总目》收录书画著作情况、择取书画著作标准、书画观念三方面来看《四库全书总目》论书画。

关键词：《四库全书总目》书画观念

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书画修复简介——以立轴为例

四库学 2019年第1期5卷 129-143页

作者：李沛恒故宫博物院

装裱作为一门技术,其产生的初衷是对书画进行保护。放之现代,对古书画进行装裱,则是对古书画的重要修复手段。立轴装裱在书画装裱中最为常见,且较有特点,本文意在对立轴装裱做一个简单的科普性介绍。

关键词：书画修复书画装裱立轴画

An integer multi-objective optimization model and an enhanced non-dominated sorting genetic algorithm for contraflow scheduling problem

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Journal of Central South University 2015年第6期22卷 2399-2405页

作者：李沛恒楼颖燕 School of Sustainable Engineering and the Built Environment Arizona State University

To determine the onset and duration of contraflow evacuation, a multi-objective optimization(MOO) model is proposed to explicitly consider both the total system evacuation time and the operation cost. A solution algorithm that enhances the popular evolutionary algorithm NSGA-II is proposed to solve the model. The algorithm incorporates preliminary results as prior information and includes a meta-model as an alternative to evaluation by simulation. Numerical analysis of a case study suggests that the proposed formulation and solution algorithm are valid, and the enhanced NSGA-II outperforms the original algorithm in both convergence to the true Pareto-optimal set and solution diversity.

关键词： hurricane evacuation contraflow scheduling multi-objective optimization NSGA-II

养护剂对道床板现浇混凝土收缩开裂性能的影响

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混凝土与水泥制品 2012年第3期 33-36页

作者：谭盐宾李化建易忠来李沛恒中国铁道科学研究院北京100081 高速铁路轨道技术国家重点实验室北京100081

为解决道床板现浇混凝土养护难、易开裂的问题,研究了自制高效养护剂对道床板现浇混凝土的强度、塑性收缩变形和抗裂性的影响。结果表明,采用养护剂养护有利于提高混凝土的抗压强度,其早期(7d)抗压强度高于标准养护下的抗压强度,后期(28... 详细信息

为解决道床板现浇混凝土养护难、易开裂的问题,研究了自制高效养护剂对道床板现浇混凝土的强度、塑性收缩变形和抗裂性的影响。结果表明,采用养护剂养护有利于提高混凝土的抗压强度,其早期(7d)抗压强度高于标准养护下的抗压强度,后期(28d和56d)抗压强度与标准养护下的抗压强度相近,但其7d和28d抗折强度略低于标准养护下的抗折强度。在混凝土浇筑成型后立即喷涂养护剂,可有效降低混凝土塑性收缩。72h后,TJ-A、TJ-B和C型3种养护剂分别降低混凝土塑性收缩率为42%、27%和27%,同时,这3种养护剂养护下的混凝土表面水分蒸发量比自然养护下分别降低了60%、54%、60%。养护剂养护有效地防止了混凝土早期裂缝的产生,提高了混凝土的抗裂性能。

关键词：养护剂道床板现浇混凝土塑性收缩开裂

基础教学改革背景下素描石膏像写生课的再定位

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天津美术学院学报 2024年第1期 15-17页

作者：李沛恒天津美术学院造型基础教育学院

素描是一切造型艺术的基础,素描石膏像写生是造型艺术基础训练的初级课程,经过长期实践证明,这种训练不仅可以提高学生的观察能力、塑造能力、审美能力,还可以培养耐性和转变绘画造型上的思维方式。用素描对西方雕塑作品的石膏像进行写... 详细信息

素描是一切造型艺术的基础,素描石膏像写生是造型艺术基础训练的初级课程,经过长期实践证明,这种训练不仅可以提高学生的观察能力、塑造能力、审美能力,还可以培养耐性和转变绘画造型上的思维方式。用素描对西方雕塑作品的石膏像进行写生训练,在我国一直以来都是美术学院的基础课程。学生们在写生过程中,面对石膏像进行细致的描摹,绘画能力借此可以得到充分的训练,这是美术教学的共识。大部分绘画的基础常识,如比例、透视、解剖,明暗、黑白、质感、整体感、体积感、空间感等等,都可以在素描石膏像写生的过程中被充分地认识。长久以来的课程实践充分证明了素描石膏像写生在美术教学中有重要的作用和意义。

关键词：绘画造型石膏像美术教学写生训练美术学院课程实践绘画能力整体感