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猪链球菌deoR基因缺失株的构建和生物学特性的研究

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猪链球菌deoR基因缺失株的构建和生物学特性的研究

作者：李曼歌安徽农业大学

学位级别：硕士

猪链球菌病(Streptococcus suis)是一种重要的动物传染病,它给全球养猪业带来了巨大的经济损失,同时还给人类的生命安全造成了极大的威胁。猪链球菌在感染宿主的过程中,可以根据宿主多变的体内环境来调节相关基因的表达,从而提高其在宿... 详细信息

猪链球菌病(Streptococcus suis)是一种重要的动物传染病,它给全球养猪业带来了巨大的经济损失,同时还给人类的生命安全造成了极大的威胁。猪链球菌在感染宿主的过程中,可以根据宿主多变的体内环境来调节相关基因的表达,从而提高其在宿主体内定殖的能力。其中,细菌应对动态环境的一个重要机制就是转录调控因子。DeoR(Deoxyribonucleoside operon Repressor)蛋白家族是一种调控因子,其存在于很多细菌体内。鉴于DeoR调控因子对其他细菌的调控功能,预测它可能对猪链球菌的糖代谢以及致病性有一定的调控作用。但目前关于猪链球菌DeoR的调控机制鲜有报道,因此研究其在猪链球菌体内的调控作用具有重要的意义。具体研究内容如下:1.猪链球菌的分离鉴定、毒力基因以及耐药性分析本研究采集临床发病猪的心包积液,无菌接种于5%的兔血平板,对疑似菌落进行纯化培养、革兰氏染色镜检、菌液PCR鉴定、16S r RNA测序鉴定、药敏试验、血清型鉴定和毒力基因鉴定。结果显示,我们成功分离猪链球菌2型菌株,命名为SS21-1。该分离株具有gapdh+/orf2+/fbps+/mrp+/sly/epf+6个毒力基因。药敏试验表明该菌株对头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟、氧氟沙星、诺氟沙星、四环素、氨苄西林、青霉素、庆大霉素敏感;对林可霉素、卡那霉素、红霉素耐药。16S r RNA序列结果分析显示,该菌株与Gen Bank中的菌株P1/7、05ZYH33、98HAH33同源性较高且属于同一个进化分支Ⅰ群。2、猪链球菌2型deoR基因的生物学信息分析由于deoR基因在SS中广泛存在并高度保守,因此运用相关生物分子信息学网站对该菌转录调控因子DeoR进行蛋白序列同源性检索、功能结构域检索、信号肽预测和跨膜区预测。结果显示,deoR基因编码247个氨基酸,分子量为27.9 k Da;N-末端具有螺旋-转角-螺旋(helix-turn-helix,HTH)基序的小DNA结合结构域。DeoR蛋白可能在细胞质中,无跨膜区,不编码信号肽;DeoR家族转录蛋白的等电点(pl)为6.24。3、猪链球菌deoR基因缺失株的构建以及生物学特性的研究本研究进一步以SS21-1为研究对象,通过用同源重组技术成功构建deoR基因缺失株SS21-1△deoR。随后对缺失株的生物学特性及对小鼠的致病性与亲本株进行了比较。结果显示,缺失株与野生株的菌落形态和溶血特性差异不显著;缺失株在对数期生长速率高于野生株,在稳定期低于野生株;野生株与缺失株对糖的利用率试验中,两菌株均可在葡萄糖、蔗糖以及棉子糖中生长,在葡萄糖和棉子糖作为唯一糖原的情况下,缺失株的生长速率降低,两菌株的OD差异不显著,在蔗糖作为唯一糖原的情况下,缺失株的生长速率以及OD显著下降;野生株对多西环素中度敏感,缺失型对多西环素敏感;缺失株的致病性高于野生株;缺失株的抗吞噬能力、全血存活率、在小鼠体内的定殖能力均优于野生型。因此,deoR基因既可以调控糖代谢,也可以增强细菌在血液以及组织器官中的存活能力,进而增强链球菌2型对小鼠的感染能力。此外,deoR基因的缺失可以让RAW264.7细胞更难清除猪链球菌2型,这也进一步佐证deoR基因可以调控猪链球菌2型相关毒力基因,从而调控其致病性。综上,本试验首先分离并鉴定一株猪链球菌2型菌株SS21-1,通过对该菌deoR基因的生物学信息分析及其缺失株的构建,进一步明确deoR基因对猪链球菌的糖代谢以及致病性相关毒力基因存在一定程度的调控作用。上述研究结果为深入探索猪链球菌2型的致病机制奠定了理论基础。

关键词：猪链球菌2型 deoR基因毒力缺失菌株生物学特性

从研究到发表的在线学习教程此BMJ教程旨在培育可信赖、可发表、可应用的健康研究能力

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英国医学杂志中文版 2016年第6期19卷 305-306页

作者： Trish Groves 李红侠李曼歌 The BMJ London UK 美国约翰霍普金斯大学医学院美国印第安纳大学癌症中心

“对那些采用错误研究技术（无论是有意或出于无知）、对正确技术使用不当、曲解研究结果、有选择性的报告研究结果、有选择性的引用参考文献，以及做出毫无根据结论的研究人员，我们应做何感想？我们感到震惊。

关键词：电子学习出版线学习教程健康研究能力

统计学显示食用益生菌酸奶能促进儿童身体健康，但可能无临床相关意义

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英国医学杂志中文版 2016年第4期19卷 231-232页

作者：李红侠李曼歌约翰霍普金斯大学医学院印第安纳大学癌症中心

前言益生菌、益生元，以及两者的混合物（合生元或称合生素）由于其免疫调剂功效故对身体健康有潜在益处。在医药公司能确定适应证之前，这些功效必须通过临床试验加以证实。本文评论的文章报道了一项临床研究，旨在评估儿童每日食用... 详细信息

前言益生菌、益生元，以及两者的混合物（合生元或称合生素）由于其免疫调剂功效故对身体健康有潜在益处。在医药公司能确定适应证之前，这些功效必须通过临床试验加以证实。本文评论的文章报道了一项临床研究，旨在评估儿童每日食用合成元酸奶对身体健康的益处。

关键词：儿童健康合生元统计消费酸奶临床

在基金项目组织管理中更好地实施科研管理职能

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生命科学 1998年第4期10卷 198-199页

作者：吕立宁张凤珠赵爱芳王春景宋光欣李曼歌杨善蓉中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院科研处北京100005

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天眼之父南仁东

诗刊 2019年第13期 78-78页

作者：李曼歌不详

窥天探奥觅蝉鸣,一事关情廿载倾。每向无垠穷万象,还从射电辨千声。山中岁月黔南度,地外文明禹甸呈。含笑回眸成永忆,夜空新烁有恒星。

关键词：天眼之父南仁东李曼歌诗歌

国家关键领域科技领军人才成长的田野研究:以核能领域为例

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高等工程教育研究 2025年第1期 11-18页

作者：李曼丽杨芊芊清华大学清华大学教育研究院

工程实践创新力是培养卓越工程师之肯綮，工程实践性知识则是工程实践能力的根基。研究以清华大学核研院为个案，综合应用深度访谈法、实地观察法、档案法等，基于工程实践性知识的生成机理，深入剖析国家关键领域科技领军人才的成长规... 详细信息

工程实践创新力是培养卓越工程师之肯綮，工程实践性知识则是工程实践能力的根基。研究以清华大学核研院为个案，综合应用深度访谈法、实地观察法、档案法等，基于工程实践性知识的生成机理，深入剖析国家关键领域科技领军人才的成长规律。通过总结不同阶段的核人才持有和运用工程实践性知识的方式与关键特征，研究提出核人才成长路径——EIIS模型。在新手阶段，通过接受部分被外化的工程实践性知识，形成基本的工程认知图式；在熟手阶段，在以“传帮带”为核心的学徒制中，通过内化模式获得即时性实践智慧；在专家阶段，在牵头负责大型工程科研项目中，通过整合模式逐渐发展出适应性专长；在领军阶段，不断积累的实践性知识获得从经验到理论、从技艺到信念、从操作层面到战略层面的深化和拓展，并集中表征为工程实践创新能力。

关键词：核能领域科技领军人才拔尖创新人才工程实践性知识人才成长规律

复杂区域疼痛综合征儿科复杂区域疼痛综合征需早期识别和多学科综合治疗

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英国医学杂志中文版 2015年第12期18卷 747-747页

作者：李红侠李曼歌约翰霍普金斯大学医学院印第安纳大学癌症中心

复杂区域疼痛综合征在儿童和青少年中经常容易被忽视，导致合理治疗的长期延误。造成这种情况的原因可能有两种：一是有些临床医生对此病症缺乏足够的了解；

关键词：复杂区域早期识别综合征多学科疼痛管理儿科

基于土壤重金属污染和累积性评价的耕地环境质量类别划分与风险管控

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生态环境学报 2025年

作者：张传华刘力代杰李曼曼张凤太邓凌重庆理工大学管理学院中国农工民主党重庆市江津区工作委员会重庆社会主义学院

以重庆彭水县大同镇为例，协同采集土壤-玉米样品50套，分析土壤及玉米样品中Cd、Hg、As、Pb和Cr的含量及土壤pH，综合考虑土壤重金属污染及累积性，开展耕地土壤环境质量类别划分，提出风险管控措施建议，以期为地质高背景区耕地土壤... 详细信息

以重庆彭水县大同镇为例，协同采集土壤-玉米样品50套，分析土壤及玉米样品中Cd、Hg、As、Pb和Cr的含量及土壤pH，综合考虑土壤重金属污染及累积性，开展耕地土壤环境质量类别划分，提出风险管控措施建议，以期为地质高背景区耕地土壤风险管控提供技术方法。结果表明，研究区耕地土壤以安全利用类和严格管控类为主，土壤存在明显重金属累积的点位占比为22%，主要的超标及累积因子为Cd和As，土壤重金属污染及累积问题显著。研究区耕地土壤环境质量类别以III类（安全利用类，无明显累积）为主，IV类（安全利用类，有明显累积）和VI类（严格管控类，无明显累积）耕地均分布在研究区西南部。研究区耕地土壤重金属超标整体受地质背景的影响，重金属累积主要与城镇生活污水、禽畜粪肥和部分复合肥施用等人为活动有关，由于外源输入，部分耕地土壤超标程度加剧趋势明显。研究区玉米样品的总体超标率为28%，超标因子为Cd。当土壤pH>6.5时，农产品超标风险显著降低。建议在耕地土壤重金属溯源断源的基础上，根据土壤及农产品污染程度，施用钙质土壤调理剂或钙镁磷肥进行土壤酸化治理，实现“边生产，边修复”，逐渐改善研究区土壤环境质量状况。

关键词：耕地重金属污染累积性评价环境质量类别划分

多智能体协同研究进展综述:博弈和控制交叉视角

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自动化学报 2025年

作者：秦家虎马麒超李曼张聪付维明刘轻尘郑卫新中国科学技术大学自动化系澳大利亚西悉尼大学计算机学院数据与数学科学系

多智能体协同应用广泛,并被列为新一代人工智能基础理论亟待突破的重要内容之一,对其开展研究具有鲜明的科学价值和工程意义.随着人工智能技术的进步,单一控制视角下的多智能体协同已无法满足执行大规模复杂任务的需求,融合博弈与控制... 详细信息

多智能体协同应用广泛,并被列为新一代人工智能基础理论亟待突破的重要内容之一,对其开展研究具有鲜明的科学价值和工程意义.随着人工智能技术的进步,单一控制视角下的多智能体协同已无法满足执行大规模复杂任务的需求,融合博弈与控制的多智能体协同应运而生.在这一框架下,多智能体协同具有更高的灵活性、适应性和扩展性,为多智能体系统的发展带来了更多可能性.本文首先从协同角度入手,回顾了多智能体协同控制与估计领域的进展.接着,围绕博弈与控制的融合,介绍了博弈框架的基本概念,重点讨论了在微分博弈下多智能体协同问题的建模与分析,并简要总结了如何应用强化学习算法求解博弈均衡.文章选取多移动机器人导航和电动汽车充电调度这两个典型的多智能体协同场景,介绍了博弈与控制融合的思想如何用于解决相关领域的难点问题.最后,对博弈与控制融合框架下的多智能体协同进行了总结和展望.

关键词：多智能体系统协同控制博弈优化应用