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Fas/FasL信号途径参与17-羟-岩大戟内酯B诱导U251细胞凋亡

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中药药理与临床 2017年第1期33卷 46-49页

作者：王晓丽韩翠艳李宏铃马国芳野津齐齐哈尔医学院药学院齐齐哈尔161006

目的 :探讨Fas/Fas L信号转导途径在17-羟-岩大戟内酯B诱导人脑胶质瘤细胞U251细胞凋亡中的作用及机制。方法:以5-氟尿嘧啶(浓度为10μg/ml)为阳性对照。各组样品用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增值抑制率;流式细胞仪Annexin V-FITC/P... 详细信息

目的 :探讨Fas/Fas L信号转导途径在17-羟-岩大戟内酯B诱导人脑胶质瘤细胞U251细胞凋亡中的作用及机制。方法:以5-氟尿嘧啶(浓度为10μg/ml)为阳性对照。各组样品用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增值抑制率;流式细胞仪Annexin V-FITC/PI检测细胞早期凋亡率;分光光度法检测Caspase-3和Caspase-8的相对活性;Western Blot法检测Fas和Fas L的蛋白表达。结果:与空白对照组相比,10μg/ml的17-羟-岩大戟内酯B对U251细胞的增殖没有显著性改变,但20μg/ml和40μg/ml的17-羟-岩大戟内酯B对U251细胞的增殖有显著性抑制作用,但40μg/ml的17-羟-岩大戟内酯B对U251细胞的增殖的抑制作用没有进一步改变,故应用20μg/ml 17-羟-岩大戟内酯B做后续试验。与单独应用20μg/ml 17-羟-岩大戟内酯B组相比,经0.1μg/ml、0.5μg/ml或1μg/ml抗Fas单克隆抗体预处理后,再加入20μg/ml17-羟-岩大戟内酯B时,U251细胞增值抑制率明显减弱,并选用0.5μg/ml抗Fas单克隆抗体进行后续实验。单独应用20μg/ml17-羟-岩大戟内酯B,细胞早期凋亡率、Caspase-3及Caspase-8相对活性较空白组明显升高,Fas及Fas L蛋白表达水平明显增强;而经0.5μg/ml抗Fas单克隆抗体预处理后再加入20μg/ml17-羟-岩大戟内酯B,可使细胞早期凋亡率、Caspase-3及Caspase-8的相对活性较单独应用20μg/ml17-羟-岩大戟内酯B明显下降,Fas及Fas L蛋白表达明显减弱。结论:17-羟-岩大戟内酯B可抑制U251细胞增殖和诱导细胞凋亡;Fas/Fas L信号通路介导了17-羟-岩大戟内酯B诱导的凋亡;Fas/Fas L通路活化导致了下游caspase途径的活化。

关键词： 17-羟-岩大戟内酯B U251 细胞凋亡 Fas/FasL Caspase-3 Caspase-8

天麻钩藤饮含药血清对MPP^+诱导PC12细胞损伤保护作用的研究

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中药药理与临床 2017年第6期33卷 10-13页

作者：王晓丽崔红霞李宏铃张宏莲马国芳齐齐哈尔医学院药学院齐齐哈尔161006

目的:观察天麻钩藤饮含药血清对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenyl pyridinium,MPP+)诱导的PC12细胞凋亡的影响,并且探讨其作用机制。方法:将48只大鼠随机分为空白组、美多巴组、天麻钩藤饮2.85、5.7、11.4、22.8g/kg剂量组,天... 详细信息

目的:观察天麻钩藤饮含药血清对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenyl pyridinium,MPP+)诱导的PC12细胞凋亡的影响,并且探讨其作用机制。方法:将48只大鼠随机分为空白组、美多巴组、天麻钩藤饮2.85、5.7、11.4、22.8g/kg剂量组,天麻钩藤饮按照相应剂量灌胃,空白组灌胃等体积生理盐水,美多巴片(0.05g/kg)溶于生理盐水灌胃。采血制备含药和空白血清,常规培养PC12细胞,空白组和模型组给予空白血清,其他5组给予10%含药血清,孵育30min后,再加500μmol/L MPP+共孵育48h后收集细胞,采用MTT法检测细胞存活率,LDH释放检测细胞毒性,Annexin V/PI染色流式细胞术检测PC12细胞凋亡,Western blot检测Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase-3蛋白表达水平,分光光度法检测Caspase-3及Caspase-9活性。结果:模型组较空白组细胞活力明显降低,LDH释放率增加,诱导细胞发生凋亡,同时Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达水平增加,而Bcl-2蛋白表达降低,Caspase-3及Caspase-9活性明显增加。与模型组比较,10%的天麻钩藤饮5.7、11.4、22.8g/kg含药血清组细胞活力显著增加,LDH释放率减少,凋亡细胞量减少,Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达水平降低,而Bcl-2蛋白表达升高,Caspase-3及Caspase-9活性降低;而10%的天麻钩藤饮2.85g/kg含药血清组无明显变化。结论:天麻钩藤饮含药血清对MPP+诱导的PC12细胞的凋亡具有保护作用,其机制可能与调节线粒体功能密切相关。

关键词：天麻钩藤饮含药血清 PC12细胞 MPP+ 细胞凋亡

UPLC-Q-Trip-MS/MS法测定赤芍中4种成分的含量

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化学试剂 2021年第2期43卷 216-219页

作者：孙辑凯张梅娟张宏莲李宏铃董巍齐齐哈尔医学院药学院黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔大学生命科学院黑龙江齐齐哈尔161000

基于超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(UPLC-Q-Trip-MS/MS)技术,建立赤芍中4种化学成分含量测定方法。采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液进行梯度洗脱,柱温40℃,流速0.3 mL/min,... 详细信息

基于超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(UPLC-Q-Trip-MS/MS)技术,建立赤芍中4种化学成分含量测定方法。采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液进行梯度洗脱,柱温40℃,流速0.3 mL/min,进样量5μL;质谱条件为Agilent ultro-triple quad LC/MS在线系统,采用多反应监测模式(MRM)分别在正、负离子模式下对色谱流出物进行检测,喷雾电压3.5 kV,干燥气温度380℃,干燥气流量60 L/h,雾化器压力60 MPa。芍药苷、儿茶素、没食子酸和苯甲酸分别在5~50、0.5~5.0、0.25~2.5、0.25~2.5μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系。7批赤芍中芍药苷、没食子酸、儿茶素和苯甲酸的含量均值依次为2.13%、0.047%、0.20%、7.15%。建立的UPLC-Q-trip-MS/MS方法具有良好的定性和定量分析能力,适用于定量分析赤芍中4种化学成分。

关键词：赤芍芍药苷没食子酸儿茶素苯甲酸定量分析检测

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高效液相色谱法测定莪术油乳膏含量

医药导报 2021年第11期40卷 1577-1579页

作者：李文静刘军李宏铃包亚男朱红洪博齐齐哈尔医学院药学院齐齐哈尔161006 黑龙江省齐齐哈尔市结核病防治院齐齐哈尔161006

目的采用高效液相色谱法建立莪术油乳膏含量测定方法。方法色谱柱采用安捷伦(Agilent)TC-C 18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-水溶液梯度洗脱,检测波长:216 nm,柱温25℃,流速:1.0 mL·min^(-1),进样量10μL。结果莪术二酮、莪术... 详细信息

目的采用高效液相色谱法建立莪术油乳膏含量测定方法。方法色谱柱采用安捷伦(Agilent)TC-C 18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-水溶液梯度洗脱,检测波长:216 nm,柱温25℃,流速:1.0 mL·min^(-1),进样量10μL。结果莪术二酮、莪术醇、吉马酮、β-榄香烯4种挥发油线性关系良好(r≥0.9989),平均加样回收率≥93.67%。结论该方法简便快捷,适用于莪术油乳膏定量分析。

关键词：莪术油乳膏高效液相色谱法含量测定

天麻钩藤饮含药血清对MPP^+诱导PC12细胞凋亡JNK通路的影响

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中国实验方剂学杂志 2017年第21期23卷 141-146页

作者：王晓丽崔红霞李宏铃张宏莲马国芳齐齐哈尔医学院药学院黑龙江齐齐哈尔161006

目的:观察天麻钩藤饮含药血清对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenyl pyridinium,MPP^+)诱导的PC12细胞凋亡的影响,并且探讨其是否通过c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路发挥神经保护作用。方法:将32只SD大鼠随机分为空白组、天麻... 详细信息

目的:观察天麻钩藤饮含药血清对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenyl pyridinium,MPP^+)诱导的PC12细胞凋亡的影响,并且探讨其是否通过c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路发挥神经保护作用。方法:将32只SD大鼠随机分为空白组、天麻钩藤饮低、中、高剂量组,每组8只。天麻钩藤饮按照5.7,11.4,22.8 g·kg-1灌胃,空白组灌胃等体积生理盐水,采血制备空白和含药血清。PC12细胞常规培养并分为空白组、模型组、天麻钩藤饮含药血清低、中、高剂量组,空白组和模型组加空白血清,其他3组加10%的天麻钩藤饮含药血清,孵育30 min后,模型组和含药血清组再加500μmol·L^(-1)MPP^+共孵育48 h后收集细胞,采用Cell Titer 96Aoueous MTS Reagent powder(MTS法)检测细胞存活率。后续实验分为5组,即:空白组,MPP^+组,MPP^++含药血清高剂量组,MPP^++SP600125组,MPP^++含药血清高剂量+SP600125组,采用Annexin VFITC/PI双染色法检测细胞凋亡,分光光度法检测细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JNK,p-JNK,c-Jun,p-c-Jun蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组细胞活力明显降低(P<0.05);与模型组比较,10%的天麻钩藤饮低、中、高剂量含药血清组细胞活力显著增加(P<0.05)。后续试验中,与空白组比较,MPP^+组细胞凋亡率,Caspase-3活性,p-JNK和p-c-Jun蛋白表达明显升高(P<0.05)。与MPP^+组比较,MPP^++含药血清高剂量组,MPP^++SP600125组均能够使细胞凋亡率,Caspase-3活性,p-JNK和p-c-Jun蛋白表达明显降低(P<0.05),而MPP^++含药血清高剂量+SP600125组的作用明显高于MPP^++含药血清高剂量组(P<0.05),但不高于MPP^++SP600125组。JNK和c-Jun蛋白表达无明显变化。结论:天麻钩藤饮含药血清对MPP^+诱导的PC12细胞的凋亡具有保护作用,其机制可能与JNK信号通路密切相关。

关键词：天麻钩藤饮血清药理神经保护细胞凋亡 1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+) c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路

瑞舒伐他汀对糖尿病模型大鼠血糖及其心肌形态学的影响

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瑞舒伐他汀对糖尿病模型大鼠血糖及其心肌形态学的影响

中国转化医学和整合医学学术交流会（上海站）

作者：孙超李宏铃杨秀珍秦伟崔涛都晓辉齐齐哈尔医学院

目的:研究瑞舒伐他汀对糖尿病(DM)模型大鼠血糖及其心肌形态学的影响。方法:雄性SD大鼠60只,随机分成对照组、模型组、罗格列酮组(0.8mg·kg·d)、瑞舒伐他汀高剂量组(200mg·kg·d)、瑞舒伐他汀中剂量组(100mg·kg·d)、瑞舒伐他汀低... 详细信息

目的:研究瑞舒伐他汀对糖尿病(DM)模型大鼠血糖及其心肌形态学的影响。方法:雄性SD大鼠60只,随机分成对照组、模型组、罗格列酮组(0.8mg·kg·d)、瑞舒伐他汀高剂量组(200mg·kg·d)、瑞舒伐他汀中剂量组(100mg·kg·d)、瑞舒伐他汀低剂量组(50 mg·kg·d)。采用口腔灌胃脂肪乳(10 ml·kg·d)及其腹腔注射链脲佐菌素(40 mg·kg·d)制备2型DM大鼠模型。采用快速血糖仪测定各组大鼠空腹血糖浓度,采用电子天平测定各组大鼠体重质量,采用HE染色观察DM大鼠心肌结构的改变。结果:与对照组比较,模型组大鼠血糖浓度明显升高(P0.05),瑞舒伐他汀中剂量组心肌排列整齐,变性坏死程度较轻,闰盘比较完整。结论:瑞舒伐他汀可以明显改善2型DM大鼠的血糖水平及其心肌的形态学基本结构,并且对2型DM模型大鼠体重质量无明显影响。

关键词：瑞舒伐他汀糖尿病血糖

来源： cnki会议评论

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“学生工作坊”在药理学教学中的应用

世界中医药 2016年第B3期11卷 1416-1416,1419页

作者：都晓辉杨宏艳邹宇李宏铃崔红霞齐齐哈尔医学院药学院药理教研室黑龙江齐齐哈尔161000 齐齐哈尔医学院药学院教务科黑龙江齐齐哈尔161000

相对传统的课堂教学，“工作坊”缴学模式下的课堂活泼、新颖、开放，教师也能突破传统，实现角色的重要转变。本文从“工作坊”的基本概念、新时代对药理学教学的基本要求、“学生工作坊”的前期准备、“学生工作坊”的教学优势、“工... 详细信息

相对传统的课堂教学，“工作坊”缴学模式下的课堂活泼、新颖、开放，教师也能突破传统，实现角色的重要转变。本文从“工作坊”的基本概念、新时代对药理学教学的基本要求、“学生工作坊”的前期准备、“学生工作坊”的教学优势、“工作坊”时教师的重要要求以及“工作坊”教学的实践等六个方面探讨这种新型模式在高校药理学教学中的应用。

关键词：学生工作坊药理学教学方法

“全程多元化启发式”教学法在药理学教学中的应用

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卫生职业教育 2017年第11期35卷 41-42页

作者：王晓丽李宏铃包亚男宋娟丛欢都晓辉齐齐哈尔医学院黑龙江齐齐哈尔161006

药理学是临床医学专业的主干课程,是连接基础课程与临床课程的桥梁学科。教学中应用"全程多元化启发式"教学法,对提高药理学教学质量和学生综合素质有积极意义。笔者结合药理学学科特点,从教师教案设计、集体备课、课堂教学、师生互动... 详细信息

药理学是临床医学专业的主干课程,是连接基础课程与临床课程的桥梁学科。教学中应用"全程多元化启发式"教学法,对提高药理学教学质量和学生综合素质有积极意义。笔者结合药理学学科特点,从教师教案设计、集体备课、课堂教学、师生互动、教学效果评价几方面入手,探讨"全程多元化启发式"教学法在药理学教学中的应用。

关键词：全程多元化启发式教学法药理学

瑞舒伐他汀对2型糖尿病大鼠血脂及心肌细胞钾通道KV4.2 mRNA的影响

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瑞舒伐他汀对2型糖尿病大鼠血脂及心肌细胞钾通道KV4.2 mRNA的影响