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BV教育长春分校考研培训业务营销策略优化研究

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BV教育长春分校考研培训业务营销策略优化研究

作者：李昕琦吉林大学

学位级别：硕士

应用Bac-to-Bac双启动子表达系统在家蚕中表达BmCecB2

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应用Bac-to-Bac双启动子表达系统在家蚕中表达BmCecB2

作者：李昕琦安徽农业大学

学位级别：硕士

家蚕抗菌肽Cecropin B是家蚕免疫系统产生的一种具有生物活性的小分子多肽,无分子内的二硫键,分子质量约为4kDa,其N端和C端分别具有强碱性和强疏水性。抗菌肽Cecropin B具有抗细菌、抗真菌、抗病毒等作用,此外抗菌肽还可作为绿色健康的... 详细信息

家蚕抗菌肽Cecropin B是家蚕免疫系统产生的一种具有生物活性的小分子多肽,无分子内的二硫键,分子质量约为4kDa,其N端和C端分别具有强碱性和强疏水性。抗菌肽Cecropin B具有抗细菌、抗真菌、抗病毒等作用,此外抗菌肽还可作为绿色健康的饲料添加剂应用在畜牧生产中,促进动物健康生长,提高动物自身免疫力,因此抗菌肽的研究已成为生命科学领域的一大热点。抗菌肽从生物组织中分离获得大量的抗菌肽难度大,成本高,以融合蛋白的形式表达,表达产物活性较低,纯化过程比较复杂,并且翻译后加工修饰不完善,而采用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统所产生的重组病毒多数情况下通过皮下注射的方式接种昆虫,效率低下,因此通过构建可同时表达polh基因和外源目的基因的真核表达系统进行抗菌肽基因工程的研究已成为一个热门话题。本研究应用Bac-to-Bac表达系统,构建含有家蚕抗菌肽cecropin B2基因与polh基因的双启动子载体,在家蚕中表达,获得具有抑菌活性的Cecropin B抗菌肽,并进行表达量分析,研究结果如下：1.获得重组杆状病毒BmNPV-CecB2/polh分别以质粒PET-32a-BmCecB2和野生型T3株基因组DNA为模板进行PCR扩增,合成BmCecB2基因和polh基因,再将两个基因克隆到pFastBacDual转移载体Pp10和Pph的MCS的下游,构建重组质粒pFastBacDual-CecB2/polh,再转化到DH10Bac ***感受态细胞,发生转座,获得重组Bacmid-CecB2/polh, Bacmid DNA通过转染BmN细胞获得重组杆状病毒BmNPV-CecB2/polh。2.目的基因在家蚕幼虫中表达及鉴定重组Bacmid-CecB2/polh通过脂质体介导转染BmN细胞,转染72h后,BmN细胞有明显的感染症状,在显微镜下可见细胞呈现圆球形,并能观察到大量的多角体。重组病毒液经口添食家蚕幼虫,144h后,添食重组病毒的家蚕有明显感染症状,蚕血呈乳白色,收集受感染家蚕的血液,超声裂解细胞,Tricine-SDS-PAGE结果表明家蚕抗菌肽cecropin B基因与polh基因在家蚕体中均得到表达,家蚕抗菌肽cecropin B基因大小约为4.9KD,polh基因大小约为29KD。抑菌试验的结果显示表达的家蚕抗菌肽Cecropin B具有抑菌活性,抑菌直径为10mm。ELISA表达量检测结果得知蚕体粗提物中BmCecB2平均浓度0.115μ/mL,蚕血BmCecB2平均浓度为0.109μg/mL,为今后进一步的实验研究提供依据。通过以上研究结果表明,构建双启动子表达载体同时表达家蚕抗菌肽cecropin B基因及polh基因,由此获得的重组病毒既可以在家蚕培养细胞内表达,也可以利用多角体经口添食感染家蚕幼虫实现高效率表达,为大规模生产及畜牧业应用提供理论基础。

关键词：抗菌肽Cecropin B 多角体蛋白 pFastBacDual Bac-to-Bac表达系统抗菌活性

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新媒体传播下警察公共关系发展策略

公关世界 2023年第9期 74-75页

作者：李浩李昕琦王筠娴铁道警察学院公安管理学系

警察公共关系的理论与实践在新媒体时代下都面临着全新的挑战。本文通过梳理警察公共关系发展历史与现状，对比新媒体与传统媒体下警察公共关系的发展，同时深入探讨新媒体环境下警察公共关系存在的危机与挑战。最后，根据新媒体的优势...

警察公共关系的理论与实践在新媒体时代下都面临着全新的挑战。本文通过梳理警察公共关系发展历史与现状，对比新媒体与传统媒体下警察公共关系的发展，同时深入探讨新媒体环境下警察公共关系存在的危机与挑战。最后，根据新媒体的优势，提出警察公共关系构建策略。

关键词：

抗菌肽Thanatin基因与多角体蛋白Polyhedrin基因的融合表达及产物的抑菌活性分析

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蚕业科学 2011年第6期37卷 1008-1013页

作者：王成林李昕琦凌琳徐家萍安徽农业大学生命科学学院合肥230036

为利用大肠杆菌表达系统高效表达抗菌肽Thanatin并避免其抗菌活性对宿主菌的影响,将抗菌肽Thanatin基因与家蚕核型多角体病毒多角体蛋白Polyhedrin基因融合克隆到表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a(+)-Thanatin-polyhedrin,... 详细信息

为利用大肠杆菌表达系统高效表达抗菌肽Thanatin并避免其抗菌活性对宿主菌的影响,将抗菌肽Thanatin基因与家蚕核型多角体病毒多角体蛋白Polyhedrin基因融合克隆到表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a(+)-Thanatin-polyhedrin,转化大肠杆菌BL21(DE3)中表达。SDS-PAGE检测显示经诱导表达的菌体中有与融合蛋白理论值(35 kD)相符的目的条带。凝胶扫描分析目的融合蛋白以包涵体的形式表达,且诱导后6 h融合蛋白的表达量最大,约占菌体总蛋白量的30%。纯化融合蛋白用盐酸羟胺切割后初步纯化获得具有抗菌活性的Thanatin蛋白。研究结果表明家蚕核型多角体病毒多角体蛋白能够作为抗菌肽Thanatin融合标签介导其高水平表达,有助于利用基因工程技术大规模生产抗菌肽Thanatin。

关键词：抗菌肽 Thanatin 家蚕核型多角体病毒多角体蛋白原核表达抗菌活性

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利用城市二级排放污水热量的城市污泥热干化系统技术

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LCMS-QTOF鉴定卡络磺钠原料药的有关物质

第11届长三角科技论坛环境保护分论坛暨上海市环境科学学会第18届学术年会

作者：方跃飞陈俊沈江涛李昕琦上海市政工程设计研究总院(集团)有限公司

目前世界能源紧缺,高温双热源热泵也是节能型产品,节能率比普通热泵高70%。同时城市生活污水作为人类生活必不可少的附属品,蕴含着巨大的能量,可以成为优质的低温热源。介绍了利用城市污水和热泵作为热源,利用干燥机对城市污泥进行热干... 详细信息

目前世界能源紧缺,高温双热源热泵也是节能型产品,节能率比普通热泵高70%。同时城市生活污水作为人类生活必不可少的附属品,蕴含着巨大的能量,可以成为优质的低温热源。介绍了利用城市污水和热泵作为热源,利用干燥机对城市污泥进行热干化的系统结构、工作原理和实验研究。该系统也可应用于干燥其他物料,如食品、药材等。

关键词：高温双热源热泵带式干燥机污水热量收集装置挤条机

来源： cnki会议评论

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中国现代应用药学 2022年第7期39卷 934-941页

作者：冀峰徐海英李玮陈振贺董静杨勇李昕琦阚家义李晓东曹磊岛津企业管理(中国)有限公司北京100020 四川联成迅康医药股份有限公司成都610091 安徽省食品药品检验研究院合肥230051 成都天台山制药有限公司成都611531

目的检测卡络磺钠原料药中有关物质,并进行结构鉴定,为工艺优化和质量控制提供参考。方法采用Shim-pack Scepter C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以50 mmol·L^(-1)乙酸铵水溶液为流动相A、乙腈为流动相B对卡络磺钠强制降解溶液中的有... 详细信息

目的检测卡络磺钠原料药中有关物质,并进行结构鉴定,为工艺优化和质量控制提供参考。方法采用Shim-pack Scepter C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以50 mmol·L^(-1)乙酸铵水溶液为流动相A、乙腈为流动相B对卡络磺钠强制降解溶液中的有关物质进行分离。采用四极杆飞行时间高分辨质谱在m/z 100~800内进行正负离子扫描,数据依赖性采集获取二级质谱图。结合有关物质精确质量数、质谱裂解规律及卡络磺钠合成工艺推测其可能的结构。结果卡络磺钠原料药经强制降解破坏得到8个主要的杂质,2种为已报道杂质,6种为本研究首次报道。强制降解试验表明卡络磺钠对高温和氧化相对较为稳定,光照、强酸和强碱条件对卡络磺钠影响较大。卡络磺钠原料药中检出杂质5,6和8,高温破坏的主要降解产物是杂质8。结论本研究建立的液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用法具有良好的分离能力,可有效地鉴定卡络磺钠原料药中有关物质,为其生产工艺和质量控制提供了参考。

关键词：卡络磺钠有关物质四极杆飞行时间质谱杂质谱

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鄱阳湖全天候水位-面积逐日数据集（2014—2023年）

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湖泊科学 2025年

作者：李昕悦谢涛马荣华南京信息工程大学遥感与测绘工程学院中国科学院南京地理与湖泊研究所湖泊与流域水安全重点实验室中国科学院大学南京学院

在气候变化与人类活动的影响下，鄱阳湖洪涝灾害和干旱频发，严重影响鄱阳湖流域的生态环境。本研究旨在通过雷达遥感技术，准确监测鄱阳湖水域面积全天候的时空动态变化，为鄱阳湖水资源评估和旱涝灾害预警提供科学依据。基于2014—202... 详细信息

在气候变化与人类活动的影响下，鄱阳湖洪涝灾害和干旱频发，严重影响鄱阳湖流域的生态环境。本研究旨在通过雷达遥感技术，准确监测鄱阳湖水域面积全天候的时空动态变化，为鄱阳湖水资源评估和旱涝灾害预警提供科学依据。基于2014—2023年Sentinel-1影像，分别利用单波段阈值法、双极化水体指数以及谱间关系法，结合最大类间方差法自适应确定阈值提取水体，通过精度评价，选定最优提取方法，应用于全天候鄱阳湖水域面积提取。结合星子站、湖口站水位数据，揭示水位变化与湖泊水域面积关系。得到鄱阳湖全天候水位-面积逐日数据集，该数据集包括2014—2023年共424期鄱阳湖水域栅格数据、水域面积汇总数据以及星子站、湖口站水位数据，数据集存储为.tif、.xlsx格式。同时，利用湖泊水域面积时间序列曲线的扰动事件识别方法，识别2020年和2022年面积突变的主要因素。结果表明：谱间关系法结合最大类间方差的阈值分割法的提取精度最优(总体精度>95%);2016—2023年间，鄱阳湖的水域面积呈现显著的年内变化，主要集中在河道以及湖中部。水位与面积变化总体趋于一致，水位≥14 m时，水位变化与湖泊水域面积变化呈现显著正相关。从湖泊时间序列扰动结果分类可以看出，2020年湖泊水域面积扩张的主要原因是自然因素，2022年湖泊水域面积骤减的主要原因是人为因素。

关键词：水域面积鄱阳湖 Sentinel-1 Google Earth Engine 时序变化

n型筋布置方式对3D打印混凝土抗弯性能的影响

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硅酸盐学报 2025年第01期53卷 27-36页

作者：王振地李昕泽王玲中国建筑材料科学研究总院有限公司绿色建筑材料国家重点实验室

挤出式混凝土3D打印技术被认为是最可能实现大型建筑建造的主流工艺，缺少有效的配筋方法是该技术实用化的主要障碍之一。n型筋垂直贯入3D打印混凝土（3DPC）已被证明是行之有效的纵向配筋方法。为评价n型光圆钢筋布局方式对3DPC抗弯性... 详细信息

挤出式混凝土3D打印技术被认为是最可能实现大型建筑建造的主流工艺，缺少有效的配筋方法是该技术实用化的主要障碍之一。n型筋垂直贯入3D打印混凝土（3DPC）已被证明是行之有效的纵向配筋方法。为评价n型光圆钢筋布局方式对3DPC抗弯性能的影响，定义了钢筋不搭接贯穿度Pnon和搭接贯穿度Povr，制备了Pnon和Povr不同的8种试件，通过三点弯曲加载试验研究了贯穿度对配筋3DPC抗弯强度、荷载位移曲线以及断面形貌的影响。结果表明：不搭接的配筋方式对抗弯强度没有增强效果且破坏模式均为脆性破坏；当n型筋搭接布置时，3DPC的抗弯强度随贯穿度增加而增大，但钢筋的贯穿度对抗弯强度的提升存在一个饱和值。搭接n型筋增强3DPC的破坏模式为韧性破坏，并出现了明显的应变硬化特性。通过讨论得到了配筋率、钢筋贯穿度、3DPC基体抗弯强度对配筋3DPC抗弯强度的影响权重，还对比分析了n型筋（不搭接和搭接）、铆钉与短切直筋等4种纵向配筋方法对3DPC抗弯强度的提升效果，相关结果对配筋参数和方法的选择具有重要的参考价值和指导意义。

关键词： n型筋 3D打印混凝土贯穿度抗弯性能

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金融发展视域下黄河流域城市绿色发展效率研究

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河南师范大学学报（自然科学版） 2025年第1期53卷 13-22页

作者：李昕昱郭光庭杨韶艳宁夏大学经济管理学院银川750021

利用2006-2021年黄河流域78个城市面板数据,采用超效率EBM模型与窗口DEA方法,对黄河流域城市绿色发展效率进行测算,并构建空间杜宾模型实证检验黄河流域城市金融发展对绿色发展效率的影响.研究发现:(1)黄河流域城市金融发展与绿色发展... 详细信息

利用2006-2021年黄河流域78个城市面板数据,采用超效率EBM模型与窗口DEA方法,对黄河流域城市绿色发展效率进行测算,并构建空间杜宾模型实证检验黄河流域城市金融发展对绿色发展效率的影响.研究发现:(1)黄河流域城市金融发展与绿色发展效率呈显著的空间正向相关关系,方向特征表现为偏西北-偏东南;(2)总体来看,金融发展的3个子系统中,金融规模显著促进绿色发展效率的提升,金融效率和金融可得性反之;(3)从空间溢出角度来看,当前黄河流域城市金融规模不利于本地区绿色发展效率的提升,但促进周边地区绿色发展效率的提高;金融效率对本地区绿色发展效率产生显著的负向影响,对邻近地区影响不明显;金融可得性显著促进了本地绿色发展效率,却抑制了邻近地区的绿色发展.

关键词：金融发展黄河流域绿色发展效率空间杜宾模型

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