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二十二碳六烯酸对大鼠脂肪细胞增殖分化的影响

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生物工程学报 2005年第5期21卷 840-843页

作者：李惠侠杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室杨凌712100

体外培养大鼠脂肪细胞,分别以0μmolL(对照组)、40μmolL(低剂量组)和160μmolL(高剂量组)的二十二碳六烯酸(DHA)处理细胞。采用台盼蓝排斥试验和MTT比色法检测细胞活性及增殖状况;油红O染色化学比色法定量分析细胞内脂肪生成及细胞分... 详细信息

体外培养大鼠脂肪细胞,分别以0μmolL(对照组)、40μmolL(低剂量组)和160μmolL(高剂量组)的二十二碳六烯酸(DHA)处理细胞。采用台盼蓝排斥试验和MTT比色法检测细胞活性及增殖状况;油红O染色化学比色法定量分析细胞内脂肪生成及细胞分化程度;逆转录聚合酶链反应(RT_PCR)分析过氧化物酶增殖物激活受体γ2(PPARγ2)mRNA表达情况,探讨DHA对前体脂肪细胞增殖分化的影响及其可能机制。结果显示,各组细胞活力及MTT测得的光密度值(OD值)均低于对照组,160μmolL组在60～72h作用显著(P<0.05);脂肪细胞经DHA处理后,160μmolL组细胞油红O染色的OD值及PPARγ2mRNA表达量均显著下降(P<0.01)。以上结果说明,DHA对脂肪细胞增殖分化均有一定抑制作用,高剂量DHA(160μmolL)可显著减少细胞内脂肪的合成、抑制脂肪细胞分化,PPARγ2mRNA表达量的下降可能是DHA抑制细胞分化的部分原因。

关键词：二十二碳六烯酸脂肪细胞增殖分化

猪脂肪组织发育过程中Wnt/β-catenin信号通路相关基因及脂肪转录因子的时序表达

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生物工程学报 2008年第5期24卷 746-753页

作者：罗肖李惠侠杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室杨凌712100

为研究Wnt/β-catenin信号通路对猪脂肪组织发育的影响,并探讨其可能的作用机制,以1-120日龄长白猪脂肪组织为试验材料,采用SQRT-PCR法检测Wnt信号通路中相关基因β-catenin、GSK3β、Fz1及主要的脂肪转录因子PPARγ、C/EBPα和分化早... 详细信息

为研究Wnt/β-catenin信号通路对猪脂肪组织发育的影响,并探讨其可能的作用机制,以1-120日龄长白猪脂肪组织为试验材料,采用SQRT-PCR法检测Wnt信号通路中相关基因β-catenin、GSK3β、Fz1及主要的脂肪转录因子PPARγ、C/EBPα和分化早期标志基因LPL mRNA的表达变化;石蜡切片免疫组化方法定性检测β-catenin在脂肪组织发育中的时序表达变化。SQRT-PCR结果显示,β-catenin mRNA在猪出生第1天有高水平表达,随着个体日龄的增长,其表达量逐渐降低,60日龄后维持在一个较低水平。GSK3β和Fz1mRNA的表达量也伴随脂肪组织的发育而逐渐降低。而LPL、PPARγ和C/EBPα的mRNA表达量随着个体日龄的增长而逐渐升高,60日龄后仍保持高水平的表达。石蜡切片免疫组化结果显示,随着脂肪组织的发育,β-catenin蛋白的表达也随之降低,并且β-catenin蛋白的表达部位逐渐由细胞核和细胞质共表达变为只在细胞质中表达。上述基因表达的时序变化规律提示,β-catenin在维持前体脂肪细胞的未分化状态,抑制脂肪组织发育中具有重要作用,其作用机制可能是通过对脂肪细胞转录因子PPARγ、C/EBPα及分化早期标志基因LPL mRNA的调控来进行的。

关键词： Wnt/β-catenin 猪脂肪发育时序表达

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脂肪组织源性干细胞研究进展

生理科学进展 2007年第2期38卷 129-132页

作者：李惠侠屈长青罗肖杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室陕西杨凌712100

增加具有完整功能的种子细胞数目是细胞移植的首要环节。近来研究发现,成体动物脂肪组织中含有大量的具有多向分化潜能的间充质干细胞,在特定条件下可分化为多种组织细胞,如脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、肌细胞及神经星状细胞等,且具... 详细信息

增加具有完整功能的种子细胞数目是细胞移植的首要环节。近来研究发现,成体动物脂肪组织中含有大量的具有多向分化潜能的间充质干细胞,在特定条件下可分化为多种组织细胞,如脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、肌细胞及神经星状细胞等,且具有极强的自我复制能力,有望成为组织工程理想的种子细胞。本文综述了脂肪组织源性干细胞(ADSCs)的发现、生物学特性、多向分化潜能、应用前景及存在的问题。

关键词：脂肪源性干细胞细胞分化组织工程

AA和DHA在大鼠前体脂肪细胞增殖与分化中的调控作用

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AA和DHA在大鼠前体脂肪细胞增殖与分化中的调控作用

作者：李惠侠西北农林科技大学

学位级别：硕士

本文以生长发育正常、健康状况良好的20 日龄雄性SD 大鼠为实验动物,采用脂肪细胞离体培养技术分离培养大鼠前体脂肪细胞,以不同浓度的花生四烯酸(AA)和二十二碳六烯酸(DHA)处理细胞,分析了AA 和DHA对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响... 详细信息

本文以生长发育正常、健康状况良好的20 日龄雄性SD 大鼠为实验动物,采用脂肪细胞离体培养技术分离培养大鼠前体脂肪细胞,以不同浓度的花生四烯酸(AA)和二十二碳六烯酸(DHA)处理细胞,分析了AA 和DHA对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响,并比较了不同浓度AA 和DHA 对前体脂肪细胞分化过程中过氧化物酶增殖物活化受体-γ2(PPAR-γ2)及环氧合酶-2(COX-2)基因mRNA 表达的调控, 为进一步阐明AA 和DHA 两种多不饱和脂肪酸(PUFA)在脂肪细胞增殖与分化中的作用机理提供理论依据。利用台盼兰排斥试验、噻唑蓝比色法(MTT)、Hoechst33342 荧光染色、流式细胞术测细胞周期法等实验技术分别检测了不同浓度AA 和DHA 对大鼠前体脂肪细胞活力、细胞周期及凋亡的影响。台盼兰排斥试验和MTT 结果均表明,AA 促进大鼠前体脂肪细胞活力,120 μmol/L的AA 促增殖作用较40、80、160 μmol/L三种浓度显著(P0.05)。与对照组相比,DHA对大鼠前体脂肪细胞的增殖有一定抑制作用,160 μmol/L DHA作用显著(P<0.05)。通过细胞形态观察、油红O 染色、香草醛测总脂法和考马斯亮蓝测总蛋白等方法分析不同浓度AA 和DHA对大鼠前体脂肪细胞分化的影响。结果表明:低浓度AA(40-80 μmol/L)可降低细胞内脂肪生成量,抑制前体脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化,80 μmol/L AA 作用效果显著(P<0.01),而高浓度AA(160 μmol/L)则对细胞的分化起促进作用;DHA 以浓度依赖性抑制脂肪细胞分化,160 μmol/L DHA抑制作用较40、80、120 μmol/L三种浓度显著(P<0.05)。采用半定量RT-PCR 技术分析40 μmol/L、160 μmol/L两种浓度的AA 和DHA对大鼠脂肪细胞中PPARγ2 和COX-2 mRNA表达的影响。结果显示:低浓度AA(40 μmol/L)和高浓度DHA(160 μmol/L)均可下调PPARγ2 mRNA表达,160 μmol/L DHA作用极显著(P<0.01),但二者对COX-2 mRNA 的表达均有上调作用, 40 μmol/L AA 作用显著(P<0.01);高浓度AA(160 μmol/L)和低浓度DHA(40 μmol/L)均显著抑制COX-2 mRNA的表达(P<0.01)。

关键词：前体脂肪细胞 AA DHA 增殖分化

用成熟脂肪建立一种新的猪前体脂肪细胞培养模型

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中国生物化学与分子生物学报 2009年第3期25卷 270-275页

作者：李惠侠罗肖刘荣鑫杨公社西北农林科技大学动物科技学院动物脂肪沉积与肌肉发育实验室陕西杨凌712100 南京农业大学动物科技学院南京210095

用去分化的成熟脂肪细胞建立一种新的具有再增殖和再分化能力的猪前体脂肪细胞模型.用"天花板"培养法分离、培养1～3日龄仔猪皮下成熟脂肪细胞,显微镜下观察细胞形态变化并计数,流式细胞术检测细胞周期;油红O染色法检测脂肪细胞分化率,R... 详细信息

用去分化的成熟脂肪细胞建立一种新的具有再增殖和再分化能力的猪前体脂肪细胞模型.用"天花板"培养法分离、培养1～3日龄仔猪皮下成熟脂肪细胞,显微镜下观察细胞形态变化并计数,流式细胞术检测细胞周期;油红O染色法检测脂肪细胞分化率,RT-PCR分析前体脂肪细胞标志基因Pref-1及成熟脂肪细胞关键转录因子PPARγ和C/EBPα等mRNA表达情况.发现刚贴壁的细胞为单室脂滴成熟脂肪细胞,油红O染色完全阳性;14d后这种成熟脂肪细胞完全去分化为无脂滴的纤维状细胞,并表达前体脂肪细胞标志基因Pref-1,油红O染色阴性.这种去分化的前体脂肪细胞在成脂诱导剂作用下,可重新分化为成熟的脂肪细胞.结果证实,成熟脂肪细胞去分化后的前体脂肪细胞可重新增殖、分化为成熟脂肪细胞,是一种新的有效的前体脂肪细胞模型.

关键词：成熟脂肪细胞 “天花板”培养增殖分化前体脂肪细胞

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盐池滩羊肉品质特性及其潜在调控机理探讨

草业学报 2024年

作者：杨攀平李惠侠胡亚美南京农业大学动物科技学院宁夏大学动物科技学院

盐池滩羊是宁夏当地的优良特色畜种，因其肉质鲜嫩、膻味轻、大理花纹明显而深受消费者青睐。但随着封山禁牧政策的实施和舍饲圈养的现代化畜牧业发展，致使滩羊肉品质下降，故提升滩羊肉质风味，改善肉品质性状成为研究者及生产者关注... 详细信息

盐池滩羊是宁夏当地的优良特色畜种，因其肉质鲜嫩、膻味轻、大理花纹明显而深受消费者青睐。但随着封山禁牧政策的实施和舍饲圈养的现代化畜牧业发展，致使滩羊肉品质下降，故提升滩羊肉质风味，改善肉品质性状成为研究者及生产者关注的重点，而明确滩羊肉质特征及其影响因素的作用机制对于提升羊肉品质具有重要意义。本研究从营养、遗传和环境阐述其对肌内脂肪沉积和肌纤维分化的影响及作用机理，重点总结了瘤胃微生物对滩羊肉品质的代谢调控作用，以期为提高滩羊肉品质奠定理论基础。

关键词：盐池滩羊瘤胃微生物肌内脂肪肌肉纤维肉质

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Wnt信号通路与前体脂肪细胞

中国生物化学与分子生物学报 2007年第10期23卷 791-796页

作者：罗肖李惠侠杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室杨凌712100

Wnt蛋白是一类分泌型蛋白生长因子,通过自分泌和旁分泌作用调节多种细胞的发生和发育.新近研究表明,Wnt信号通路在前体脂肪细胞的增殖分化中发挥着重要作用.Wnt蛋白的配基通过与细胞膜上的特异性受体Frizzled1/2/5及辅助受体LRP5/6结合... 详细信息

Wnt蛋白是一类分泌型蛋白生长因子,通过自分泌和旁分泌作用调节多种细胞的发生和发育.新近研究表明,Wnt信号通路在前体脂肪细胞的增殖分化中发挥着重要作用.Wnt蛋白的配基通过与细胞膜上的特异性受体Frizzled1/2/5及辅助受体LRP5/6结合,激活经典或非经典的Wnt信号通路,影响下游靶基因产物的磷酸化作用,进而抑制C/EBPα、PPARγ等脂肪细胞关键转录因子,使细胞保持未分化状态,从而抑制脂肪的形成.本文就Wnt信号通路的研究史和主要分支、作用方式及其抑制脂肪细胞的机制方面进行了综述,并对今后的研究方向和应用作了展望.

关键词： Wnt信号通路前体脂肪细胞分化

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芦丁对热应激奶牛生产性能的影响

南京农业大学学报 2021年第6期44卷 1144-1153页

作者：唐宇杰卢浩诚韩兆玉李惠侠南京农业大学动物科技学院/草食动物研究所江苏南京210095

[目的]本文旨在研究芦丁对热应激下奶牛生产性能及机制的影响。[方法]选取生理情况相同的荷斯坦奶牛30头,随机分为3组,每组10头,对照组饲喂基础日粮,试验1组在基础日粮中添加2 g芦丁,试验2组在基础日粮中添加3 g芦丁,饲养期为60 d,采血... 详细信息

[目的]本文旨在研究芦丁对热应激下奶牛生产性能及机制的影响。[方法]选取生理情况相同的荷斯坦奶牛30头,随机分为3组,每组10头,对照组饲喂基础日粮,试验1组在基础日粮中添加2 g芦丁,试验2组在基础日粮中添加3 g芦丁,饲养期为60 d,采血测定生理指标,采集奶样分析指标。体外培养奶牛乳腺上皮细胞(BMEC),对细胞进行热应激处理,试验组在基础培养基(DMEM/F12+10%胎牛血清)添加40μg·mL^(-1)芦丁,RT-qPCR测定乳脂、乳蛋白及乳糖相关基因mRNA表达水平,以评估芦丁对热应激奶牛生产性能的影响。[结果]与对照组相比,日粮添加芦丁饲喂40 d后试验组奶牛产奶量均显著升高(P0.05),但试验组乳中脂质质量显著升高(P<0.05),乳中体细胞数均显著降低(P<0.05);体外试验中对奶牛BMEC进行热应激处理后,添加芦丁显著提高BMEC乙酰辅酶A羧化酶基因(ACC)、脂肪酸合成酶基因(FASN)、二酰甘油酰基转移酶2基因(DGAT2)、固醇调节元件结合蛋白1基因(SREBP1)、酪蛋白αs1基因(CSN1S1)、酪蛋白β基因(CSN2)及葡萄糖转运蛋白1基因(GLUT1)mRNA的相对表达水平(P<0.05)。[结论]芦丁可通过提高乳脂、乳蛋白及乳糖相关基因mRNA表达水平来提高乳品质和奶牛产奶性能,是一种优秀的植源性饲料添加剂。

关键词：芦丁奶牛热应激生产性能乳品质

新生儿行为神经评分及血钙检测在窒息新生儿中的意义

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实用儿科临床杂志 2004年第6期19卷 467-469页

作者：曲群李惠侠宗璐李凤莲西安交通大学第二医院妇产科陕西省妇幼保健院新生儿科陕西西安710004

目的　探讨新生儿行为神经评分 (NABA)及血钙测定在窒息新生儿中的临床意义。方法　对 6 0例窒息新生儿行NBNA评分并测定血钙 ,分析其在不同病情中的变化。结果　NBNA评分及血钙在窒息新生儿中均下降 ,并与窒息程度呈正相关。结论　NBN... 详细信息

目的　探讨新生儿行为神经评分 (NABA)及血钙测定在窒息新生儿中的临床意义。方法　对 6 0例窒息新生儿行NBNA评分并测定血钙 ,分析其在不同病情中的变化。结果　NBNA评分及血钙在窒息新生儿中均下降 ,并与窒息程度呈正相关。结论　NBNA评分及血钙测定联合应用有助于判断窒息新生儿的病情并估计预后。

关键词：婴儿新生窒息新生儿行为神经评分血钙