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30例慢性（难治）根尖周炎感染根管内细菌16SrRNA初步分析

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30例慢性（难治）根尖周炎感染根管内细菌16SrRNA初步分析

作者：李晓然新疆医科大学

学位级别：硕士

目的：大量研究证实细菌生物膜存在于感染根管内。同一菌株的生物膜和浮游细菌具有不同的特性。本研究针对新疆地区感染根管内细菌、病原菌分布及其与民族之间的关系，初步探讨细菌与不同民族慢性根尖周疾病的相关性以及细菌的可能致病... 详细信息

目的：大量研究证实细菌生物膜存在于感染根管内。同一菌株的生物膜和浮游细菌具有不同的特性。本研究针对新疆地区感染根管内细菌、病原菌分布及其与民族之间的关系，初步探讨细菌与不同民族慢性根尖周疾病的相关性以及细菌的可能致病机制奠定基础。为后期深入研究阐明根尖周病病因学和临床根管治疗中的感染控制提供实验依据。方法：选择自2012年5月-7月，30例就诊于新疆医科大学第一附属医院牙体牙髓科临床的慢性根尖周炎患者，进行细菌培养，DNA提取，PCR扩增后进行16SrRNA检测。结果：11例汉族病例样本中主要以Thermoanaerobacterium、Eubacterium、Heliobacterium、Streptomyces、Acetobacterium和Solitalea检出量大，且在维族病例样本中未发现。10例维族病例样本中主要以Exiguobacterium菌属及Oceanobacillus菌属检出量的大，且在汉族病例样本中未发现。2例脓液病例中检出：Enterococcus菌属、Melissococcus菌属、Carnobacterium菌属、Lactobacillus菌属、Bacillus菌属、Pediococcus菌属等。结论：通过对临床标本的检测分析，发现新疆地区维汉民族中慢性根尖周炎的病原菌的检出情况与以往文献大致相同，但也存在本地区的差异特点。为进一步深入探讨维汉民族之间的差异性奠定了实验基础。

关键词：慢性根尖周病细菌 16SrRNA

蔬菜中Listeria monocytogenes快速检测方法建立及果蔬中Listeria spp.污染分布研究

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蔬菜中Listeria monocytogenes快速检测方法建立及果蔬中Listeria...

作者：李晓然河北科技师范学院

学位级别：硕士

单核细胞增生李斯特氏菌(L.monocytogenes)是一种常见的侵袭性食源性致病细菌,导致李斯特菌病发生,病死率较高。我们建立了一种基于聚合酶链式反应(PCR)的方法,将β-环糊精(β-CD)和牛乳蛋白包被活性炭用于去除蔬菜基质中的PCR反应抑制... 详细信息

单核细胞增生李斯特氏菌(L.monocytogenes)是一种常见的侵袭性食源性致病细菌,导致李斯特菌病发生,病死率较高。我们建立了一种基于聚合酶链式反应(PCR)的方法,将β-环糊精(β-CD)和牛乳蛋白包被活性炭用于去除蔬菜基质中的PCR反应抑制因子(促进靶细菌的回收)。基于该菌iap基因的引物用于PCR,检测了含靶细菌与非靶细菌的141株菌,以确定其特异性。检测了不同浓度的人工染菌蔬菜(菠菜、生菜、油麦菜、油菜和大白菜),以确定本方法灵敏度。分别用本方法和国标GB/T 4789.30-2016对种植基地采集的蔬菜进行了检测,以评估本方法实用性。为确定本方法主要试剂的稳定性,分别用-20°C冰箱中保存了不同时间(3、6、12个月)的试剂,对人工染菌和实际采集样品进行检测,以评价本方法的灵敏度和实用性是否受影响。目前国外对果蔬中李斯特氏菌的污染分布和L.monocytogenes分型研究正逐步增加,而国内对该属、尤其近年来新发现的李斯特氏菌的污染分布情况尚不清楚,对果蔬中L.monocytogenes的分型研究较少。因此,对河北省石家庄、保定、唐山、秦皇岛、邢台、承德六个主要果蔬种植基地果蔬中李斯特氏菌的污染分布和L.monocytogenes表型特征进行研究,用现行国标GB/T 4789.30-2016、美国FDA BAM Chapter 10、USDA MLG 8.12和ISO 11290-1,对李斯特氏菌进行定性检测;用GB/T 4789.30-2016中的平板计数法对L.monocytogenes进行定量检测;对分离的L.monocytogenes进行血清学分型和抗生素敏感性试验。研究结果表明:(1)本方法无需前増菌,灵敏度为10～1CFU/25 g,特异性100%,检测时间为4 h,是一种快速、灵敏、特异性强的检测方法。与国标的L.monocytogenes检出率(菠菜5%、生菜3%、油菜1%、油麦菜0%、大白菜0%)和活体菌检测率(100%)一致(符合率100%)。-20°C冰箱中保存12个月后的本方法主要试剂对样品进行检测后,本方法灵敏度仍为10～1CFU/25 g,与国标的检测结果一致,表明试剂在-20°C保存至少12个月后仍可正常使用,稳定性较好。(2)李斯特氏菌在各基地果蔬样品中的总污染率为11.19%。承德污染率最高(14.13%),其次是秦皇岛13.36%、邢台10.62%、保定10.13%、石家庄9.53%和唐山9.36%。各种果蔬的污染情况方面,菠菜污染率最高(22.87%),其次是生菜18.93%、大白菜17.03%、哈密瓜13.67%、西红柿11.23%、黄瓜11.10%、葡萄2.63%、苹果2.03%和梨1.20%。各种李斯特氏菌的污染情况方面,L.monocytogenes在果蔬中的污染率不是很高(0.10～3.43%,梨和哈密瓜未检出);其他较罕见使人致病的、有零星散发事件的李斯特氏菌中,英诺克李斯特氏菌(L.innocua)在蔬菜和哈密瓜中的污染率较高(5.67～16.43%、其他水果0.27～0.60%,梨未检出),果蔬中斯氏李斯特氏菌(L.seeligeri)、伊氏李斯特氏菌(L.ivanovii)和格氏李斯特氏菌(L.grayi)的污染率不高(均低于0.60～2.10%,哈密瓜中L.seeligeri污染率除外,为3.07%);果蔬中威氏李斯特氏菌(L.welshimeri)的污染率不高(均低于2.27%);2010年至今发现的15种李斯特氏菌,在果蔬中的污染率均低于1.00%(菠菜中L.marthii污染率除外,为1.33%)。L.monocytogenes的污染水平方面,384份阳性样品平均污染水平为58 CFU/g。其中,9.64%的样品污染水平在0～20 CFU/g、69.27%在21～100 CFU/g,17.19%在101～200 CFU/g,3.91%>200 CFU/g。总体来看,大多数样品的污染水平在0～100 CFU/g。(3)果蔬中分离的384株L.monocytogenes的血清型主要有5种(1/2a、1/2c、1/2b、4b和3a)。其中血清型1/2a、1/2c和1/2b的菌株在六个基地果蔬中分布较广泛(数量占比前三位,分别为28.39%、25.52%和25.00%)。384株L.monocytogenes的抗生素耐药性方面,共对9种抗生素耐药,总耐药率为20.31%。对四环素的耐药率最高(11.20%),其次是环丙沙星5.21%、庆大霉素2.86%、红霉素2.34%、强力霉素1.30%、万古霉素1.30%、利福平和氯霉素都为0.52%、青霉素0.26%。其中有10株菌多重耐受三种抗生素。提示河北省L.monocytogenes的耐药谱逐渐广泛并复杂化,应加大抗生素生产和使用情况的监管力度,以减缓该菌耐药情况的发展。

关键词：单核细胞增生李斯特氏菌 β-环糊精(β-CD) 牛乳蛋白包被活性炭聚合酶链式反应(PCR) 果蔬李斯特氏菌污染分布表型分型

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连锁便利店O2O发展模式研究

连锁便利店O2O发展模式研究

作者：李晓然河北经贸大学

学位级别：硕士

传统业态的连锁便利店与电子商务的融合已经成为当前便利店企业发展的潮流趋势。O2O商业模式在2011年的引进以及在我国市场中的普遍试用,又将最大程度的推动我国传统连锁便利企业与电子商务的进一步融合,尤其是面对“互联网+”时代的到... 详细信息

传统业态的连锁便利店与电子商务的融合已经成为当前便利店企业发展的潮流趋势。O2O商业模式在2011年的引进以及在我国市场中的普遍试用,又将最大程度的推动我国传统连锁便利企业与电子商务的进一步融合,尤其是面对“互联网+”时代的到来,我国传统的连锁便利企业以占据线下市场的先天优势为基础,逐步加大线上电子商务的布局,尝试推出适合自己的线上线下O2O商业模式。但同时存在着许多连锁便利店企业仍然迟迟观望,面对传统业态的这一次转型仍态度不明确,主要的原因在于他们对选择怎样的O2O模式,以及该模式带来的预期盈利不明确。那么如何抓住这次机遇,如何构建电子商务平台发展O2O模式,如何做好相关策略部署,成为亟待解决的现实问题。本文着重研究连锁便利店O2O模式构建的三种类型,即以线下为主线上为辅的定位新业务模式、以线上为主线下为辅的定位新渠道模式、线上线下同步发展定位新方式模式,阐述了连锁便利店在选择O2O模式过程中的体系构建,在相关理论分析的基础上,结合了美宜佳连锁便利店、好邻居连锁便利店、唐久连锁便利店这些典型案例的真实发展情况,提出我国连锁便利店在实施O2O模式进程中的模式构建、模式经验以及遇到的问题,并进行原因分析。由于我国的连锁便利店O2O模式正处于探索阶段,相关的理论基础、模式规划也不够成熟,论文作者充分结合了我国的发展情形,主要通过案例分析、实践考察分析的方式,提出了我国不同发展规模的连锁便利店应选择不同的O2O模式,并按照O2O模式的构建方案给出相关性建议。本篇论文主要有六个章节,第一章主要介绍了研究背景和研究意义、国内外研究现状、研究思路和结构、研究方法和创新点;第二章阐述了连锁便利店O2O模式的概念及其相关的理论基础;第三章运用相关理论阐述了连锁便利店O2O模式的发展机理,详细分析了其发展过程的动因、路径以及发展评价;第四章着重对连锁便利店O2O模式进行了分类,分为定位新业务模式、定位新渠道模式、定位新方式模式,并分别对三种模式的具体构建运营做了详细描述;第五章运用相应的典型案例-美宜佳连锁便利店、好邻居连锁便利店、唐久连锁便利店来照应模式,并从模式的价值主张、价值网络、价值创造、模式优势与不足四个方面进行对比分析;第六章主要是切实结合我国连锁便利店自身发展情况提出不同的连锁便利店应选择不同的发展模式,最后提出了推进我国连锁便利店O2O模式发展的战略建议。

关键词： O2O模式发展机理运营分析典型案例对比分析

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六安市茶产业集群发展现状及预测

蚌埠学院学报 2023年第1期12卷 72-77页

作者：刘晓婉李晓然岳芹皖西学院金融与数学学院安徽六安237000

分析了六安市茶产业集群的发展状况,运用指数平滑法对茶产业集聚效应的发展趋势进行了预测,进而探讨了六安市茶产业竞争力的影响因素,针对茶产业集群所面临的问题提出了解决对策,为开展大别山区茶产业集群向专业化、集中化趋势发展的研... 详细信息

分析了六安市茶产业集群的发展状况,运用指数平滑法对茶产业集聚效应的发展趋势进行了预测,进而探讨了六安市茶产业竞争力的影响因素,针对茶产业集群所面临的问题提出了解决对策,为开展大别山区茶产业集群向专业化、集中化趋势发展的研究提供了借鉴。

关键词：乡村振兴茶产业集群指数平滑法六安市

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我国农业与旅游业耦合协调发展研究

山东农业工程学院学报 2022年第12期39卷 49-53页

作者：刘晓婉李晓然岳芹皖西学院安徽六安237012

实施乡村振兴战略能够解决我国所面临的农村发展不充分、城乡发展不均衡及农民、农业、农村等三农问题。在构建现代化社会主义强国及推进小康社会建成中,乡村振兴战略拥有举足轻重的价值。旅游业与农业的协同耦合发展是推动乡村振兴战... 详细信息

实施乡村振兴战略能够解决我国所面临的农村发展不充分、城乡发展不均衡及农民、农业、农村等三农问题。在构建现代化社会主义强国及推进小康社会建成中,乡村振兴战略拥有举足轻重的价值。旅游业与农业的协同耦合发展是推动乡村振兴战略落实的重要渠道,为农村经济的发展指明了发展方向。然而在探索旅游与农业耦合协同发展的过程中,我们应结合乡村振兴及耦合发展的内涵,明确其耦合发展机制,从而确定其耦合协调的渠道。

关键词：乡村振兴农业旅游业协调发展

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影响变形链球菌生物膜形成因素的研究进展

中国微生态学杂志 2011年第10期23卷 956-957,960页

作者：李晓然赵今新疆医科大学第一附属医院口腔系牙体牙髓科新疆乌鲁木齐830054

龋病的发生发展过程中,致龋微生物生物膜(biofilm)形成是龋病发生的首要因素。变形链球菌(Streptococcus mutans)等在口腔生物膜内进行产酸代谢活动是产生龋病的直接原因。因此,控制S.mutans生物膜的形成可以减少龋病的发生、发展。本... 详细信息

龋病的发生发展过程中,致龋微生物生物膜(biofilm)形成是龋病发生的首要因素。变形链球菌(Streptococcus mutans)等在口腔生物膜内进行产酸代谢活动是产生龋病的直接原因。因此,控制S.mutans生物膜的形成可以减少龋病的发生、发展。本文就影响变形链球菌生物膜形成的因素研究进展做一综述。

关键词：变形链球菌生物膜影响因素

牡蛎中单核细胞增生李斯特菌PCR快速检测方法的建立

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卫生研究 2023年第2期52卷 265-271页

作者：王晓芳张若鸿王纯阎贺静姚红刘绍军李晓然杨洋崔生辉郭云昌河北科技师范学院食品科技学院秦皇岛066600 中国食品药品检定研究院北京100050 国家食品安全风险评估中心北京100022

目的建立一种无需前增菌快速检测牡蛎中单核细胞增生李斯特菌的PCR方法。方法利用β-环糊精和膨润土包被活性炭处理牡蛎样品,去除聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)反应抑制因子,以单核细胞增生李斯特菌特异基因inlB为靶基因... 详细信息

目的建立一种无需前增菌快速检测牡蛎中单核细胞增生李斯特菌的PCR方法。方法利用β-环糊精和膨润土包被活性炭处理牡蛎样品,去除聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)反应抑制因子,以单核细胞增生李斯特菌特异基因inlB为靶基因,建立无需样品前增菌的PCR快速检测方法。同时验证该方法的特异性、灵敏度及实用性参数,并评估该方法所用试剂在冷冻保存后的稳定性与实用性。结果建立的PCR方法对130株目标菌和63株非目标菌的检测特异性为100%,灵敏度达10 CFU/25 g。该方法无需前增菌,4 h即可完成检测。PCR方法和国标方法对实际样品中单核细胞增生李斯特菌的检出率(均为13%)和活菌检测率(均为100%)一致,即符合率100%。此外,该方法所用试剂在-20℃冷冻条件下可稳定保存至少1年。结论建立的PCR方法特异性强、灵敏度高,可快速、准确检测出牡蛎中的单核细胞增生李斯特菌。

关键词：单核细胞增生李斯特菌 β-环糊精膨润土包被活性炭牡蛎聚合酶链反应

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缺氧条件下含氧燃料燃烧性能研究

石油炼制与化工 2015年第3期46卷 67-70页

作者：李晓然许世海刘晓吴芃解放军后勤工程学院军事油料应用与管理工程系重庆401331

采用低压氧弹法模拟高原缺氧条件下燃料的燃烧状况,选择二乙二醇二甲醚、己二酸二乙酯、生物柴油作为含氧添加剂,分别以不同配比掺混到柴油中,研究了这3种含氧添加剂在缺氧条件下的助燃性能,并采用燃烧改善系数作为评价指标来评价它们... 详细信息

采用低压氧弹法模拟高原缺氧条件下燃料的燃烧状况,选择二乙二醇二甲醚、己二酸二乙酯、生物柴油作为含氧添加剂,分别以不同配比掺混到柴油中,研究了这3种含氧添加剂在缺氧条件下的助燃性能,并采用燃烧改善系数作为评价指标来评价它们的助燃效果。结果表明:在缺氧条件下,加入3种含氧添加剂均能不同程度地提高燃料的燃烧性能;助燃作用的大小与添加剂本身的热值和含氧量有关;在海拔3 000m处,最优含氧添加剂是二乙二醇二甲醚,其最佳添加量(w)为18%。

关键词：柴油含氧添加剂低压氧弹法缺氧

乳制品中金黄色葡萄球菌PCR快速检测方法的建立

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核农学报 2022年第6期36卷 1193-1203页

作者：王纯张若鸿王晓芳李晓然尹树仁杨洋崔生辉郭云昌河北科技师范学院食品科技学院河北秦皇岛066600 中国食品药品检定研究院北京100050 国家食品安全风险评估中心北京100022

为快速检测乳制品中的金黄色葡萄球菌,本研究将纳米氢氧化钛和纳米氢氧化锆固定在滤纸片上以去除PCR反应抑制因子,并以Nuc为靶基因,建立一种无需样品前增菌的PCR快速检测方法,同时确定该方法的特异性、灵敏度和实用性,并评估该方法所用... 详细信息

为快速检测乳制品中的金黄色葡萄球菌,本研究将纳米氢氧化钛和纳米氢氧化锆固定在滤纸片上以去除PCR反应抑制因子,并以Nuc为靶基因,建立一种无需样品前增菌的PCR快速检测方法,同时确定该方法的特异性、灵敏度和实用性,并评估该方法所用试剂在冷冻保存条件下的稳定性与实用性。结果表明,该PCR快速检测方法在检测97株目标菌及83株非目标菌后未出现假阳性或假阴性结果;该方法无需增菌处理,可在4 h内完成检测,检测限为10^(1)CFU·25 g^(-1)或10^(1)CFU·25 mL^(-1);该方法与传统检测方法在实际乳制品样品中金黄色葡萄球菌的检出率及活菌检测率均一致(符合率100%);此外,该检测方法所用试剂在-20℃冷冻条件下可稳定保存至少12个月。综上所述,本研究建立的PCR快速检测方法特异性强、灵敏度高,且实用性良好,能有效去除样品基质中的PCR反应抑制因子,为乳制品中金黄色葡萄球菌的快速检测提供了参考依据。

关键词：纳米氢氧化钛纳米氢氧化锆 PCR 乳制品金黄色葡萄球菌