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乳腺癌血清标志物的TMT标记定量蛋白质组学筛选及分析

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第二军医大学学报 2017年第5期38卷 622-627页

作者：李曦洲方敏盛湲于恩达第二军医大学长海医院普外科上海200433

目的探讨乳腺癌患者血清中蛋白的表达变化,筛选并分析乳腺癌诊断的生物学标志物。方法采用定量蛋白质组学串联质量标签(TMT)标记技术对68例Ⅱ期乳腺癌患者及62例健康女性的血清蛋白进行检测,并进行蛋白质定量分析,筛选乳腺癌患者血清中... 详细信息

目的探讨乳腺癌患者血清中蛋白的表达变化,筛选并分析乳腺癌诊断的生物学标志物。方法采用定量蛋白质组学串联质量标签(TMT)标记技术对68例Ⅱ期乳腺癌患者及62例健康女性的血清蛋白进行检测,并进行蛋白质定量分析,筛选乳腺癌患者血清中发生显著变化的差异蛋白。利用Uni Prot数据库和Proteome Discoverer软件及在线工具STRING对差异蛋白进一步行生物信息学分析,应用蛋白质印迹法和q PCR对变化倍数显著的差异蛋白VIME(上调为健康对照女性的3.918倍)和RAF1(下调为健康对照女性的0.251)进行验证。结果共获得67种差异蛋白,其中26种表达上调,41种表达下调。基因本体论(GO)注释分析和功能聚类分析显示上述差异蛋白与肿瘤的血管生成、新陈代谢进程、生物黏附能力等相关。蛋白质印迹法和q PCR验证结果显示RAF1蛋白和mRNA在Ⅱ期乳腺癌患者血清中的表达水平均低于健康对照女性,而VIME蛋白和mRNA的表达均高于健康对照女性,与筛选结果一致。结论定量蛋白质组学TMT法能有效筛选Ⅱ期乳腺癌患者血清中的差异蛋白,其中VIME和RAF1蛋白有望成为乳腺癌淋巴结转移的候选血清标志物。

关键词：乳腺肿瘤蛋白质组学串联质量标签生物学肿瘤标志物

围绝经期ER/PR+HER2-浸润性乳腺癌的临床病理特征及预后分析

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第二军医大学学报 2021年第5期42卷 475-482页

作者：谢轶群李曦洲李莉李恒宇上海交通大学医学院附属第九人民医院黄浦分院乳腺外科上海200011 海军军医大学(第二军医大学)长海医院普通外科上海200433

目的探讨围绝经期雌激素受体(ER)和/或孕激素受体(PR)阳性及人类表皮生长因子受体2(HER2)阴性(ER/PR+HER2-)浸润性乳腺癌患者的临床病理特征及预后。方法选择2009年1月至12月上海交通大学医学院附属第九人民医院黄浦分院收治的335例ER/P... 详细信息

目的探讨围绝经期雌激素受体(ER)和/或孕激素受体(PR)阳性及人类表皮生长因子受体2(HER2)阴性(ER/PR+HER2-)浸润性乳腺癌患者的临床病理特征及预后。方法选择2009年1月至12月上海交通大学医学院附属第九人民医院黄浦分院收治的335例ER/PR+HER2-浸润性乳腺癌患者作为研究对象,根据月经状态将其分为绝经前组(60岁,84例),比较3组患者的临床病理特征及预后情况,并通过单因素和多因素Cox回归分析围绝经期ER/PR+HER2-浸润性乳腺癌患者预后的危险因素。结果不同月经状态ER/PR+HER2-浸润性乳腺癌患者肿瘤T分期、N分期、TNM分期、组织学分级、组织学类型、淋巴血管浸润情况、PR表达水平差异均无统计学意义(P均>0.05)。Ki-67、ER、P53表达水平在3组患者间差异均有统计学意义(P均0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,淋巴结转移、Ki-67阳性细胞百分比≥60%、PR低表达是围绝经期ER/PR+HER2-浸润性乳腺癌患者预后的独立影响因素(HR=2.43、3.45、0.27,P均<0.05)。结论围绝经期ER/PR+HER2-浸润性乳腺癌有其独特的临床病理特征,但不同月经状态下患者的预后无明显差异。淋巴结转移、Ki-67阳性细胞百分比≥60%、PR低表达是围绝经期ER/PR+HER2-浸润性乳腺癌患者预后的独立影响因素。

关键词：乳腺肿瘤围绝经期临床病理特征预后雌激素受体孕酮受体

TMT定量蛋白组学方法筛选乳腺癌腋窝淋巴结转移患者血清差异蛋白

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中国肿瘤生物治疗杂志 2017年第4期24卷 411-416页

作者：李曦洲方敏盛湲于恩达第二军医大学附属长海医院普外科上海200433

目的:分析有腋窝淋巴结转移和无腋窝淋巴结转移的乳腺浸润性导管癌患者血清中的差异蛋白,筛选与乳腺癌转移相关的生物标志物和治疗靶点。方法:本研究采用定量蛋白质组学串联质谱标签(tandem mass tag,TMT)标记技术分别对14例有腋窝淋巴... 详细信息

目的:分析有腋窝淋巴结转移和无腋窝淋巴结转移的乳腺浸润性导管癌患者血清中的差异蛋白,筛选与乳腺癌转移相关的生物标志物和治疗靶点。方法:本研究采用定量蛋白质组学串联质谱标签(tandem mass tag,TMT)标记技术分别对14例有腋窝淋巴结转移及14例无腋窝淋巴结转移的乳腺癌患者血清蛋白进行检测,并对蛋白质进行定量分析,筛选出发生显著变化的差异蛋白,再搜索Uniprot数据库和用Proteome Discoverer软件分析,进一步进行生物信息学分析。结果:有腋窝淋巴结转移组中共筛选出差异蛋白119个,其中6个表达上调,113个表达下调。基因本体(gene ontology,GO)注释分析和功能聚类分析表明,这些差异蛋白质主要定位于细胞外区,与肿瘤的生物合成、细胞增殖、血管生成相关。Western boltting和qRT-PCR验证了K1C19(下调0.11倍)和PSME2(上调2.02倍)的表达。结论:TMT定量蛋白组学方法能有效筛选有腋窝淋巴结转移的和无腋窝淋巴结转移的乳腺癌患者血清中的差异蛋白。其中,K1C19和PSME2是值得进一步研究的乳腺癌淋巴结转移的候选血清标志物。

关键词：乳腺癌腋窝淋巴结转移蛋白组学串联质谱标签差异蛋白

乳腺癌3p染色体微卫星杂合性缺失与血管生成

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第二军医大学学报 2011年第9期32卷 979-984页

作者：乔峰姜晓玲李曦洲施俊义第二军医大学长海医院甲乳外科上海200433 解放军88医院病理科泰安271000

目的探讨乳腺癌染色体3p区域微卫星杂合性缺失(LOH)与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达及临床病理特征之间的关系。方法选取乳腺浸润性导管癌病例石蜡组织切块40例。运用激光显微切割技术留取组织中导管癌及正常乳腺细胞,应用毛细管电泳... 详细信息

目的探讨乳腺癌染色体3p区域微卫星杂合性缺失(LOH)与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达及临床病理特征之间的关系。方法选取乳腺浸润性导管癌病例石蜡组织切块40例。运用激光显微切割技术留取组织中导管癌及正常乳腺细胞,应用毛细管电泳测序技术进行4个微卫星位点的LOH检测。应用免疫组织化学技术SP法检测CD34、VEGF和Her2的表达,分析LOH与乳腺癌临床病理参数的关系。结果 40例乳腺癌患者中D3S1038的LOH发生率为20%(8/40),D3S1295的LOH发生率为37.5%(15/40),D3S1581的LOH发生率为17.5%(7/40),D3S3118的LOH发生率为5%(2/40)。LOH与VEGF的表达呈正相关(r=0.658 0,P<0.01),LOH和MVD也呈正相关(r=0.804 9,P<0.01)。LOH发生率与Her2表达(r=0.539 4)、组织学分级(r=0.497 2)、淋巴结转移(r=0.506 4)、TNM分期(r=0.596 0)均有相关性(均P<0.01)。结论乳腺癌染色体3p微卫星位点LOH与血管生成具有相关性,抑癌基因失活并通过对血管生成的影响可能为肿瘤生长与转移提供了条件;同时检测染色体3p微卫星位点LOH与血管生成情况,可能有助于更全面地了解乳腺癌的生物学特性。

关键词：乳腺肿瘤杂合性缺失病理性新生血管化血管内皮生长因子

GATA3在乳腺癌组织中的表达及其与ER表达的关系

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中国肿瘤生物治疗杂志 2011年第1期18卷 89-91页

作者：谢轶群施俊义李曦洲隋金珂裔海鹰第二军医大学长海医院普外科上海200433 上海市黄浦区中心医院乳腺外科上海200002

目的:探讨乳腺癌组织中GATA3的表达及与ER表达的关系,以及GATA3在乳腺癌发生中的意义。方法:采用免疫组化方法检测了上海市黄浦区中心医院2004年至2005年间外科手术切除的100例乳腺癌组织和61例癌旁乳腺组织中GATA3的表达水平,分析其与E... 详细信息

目的:探讨乳腺癌组织中GATA3的表达及与ER表达的关系,以及GATA3在乳腺癌发生中的意义。方法:采用免疫组化方法检测了上海市黄浦区中心医院2004年至2005年间外科手术切除的100例乳腺癌组织和61例癌旁乳腺组织中GATA3的表达水平,分析其与ER表达和乳腺癌患者临床病理特征间的关系。结果:GATA3在癌旁乳腺组织中的阳性表达率(82.0%)明显高于乳腺癌组织(60.0%)(χ2=8.45,P0.05)GATA3的表达和患者年龄、肿瘤大小无关(P>0.05),与乳腺癌组织分级、淋巴结转移相关(P<0.05)。乳腺癌组织中GATA3的阳性表达与ER的阳性表达存在着显著的正相关(r=0.49,P<0.01)。结论:乳腺癌组织低表达GATA3,GATA3表达与ER表达正相、与乳腺癌的发生、发展、转移和预后相关。

关键词： GATA3 乳腺癌雌激素受体

乳腺导管内癌和浸润性导管癌中骨桥蛋白的表达及意义

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第二军医大学学报 2011年第1期32卷 49-52页

作者：李曦洲隋金珂谢轶群施俊义第二军医大学长海医院甲乳外科上海200433

目的探讨正常乳腺组织、乳腺导管内癌和浸润性导管癌中骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达及临床意义。方法应用免疫组化S-P法测定OPN在正常乳腺组织、乳腺导管内癌和浸润性导管癌中的表达,采用SPSS 13.0软件进行统计学分析。结果正常乳... 详细信息

目的探讨正常乳腺组织、乳腺导管内癌和浸润性导管癌中骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达及临床意义。方法应用免疫组化S-P法测定OPN在正常乳腺组织、乳腺导管内癌和浸润性导管癌中的表达,采用SPSS 13.0软件进行统计学分析。结果正常乳腺组织、乳腺导管内癌、浸润性导管癌OPN的阳性表达率分别为0%(0/20)、20.0%(5/25)、43.1%(25/58),组间差异有统计学意义(P<0.05)。有否家族史、不同年龄、不同原发肿瘤大小的浸润性导管癌患者间OPN的表达差异无统计学意义,但不同组织学分级、不同临床TNM分期、腋窝淋巴结转移与否患者间OPN的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论 OPN可能参与了乳腺癌的发生、发展和转移,有利于乳腺癌的预后判断。

关键词：乳腺肿瘤非浸润性导管内癌浸润性导管癌免疫组织化学骨桥蛋白质

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GATA3与乳腺癌发生发展关系的研究进展

第二军医大学学报 2010年第7期31卷 787-789页

作者：谢轶群施俊义李曦洲隋金珂第二军医大学长海医院普通外科上海200433 上海市黄浦区中心医院乳腺外科上海200002

GATA3转录因子在正常乳腺的生长分化中起重要作用,与乳腺癌的发生发展也密切相关,GATA3在不同乳腺癌亚型发生中的作用有所不同。本文综述了GATA3与正常乳腺及乳腺癌发生发展关系的研究现状,为今后研究GATA3在乳腺癌中的临床应用提供理... 详细信息

GATA3转录因子在正常乳腺的生长分化中起重要作用,与乳腺癌的发生发展也密切相关,GATA3在不同乳腺癌亚型发生中的作用有所不同。本文综述了GATA3与正常乳腺及乳腺癌发生发展关系的研究现状,为今后研究GATA3在乳腺癌中的临床应用提供理论依据。

关键词： GATA3转录因子乳腺肿瘤乳腺

ER/PR^+和HER2^-型乳腺癌患者免疫组化指标的列线图预后模型

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中国肿瘤生物治疗杂志 2018年第9期25卷 934-939页

作者：吴莹洪晏谢轶群李曦洲刘洋上海市黄浦区中心医院乳腺外科上海200002 第二军医大学附属长海医院普外科上海200433 华东师范大学统计学院上海200241

目的:探讨改良雌激素受体(estrogen receptor,ER)/孕激素受体(progesterone receptor,PR)阳性(^+)及人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阴性(-)(ER/PR^+、HER2-)型乳腺癌患者的传统预后模型,满足目前的临床实际需求。方法:选取了2009年1月至2009年12月上海市黄浦区中心医院乳腺外科收治的335例ER/PR^+、HER2-型乳腺癌患者。将97个变量纳入模型,采用SCAD变量选择的方法,在充分考虑协变量是否存在对数线性关系、非对数线性关系(分段线性关系)临界值的合理确定、共线问题后,构建一个新的ER/PR^+、HER2-型乳腺癌患者传统免疫组化指标的Cox回归预后模型,并进一步建立其列线图模型;在此基础上建立了术后1、3和5年生存概率的列线图;并通过比较模型的区分度(discrimination)和校准度(calibration)来评价模型的预测能力。结果:通过乳腺癌预后建立Cox回归模型结果显示,患者的预后与组织级别、淋巴结转移、Ki67、PR和年龄等因素有关;其中组织级别和淋巴结转移对风险比的影响呈对数线性关系,Ki67、PR和年龄对风险比的影响呈非对数线性关系,其合理临界值分别为Ki67(60%)、PR(20%)和年龄(55岁)。该模型术后1、3和5年的ROC曲线下面积(AUC值)均高于0.85,说明该Cox回归模型具有较高的区分度。该模型Gr?nnesby-Borgan拟合优度检验统计量值为1.37、对应的P值为0.5,说明该Cox回归模型有较好的校准度。结论:通过改良ER/PR^+和HER2-型乳腺癌患者的传统预后模型,建立患者术后1、3和5年生存概率的列线图,能准确、直观、有效地预测患者的生存概率,对乳腺癌患者临床治疗有较好的指导意义。

关键词：乳腺癌雌激素受体孕激素受体人类表皮生长因子受体2 传统免疫组化指标列线图预后模型

乳腺癌各分子亚型中骨桥蛋白的表达及其临床意义

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中国肿瘤生物治疗杂志 2010年第4期17卷 439-443页

作者：李曦洲谢轶群隋金珂施俊义郑唯强第二军医大学长海医院甲乳外科上海200433 第二军医大学长海医院病理科上海200433

目的:研究骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在乳腺癌各分子亚型中的表达及其临床意义。方法:收集2000年1月至2003年12月第二军医大学长海医院的99例乳腺癌组织标本,免疫组织化学法检测ER(estrogen receptor)、PR(progesteronereceptor)和HER-2... 详细信息

目的:研究骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在乳腺癌各分子亚型中的表达及其临床意义。方法:收集2000年1月至2003年12月第二军医大学长海医院的99例乳腺癌组织标本,免疫组织化学法检测ER(estrogen receptor)、PR(progesteronereceptor)和HER-2(human epidermal growth factor receptor-2)的表达,并据此将乳腺癌患者分为luminal A型、luminal B型、HER-2过表达型和基底细胞样型。免疫组织化学法测定各分子亚型乳腺癌组织中OPN的表达情况,并分析OPN表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果:根据ER、PR和HER-2的不同表达情况,99例乳腺癌患者中luminal A型45例、luminal B型27例、HER-2过表达型14例、基底细胞样型13例。OPN在luminal A型、luminal B型、HER-2过表达型和基底细胞样型中表达率分别为22.2%、29.6%、71.4%和61.5%,HER-2过表达型和基底细胞样型乳腺癌组织中OPN表达率均高于luminal A型和luminal B型(P<0.01)。OPN低表达的乳腺癌患者生存率高于OPN高表达者,两者差异有统计学意义(P<0.01)。结论:OPN在基底细胞样型和HER-2过表达型乳腺癌组织中高表达,其表达可作为乳腺癌预后的评估指标之一。

关键词：乳腺肿瘤分子亚型骨桥蛋白 ER PR HER-2