检索结果-南通市图书馆

小干扰RNA预防兔激素性股骨头坏死的组织病理学观察

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2016年第7期33卷 1747-1749页

作者：马源张善锋刘鸣李劲峰王义生李月白赵国强郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 450052 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学系 450001 郑州大学基础医学院微生物与免疫学系 450001

目的观察靶向过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）基因小干扰RNA预防兔激素性股骨头坏死（ONFH）的组织病理学变化。方法将48只兔随机分为4组。股骨头坏死模型组（M）：给予地塞米松20mg／kg，连续肌肉注射3d。干扰组（S）：同样给... 详细信息

目的观察靶向过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）基因小干扰RNA预防兔激素性股骨头坏死（ONFH）的组织病理学变化。方法将48只兔随机分为4组。股骨头坏死模型组（M）：给予地塞米松20mg／kg，连续肌肉注射3d。干扰组（S）：同样给予地塞米松，并于实验1、3、6周给予siRNA腺病毒滴液25山注入一侧股骨头内。无关序列组（Con）：同样给予地塞米松，注入兔股骨头内无关序列siRNA病毒滴液。正常组（N）：无特殊处理。实验第4、8周末分批处死兔，观察兔股骨头组织病理学改变。结果实验8周时，干扰组、模型组、无关序列组、正常组中，最大脂肪细胞平均直径分别为（41．21±2．33）、（49．61±1．13）、（49．22±2．18）、（40．94±2．09）μm；骨小梁面积分数分别为（40．93±1．96）、（31．51±4．26）、（30．79±1．85）、（41．64±2．34）％；空骨陷窝计数分别为（12．07±1．38）、（21．54±1．38）、（21．76±1．46）、（11．67±1．28）％。模型组和无关序列组中发生明显的早期ONFH组织病理学变化，股骨头软骨下骨区造血组织大大减少、骨髓坏死、脂肪细胞增殖肥大、平均直径明显增大、骨小梁变细稀疏或断裂、骨小梁面积分数明显降低、空骨陷窝显著增多。而正常组中无这些病理学改变（P〈0．05）。干扰组股骨头病理学改变较少，接近于正常组（P〉0．05），与模型组和无关序列组之间的差异均有统计学意义（P〈0．05）。模型组、无关序列组中ONFH发生率为83％、83％，干扰组、正常组中为33％、0％（P〈0．05）。结论靶向PPARγ基因小干扰RNA能够有效阻止激素导致兔ONFH的组织病理学改变，预防激素性ONFH的发生。

关键词：小干扰RNA 激素股骨头坏死组织病理学

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

采用骨内液氮冷冻法制作兔股骨头坏死模型

中华实验外科杂志 2017年第3期34卷 524-526页

作者：王海涛王义生王秀利刘鸣李劲峰李月白河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室郑州大学第一附属医院骨科 450052 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学系 450001

目的采用骨内液氮冷冻法制作家兔股骨头坏死模型.方法取18只新西兰大白兔,随机选择兔一侧股骨头,采用股骨头骨内液氮冷冻法制作兔股骨头坏死模型,另一侧作为正常对照,于术后2、4、8周行大体观察和放射学、组织病理学观察.结果正常对... 详细信息

目的采用骨内液氮冷冻法制作家兔股骨头坏死模型.方法取18只新西兰大白兔,随机选择兔一侧股骨头,采用股骨头骨内液氮冷冻法制作兔股骨头坏死模型,另一侧作为正常对照,于术后2、4、8周行大体观察和放射学、组织病理学观察.结果正常对照侧的股骨头无异常变化,空骨陷窝计数为（11.02±1.56）%.实验侧：X线片显示,造模2周股骨头密度增高,4周时出现囊性变和骨密度增高,8周时股骨头内骨密度不均,2个股骨头负重区轻度塌陷.组织病理学结果：造模2周,造血组织明显减少,出现骨小梁坏死,骨髓坏死灶,空骨陷窝明显增多[（73.33±7.21）%].4周时,骨小梁变细、排列紊乱,空骨陷窝显著增多[（81.52±7.35）%],出现纤维组织.8周时,股骨头内坏死范围大,骨小梁明显变细、稀疏、断裂,排列紊乱,可见大量空骨陷窝[（88.13±8.12）%].坏死区可见部分增生结缔组织,坏死区外围出现修复反应,股骨头软骨面无剥脱.全部实验侧出现了股骨头坏死,2、4、8周时空骨陷窝计数均显著高于正常侧（t2周=12.168,P2周=0.007;t4周=13.048,P4周=0.006;t8周=13.048,P8周=0.006）.结论骨内液氮冷冻法制作兔股骨头坏死模型简便、易行,可模拟临床早期股骨头坏死,适合于标准化的治疗研究.

关键词：液氮冷冻股骨头坏死模型,动物兔

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

葛根素预防酒精性股骨头坏死的初步实验研究

中原医刊 2006年第7期33卷 17-19页

作者：刘沛霖李月白王义生郑州大学第一附属医院骨科郑州450052 郑州大学基础医学院生物化学教研究室

目的为了预防酒精性骨坏死,从动物实验角度观察葛根素对预防酒精性股骨头坏死的作用。方法昆明小白鼠300只,随机分为三组:A模型组(烈性白酒0.4m l/d,肌肉注射生理盐水0.2m l/d);B实验组(烈性白酒0.4m l/d,肌肉注射葛根素注射液0.2m l/d... 详细信息

目的为了预防酒精性骨坏死,从动物实验角度观察葛根素对预防酒精性股骨头坏死的作用。方法昆明小白鼠300只,随机分为三组:A模型组(烈性白酒0.4m l/d,肌肉注射生理盐水0.2m l/d);B实验组(烈性白酒0.4m l/d,肌肉注射葛根素注射液0.2m l/d);C对照组(10%葡萄糖0.3m l/d,肌肉注射生理盐水0.2m l/d)。于实验第4、6、8、10个月分批处死动物,取其股骨头及肝脏,观察组织学变化,同时取血清测定甘油三酯和总胆固醇。结果从第6个月起,模型组肝脏及股骨头脂肪浸润,股骨头骨髓内出现脂肪物质增多、脂肪细胞增大(P0.05)。结论葛根素能够抑制酒精性股骨头坏死的发生,并能够预防骨坏死。

关键词：葛根素预防酒精骨坏死酒精性股骨头坏死

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

丙二醛对小鼠淋巴细胞的抑制作用

河南医科大学学报 1995年第4期30卷 370-373页

作者：杨尚琪李月白李良晨油书恒苗健河南省医学科学研究所肿瘤免疫室郑州450052 河南医科大学生物化学教研室郑州450052

体内外实验观察脂质过氧化的终产物丙二醛对小鼠脾淋巴细胞活性和功能的影响。结果表明，丙二醛可明显抑制鼠自身混合淋巴细胞反应，并抑制刀豆素Ａ（ＣｏｎＡ）和细菌脂多糖（ＬＰＳ）分别诱导的Ｔ、Ｂ淋巴细胞增殖，对Ｔ细胞作用更... 详细信息

体内外实验观察脂质过氧化的终产物丙二醛对小鼠脾淋巴细胞活性和功能的影响。结果表明，丙二醛可明显抑制鼠自身混合淋巴细胞反应，并抑制刀豆素Ａ（ＣｏｎＡ）和细菌脂多糖（ＬＰＳ）分别诱导的Ｔ、Ｂ淋巴细胞增殖，对Ｔ细胞作用更明显，此抑制作用发生在有丝分裂原激活淋巴细胞之后。提示：脂质过氧化产物参与了对机体淋巴细胞的损伤过程；为阐明由丙二醛造成的免疫抑制的过氧化机理提供部分实验依据。

关键词：丙二醛淋巴细胞增殖抑制作用小鼠淋巴细胞

沉默过氧化物酶体增殖子活化受体γ表达降钙素基因相关肽基因重组载体的构建与鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2014年第1期31卷 142-145页

作者：王义生李宁博李劲峰施佳辰孙俊魁李月白赵国强郑州大学第一附属医院骨科郑州大学骨科研究所河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 450052 郑州大学基础医学院郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室微生物免疫教研室

目的构建与鉴定沉默过氧化物酶体增殖子活化受体γ（PPARγ）同时表达降钙素基因相关肽（CGRP）基因重组载体.方法选用pGFP-V-RS载体,将PPARγ小干扰RNA（siRNA）寡核苷酸靶序列连接入pGFP-V-RS载体,酶切鉴定及测序正确后得到重组载体... 详细信息

目的构建与鉴定沉默过氧化物酶体增殖子活化受体γ（PPARγ）同时表达降钙素基因相关肽（CGRP）基因重组载体.方法选用pGFP-V-RS载体,将PPARγ小干扰RNA（siRNA）寡核苷酸靶序列连接入pGFP-V-RS载体,酶切鉴定及测序正确后得到重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ;将CGRP片段与Mlu Ⅰ酶切,并与末端羟基化的线性质粒pGFP-V-RS重组连接,得到重组载体pGFP-V-RS-exCGRP.将获取的CGRP基因片段连接入线性化重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ,酶切鉴定及测序正确后得到重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP.收集第3代HEK-293细胞,将细胞分为4组：CON组：转染空载体pGFP-V-RS质粒,作为对照；SI组：转染重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ质粒；EX组：转染重组pGFP-V-RS-exCGRP质粒；DOU组：转染重组双基因载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP质粒.每组电极杯中加入5x106个细胞,并分别加入上述质粒2.5μl,给予直流电低压脉冲1次,时间15 ms.培养48 h后收集各组细胞,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）与Western blot检测细胞内PPAR、CGRP mRNA及蛋白的表达.结果重组双基因载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP经酶切鉴定及测序结果与设计完全一致.电转染HEK-293细胞后,DOU组细胞PPARγ基因呈低表达,PPARγmRNA与其蛋白的相对表达量为0.036±0.003、0.108 ±0.031,与EX组（0.156±0.014、0.778±0.103）及CON组（0.148±0.014、0.742 ±0.143）比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,与SI组（0.054±0.005、0.135 ±0.039）比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.DOU组细胞CGRP基因呈高表达,CGRP mRNA与其蛋白的相对表达量为1.144±0.106、1.244±0.184,与SI组（0.320±0.030、0.370±0.089）及CON组（0.444 ±0.041、0.274±0.062）比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,与EX组（1.021 ±0.095、1.221±0.181）比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论成功构建出沉默PPARγ基因并表达CGRP基因的重组载体pGFP-V-RS-siPPARγ-exCGRP,能够有效阻断PPARγ基因表达,同时促进CGRP基因表达.

关键词： RNA干扰过氧化物酶体增殖子活化受体-γ 降钙素基因相关肽重组载体

大豆苷元激活过氧化物酶体增殖子激活受体γ通路抑制人骨肉瘤MG63细胞的侵袭和迁移

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2015年第7期32卷 1563-1565页

作者：关红亚张海风宋石李洁李欣洁李月白王义生郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 450001 郑州大学第一附属医院骨科

目的观察植物雌激素大豆苷元（DAI）通过激活过氧化物酶体增殖子激活受体（PPAR）γ通路对人骨肉瘤MG63细胞侵袭迁移的影响.方法将人骨肉瘤MG63细胞分为对照组和浓度20、40、80 μmol/L的DAI处理组,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力... 详细信息

目的观察植物雌激素大豆苷元（DAI）通过激活过氧化物酶体增殖子激活受体（PPAR）γ通路对人骨肉瘤MG63细胞侵袭迁移的影响.方法将人骨肉瘤MG63细胞分为对照组和浓度20、40、80 μmol/L的DAI处理组,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,定量聚合酶链反应（qPCR）检测PPARγ mRNA表达,免疫细胞化学检测抑癌基因第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（PTEN）和基质金属蛋白酶（MMP）-9的蛋白表达水平.结果 Transwel实验结果显示,20、40、80 μmol/L的DAI处理组细胞侵袭个数分别为（34.15±3.71）、（21.28 ±0.94）和（16.73 ±1.10）个,显著低于对照组的（38.92 ±2.85）个（P＜0.01）;划痕实验结果显示,DAI各处理组细胞迁移能力较对照组均有所下降,且随DAI浓度增大其作用增强,80 μmol/L组作用最明显;qPCR结果显示,各浓度DAI处理组细胞PPARγ mRNA表达较对照组均升高（P＜0.01）,且随干预浓度增加而增强;免疫细胞化学检测显示,不同浓度DAI处理组细胞,PTEN表达均升高,MMP-9表达均下降（P＜0.01）.结论 DAI激活PPARγ,上调PTEN的表达,下调MMP-9表达,抑制人骨肉瘤MG63细胞的侵袭和迁移.

关键词：大豆苷元骨肉瘤侵袭迁移

微小RNA-329通过调控E2F1对人骨肉瘤U-20S细胞增殖及分化的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2017年第2期34卷 271-273页

作者：李成梅英武吴留源关红亚谷晨熙李月白王义生郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 450052 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学系 450001

目的观察微小RNA（miRNA，miR）-329通过调控E2F1对人骨肉瘤U-2OS细胞增殖及分化的影响。方法体外培养骨肉瘤细胞株U-2OS和人成骨细胞hFOB1.19。人骨肉瘤细胞株U-2OS随机分为3组：空白组（Blank）：细胞仅转染入试剂脂质体；阴性对照组... 详细信息

目的观察微小RNA（miRNA，miR）-329通过调控E2F1对人骨肉瘤U-2OS细胞增殖及分化的影响。方法体外培养骨肉瘤细胞株U-2OS和人成骨细胞hFOB1.19。人骨肉瘤细胞株U-2OS随机分为3组：空白组（Blank）：细胞仅转染入试剂脂质体；阴性对照组（NC）：细胞转染无关序列；miR-329组：细胞转染miR-329。实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测人骨肉瘤U-2OS细胞和人成骨细胞hFOB1.19中miR-329和E2F1 mRNA表达。细胞计数试剂盒（CCK-8）检测3组人骨肉瘤U-2OS细胞在48、72、96 h的增殖水平。转染48 h后收集细胞，采用Western blot法检测3组人骨肉瘤U-2OS细胞中E2F1和核心结合蛋白因子2（Runχ2）、骨桥蛋白（OPN）、维甲酸α受体（RARα）蛋白的表达。结果miR-329和E2F1 mRNA在人骨肉瘤U-2OS细胞、人成骨细胞中的表达水平分别为0.736±0.013、1.215±0.026和1.329±0.015、0.894±0.017，人骨肉瘤细胞中miR-329 mRNA表达水平明显低于人成骨细胞（P＝0.008），E2F1 mRNA表达水平明显高于人成骨细胞（P＝0.003）。细胞转染后，Blank组、NC组和miR-329组在48、72、96 h细胞增殖水平分别为2.635±0.214、2.584±0.107和1.319±0.135，2.912±0.152、2.826±0.165和1.136±0.214，3.109±0.143、3.095±0.129和1.153±0.172，miR-329组人骨肉瘤细胞的增殖水平明显低于空白组和阴性对照组，且随时间延长其抑制人骨肉瘤细胞增殖的作用逐渐增强，差异均有统计学意义（F组间＝4.351，P＝0.036；F时间＝2.366，P＝0.043）。miR-329组E2F1的蛋白表达量明显低于空白组和阴性对照组，Runχ2、OPN、RARα蛋白表达量明显高于空白组和阴性对照组，差异有统计学意义（F组间＝9.037，P＝0.025；F组内＝7.779，P＝0.028）。结论miR-329能够通过下调E2F1表达抑制人骨肉瘤U-2OS细胞的增殖，并促进其成骨分化。

关键词：微小RNA-329 E2F1 骨肉瘤增殖分化

神经肽基因转染干细胞联合骨移植治疗兔股骨头坏死的生物力学变化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验外科杂志 2016年第12期33卷 2731-2733页

作者：王义生李劲峰王亚寒王秀利荆凯李月白郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 450052 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学系 450001

目的观察人降钙素基因相关肽α（hCGRPα）转染骨髓间充质干细胞（BMSCs）联合自体骨移植治疗模型兔股骨头坏死（ONFH）的生物力学变化。方法采用液氮冷冻法成功制作出家兔股骨头坏死动物模型。将48只ONFH模型动物随机分为3组。hCGRPα... 详细信息

目的观察人降钙素基因相关肽α（hCGRPα）转染骨髓间充质干细胞（BMSCs）联合自体骨移植治疗模型兔股骨头坏死（ONFH）的生物力学变化。方法采用液氮冷冻法成功制作出家兔股骨头坏死动物模型。将48只ONFH模型动物随机分为3组。hCGRPα基因转染BMSCs组（A组）：将hCGRPα基因转染BMSCs联合自体骨移植于股骨头内。BMSCs组（B组）：植入BMSCs（空质粒）联合自体骨移植。无关序列组（c组）：植入干细胞为无关基因BMSCs并联合自体骨移植。于实验第3、6个月末分批处死兔，观察兔股骨头的生物力学变化。结果治疗术后3个月时，A、B、C组中手术治疗侧股骨头软骨下骨的最大压缩强度与弹性模量分别为（29．13±1．95）与（59．61±2．18）、（24．63±1．35）与（48．87±2．15）、（25．05±1．34）与（50．13±2．28）mPa，股骨头松质骨的最大压缩强度与弹性模量分别为（16．41±1．13）与（24．11±2．32）、（11．43±1．55）与（17．63±2．45）、（12．51±1．85）与（18．22±2．32）mPa，A组均高于B、C组（P〈0．05）。A组的股骨头生物力学强度恢复最好，与正常侧比较差异无统计学意义（P〉0．05），而B、C组与正常侧比较差异有统计学意义（P〈0．05）。术后6个月时，B、C组与A组股骨头生物力学数据恢复水平趋于相同，组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论hCGRPα转染BMSCs联合自体骨移植治疗模型兔股骨头坏死，能够显著促进成骨和骨组织重建，有效恢复股骨头的正常生物力学性能。

关键词：降钙素基因相关肽骨髓间充质干细胞骨移植股骨头坏死生物力学兔

人骨肉瘤中P27和cyclinE蛋白的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国骨肿瘤骨病 2004年第2期3卷 125-128页

作者：王义生李月白张岩许建中殷力卢中道郑州大学第一附属医院骨科 450052 郑州大学基础医学院生化教研室

目的探讨P27和cyclinE蛋白在人骨肉瘤中的表达及其在骨肉瘤发生、发展中的作用。方法采用免疫组化S-P法检测30例骨肉瘤和10例骨软骨瘤中P27和cyclinE蛋白的表达。结果在骨肉瘤和骨软骨瘤两组中的P27蛋白阳性表达率分别为33.3％和80.0... 详细信息

目的探讨P27和cyclinE蛋白在人骨肉瘤中的表达及其在骨肉瘤发生、发展中的作用。方法采用免疫组化S-P法检测30例骨肉瘤和10例骨软骨瘤中P27和cyclinE蛋白的表达。结果在骨肉瘤和骨软骨瘤两组中的P27蛋白阳性表达率分别为33.3％和80.0％,两者差异显著(P<0.05)。而且,两组中P27蛋白表达强度的差异有显著性(P<0.05)。在骨肉瘤和骨软骨瘤两组中的cyclinE蛋白阳性表达率分别为93.3％和30.0％,两者差异显著(P<0.05)。两组中cyclinE蛋白表达强度的差异有显著性(P<0.05)。在骨肉瘤中P27和cyclinE蛋白的表达强度呈显著负相关(r_s=-0.432,P<0.05)。结论 P27蛋白在骨肉瘤中低表达,cyclinE蛋白在骨肉瘤中高表达,两者有相关性,均与骨肉瘤发生、发展有关。

关键词：人骨肉瘤 P27 cyclinE蛋白基因表达肿瘤免疫组化