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作者：李晨驰贵州医科大学

学位级别：硕士

目的:观察小鼠非酒精性脂肪性肝病发生过程中脂滴包被蛋白5(Perilipin5,Plin5)表达的变化及蓝莓花青素干预后对其表达的影响,探讨Plin5蛋白在蓝莓花青素干预非酒精性脂肪性肝病发生过程中可能的作用。方法:1、体外实验:培养AML12小鼠肝... 详细信息

目的:观察小鼠非酒精性脂肪性肝病发生过程中脂滴包被蛋白5(Perilipin5,Plin5)表达的变化及蓝莓花青素干预后对其表达的影响,探讨Plin5蛋白在蓝莓花青素干预非酒精性脂肪性肝病发生过程中可能的作用。方法:1、体外实验:培养AML12小鼠肝细胞,取对数生长期细胞分为对照组、油酸诱导组、维生素C组、蓝莓花青素组,每组设置3个复孔。对照组给予DMEM/F12培养基培养;油酸诱导组、维生素C组、蓝莓花青素组,给予含0.75mmol/L油酸的DMEM/F12培养基,培养24h,以复制小鼠非酒精性脂肪性肝病细胞模型。模型复制成功后,采用具有抗氧化活性的水溶性维生素C作为阳性对照药物;维生素C组、蓝莓花青素组分别更换含50μg/m L维生素C及50μg/m L蓝莓花青素的DMEM/F12培养基,对照组、油酸诱导组更换DMEM/F12培养基,各组均培养24h。实验结束后,采用微板法测定细胞培养上清液中ALT、AST水平以及细胞内TG含量;WST-1法检测细胞内SOD含量;TBA法检测细胞内MDA含量;油红O染色观察细胞内脂质沉积情况;Western Blot检测细胞中Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白的相对表达情况;q-PCR检测细胞中Plin5 m RNA的相对表达情况。2、体内实验:将8周龄、体重25-30g、雄性ICR小鼠适应性饲养1周后随机分为对照组、非酒精性脂肪性肝病组、维生素C组、蓝莓花青素组,每组6只;对照组小鼠使用基础饲料喂养;非酒精性脂肪性肝病组、维生素C组、蓝莓花青素组小鼠使用高脂饲料喂养并腹腔注射5%CCl,剂量2μL/g,2次/周,共10周,以复制小鼠非酒精性脂肪性肝病动物模型。模型复制成功后,维生素C组、蓝莓花青素组小鼠分别给予50μg/m L维生素C溶液及50μg/m L蓝莓花青素溶液,剂量10μL/g,隔天灌胃,共8周;对照组、非酒精性脂肪性肝病组小鼠给予等量生理盐水灌胃;灌胃期间同时对非酒精性脂肪性肝病组、维生素C组、蓝莓花青素组各组小鼠腹腔注射5%CCl,剂量1μL/g,1次/周,以维持造模效果。实验结束后,各组小鼠乙醚麻醉,眼球取血,剪开腹腔后取肝右叶部分肝组织行石蜡切片及冰冻切片,其余肝组织-80℃冻存。采用微板法检测小鼠血清ALT、AST水平及肝组织TG含量;WST-1法检测肝组织内SOD含量,TBA法检测肝组织内MDA含量;病理切片行HE染色及油红O染色,观察肝脏组织形态学变化及脂质沉积情况;Western Blot检测肝组织中Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白的相对表达情况;q-PCR检测肝组织中Plin5 m RNA的相对表达情况。结果:1、体外实验:与对照组相比,油酸诱导组的细胞培养上清液中ALT、AST水平、细胞内TG、MDA含量均升高(P<0.05)、细胞内SOD含量降低(P<0.05),染色结果显示细胞内脂滴数量增加(P<0.05),细胞内Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白相对表达量以及Plin5 m RNA相对表达量均升高(P<0.05)。与油酸诱导组相比,维生素C组、蓝莓花青素组的细胞培养上清液中ALT、AST水平、细胞内TG、MDA含量均降低(P<0.05),但未降至对照组水平,细胞内SOD含量升高(P<0.05),染色结果显示细胞内脂滴数量减少(P<0.05),细胞内Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白相对表达量以及Plin5 m RNA相对表达量均降低(P<0.05)。与维生素C组相比,蓝莓花青素组的细胞培养上清液中ALT水平、细胞内TG、MDA含量均降低(P<0.05),细胞内SOD含量升高(P<0.05),染色结果显示细胞内脂滴数量进一步减少(P<0.05)、细胞内Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白相对表达量以及Plin5 m RNA相对表达量均降低(P<0.05)。2、体内实验:与对照组相比,非酒精性脂肪性肝病组的小鼠血清ALT、AST水平、肝组织中TG、MDA含量均升高(P<0.05)、肝组织中SOD含量降低(P<0.05),病理结果显示肝组织出现明显空泡变性及脂质沉积,肝组织中Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白相对表达量以及Plin5 m RNA相对表达量均升高(P<0.05)。与非酒精性脂肪性肝病组相比,维生素C组、蓝莓花青素组的小鼠血清ALT、AST水平、肝组织中TG、MDA含量均降低(P<0.05),但未降至对照组水平,肝组织中SOD含量升高(P<0.05),病理结果显示肝组织空泡变性及脂质沉积得到改善,肝组织中Plin5、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白相对表达量以及Plin5 m RNA相对表达量均降低(P<0.05)。与维生素C组相比,蓝莓花青素组的小鼠血清ALT、AST水平、肝组织中T

关键词：非酒精性脂肪性肝病蓝莓花青素抗氧化 Plin5 PI3K/Akt

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含氧化苦参碱大鼠血清通过阻断PI3K/AKT通路抑制砷对LX2人肝星状细胞增殖活化的刺激作用

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第7期38卷 598-604页

作者：杨柳张景允韩萧萧李晨驰刘冉阳马子华韩冰谢汝佳杨勤贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室贵州省常见慢性疾病发病机制及药物研究重点实验室贵州贵阳550000

目的探讨含氧化苦参碱(OM)大鼠血清对砷致LX2人肝星状细胞增殖活化的影响及其可能机制。方法 SD大鼠分别给予100 mg/kg OM及等容积生理盐水灌胃以制备含OM血清及空白血清。采用100μmol/L亚砷酸钠处理LO2人胚胎肝细胞株,24 h后收集上清... 详细信息

目的探讨含氧化苦参碱(OM)大鼠血清对砷致LX2人肝星状细胞增殖活化的影响及其可能机制。方法 SD大鼠分别给予100 mg/kg OM及等容积生理盐水灌胃以制备含OM血清及空白血清。采用100μmol/L亚砷酸钠处理LO2人胚胎肝细胞株,24 h后收集上清液,上清液与正常培养液以1∶4的比例孵育LX2细胞24 h建立间接染砷组细胞模型。设立空白血清组(160 mL/L空白血清)、间接染砷组(160 mL/L空白血清联合染砷刺激)、含OM血清低剂量组(80 mL/L空白血清、 80 mL/L含OM血清联合染砷刺激),含OM血清高剂量组(160 mL/L含药血清联合染砷刺激)。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测LX2细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、 B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、 Bcl2相关X蛋白(BAX)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的蛋白表达。结果间接染砷处理后LX2细胞增殖率升高,G1期比例减少,凋亡比例减少,α-SMA、 PI3K、p-AKT、 cyclin D1、 Bcl2表达均明显上调、 BAX表达降低;OM血清处理后,G1期细胞比例增加,细胞凋亡比例增加,BAX蛋白表达明显增加,其他蛋白表达均明显下调,高剂量组更为显著。结论含OM血清能有效抑制砷对LX2肝星状细胞的增殖刺激作用,促进其凋亡,可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。

关键词：氧化苦参碱(OM) 亚砷酸钠血清肝纤维化增殖活性

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齐墩果酸衍生物DKS26对非酒精性脂肪肝病模型小鼠肝组织Fndc5表达的影响

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贵州医科大学学报 2023年第4期48卷 383-388页

作者：韩萧萧李晨驰刘冉阳唐爽冯琳琳韩冰谢汝佳杨勤贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室贵州贵阳550025 贵州省常见慢性疾病发病机制及药物研究重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学医学检验学院临床微生物免疫教研室贵州贵阳550025

目的研究齐墩果酸衍生物DKS26对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型小鼠肝组织中Ⅲ型纤连蛋白组件包含蛋白(Fndc5)表达的影响。方法 40只健康5周龄C57/BL小鼠随机均分为对照组(CON组)、模型组(MOD组)、二甲双胍对照组(MET组)和DKS26组,后3组... 详细信息

目的研究齐墩果酸衍生物DKS26对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型小鼠肝组织中Ⅲ型纤连蛋白组件包含蛋白(Fndc5)表达的影响。方法 40只健康5周龄C57/BL小鼠随机均分为对照组(CON组)、模型组(MOD组)、二甲双胍对照组(MET组)和DKS26组,后3组小鼠用40%四氯化碳皮下注射加高脂饮食喂养、建立小鼠NAFLD模型,MET组和DKS26组小鼠分别给予100 mg/(kg·d)的MET和DKS26灌胃干预、CON组和MOD组小鼠给予100 mg/(kg·d)的羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液灌胃干预,1次/d,共6周;末次干预后检测各组小鼠血清ALT、AST及肝组织的TG含量、脂滴沉积及肝组织学变化,Western blot法检测肝组织Fndc5蛋白表达。结果与CON组相比,MOD组小鼠血清ALT和AST水平明显上升(P<0.01),肝组织TG含量明显上升(P<0.01),肝细胞空泡样变明显、胞质脂质沉积过多,Fndc5表达下调(P<0.05);MET和DKS26干预后,两组小鼠血清ALT、AST水平、肝组织TG含量、肝细胞空泡样变及脂质沉积较MOD组明显下降(P<0.01),且DKS26干预组小鼠血清AST水平低于MET组(P<0.05);MET组和DKS26组干预后,两组小鼠肝组织Fndc5蛋白表达较MOD组上调(P<0.05),且DKS26组比MET组更高(P<0.05)。结论 DKS26对NAFLD小鼠的肝功能指标及肝脂肪沉积有改善作用,其机制可能与调节鸢尾素(irisin)前体Fndc5表达有关。

关键词：非酒精性脂肪肝病墩果酸衍生物DKS26 Ⅲ型纤连蛋白组件包含蛋白脂质氧化二甲双胍

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衣霉素诱导肝星状细胞内质网应激促进细胞凋亡和细胞周期阻滞

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细胞与分子免疫学杂志 2021年第9期37卷 794-800页

作者：张景允杨柳韩萧萧李晨驰刘冉阳马子华韩冰谢汝佳杨勤贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室贵州省常见慢性疾病发病机制及药物研究重点实验室贵州贵阳550000

目的研究衣霉素诱导HSC-T6大鼠肝星状细胞发生内质网应激(ERS)时对细胞增殖活化及细胞凋亡的影响及可能机制。方法以葡萄糖调节蛋白(GRP78)表达水平为指标摸索衣霉素诱导HSC-T6细胞ERS适宜的浓度及时间,建立衣霉素诱导HSC-T6细胞发生ER... 详细信息

目的研究衣霉素诱导HSC-T6大鼠肝星状细胞发生内质网应激(ERS)时对细胞增殖活化及细胞凋亡的影响及可能机制。方法以葡萄糖调节蛋白(GRP78)表达水平为指标摸索衣霉素诱导HSC-T6细胞ERS适宜的浓度及时间,建立衣霉素诱导HSC-T6细胞发生ERS的细胞模型。在此条件下将HSC-T6细胞随机分为对照组、1 mL/L二甲基亚砜(DMSO)处理组、1μg/mL衣霉素处理组,分别处理细胞12 h。噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期的变化;Western blot法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、CCAAT/增强子结合蛋白子同源蛋白(CHOP)、胱天蛋白酶12(caspase-12)、细胞周期蛋白1(cyclin D1)的蛋白表达。结果筛选出衣霉素诱导HSC-T6细胞发生ERS的适宜剂量为1μg/mL,适宜时间为12 h。与对照组及DMSO处理组相比,1μg/mL衣霉素处理组细胞增殖变化不明显,但α-SMA表达上调、细胞凋亡增加,G1期细胞比例明显增加、S期细胞比例下降,ERS诱导凋亡相关信号蛋白CHOP、caspase-12均显著上调,cyclin D1表达显著下调。结论衣霉素处理HSC-T6细胞12 h可致细胞发生明显ERS并活化,活化过程中细胞数量变化不明显可能与GRP78/CHOP/caspase-12通路激活导致的细胞凋亡增多、细胞周期阻滞有关。

关键词：肝星状细胞衣霉素内质网应激(ERS) 细胞增殖细胞凋亡

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蓝莓花青素对油酸诱导肝细胞脂肪变性小鼠Plin5蛋白表达的影响

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中国现代医学杂志 2021年第24期31卷 7-12页

作者：李晨驰韩萧萧杨柳张景允刘冉阳杨勤贵州医科大学病理生理学教研室贵州贵阳550000 贵州医科大学贵州省常见慢性疾病发病机制及药物研究重点实验室贵州贵阳550000

目的观察蓝莓花青素对油酸诱导AML12小鼠肝细胞脂肪变性过程中Plin5蛋白表达的影响,探讨其可能的机制。方法培养AML12小鼠肝细胞,取对数生长期细胞分为对照组、油酸诱导组、维生素C组和蓝莓花青素组,每组设置3个复孔。对照组用DMEM/F12... 详细信息

目的观察蓝莓花青素对油酸诱导AML12小鼠肝细胞脂肪变性过程中Plin5蛋白表达的影响,探讨其可能的机制。方法培养AML12小鼠肝细胞,取对数生长期细胞分为对照组、油酸诱导组、维生素C组和蓝莓花青素组,每组设置3个复孔。对照组用DMEM/F12培养基培养;油酸诱导组、维生素C组及蓝莓花青素组用含0.75 mmol/L油酸的培养基处理24 h,复制小鼠肝细胞脂肪变性模型。模型复制成功后,采用具有抗氧化活性的水溶性维生素C作为阳性对照,维生素C组及蓝莓花青素组分别更换含50μg/ml维生素C及50μg/ml蓝莓花青素的培养基培养24 h。采用微板法测定各组细胞培养液上清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平及细胞内甘油三酯(TG)含量;油红O染色观察细胞内脂滴沉积情况;Western blotting检测AML12细胞Plin5、PI3K、P-Akt蛋白的表达。结果100μg/ml、150μg/ml、200μg/ml组细胞指数较0μg/ml组下降(P<0.05)。蓝莓花青素处理24 h后100μg/ml组抑制率为14.4%,而50μg/ml组未显示。油酸诱导组ALT、AST、TG水平较对照组升高(P<0.05),维生素C组、蓝莓花青素组较油酸诱导组降低(P<0.05),蓝莓花青素组较维生素C组降低(P<0.05)。油酸诱导组积分光密度值较对照组升高(P<0.05),维生素C组、蓝莓花青素组较油酸诱导组降低(P<0.05),蓝莓花青素组较维生素C组降低(P<0.05)。油酸诱导组Plin5、PI3K、P-Akt蛋白相对表达量较对照组升高(P<0.05),维生素C组、蓝莓花青素组细胞较油酸诱导组降低(P<0.05),蓝莓花青素组细胞较维生素C组降低(P<0.05)。结论蓝莓花青素对油酸所致小鼠肝细胞脂肪变性有一定的改善作用,该机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路调控的Plin5蛋白表达、减少了油酸诱导的肝细胞脂滴形成有关。

关键词：肝细胞脂肪变性蓝莓花青素增殖小鼠

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DMSCs三维培养方法及其在组织再生和疾病治疗中应用的研究进展

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吉林大学学报（医学版） 2024年第2期50卷 564-571页

作者：李国鑫赵小琳李晨曦刘影驰朱芷墨袁瑶安政雯吉林大学口腔医院口腔生物学教研室吉林长春130021

牙源性间充质干细胞(DMSCs)是来源于神经嵴外胚层的间充质干细胞,具有优越的自我更新和多向分化的能力,被广泛应用于组织工程和再生医学研究。利用三维培养方法可对DMSCs进行大量体外扩增以满足研究和治疗的需要。与传统的二维培养方法... 详细信息

牙源性间充质干细胞(DMSCs)是来源于神经嵴外胚层的间充质干细胞,具有优越的自我更新和多向分化的能力,被广泛应用于组织工程和再生医学研究。利用三维培养方法可对DMSCs进行大量体外扩增以满足研究和治疗的需要。与传统的二维培养方法比较,三维培养技术可更有效地模拟干细胞在体内所处的结构和微环境,从时间和空间上共同调控干细胞的增殖及分化。近年来开展的体外三维培养方法较多,悬滴培养法操作简单,但较难控制培养组织的气象环境;微流控芯片可更好地控制细胞参数,但成本高昂,且存在技术平台的难题而难以广泛应用;磁悬浮培养费用低廉,操作简便,细胞成球速度快,但由于磁化作用难以用来定量分析。其他三维培养方法还包括旋转细胞培养系统、离心成球培养法、液体覆盖法和人工支架法等,上述培养方法都存在不同的优势和一定的局限性。现对体外三维培养DMSCs的不同方法及其在不同组织再生和疾病治疗中的应用进行综述,为DMSCs功能的精准调控和再生医学研究提供参考。

关键词：牙源性间充质干细胞球体培养干性维持组织工程再生医学

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基于下投式探空资料的热带气旋边界层结构分析

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地球物理学报 2024年第6期67卷 2085-2095页

作者：苏媚媚明杰李晨南京大学大气科学学院中尺度灾害性天气教育部重点实验室南京210023 中国气象局雷达气象重点开放实验室南京210023 中国气象局雄安大气边界层重点开放实验室河北雄安新区071800 南京大学连云港高新技术研究院江苏连云港222000

本文使用来自大西洋海域5218个探空仪和西北太平洋海域448个探空仪资料,以及全球海表面温度资料、热带气旋路径资料和强度统计预测方案资料,分析了46个大西洋飓风和11个西北太平洋台风所处的环境特征和边界层结构,并对热带气旋快速增强... 详细信息

本文使用来自大西洋海域5218个探空仪和西北太平洋海域448个探空仪资料,以及全球海表面温度资料、热带气旋路径资料和强度统计预测方案资料,分析了46个大西洋飓风和11个西北太平洋台风所处的环境特征和边界层结构,并对热带气旋快速增强时的边界层结构做了进一步研究.结果表明:两海域增强组热带气旋更多地受到偏北的垂直风切变的影响,增强组热带气旋所处的环境也明显比减弱组热带气旋要更加湿热;且与大西洋飓风相比,西北太平洋台风所处的环境相对湿度更大,海洋热容量亦较高;从径向分布特征来看,增强组的热带气旋总体而言边界层更加温暖,比湿相对较低;相比于快速减弱的飓风,快速增强的飓风所受到的中低层垂直风切变方向更偏向北方,所处环境更湿热,温度分布更对称,但比湿较小.研究结果能为热带气旋的强度预报特别是快速增强(减弱)的预报提供参考.

关键词：热带气旋边界层结构下投式探空仪快速增强

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“二维码”符号的传播生态学考察

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现代传播（中国传媒大学学报） 2024年第4期46卷 142-149页

作者：曹进李晨西北师范大学外国语学院

基于传播生态学,探究二维码环境对传播生态的扰动与构建、技术与范式融合重构网民社会行为,以及二维码传播生态对实在社会的影响。二维码含蕴的海量信息、链接的虚拟世界、实现的电子支付既体现了媒介的再延伸,也表征了人与机器的共同... 详细信息

基于传播生态学,探究二维码环境对传播生态的扰动与构建、技术与范式融合重构网民社会行为,以及二维码传播生态对实在社会的影响。二维码含蕴的海量信息、链接的虚拟世界、实现的电子支付既体现了媒介的再延伸,也表征了人与机器的共同延伸。其表意的“现代神话”构建了符号的技术逻辑、审美视觉、意义生产,也重塑了传播生态与网络消费行为。二维码改变了符号占有与交换规则,压缩与扩张了符号空间、联结着真实与虚拟社会、勾连着实在与虚拟环境,在大量存储各类符号的同时,又在释放被压缩的人类信息或消费活动,风格迥异的二维码拓展了传播范式、维系着新的传播逻辑。二维码作为重要的个人身份信息载体与电子消费介质,亟须建立二维码信息核查、安全支付机制和监管体系,完善二维码的安全与隐私保护机制。

关键词：传播生态学二维码符号传播范式社会行为

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以区域协调发展推动共同富裕的理论与实践

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广东社会科学 2024年第1期 274-283,287页

作者：李晨中共中央党校(国家行政学院)经济学教研部北京100091

区域协调发展是破解中国发展不平衡不充分问题的重要战略举措,是实现全体人民共同富裕的必然要求。实施区域协调发展战略可以通过微观层面要素自由流动、中观层面产业深度关联、宏观层面空间辐射带动三个渠道推动共同富裕。中国区域、... 详细信息

区域协调发展是破解中国发展不平衡不充分问题的重要战略举措,是实现全体人民共同富裕的必然要求。实施区域协调发展战略可以通过微观层面要素自由流动、中观层面产业深度关联、宏观层面空间辐射带动三个渠道推动共同富裕。中国区域、省域、南北地区之间的发展差距及其演变趋势显示,在新发展阶段区域发展差距仍是制约中国实现共同富裕的重要因素。要通过缩小区域发展差距推动共同富裕,须在认识上坚持区域共同发展、在实践上坚持区域共生发展、在制度上坚持区域共享发展。因此,应坚持以高质量发展为导向,为实现共同富裕奠定经济基础;加快形成优势互补的区域发展格局,为实现共同富裕奠定空间基础;加快构建区域协调发展新机制,为实现共同富裕奠定制度基础;加快推进基本公共服务均等化,为实现共同富裕奠定社会基础。

关键词：区域协调发展共同富裕共同发展共生发展共享发展

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美国霸权:历史演变、行为模式与战略影响

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当代世界与社会主义 2024年第3期 33-42页

作者：李晨中国人民大学国际关系学院

美国的霸权是美国长期坚持的战略行为和结果。美国的战略思维和实力优势推动美国在不同阶段争夺、掌控和维护地区霸权、阵营霸权和全球霸权。美国霸权的行为模式包括霸权战略目标的设定、不断升级的战略评估与规划,以及多种战略手段的... 详细信息

美国的霸权是美国长期坚持的战略行为和结果。美国的战略思维和实力优势推动美国在不同阶段争夺、掌控和维护地区霸权、阵营霸权和全球霸权。美国霸权的行为模式包括霸权战略目标的设定、不断升级的战略评估与规划,以及多种战略手段的转化和运用。百年变局下,美国主要针对中国的新一轮霸权战略对全球秩序、安全格局和各国之间的经济社会纽带都产生了深刻影响。

关键词：美国霸权战略行为国际秩序

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