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骨形态发生蛋白7体外诱导大鼠骨髓间质干细胞向神经元分化的研究

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中华骨科杂志 2020年第12期40卷 802-810页

作者：白广超张文高磊李宽新新疆生产建设兵团医院关节脊柱科乌鲁木齐830002 安徽省蚌埠医学院第一附属医院骨科

目的探索骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein 7,BMP7)在体外诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元的作用。方法SPF级SD大鼠10只,雄性,4周龄,体重约110 g,以全骨髓贴壁法分离、培养大鼠骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal s... 详细信息

目的探索骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein 7,BMP7)在体外诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元的作用。方法SPF级SD大鼠10只,雄性,4周龄,体重约110 g,以全骨髓贴壁法分离、培养大鼠骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs);成脂诱导、成骨分化检测BMSCs多向分化能力。将BMSCs随机分为对照组、25 ng/ml、50 ng/ml、75 ng/ml及100 ng/ml BMP7组,MTT法检测BMP7对大鼠BMSCs增殖的影响;倒置相差显微镜下观察大鼠BMSCs诱导后形态学变化;qRT-PCR检测诱导得到的细胞NF200、SYN1、MAP2、GFAP mRNA相对表达量;免疫荧光检测NSE蛋白表达情况。结果体外培养的第3代大鼠BMSCs呈长梭形,细胞聚集生长呈漩涡状。大鼠BMSCs成脂诱导后胞浆内出现脂滴,油红"O"染色呈阳性;大鼠BMSCs经成骨诱导后出现不透光团状矿物质结节,茜素红染色呈阳性。诱导1后第1天,各组细胞吸光度值比较差异无统计学意义;诱导后2~6 d,各组细胞吸光度值比较差异有统计学意义(均P<0.05),诱导后第6天时,对照组、25 ng/ml、50 ng/ml、75 ng/ml、100 ng/ml BMP7组吸光度值分别为0.370±0.003、0.399±0.003、0.404±0.003、0.410±0.003、0.397±0.001,其中75 ng/ml BMP7组细胞吸光度值明显高于其余各组(均P<0.05)。75 ng/ml BMP7组细胞形态学变化最为显著,细胞形态上类似神经元。75 ng/ml BMP7组NF200、SYN1、MAP2、GFAP mRNA相对表达量分别为5.47±0.59、1.48±0.38、2.86±1.65、4.41±0.13,均显著高于对照组(均P<0.05)。75 ng/ml BMP7组NSE免疫荧光染色阳性率高于对照组(32.94%±1.62%比0)。结论BMP7具有体外诱导大鼠BMSCs分化为神经元的能力。

关键词：大鼠骨形态发生蛋白质7 间质干细胞神经元

慢病毒介导骨形态发生蛋白7基因转染诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化

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中国组织工程研究 2020年第7期24卷 985-990页

作者：张文雷堃高磊李宽新石河子大学第二附属医院(新疆生产建设兵团医院)关节脊柱外科

背景:骨髓间充质干细胞具备向神经元样细胞分化的潜能,已经被列为治疗脊髓损伤的首选干细胞,但其分化效率低,寻找一种具有高效诱导能力的因子尤为重要。基于文献查阅及课题组研究基础,推测骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein 7... 详细信息

背景:骨髓间充质干细胞具备向神经元样细胞分化的潜能,已经被列为治疗脊髓损伤的首选干细胞,但其分化效率低,寻找一种具有高效诱导能力的因子尤为重要。基于文献查阅及课题组研究基础,推测骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein 7,BMP-7)基因可能在促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化上发挥着重要作用。目的:探讨骨形态发生蛋白7慢病毒载体转染诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的作用。方法:采用全骨髓贴壁法培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,以感染复数为50,25,10,1进行LV-GFP转染,转染后3 d在荧光倒置显微镜下观察各组GFP表达情况,确定最佳感染复数。取第3代骨髓间充质干细胞,分为空白对照组(常规培养)、LV-GFP组、LV-BMP-7-GFP组,以最佳感染复数转染24,48,72,96,120 h后,采用MTT法检测细胞存活率;转染3 d后,采用免疫细胞化学实验检测神经细胞标记物神经丝蛋白200、突触素1表达。结果与结论:①LV-GFP转染后3 d,感染复数为1组未见GFP阳性细胞,感染复数为10,25,50组可见GFP阳性细胞,其中感染复数为10组平均荧光强度高于其余组(P<0.05),为最适感染复数;②空白对照组、LV-GFP组神经丝蛋白200、突触素1表达呈阴性;LV-BMP-7-GFP组神经丝蛋白200、突触素1表达呈阳性,胞体和轴突被染成亮棕黄色;③结果表明,LV-BMP-7转染可促进骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化。

关键词：骨形态发生蛋白7 骨髓间充质干细胞神经细胞细胞分化神经丝蛋白200 突触素1

大鼠急性脊髓完全性损伤后血脊膜屏障通透性的变化

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实用医学杂志 2011年第18期27卷 3295-3297页

作者：李宽新李锋华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科武汉市430022 石河子大学医学院一附院骨一科在读博士832000

目的:探讨大鼠急性脊髓完全性损伤后血脊膜屏障(blood-spinal cord barrier,BSCB)通透性的变化。方法:本研究选用wistar大鼠48只,制作Allen氏脊髓打击模型(打击当量300gcf),随机分为对照组(n=6)和脊髓损伤组(n=42),后者又根据伤后不同... 详细信息

目的:探讨大鼠急性脊髓完全性损伤后血脊膜屏障(blood-spinal cord barrier,BSCB)通透性的变化。方法:本研究选用wistar大鼠48只,制作Allen氏脊髓打击模型(打击当量300gcf),随机分为对照组(n=6)和脊髓损伤组(n=42),后者又根据伤后不同时间点分为2、8、24、48、72h以及1、2周组,每组6只,再分为A组和B组,每组各3只。A组从大鼠股静脉注射2%的伊文思蓝(Evens blue,EB),通过荧光显微镜下观察;B组用干湿重法测定脊髓水肿变化情况。结果:随着脊髓损伤时间的延长,脊髓组织EB蓝染的范围逐渐增大,荧光光斑数量增加,强度增强,24～48h达高峰,与脊髓组织内水肿时间一致,72h后水肿逐渐减轻,其内开始出现坏死灶,1～2周可见明显大小不等的囊腔形成,未见EB蓝染。结论:脊髓损伤后BSCB的通透性增高,并在24～48h达高峰,72h后逐渐下降,1周后BSCB通透性明显减小。

关键词：血脑屏障急性脊髓完全性损伤通透性荧光显微镜伊文思蓝

脊髓损伤模型大鼠神经胶质细胞增殖与胶质纤维酸性蛋白的表达

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中国组织工程研究与临床康复 2011年第20期15卷 3657-3661页

作者：李宽新李锋华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科湖北省武汉市430022 石河子大学医学院第一附属医院骨一科新疆维吾尔自治区石河子市832000

背景:星形胶质细胞可以通过细胞裂解释放各种神经营养因子,并可促进损伤脊髓的修复。目的:观察脊髓损伤模型大鼠神经胶质纤维酸性蛋白的表达及对其后肢功能恢复的影响。方法:将SD大鼠采用Allen's法撞击T9～10节段致脊髓损伤,造模成功后... 详细信息

背景:星形胶质细胞可以通过细胞裂解释放各种神经营养因子,并可促进损伤脊髓的修复。目的:观察脊髓损伤模型大鼠神经胶质纤维酸性蛋白的表达及对其后肢功能恢复的影响。方法:将SD大鼠采用Allen's法撞击T9～10节段致脊髓损伤,造模成功后蛛网膜下腔移植骨形态发生蛋白7,并设置仅蛛网膜下腔移植His蛋白的正常SD大鼠做对照。用BBB评分法评估两组大鼠后肢的运动功能,用免疫组织化学染色法和Western-blot法观察各组神经胶质纤维酸性蛋白的表达。结果与结论:BBB评分结果显示,模型组大鼠脊髓损伤后下肢功能自行恢复率达68%。模型组脊髓损伤3和7d,损伤区域神经胶质纤维酸性蛋白表达逐渐增加(P0.05)。脊髓损伤后1～14d两组胶质纤维酸性蛋白表达逐渐升高(P>0.05)。结果证实,脊髓损伤后蛛网膜下腔移植骨形态发生蛋白7可诱导星形胶质细胞增殖,神经胶质纤维酸性蛋白的表达增强,进而促进脊髓损伤大鼠后肢功能的恢复。

关键词：胶质纤维酸性蛋白脊髓损伤骨形态发生蛋白7 BBB评分免疫组织化学组织构建

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人工关节置换基础与临床

人工关节置换基础与临床

BMP-7诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经元细胞分化的初步研究

2014年

作者：王维山尹生云李宽新等

为了适应人工关节置换专业发展的需求，笔者查阅了大量国内外相关文献，在总结自身多年临床经验的基础上编著了这部《人工关节置换基础与临床》。全书共分为上下两篇，共13章。上篇总论篇介绍了关节置换相关基础知识与基本理论，具体包... 详细信息

ISBN: (纸本)9787560568898

为了适应人工关节置换专业发展的需求，笔者查阅了大量国内外相关文献，在总结自身多年临床经验的基础上编著了这部《人工关节置换基础与临床》。全书共分为上下两篇，共13章。上篇总论篇介绍了关节置换相关基础知识与基本理论，具体包括关节的基本结构和功能、关节的组织解剖生理学、关节软骨的形态生理与功能、关节的运动和物理检查、骨关节疾病的影像学基本特征、人工关节材料学、人工关节假体设计、关节的功能解剖与手术入路;下篇分论篇以较大篇幅阐述了当今临床常用的关节置换手术，具体包括人工肩关节置换术、人工肘关节置换术、人工骸关节置换术、人工膝……

关键词：人工关节移植术医学研究

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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安徽医科大学学报 2018年第2期53卷 190-195页

作者：白广超金宏亮雷堃李宽新新疆生产建设兵团医院(石河子大学医学院第二附属医院)关节脊柱科乌鲁木齐830000

目的探讨骨形态发生蛋白7(BMP-7)体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经元细胞分化的作用。方法以全骨髓贴壁法分离、培养大鼠BMSCs;流式细胞仪检测细胞表型CD29、CD44及成脂诱导以鉴定大鼠BMSCs;MTT法检测浓度分别为25、50、75、1... 详细信息

目的探讨骨形态发生蛋白7(BMP-7)体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经元细胞分化的作用。方法以全骨髓贴壁法分离、培养大鼠BMSCs;流式细胞仪检测细胞表型CD29、CD44及成脂诱导以鉴定大鼠BMSCs;MTT法检测浓度分别为25、50、75、100 ng/ml的BMP-7对大鼠BMSCs增殖的影响;第3代细胞贴壁后随机分为三组:阴性对照组、阳性对照组(β-巯基乙醇)、BMP-7诱导组;倒置相差显微镜下观察各组细胞形态学变化;诱导2 h后进行免疫细胞化学实验,检测各组细胞神经元标志物神经丝蛋白-200(NF-200)及神经突触素-1(SYN-1)的表达情况。结果体外培养的第3代大鼠BMSCs形态呈长梭形,"鱼尾纹"状聚集生长;CD29、CD44阳性表达,阳性率分别为99.44%、99.17%;成脂诱导28 d后油红O染色阳性;不同浓度的BMP-7均具有促进大鼠BMSCs增殖的作用,以75 ng/ml最为显著;75 ng/ml BMP-7诱导大鼠BMSCs 2 h后可见形态典型的神经元细胞,NF-200及SYN-1为阳性。结论 BMP-7体外具有诱导大鼠BMSCs向神经元细胞分化的作用。

关键词： BMP-7 骨髓间充质干细胞诱导分化神经元细胞

乌鲁木齐地区老年骨质疏松患病状况及危险因素

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中国老年学杂志 2021年第14期41卷 2997-3000页

作者：张文郑伟高磊李宽新新疆生产建设兵团医院(石河子大学第二附属医院)关节脊柱外科新疆乌鲁木齐830000

目的了解与分析新疆乌鲁木齐市城乡骨质疏松(OP)的患病情况及相关危险因素。方法采用统一的流行病学调查问卷,以分层整群随机抽样方法,在乌鲁木齐市区及农村分别随机抽取两个社区,对其常驻60岁及以上居民7941名进行流行病学调查,对所有... 详细信息

目的了解与分析新疆乌鲁木齐市城乡骨质疏松(OP)的患病情况及相关危险因素。方法采用统一的流行病学调查问卷,以分层整群随机抽样方法,在乌鲁木齐市区及农村分别随机抽取两个社区,对其常驻60岁及以上居民7941名进行流行病学调查,对所有样本进行问卷调查,并采用Sahara超声骨密度测定仪检测跟骨骨密度,整理资料对OP相关危险因素进行统计分析。结果OP总患病率为42.67%(3154/7391),其中男性患病率明显低于女性(P新疆乌鲁木齐农村OP患病率较高,可能的危险因素是多方面的,应针对危险因素,早期制定综合干预措施,提高居民的健康知识水平,注重对危险因素的干预,进而降低OP患病率,提高居民的生活质量。

关键词：骨质疏松体重指数运动锻炼

等离子刀行颈椎间盘髓核成形术安全性的实验观察

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中国脊柱脊髓杂志 2009年第2期19卷 130-133,I0002页

作者：康波李宽新史晨辉新疆维吾尔自治区石河子大学医学院第一附属医院骨一科 832000 华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科武汉市430030

目的:观察等离子刀在不同能量档位、相同消融时间行颈椎间盘髓核成形术(coblation nucleoplasty,CN)时的效能及安全性。方法:7具18月龄新鲜宰杀羊颈椎标本(包括周围肌肉及组织),每具含6个颈椎间盘,将其中40个椎间盘随机分为3个实验组和... 详细信息

目的:观察等离子刀在不同能量档位、相同消融时间行颈椎间盘髓核成形术(coblation nucleoplasty,CN)时的效能及安全性。方法:7具18月龄新鲜宰杀羊颈椎标本(包括周围肌肉及组织),每具含6个颈椎间盘,将其中40个椎间盘随机分为3个实验组和1个对照组,每组10个间盘。实验组分别用80W(1档,A组)、100W(2档,B组)、120W(3档,C组)行CN,消融时间相同;对照组模拟手术操作,不行消融。术中测量椎间盘前缘、后缘、椎间孔处温度,术后测量CN在椎间盘中形成的消融腔截面积大小,并取对应节段双侧脊神经节用免疫组化S-P法测定热休克蛋白70(Heat shock Protein70,HSP70)的表达。结果:术中各组椎体前缘、后缘、椎间孔处的温度无显著性差异,取三个测量点温度平均值,对照组、A组、B组、C组的温度分别为20.60℃±0.22℃、28.69℃±0.39℃、35.47℃±0.51℃、41.73℃±0.31℃,各组间比较有统计学意义;对照组穿刺形成的穿刺腔截面积为2.01±0.00mm2,A、B、C组消融腔截面积分别为3.00±0.45mm2、9.447±1.27mm2、27.36±2.00mm2,A组与对照组比较无显著性差异(P>0.05),B组与A组和对照组比较有显著性差异(P<0.05),C组与其余三组比较均有显著性差异(P<0.05)。温度和消融腔截面积与能量成正相关(温度与能量r=0.97,消融腔与能量r=0.96,P<0.05)。C组免疫组化染色HSP70阳性表达,阳性率为95%(19/20),对照组和A、B组HSP70表达阴性。讨论:相同消融时间下等离子刀髓核成形术的效能、邻近组织的温度与能量成正相关,周围组织热损伤与能量的选择密切相关,相比较而言选择100W能量(2档)行CN手术效果和安全性都较为可靠。

关键词：颈椎间盘等离子刀髓核成形术热休克蛋白

锁定钢板与三叶草钢板治疗老年肱骨近端骨折的疗效对比

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中国老年学杂志 2011年第14期31卷 2732-2733页

作者：王维山董金波李宽新何斌李长俊史晨辉新疆石河子大学医学院第一附属医院骨一科新疆石河子832008

肱骨近端骨折是指肱骨外科颈以远1-2 cm至肱骨头关节面之间的骨折,包括肱骨头、大结节、小结节和肱骨干近端等结构的骨折,老年患者由于多伴有骨质疏松,肱骨近端一旦发生骨折,极易粉碎,并造成复杂骨折,而且多伴有肩关节脱位,治疗相当棘... 详细信息

肱骨近端骨折是指肱骨外科颈以远1-2 cm至肱骨头关节面之间的骨折,包括肱骨头、大结节、小结节和肱骨干近端等结构的骨折,老年患者由于多伴有骨质疏松,肱骨近端一旦发生骨折,极易粉碎,并造成复杂骨折,而且多伴有肩关节脱位,治疗相当棘手。临床上对该类骨折的治疗方法较多,绝大多数患者经过保守治疗就可取得良好的治疗效果,

关键词：肱骨近端骨折锁定钢板三叶草钢板