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当代护士（上旬刊） 2024年第1期31卷 113-116页

作者：郑湘琼吴嘉齐马肇华柯玩娜吕燕君李庆妮广东省中山市博爱医院生殖分院中山528402

总结1例遗传性易栓症患者行IVF-ET助孕治疗的护理经验。护理要点包括静脉血栓风险评估、健康教育、预防护理、皮肤管理、加强心理支持、延续性护理等。经过精心的治疗及护理后,患者在IVF-ET助孕治疗过程中未发生静脉血栓栓塞。

关键词：遗传性易栓症 IVF-ET助孕护理

佐剂对IBRV△gG/△TK双基因缺失活疫苗牛体攻毒保护效果的影响

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吉林农业大学学报 2023年

作者：王琛张一李庆妮陈建国陈颖钰陈曦胡长敏郭爱珍华中农业大学湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北省洪山实验室华中农业大学动物医学院华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业部兽用诊断制剂创制重点实验室农业部反刍动物生物制品重点实验室

牛传染性鼻气管炎是危害养牛业的一种重要病毒性传染病，疫苗免疫是最主要的防控手段。为研究水性佐剂对牛传染性鼻气管炎Tk和gG双基因缺失活疫苗（IBRV △gG/△TK株）的免疫增强作用。将18头1.5～2.0月龄的奶公犊分成4组，组1～3各5头... 详细信息

牛传染性鼻气管炎是危害养牛业的一种重要病毒性传染病，疫苗免疫是最主要的防控手段。为研究水性佐剂对牛传染性鼻气管炎Tk和gG双基因缺失活疫苗（IBRV △gG/△TK株）的免疫增强作用。将18头1.5～2.0月龄的奶公犊分成4组，组1～3各5头牛，组4为3头牛。组1滴鼻接种IBRV △gG/△TK疫苗株，组2滴鼻接种IBRV △gG/△TK疫苗株和Gel 01 ST水性佐剂混合物，组3为未免攻毒对照组，组4为不做处理的空白对照组。免疫35 d后，1～3组滴鼻攻击毒力株IBRV HB06株。免疫期间，组1牛体温在正常范围内，有1头牛眼睛和鼻腔出现水样分泌物；组2有1头牛出现一个温次达到40.0 ℃，有2头在眼或鼻出现水样分泌物。组1和组2血清特异性抗体和中和抗体水平无显著差异。攻毒后，组1和组2各有1头在第3天体温分别升高一个温次，达到40.25 ℃和40.0 ℃，部分牛眼睛出现水样分泌物；组1鼻腔排毒到第8天，组2中有1头牛在第9天仍检测到排毒；而组3出现流眼、鼻分泌物、鼻黏膜出血等临床症状，鼻腔排毒持续到第11天；组1肺部病变与空白对照组（组4）无显著差异，组2略严重于组1，组3表现出明显的肺部病变。按症状分值计算，组1和组2总保护率分别为91.7%和61.41%。参考世界动物卫生组织关于IBRV活疫苗的免疫保护评判标准，组1和组2分别达到5/5和4/5保护。综上，此次研究所用佐剂没有达到预期效果，后期仍需进行更多筛选。

关键词：牛传染性鼻气管炎标记疫苗佐剂免疫病毒

禽流感病毒NA1和NA2基因重组杆状病毒的表达及N1和N2抗体ELISA检测方法的建立

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禽流感病毒NA1和NA2基因重组杆状病毒的表达及N1和N2抗体ELISA检...

作者：李庆妮中国兽医药品监察所

学位级别：硕士

为获得利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞内表达禽流感病毒(AIV)神经氨酸酶N1和N2蛋白,本研究利用RT-PCR方法得到H5N1和H9N2亚型AIV的NA1和NA2基因,将目的基因分别克隆到杆状病毒转移载体pFastBactHTA上,获得重组转移载体pFastBacHTA-NA1... 详细信息

为获得利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞内表达禽流感病毒(AIV)神经氨酸酶N1和N2蛋白,本研究利用RT-PCR方法得到H5N1和H9N2亚型AIV的NA1和NA2基因,将目的基因分别克隆到杆状病毒转移载体pFastBactHTA上,获得重组转移载体pFastBacHTA-NA1和pFastBacHTA-NA2,再将其转化到DH10Bac细胞中得到重组穿梭载体Bacmid-NA1和Bacmid-NA2,转染昆虫细胞sf9,获得重组杆状病毒vBac-NA1和vBac-NA2。将重组杆状病毒的表达产物经Western-blot分析后可见大小分别约为55KD和53KD的特异性条带,神经氨酸酶活性试验结果呈粉红色。随后,对目的蛋白的表达条件进行了探索性优化,确定了重组病毒感染后120h是细胞最适收获时间,此时N1和N2蛋白的表达量分别占细胞总蛋白的2.1%和1.7%。试验表明vBac-NA1和vBac-NA2在昆虫细胞sf9中成功表达了AIV的N1和N2蛋白,并且表达的N1和N2蛋白具有神经氨酸酶活性,能够和相应的多克隆血清发生特异性反应,相互之间无交叉反应。为建立间接ELISA方法以鉴别鸡血清中AIV神经氨酸酶的N1和N2抗体,本研究将重组杆状病毒表达的N1和N2蛋白作为包被抗原,确定了酶标二抗最适稀释度、抗原包被最适稀释度、血清最适稀释度、最适封闭液、血清最适作用时间、酶标二抗最适作用时间、最适显色时间和结果判定标准。对建立的间接ELISA方法进行特异性、敏感性试验和重复性试验。利用该方法检测64份禽流感H5N1和H9N2亚型抗体阳性的鸡血清,与NIT相比,对N1抗体检测的符合率为95.3%,对N2抗体检测的符合率为96.8%。该方法可鉴别出目前使用的7种禽流感疫苗免疫后血清中AIV神经氨酸酶N1和N2抗体。结果表明建立的间接ELISA方法有较高的特异性和敏感性,可以用于鉴别鸡血清中AIV神经氨酸酶的N1和N2抗体。

关键词：禽流感病毒 NA1和NA2基因杆状病毒表达系统 ELISA

吩噻嗪类光敏剂介导的光动力抗菌疗法对白色念珠菌的杀伤作用研究

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吩噻嗪类光敏剂介导的光动力抗菌疗法对白色念珠菌的杀伤作用研究

作者：李庆妮广西医科大学

学位级别：硕士

目的通过比较不同吩噻嗪类光敏剂介导下的光动力抗菌疗法(APDT)对白色念珠菌的体外杀伤作用,为临床选择高效适宜的光敏剂提供理论基础。探讨APDT对艾滋病(AIDS)患者合并口腔白色念珠菌感染的真菌治疗效果方法第一部分为体外实验,选取白... 详细信息

目的通过比较不同吩噻嗪类光敏剂介导下的光动力抗菌疗法(APDT)对白色念珠菌的体外杀伤作用,为临床选择高效适宜的光敏剂提供理论基础。探讨APDT对艾滋病(AIDS)患者合并口腔白色念珠菌感染的真菌治疗效果方法第一部分为体外实验,选取白色念珠菌标准株DAY286为实验对象,将其制备成浓度为107个/mL的细胞悬液。实验分为四组:对照组、光动力组(APDT组)、光照组和光敏剂组。(1)对照组:既不加入光敏剂,也不予以光照射。(2) APDT组:将白色念珠菌细胞悬液分别与不同浓度的吩噻嗪类光敏剂亚甲蓝(MB)、甲苯胺蓝(TBO)、新亚甲蓝(NMB)及二甲基蓝(DMMB)避光混合孵育30min,再予以同等能量不同波长的光源照射。(3)光照组:不加入光敏剂,仅予以同APDT组相同能量和波长的光源照射。(4)光敏剂组:仅加入浓度相同的光敏剂MB、TBO、NMB及DMMB,不予以任何光照。用菌落形成单位(CFU)测定各组处理后白色念珠菌的存活菌落数。第二部分为临床研究,根据体外实验结果选取对白色念珠菌杀伤作用最强的DMMB为光敏剂,选取31例AIDS合并口腔白色念珠菌感染者为受试对象。治疗前嘱受试对象用0. 1mmol/L的磷酸盐缓冲液(PBS)含漱10s,将浓度1. 2mmol/L DMMB均匀涂擦到受试者口腔黏膜病变处避光孵育3min,然后用波长635nm的激光光源照射口腔30mim,连续治疗3天。直接镜检法测定治疗前后白色念珠菌细胞数,用每次治疗后白色念珠菌数与治疗前白色念珠菌数的比计算白色念珠菌的生存率。结果(1)光敏剂浓度15μmol/L时,不同吩噻嗪类光敏剂(MB、TBO、NMB、DMMB)介导的APDT作用下,白色念珠菌菌落数生存率分别为78.38%、68. 47%、62. 37%、0. 0001%,差异有统计学意义(P0. 05)。(2)AIDS合并的口腔白色念珠菌病患者予以光敏剂DMMB介导的APDT治疗1次后的白色念珠菌数与治疗前相比,生存率为49. 34%;治疗第2次后的白色念珠菌的生存率为35. 58%;第3次后白色念珠菌的生存率为24. 45%,治疗前后各组白色念珠菌数之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。所有受试者未见明显的不良反应和后遗症。结论(1)吩噻嗪类光敏剂中DMMB对白色念珠菌的体外杀伤作用最强,且在一定浓度范围内,DMMB、TBO和MB的抗菌活性与光敏剂浓度成正相关。(2) DMMB介导的APDT对AIDS患者合并的口腔白色念珠菌感染有杀伤作用。

关键词：光动力抗菌疗法光敏剂吩噻嗪类白色念珠菌艾滋病口腔白色念珠菌病

佐剂对IBRVΔgG/ΔTK双基因缺失活疫苗牛体攻毒保护效果的影响

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吉林农业大学学报 2023年第4期45卷 476-484页

作者：王琛张一李庆妮陈建国陈颖钰陈曦胡长敏郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北省洪山实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学湖北省兽医流行病学国际科技合作基地武汉430070 华中农业大学农业部兽用诊断制剂创制重点实验室农业部反刍动物生物制品重点实验室武汉430070

牛传染性鼻气管炎是危害养牛业的一种重要病毒性传染病,疫苗免疫是最主要的防控手段。为研究水性佐剂对牛传染性鼻气管炎TK和gG双基因缺失活疫苗(IBRVΔgG/ΔTK株)的免疫增强作用,将18头1.5~2月龄的奶公犊分成4组,组1~3各5头牛,组4为3... 详细信息

牛传染性鼻气管炎是危害养牛业的一种重要病毒性传染病,疫苗免疫是最主要的防控手段。为研究水性佐剂对牛传染性鼻气管炎TK和gG双基因缺失活疫苗(IBRVΔgG/ΔTK株)的免疫增强作用,将18头1.5~2月龄的奶公犊分成4组,组1~3各5头牛,组4为3头牛。组1滴鼻接种IBRVΔgG/ΔTK疫苗株,组2滴鼻接种IBRVΔgG/ΔTK疫苗株和Gel 01 ST水性佐剂混合物,组3为未免攻毒对照组,组4为不做处理的空白对照组。免疫35 d后,1~3组滴鼻攻击毒力株IBRV HB06株。免疫期间,组1牛体温在正常范围内,有1头牛眼睛和鼻腔出现水样分泌物;组2有1头牛出现一个温次达到40℃,有2头在眼或鼻出现水样分泌物。组1和组2血清特异性抗体和中和抗体水平无显著差异。攻毒后,组1和组2各有1头在第3天体温分别升高一个温次,达到40.25℃和40℃,部分牛眼睛出现水样分泌物;组1鼻腔排毒到第8天,组2中有1头牛在第9天仍检测到排毒;而组3出现流眼泪、鼻分泌物、鼻黏膜出血等临床症状,鼻腔排毒持续到第11天;组1肺部病变与空白对照组(组4)无显著差异,组2略严重于组1,组3表现出明显的肺部病变。按症状分值计算,组1和组2总保护率分别为91.7%和61.41%。参考世界动物卫生组织关于IBRV活疫苗的免疫保护评判标准,组1和组2分别达到100%(5/5)和80%(4/5)保护。综上,此研究所用佐剂未达到预期效果,后期仍需进行更多筛选。

关键词：佐剂牛传染性鼻气管炎标记疫苗免疫病毒

恒河猴血清SARS-CoV-2变异株特异性IgG抗体间接ELISA检测方法的建立及验证

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中国生物制品学杂志 2023年第11期36卷 1341-1346,1352页

作者：张文劲李庆妮唐定陈云丰华婉璐刘元浪李新国卢佳武汉生物制品研究所有限责任公司湖北武汉430207

目的建立恒河猴血清SARS-CoV-2变异株特异性IgG抗体的间接ELISA检测方法,并进行验证。方法以SARS-CoV-2 Beta变异株灭活疫苗为包被抗原建立特异性IgG抗体的间接ELISA检测方法,并优化方法的抗原包被浓度(1、2、4μg/mL)、待检血清稀释度(... 详细信息

目的建立恒河猴血清SARS-CoV-2变异株特异性IgG抗体的间接ELISA检测方法,并进行验证。方法以SARS-CoV-2 Beta变异株灭活疫苗为包被抗原建立特异性IgG抗体的间接ELISA检测方法,并优化方法的抗原包被浓度(1、2、4μg/mL)、待检血清稀释度(1∶800~1∶12800)、PBST封闭液(含1%BSA、2%BSA、1%脱脂奶、2%脱脂奶、1%BSA+1%脱脂奶)、封闭时间(30、60、90 min)、二抗稀释度(1∶5000、1∶10000、1∶15000、1∶20000)、血清及二抗孵育时间(30、60、90 min)、TMB显色反应时间(5、10、15、20、25、30 min)。采用建立的方法检测60份恒河猴阴性血清,确定阴、阳性临界值。验证该方法的敏感性及精密性。采用建立的方法及微量中和试验分别检测44份恒河猴血清抗SARS-CoV-2 Beta变异株特异性IgG抗体及中和抗体水平,并比较二者的相关性和一致性。结果确定最佳检测条件:抗原包被浓度为1μg/mL;封闭液为含1%脱脂奶粉的PBST,封闭时间为30 min;待检血清稀释度为1∶1600,孵育时间为90 min,二抗稀释度为1∶10000,孵育时间为30 min;底物显色时间为25 min。该方法的阳性临界值为0.093,阴性临界值为0.084,位于两者之间判为可疑。5份阳性血清测得阳性结果的血清稀释倍数均为1∶51200;精密性验证变异系数(CV)均<15%。44份恒河猴血清IgG抗体效价与中和抗体水平之间呈强相关(r=0.8580,P<0.0001);两种方法总符合率为90.9%,阳性符合率为93.6%,阴性符合率为84.6%;一致性检验Kappa为0.7838(95%CI:0.5865~0.9810)。结论建立的恒河猴血清SARS-CoV-2变异株特异性IgG抗体间接ELISA检测方法具有良好的敏感性和精密性,与微量中和试验具有较强一致性,可用于恒河猴血清IgG抗体的检测。

关键词：恒河猴 SARS-CoV-2变异株特异性IgG抗体间接ELISA法

非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统运行效果评价

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中国比较医学杂志 2022年第6期32卷 80-86页

作者：李庆妮陈云丰刘元浪唐定华婉璐张瑞安卢佳李新国武汉生物制品研究所有限责任公司新发传染病研究室武汉430207 武汉生物制品研究所有限责任公司生物安全三级实验室武汉430207

目的利用流感病毒作为模式病毒评价非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统的运行效果,为非人灵长类动物气溶胶吸入研究奠定实验基础。方法在生物安全三级实验室中,使用非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统产生流感病毒气溶胶,以此评价该... 详细信息

目的利用流感病毒作为模式病毒评价非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统的运行效果,为非人灵长类动物气溶胶吸入研究奠定实验基础。方法在生物安全三级实验室中,使用非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统产生流感病毒气溶胶,以此评价该装置能否正常运行并产生特定粒径大小的气溶胶颗粒,同时评价装置运行过程中病毒气溶胶输出均一性、稳定性、气密性以及装置的消毒效果。结果该装置产生的气溶胶颗粒中值直径为(1.04±0.03)μm,不同浓度气溶胶发生液产生的病毒气溶胶均能到达头罩,且6个头罩间气溶胶浓度无显著性差异(P>0.05);流感病毒雾化30 min后存活率>50%;病毒气溶胶浓度与发生器病毒浓度的线性相关良好(R^(2)=0.9989);装置易泄漏处未检测到感染性病毒,使用过氧化氢消毒剂对气溶胶暴露系统管道及负压柜腔体消毒后无指示菌生长。结论非人灵长类动物口鼻式气溶胶暴露系统运行效果良好,装置管道气密性好,可消毒完全,为将来建立SARS-CoV-2及其它病毒气溶胶感染非人灵长类动物模型奠定了基础。

关键词：非人灵长类动物气溶胶暴露均一性稳定性气密性流感病毒

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太古高速隧道超前地质预报的工艺要求

太古高速隧道超前地质预报的工艺要求

不孕女性在辅助生殖助孕期间睡眠质量与OPU试管婴儿成功率的相关性

2009年度学术论文集暨“第十六届全国高速公路管理工作...

作者：李庆妮山西省高速公路开发有限公司

公路隧道是公路工程结构的重要组成部分之一,隧道施工因地质复杂存在极大的安全隐患。为保障隧道安全、顺利、较快施工,在前期地质勘察的基础之上,在施工过程中对隧道进行可靠的超前地质预报十分关键和必要。本文针对太古高速西山大跨... 详细信息

公路隧道是公路工程结构的重要组成部分之一,隧道施工因地质复杂存在极大的安全隐患。为保障隧道安全、顺利、较快施工,在前期地质勘察的基础之上,在施工过程中对隧道进行可靠的超前地质预报十分关键和必要。本文针对太古高速西山大跨径隧道施工超前地质预报方面质量控制的关键环节作出几点论述,为山区隧道安全、顺利、较快施工提供参考。

关键词：山区高速公路大跨径隧道地质预报工艺要求

来源： cnki会议评论

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世界睡眠医学杂志 2022年第4期9卷 671-673页

作者：李庆妮吴嘉齐柯玩娜吕燕君马肇华中山市博爱医院生殖分院中山528400

目的:探究不孕女性在辅助生殖助孕期间睡眠质量与OPU试管婴儿成功率的相关性。方法:选取2019年1月至2020年12月中山市博爱医院生殖分院收治的不孕女性86例作为研究对象,根据OPU试管婴儿成功率分为失败组(n=48)和成功组(n=38),比较2组患... 详细信息

目的:探究不孕女性在辅助生殖助孕期间睡眠质量与OPU试管婴儿成功率的相关性。方法:选取2019年1月至2020年12月中山市博爱医院生殖分院收治的不孕女性86例作为研究对象,根据OPU试管婴儿成功率分为失败组(n=48)和成功组(n=38),比较2组患者睡眠质量及精神症状。结果:成功组匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)7个不同维度评分均较失败组低(P<0.05);成功组精神症状自评量表(SCL-90)10个不同维度的评分均较失败组低(P<0.05);且经Pearson相关性分析显示,不孕女性在辅助生殖助孕期间其精神症状与睡眠质量有着密切关联(r=0.784,P<0.05)。结论:不孕女性OPU试管婴儿成功率与睡眠质量及精神症状呈密切相关性,应采取针对性干预措施,改善患者的睡眠质量及精神症状,提高不孕女性OPU试管婴儿的成功率。

关键词：不孕女性辅助生殖助孕期间睡眠质量精神症状 OPU试管婴儿成功率

牛疱疹病毒1型gG;/TK;双基因缺失株的豚鼠免疫保护试验

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中国预防兽医学报 2021年

作者：杨姣王琛王安平陈颖钰李庆妮胡长敏陈曦郭爱珍华中农业大学动物医学院农业微生物国家重点实验室

为了评价牛疱疹病毒1型gG;/TK;双基因缺失株(BoHV-1 gG;/TK;)的豚鼠免疫保护效力。16只豚鼠随机分4组，3组为免疫组，1组为对照组。免疫组分别肌肉注射10;TCID;/只、10;TCID;/只和10;TCID;/只BoHV-1 gG;/TK;双基因缺失株，接种后21 d以... 详细信息

为了评价牛疱疹病毒1型gG;/TK;双基因缺失株(BoHV-1 gG;/TK;)的豚鼠免疫保护效力。16只豚鼠随机分4组，3组为免疫组，1组为对照组。免疫组分别肌肉注射10;TCID;/只、10;TCID;/只和10;TCID;/只BoHV-1 gG;/TK;双基因缺失株，接种后21 d以相同剂量和方式进行加强免疫；对照组以相同方式接种DMEM培养基。首免后35 d，4组豚鼠均经鼻腔接种BoHV-1强毒，10;TCID;/只。安全性试验结果显示，BoHV-1 gG;/TK;免疫组接种缺失株后，豚鼠均体温正常且均不排毒；首免后5 d，10;和10;TCID;组豚鼠出现鼻腔分泌物，持续3 d，而10;TCID;和DMEM组无明显临床症状。有效性试验结果显示，缺失株可诱导豚鼠产生gB抗体、中和抗体和IFN-γ，且在首免后7 d、21 d和5 d分别检测到升高，持续时间分别为28 d、35 d和2 d，并且3个剂量免疫组的抗体水平和IFN-γ含量与免疫剂量呈正相关，且显著高于DMEM组。加强免疫后，中和抗体急剧升高，首免后35 d，10;TCID;组显著高于10;、10;和DMEM组。攻毒后，4组豚鼠均体温正常，仅DMEM组鼻拭子分离到病毒。每组均有豚鼠出现鼻腔分泌物，10;TCID;组2只，持续1 d；10;和10;组各1只，均持续7 d；DMEM组3只，最长持续11 d。各组豚鼠肺组织病理切片显示，10;TCID;组肺几乎无病变；10;、10;组肺不同程度损伤；对照组肺病变最严重，表现为肺泡结构消失，局部坏死和炎性细胞浸润等。综上所述，BoHV-1 gG;/TK;双基因缺失株能诱导豚鼠产生体液免疫和细胞免疫，10;TCID;/只以下的剂量为肌注安全剂量，当免疫剂量为10;TCID;/只时，豚鼠能抵抗强毒株攻击，免疫效力最高，而10;TCID;/只～10;TCID;/只的剂量组能产生部分保护效果。

关键词：牛疱疹病毒1型牛传染性鼻气管炎病毒基因缺失免疫保护豚鼠