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七鳃鳗白细胞外泌体的鉴定与蛋白质组学研究

七鳃鳗白细胞外泌体的鉴定与蛋白质组学研究

作者：李孟娇辽宁师范大学

学位级别：硕士

七鳃鳗作为无脊椎动物向脊椎动物进化的重要纽带,拥有最古老的适应性免疫防御机制,七鳃鳗免疫机制的研究对于揭示适应性免疫的起源与进化具有重要的价值。外泌体是直径为3050 nm的囊泡样膜结构,在细胞间信息交流、免疫应答、肿瘤发生等... 详细信息

七鳃鳗作为无脊椎动物向脊椎动物进化的重要纽带,拥有最古老的适应性免疫防御机制,七鳃鳗免疫机制的研究对于揭示适应性免疫的起源与进化具有重要的价值。外泌体是直径为3050 nm的囊泡样膜结构,在细胞间信息交流、免疫应答、肿瘤发生等过程中扮演了重要的角色。目前对外泌体的相关研究主要集中于高等脊椎动物,如人类和小鼠等,而关于外泌体在七鳃鳗中的研究仍为空白。由于外泌体在形态功能以及分泌过程中的高度保守性,我们以日本七鳃鳗(Lampetra japonica)为实验材料,通过对哺乳动物外泌体的纯化与鉴定方法的优化、改进,对七鳃鳗白细胞来源外泌体进行分离纯化,并对其形态进行了表征。由于目前七鳃鳗外泌体中相关标记蛋白依然未知,因此我们对外泌体标记分子Alix以及内质网标记分子GRP78在七鳃鳗中的同源基因分别进行克隆,并进一步通过Western Blot,检测白细胞来源外泌体中包括L-Alix在内的若干个标记分子,证明分离纯化产物为外泌体。通过对白细胞来源外泌体的蛋白质组分进行高通量分析,发现其中主要包含两类蛋白,外泌体标记蛋白例如CD81、Annexin A7、Integrin beta、Alix等;免疫调控蛋白例如TGF-β、CD45等。我们进一步克隆了TGF-β在七鳃鳗中的同源基因,并通过生物信息技术对该蛋白理化性质进行分析。携带细胞因子TGF-β的外泌体在七鳃鳗适应性免疫系统中的调控功能值得继续深入研究。总之,我们成功建立了七鳃鳗白细胞来源外泌体的纯化和鉴定方法,通过对其直径以及蛋白内含物进行表征,发现其形态和标记分子较为保守,并含有若干重要的免疫调控蛋白,这将为阐明外泌体在七鳃鳗免疫细胞间通讯中发挥的重要功能奠定研究基础,对于揭示七鳃鳗独特的适应性免疫系统的调控机制具有重要意义。

关键词：日本七鳃鳗白细胞外泌体基因克隆蛋白质组

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基于压缩感知的图像去噪理论研究

基于压缩感知的图像去噪理论研究

作者：李孟娇长安大学

学位级别：硕士

压缩感知理论的核心是尽量使用较少的采样数据来对信号进行精确的重构,恢复出原始的信号。该理论是图像处理方面的一个新秀,给我们展现了对图像进行处理的另一种思路。因此,也引起了研究者们浓厚的兴趣。在本文中,所研究的就是如何将压... 详细信息

压缩感知理论的核心是尽量使用较少的采样数据来对信号进行精确的重构,恢复出原始的信号。该理论是图像处理方面的一个新秀,给我们展现了对图像进行处理的另一种思路。因此,也引起了研究者们浓厚的兴趣。在本文中,所研究的就是如何将压缩感知这一理论很好的与图像去噪相结合,从而,尽可能好的去除图像的噪声,而不至于使图像变得模糊。在图像的传输和压缩的过程中,将不可避免的受到噪声的影响,因此,会导致图像的质量下降,这是我们所不愿意见到的。所以,图像去噪就成为了数字图像处理领域的一个热点的研究话题。随着研究的深入,也不断有新的去噪方法被提出。本文以压缩感知的发展历程为背景,结合国内外的研究成果,对其进行了详细的叙述,特别是压缩感知构成的三大支柱:信号的稀疏表示,观测矩阵设计及信号重构相关算法进行了详细的分析。本文在信号的重构算法中,重点讨论p=1(1范数)和0

关键词：压缩感知图像去噪凸优化梯度投影 TV范数

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高中导数问题的研究

高中导数问题的研究

作者：李孟娇青岛大学

学位级别：硕士

一种基于钯纳米片的光学方法检测心衰标志物脑钠肽

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一种基于钯纳米片的光学方法检测心衰标志物脑钠肽

作者：李孟娇重庆医科大学

学位级别：硕士

心力衰竭(Heart failure,HF),简称心衰,是指各种原因导致心脏泵血功能受损,心排血量无法满足全身组织基本代谢需要的综合征。心力衰竭的发病率和死亡率极高。心衰时心室壁压力增加会刺激脑钠肽(Brain natriuretic peptide,BNP)的分泌,... 详细信息

心力衰竭(Heart failure,HF),简称心衰,是指各种原因导致心脏泵血功能受损,心排血量无法满足全身组织基本代谢需要的综合征。心力衰竭的发病率和死亡率极高。心衰时心室壁压力增加会刺激脑钠肽(Brain natriuretic peptide,BNP)的分泌,可以通过检测BNP的含量来实现心衰的早期诊断。常用于检测BNP的方法有化学发光免疫分析法(Chemiluminescence immunoassay,CLIA)、酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和测流免疫分析法(Lateral flow immunoassay,LFIA)。以上均是利用抗原抗体特异性结合反应检测BNP的免疫分析法,检测时可能发生交叉反应,存在竞争相同抗原结合部位的情况,因此对抗体特异性要求较高。本文基于钯纳米片(Palladium nanoshees,Pd NSs)开发了一种用于BNP超灵敏检测的荧光新方法。将Pd NSs作为能量受体,荧光染料Cy5.5作为能量供体修饰在可以特异性识别BNP的核酸适配体(Cy5.5-apt)上。Cy5.5-apt吸附在Pd NSs表面,当二者距离接近时,通过荧光共振能量转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET)荧光被猝灭。当检测体系中存在待测物BNP时,Cy5.5-apt与BNP特异性结合后脱离Pd NSs,二者距离拉远时,荧光恢复,且荧光恢复强度与BNP浓度成正比。基于以上原理构建了用于超灵敏检测BNP的荧光新方法。该方法对BNP的检测范围为50?10000fg/m L,检出限为45 fg/m L。该方法具有良好的选择性和抗干扰性,血清中的加标回收率为95.10?120.9%。使用本方法对57例临床血样中BNP含量进行检测,检测结果与临床常用的化学发光法的检测结果具有较强相关性(r=0.86)。通过绘制受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC)分析两种方法的诊断性能。本方法的阳性预测率(62.5%vs 33.3%)及特异度(94.2%vs80.8%)较CLIA法高,表明本方法的误诊率更低。临床血样保存不当时会导致BNP加速降解,从而引起检测误差,而体内检测可以有效避免该情况发生。因此,我们通过阿霉素诱导并构建了不同周期(2?8周)的心衰小鼠模型,并通过电感耦合等离子体-质谱法(Inductively coupled plasma-mass spectrometry,ICP-MS)检测该复合纳米探针在小鼠体内分布的情况。我们发现,该复合纳米探针主要分布于小鼠的肝脏,其次是心脏和肾,脑中最少。并且,该复合纳米探针在心衰小鼠各组织内的含量比健康小鼠高。心衰小鼠体内BNP的含量较健康小鼠高,该复合纳米探针识别BNP后在相应的组织中分布增多,表明该复合纳米探针具有一定体内检测BNP的潜力。

关键词：钯纳米片核酸适配体脑钠肽心衰

弥散张量成像在轻度认知功能障碍中的临床研究

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弥散张量成像在轻度认知功能障碍中的临床研究

作者：李孟娇吉林大学

学位级别：硕士

目的:探索磁共振弥散张量成像(Diffusion tensor imaging,DTI)中的特征数值:部分各向异性(fractional anisotropy,FA)值和表观扩散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)的数值变化在轻度认知功能障碍(Mild cognitive impairment,MCI)诊断中的作用。材料和方法:选取临床诊断的轻度认知功能障碍患者(MCI)30例,正常对照组(NC)患者20例。MCI的诊断采用Petersen等制定的标准。正常对照组(Normal Control,NC)为健康体检者,两组患者性别、年龄及受教育程度相匹配,两组患者均没有明确的严重痴呆及严重认知功能损害病史、没有重大疾病史及精神疾病史。神经心理学检查采用简易精神状态检查(mini-mental state examination,MMSE)量表(NC组≥27分;MCI组24-27分)、蒙特利尔认知评估(montreal cognitive assessment,MOCA)量表中文版(NC组≥24分;MCI组15-24分)。两组研究对象分别于Semens3.0T核磁共振行弥散张量成像检查并于放射线科取得相应的影像数据,应用放射线系统中后处理软件进行后续的图像处理工作,由同一位操作较熟练技术员,测量双侧大脑半球的相同大小、相同部位的感兴趣区(region of interest ROI):左右侧海马,左右侧颞叶,左右额叶,胼胝体膝部、胼胝体压部,左右侧扣带回后部的ADC值及FA值,进行记录。分别比较两组感兴趣区的ADC值和FA值,并将MCI组中发生改变的感兴趣区域的FA值与MOCA量表各分项评分做相关性分析。使用统计学软件SPSS 19.0进行分析,显著性水平设为p0.05)。***组左侧海马、胼胝体膝部的FA值较NC组显著减少,差异有统计学意义(P0.05)。***组左侧海马的ADC值较NC组增大,差异有统计学意义(P0.05)。***组发生病变区域的FA值与MOCA量表分项中的计算力、延迟回忆、抽象思维功能的具体评分呈正相关性。结论:***患者部分颅脑白质纤维束存在不同程度的缺损,本试验结果提示其行DTI检测时的左侧海马、胼胝体膝部、双侧后扣带回的FA值下降。***组发生病变部位的FA值与MOCA量表各分项中的计算力、延迟回忆、抽象思维功能的具体评分呈正相关性,FA值的大小在一定程度上可以表示认知功能的水平。

关键词：轻度认知功能障碍磁共振弥散张量成像脑白质

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我国主要畜禽消费品的价格波动研究

价格理论与实践 2014年第1期 84-86页

作者：董晓霞李孟娇中国农业科学院农业信息研究所农业部农业信息服务技术重点实验室中国农业大学人文与发展学院

本文基于1994年6月-2013年12月的月度数据,全面分析了近20年来我国主要畜禽消费品价格波动的特点,以及价格波动区间分布及其变动趋势,并进一步分析了价格波动对生产者、消费者及社会经济的影响,以及不同畜禽产品价格波动差异产生的原因... 详细信息

本文基于1994年6月-2013年12月的月度数据,全面分析了近20年来我国主要畜禽消费品价格波动的特点,以及价格波动区间分布及其变动趋势,并进一步分析了价格波动对生产者、消费者及社会经济的影响,以及不同畜禽产品价格波动差异产生的原因。研究发现,近20年我国主要畜禽消费品价格整体走高,并以2006年6月为分水岭,呈现"两阶段"波动特点。针对以上结论,提出了稳定主要畜禽产品价格波动的对策建议。

关键词：畜禽产品畜禽产品价格波动差异

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痉挛性发声障碍嗓音评估方法的系统评价

临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2016年第15期30卷 1254-1260页

作者：付丹刘加林李孟娇杨翰四川大学华西医院华西临床医学院医学信息学教研室成都610041 四川大学华西医院耳鼻咽喉头颈外科

痉挛性发声障碍（spasmodic dysphonia,SD）是由喉肌张力障碍致声带运动紊乱引起的发声障碍,又称局灶性喉肌肌张力发声障碍,通常认为是锥体外系功能障碍〔1〕。SD分内收型（adductor spasmodic dysphoina,ADSD）、外展型（abductor spas... 详细信息

痉挛性发声障碍（spasmodic dysphonia,SD）是由喉肌张力障碍致声带运动紊乱引起的发声障碍,又称局灶性喉肌肌张力发声障碍,通常认为是锥体外系功能障碍〔1〕。SD分内收型（adductor spasmodic dysphoina,ADSD）、外展型（abductor spasmodic dysphonia,ABSD）和混合型（Mixed SD）,其中ADSD最为常见,约占80%〔2〕。SD特点为发声时诱发患者不能控制的声带肌自发性痉挛性运动,紧张时加重,临床表现为嗓音震颤、嘶哑和频发的嗓音中断〔1,3-5〕。

关键词：痉挛性发声障碍评估方法系统评价

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探析国外主要农业推广模式及其对中国的启示

世界农业 2014年第9期 134-137,196页

作者：赵文李孟娇王芳王静农业部国际交流服务中心中国农业大学

19世纪中期,农业推广始于欧洲,并得到迅速发展。随着农业现代化的深入发展,借鉴国外农业推广模式的先进经验对促进中国农业推广模式的不断创新、发掘农业推广潜力、加快中国农业现代化转型具有重要意义。本文重点介绍了美国、日本、以色... 详细信息

19世纪中期,农业推广始于欧洲,并得到迅速发展。随着农业现代化的深入发展,借鉴国外农业推广模式的先进经验对促进中国农业推广模式的不断创新、发掘农业推广潜力、加快中国农业现代化转型具有重要意义。本文重点介绍了美国、日本、以色列3个国家的农业推广模式,并通过与中国现有的主要农业推广模式的对比,在此基础上,总结了国外主要农业推广模式对中国的启示。

关键词：农业推广农业推广模式启示

发达国家奶牛规模化养殖的粪污处理经验——以欧盟主要奶业国家为例

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世界农业 2014年第5期 10-15页

作者：李孟娇董晓霞李宇华中国农业大学中国农业科学院农业信息研究所/农业部农业信息服务技术重点实验室/中国农业科学院智能化农业预警技术与系统重点开放实验室北京市农业技术推广站

随着全球奶业养殖规模化程度的提高以及饲养方式的改变,规模化奶牛场的污染问题已成为世界性的话题,引起各国政府的广泛关注。欧洲各国纷纷通过法律法规等手段对规模化奶牛场环境污染问题进行宏观调控,取得了很好的效果。本文以欧盟3大... 详细信息

随着全球奶业养殖规模化程度的提高以及饲养方式的改变,规模化奶牛场的污染问题已成为世界性的话题,引起各国政府的广泛关注。欧洲各国纷纷通过法律法规等手段对规模化奶牛场环境污染问题进行宏观调控,取得了很好的效果。本文以欧盟3大奶业国家(德国、法国、荷兰)为例,基于其奶业概况及规模化养殖情况,研究阐述了3国环境保护及奶业补贴政策下规模化奶牛场环境控制的主要经验,旨在为中国规模化奶牛场建设及环境控制提供可借鉴的国际经验。

关键词：奶牛发达国家规模化养殖粪污处理经验