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涎腺导管癌临床病理特征及预后分析

口腔疾病防治 2024年第7期32卷 509-516页

作者：陈永强柴国超李天客包阳陈思张素欣河北医科大学第四医院口腔颌面外科河北石家庄050017

目的分析涎腺导管癌(salivary duct carcinoma,SDC)的临床病理特征及其预后相关因素。方法本研究已通过单位伦理委员会审查批准,并获得患者知情同意。回顾性分析河北医科大学第四医院2014—2022年收治的30例SDC患者的临床资料,包括病历... 详细信息

目的分析涎腺导管癌(salivary duct carcinoma,SDC)的临床病理特征及其预后相关因素。方法本研究已通过单位伦理委员会审查批准,并获得患者知情同意。回顾性分析河北医科大学第四医院2014—2022年收治的30例SDC患者的临床资料,包括病历记录、病理诊断、免疫组化指标、治疗方式、随访资料等数据,采用SPSS 26.0软件处理数据并制作生存曲线,卡方检验分析免疫组化分类变量与SDC复发、转移的关系,单因素用于分析临床预后因子。结果30例SDC患者中,男女比例5:1,中位年龄61.5岁,约60%发生于腮腺,其余发生于下颌下腺、舌下腺、腭部小涎腺等。其中,19例雄激素受体阳性,23例人表皮生长因子受体-2阳性,26例Ki-67阳性。术后随访18~94个月,中位随访37个月,复发13例,远端转移14例,5年总生存率31.2%。术后放疗及术后放化疗患者的总生存率高于单纯手术患者,其组间差异具有统计学意义(P=0.027)。肿瘤T分期、淋巴结转移与预后生存率相关(P<0.05),Ki-67阳性细胞数≥40%与术后复发或转移有一定相关性(P=0.025)。结论根治性手术联合术后放疗、放化疗对提高SDC患者远期总生存率有益,肿瘤T分期、淋巴结转移情况可能是影响SDC患者预后的主要因素,Ki-67阳性细胞数≥40%的患者,易出现术后复发或转移。

关键词：涎腺导管癌 Ki‐67 人表皮生长因子受体‐2 雄激素受体 T分期淋巴结转移生存率预后

IL-21、IL-2对口腔癌患者外周血T淋巴细胞内细胞因子表达的影响及临床意义

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IL-21、IL-2对口腔癌患者外周血T淋巴细胞内细胞因子表达的影响及...

作者：李天客河北医科大学

学位级别：硕士

目的:目前,口腔癌的治疗仍是以手术为主,并辅以局部放疗和全身化疗的综合治疗,但手术造成的功能障碍和外貌畸形对患者来说是不愿承受的,而放化疗对患者机体也存在着严重的毒副作用。因此研究针对口腔癌患者的免疫治疗具有重要的临床应... 详细信息

目的:目前,口腔癌的治疗仍是以手术为主,并辅以局部放疗和全身化疗的综合治疗,但手术造成的功能障碍和外貌畸形对患者来说是不愿承受的,而放化疗对患者机体也存在着严重的毒副作用。因此研究针对口腔癌患者的免疫治疗具有重要的临床应用价值。目前临床上已应用IL-2、CSF、IFN、TNF-α等治疗肿瘤。IL-21是IL-2家族中的新成员,在结构上和功能上与IL-2类似,具有持久增强效应T细胞及活化NK细胞的功能,并且以没有剂量依赖性的毒副作用而优于IL-2。因此,IL-21日益受到人们的关注,其最具潜力的应用前景在于肿瘤的生物治疗领域。本试验采用IL-21、IL-2单独或联合刺激口腔癌患者外周全血细胞,观察T淋巴细胞内IL-2+、IFN-γ+、CD4+/IL-2+、CD4+/IFN-γ+分泌水平的变化及其时间依赖性,探讨IL-21、IL-2单独或联合应用对口腔癌患者机体抗肿瘤免疫功能的影响,为IL-21应用于口腔癌的免疫治疗提供试验性理论依据。方法:抽取晨起空腹静脉肝素抗凝血3ml,与含10%灭活新生小牛血清,100U/ml青霉素和100ug/ml链霉素的RPMI 1640培养基按1:1比例加入24微孔培养板,设空白对照组和试验组,对照组不加入任何细胞因子,试验组依照加入细胞因子的不同分为A、B、C组。A:IL-2组,B:IL-21组、C:IL-2+IL-21组。(细胞因子用量:IL-2 1000U/ml,IL-21 15ng/ml),各组在37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养,选取24h、48h两个作用时间点,以流式细胞仪分别测定各组全血培养细胞中T淋巴细胞内IL-2+、IFN-γ+ T淋巴细胞所占的比例及CD4+/IL-2+、CD4+/IFN-γ+ T淋巴细胞所占的比例,以观察其分泌水平的变化及其时间依赖性。结果:1培养后各组T淋巴细胞内细胞因子分析结果1.1 IL-2+的表达:24小时空白对照组T淋巴细胞内IL-2+ T淋巴细胞所占的比例为1.2313+0.1703%,而A、B、C三组分别为3.0590+0.3897%、3.2043+0.5345%、3.1740+0.4612%,48小时对照组为1.2486+0.0964%,试验组分别为6.2083+1.2570%、4.7463+0.6297%、5.3133+1.0607%,在两个检测时间点,各试验组比对照组IL-2+ T淋巴细胞比例均有显著提高,(P﹤0.05),而A、B、C三组间均无明显差异(P>0.05)。1.2 IFN-γ+的表达:24小时空白对照组T淋巴细胞内IFN-γ+ T淋巴细胞所占的比例为1.0033+0.0919%,而A、B、C三组分别为2.6447+0.3484%、2.5103+0.2728%、2.5390+0.2691%,48小时对照组为1.0128+0.1025%,试验组分别为5.9977+0.9969%、5.6327+1.121%、5.5280+0.8846%,在两个检测时间点,各试验组比对照组IFN-γ+ T淋巴细胞比例均有显著提高(P﹤0.05),而A、B、C三组间均无明显差异(P>0.05)。1.3 CD4+/IL-2+的表达:24小时空白对照组T淋巴细胞内CD4+/IL-2+T淋巴细胞所占的比例为0.6670+0.1096%,而A、B、C三组分别为2.2660+0.3767%、2.3727+0.3341%、2.4577+0.3828%,48小时对照组为0.6738+0.0917%,试验组分别为5.5490+1.0036%、4.7463+0.6297%、5.2780+0.8209%,在两个检测时间点,各试验组比对照组CD4+/IL-2+T淋巴细胞比例均有显著提高(P﹤0.05),而A、B、C三组间均无明显差异(P>0.05)。1.4 CD4+/IFN-γ+的表达:24小时空白对照组T淋巴细胞内CD4+/IFN-γ+ T淋巴细胞所占的比例为0.5033+0.0846%,而A、B、C三组分别为1.4853+0.2079%、1.4027+0.1747%、1.6113+0.2101%,48小时对照组为0.5128+0.0735%,试验组分别为4.7390+0.5536%、5.0293+0.7189%、5.2777+0.8083%,在两个检测时间点,各试验组比对照组CD4+/IFN-γ+ T淋巴细胞比例均有显著提高(P﹤0.05),而A、B、C三组间均无明显差异(P>0.05)。2各试验组培养前、培养24小时与培养48小时检测结果比较2.1 IL-2+的变化:各组培养后较培养前IL-2+的表达均有显著增强(P﹤0.05),而培养后两个时间点比较,A组中培

关键词： IL-21 IL-2 口腔癌 T淋巴细胞全血培养细胞免疫治疗

CD168对口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭的作用机制研究

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医学分子生物学杂志 2022年第6期19卷 457-463页

作者：刘昕李天客杜宁路月亭刘学聪河北医科大学第四医院口腔科石家庄市050011 河北省儿童医院口腔科石家庄市050031

目的探究CD168对口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭的作用机制。方法比较人正常口腔角质细胞系HOK与不同口腔鳞癌细胞株间CD168表达差异,选择HN13细胞株作为研究对象,感染慢病毒shRNA载体后,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western印迹法检测CD168... 详细信息

目的探究CD168对口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭的作用机制。方法比较人正常口腔角质细胞系HOK与不同口腔鳞癌细胞株间CD168表达差异,选择HN13细胞株作为研究对象,感染慢病毒shRNA载体后,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western印迹法检测CD168基因和蛋白表达检测干预效果,CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Transwell试验检测细胞侵袭情况,Western印迹检测细胞增殖、凋亡、侵袭以及CXCL12-CXCR4/CXCR7信号轴相关蛋白表达。结果选择HN13细胞和CD168-shRNA2慢病毒载体进行后续实验(P0.05)。结论靶向沉默CD168可抑制口腔鳞状癌细胞HN13增殖、侵袭,促进其凋亡,可能与CXCL12-CXCR4/CXCR7信号轴有关。

关键词：口腔鳞状细胞癌 CD168 短发夹RNA 细胞增殖细胞侵袭 CXCL12-CXCR4/CXCR7信号轴

RNA干扰SBF2对人口腔癌细胞株SCC15增殖、凋亡及侵袭的影响

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中国老年学杂志 2016年第21期36卷 5260-5262页

作者：李天客陈中包阳张素欣河北医科大学第四医院口腔科河北石家庄050071

目的探讨RNA干扰SET结合因子2(SBF2)表达对人口腔癌细胞株SCC15增殖、凋亡及侵袭的影响。方法根据SBF2的mRNA序列及siRNA设计原则,设计并合成3条靶向SBF2基因的siRNA(SBF2-siRNA1、SBF2-siRNA2、SBF2-siRNA3),以阳离子脂质体Lipofectamine 2000为载体转染取对数生长期SCC15细胞,同时设转染不针对任何基因的随机序列(siRNA-NC)。转染48 h后采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SBF2干扰效率,分别于转染24、48、72 h采用WST-1法评价讨RNA干扰SBF2对SCC15细胞增殖的影响,分别于转染24、48 h后采用Annexin VFITC/PI双标流式细胞术和Transwell小室法检测SCC15细胞的凋亡率及穿膜细胞数以评价RNA干扰SBF2对凋亡和侵袭能力的影响。结果与仅行转染试剂Lipofectamine 2000处理的对照组相比,SBF2-siRNA1、SBF2-siRNA2和SBF2-siRNA3组SCC15细胞中SBF2 mRNA水平均降低(PSBF2-siRNA3>SBF2-siRNA1,故选取干扰效率最高的SBF2-siRNA2用于后续实验。与对照组和siRNA-NC组相比,SBF2-siRNA组的增殖抑制率和凋亡率均升高,而穿膜细胞数降低,以上差异均有统计学意义(P0.05)。结论 RNA靶向干扰SBF2表达可抑制人口腔癌细胞增殖及侵袭能力并诱导其凋亡。

关键词： RNA干扰 SET结合因子2 口腔癌增殖凋亡

Spindly和Bub3在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

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上海口腔医学 2020年第5期29卷 528-532页

作者：郑晶李天客包阳张素欣河北医科大学第四医院口腔科河北石家庄050011

目的:探讨Spindly和Bub3在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达水平及意义。方法:选取河北医科大学第四医院2017年3月—2019年3月收治的65例OSCC患者的口腔鳞癌组织及癌旁正常组织,采用RT-PCR检测口腔鳞癌组织... 详细信息

目的:探讨Spindly和Bub3在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达水平及意义。方法:选取河北医科大学第四医院2017年3月—2019年3月收治的65例OSCC患者的口腔鳞癌组织及癌旁正常组织,采用RT-PCR检测口腔鳞癌组织及癌旁正常组织中Spindly、Bub3 mRNA的表达水平;对OSCC细胞株进行培养,siRNA转染干扰Spindly、Bub3基因表达后,采用MTT法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:Spindly和Bub3 mRNA在人口腔鳞癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05);Spindly和Bub3 mRNA表达量与T分期、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);Spindly、Bub3、Spindly/Bub3高表达患者的5年生存率高于低表达患者,且Spindly/Bub3高表达患者的5年生存率低于Spindly、Bub3高表达患者,差异有统计学意义(P<0.05);siRNA-Spindly组的Spindly表达水平低于Spindly阴性对照组、空白对照组,siRNA-Bub3组的Bub3表达水平也低于Bub3阴性对照组、空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);siRNA-Spindly组细胞在24、48、72、96 h的增殖能力低于Spindly阴性对照组、空白对照组,siRNA-Bub3组细胞在24、48、72、96 h的增殖能力低于Bub3阴性对照组、空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);siRNA-Spindly组细胞在24、48 h的迁移能力低于Spindly阴性对照组、空白对照组,siRNA-Bub3组细胞在24、48 h的迁移能力低于Bub3阴性对照组、空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Spindly和Bub3在口腔鳞癌中呈高表达,且与临床、病理分期相关;特异性抑制Spindly和Bub3基因表达,可降低癌细胞的增殖和迁移能力,有望作为治疗口腔鳞癌的靶点之一。

关键词： Spindly Bub3 口腔鳞状细胞癌细胞增殖

miR-204-5p靶向溴结构域蛋白4对舌鳞状细胞癌细胞SCC25增殖和迁移侵袭的影响研究

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华西口腔医学杂志 2020年第2期38卷 185-192页

作者：郑晶张雨温李天客包阳张素欣河北医科大学第四医院口腔科石家庄050011

目的探讨miR-204-5p对溴结构域蛋白(BRD)4的靶向作用机制以及对舌鳞状细胞癌SCC25细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测舌鳞状细胞癌组织以及不同细胞株系间的miR-204-5p和BRD4 mRNA的表达水平;miR... 详细信息

目的探讨miR-204-5p对溴结构域蛋白(BRD)4的靶向作用机制以及对舌鳞状细胞癌SCC25细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测舌鳞状细胞癌组织以及不同细胞株系间的miR-204-5p和BRD4 mRNA的表达水平;miR-204-5p转染SCC25细胞后,细胞计数试剂盒(CCK)8法检测其对细胞增殖的影响,Transwell小室法检测miR-204-5p对SCC25迁移和侵袭的影响;使用TargetScan和荧光素酶实验分析并验证miR-204-5p与BRD4的靶向调控关系;RT-qPCR和Western blot检测miR-204-5p模拟物和抑制剂对BRD4表达水平的影响;Transwell小室法和CCK8法检测miR-204-5p调控BRD4对SCC25增殖和迁移侵袭的影响。结果miR-204-5p在舌鳞状细胞癌组织和SCC25细胞中表达下调,BRD4在舌鳞状细胞癌组织和SCC25细胞中表达上调;提高miR-204-5p表达量抑制SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭;TargetScan和荧光素酶实验证实miR-204-5p与BRD4具有靶向负调控关系;miR-204-5p模拟物抑制BRD4表达,miR-204-5p抑制剂促进BRD4表达上调;当在SCC25细胞中同时过表达miR-204-5p和BRD4时,BRD4能够回补miR-204-5p对SCC25细胞的抑制作用。结论miR-204-5p能够通过靶向负调控BRD4抑制舌鳞状细胞癌SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭。

关键词： miR-204-5p 溴结构域蛋白4 增殖迁移侵袭

PD1免疫治疗前后口腔癌患者T细胞免疫功能的变化

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现代口腔医学杂志 2023年第6期37卷 396-400页

作者：冯良尹克张素欣陈中包阳李天客河北省保定市第一中心医院口腔科 071000 河北省邢台市人民医院口腔科河北医科大学第四医院口腔科

目的本研究拟通过检测口腔癌患者PD1免疫治疗前后外周血中T淋巴细胞各亚群的表达情况,探讨肿瘤患者机体免疫系统发生的变化。方法本项目拟采用2019年10月至2020年9月于河北医科大学第四医院60例经手术后病理证实口腔鳞癌的患者为研究对... 详细信息

目的本研究拟通过检测口腔癌患者PD1免疫治疗前后外周血中T淋巴细胞各亚群的表达情况,探讨肿瘤患者机体免疫系统发生的变化。方法本项目拟采用2019年10月至2020年9月于河北医科大学第四医院60例经手术后病理证实口腔鳞癌的患者为研究对象,并给予PD1免疫治疗。用流式细胞仪检测CD4+T细胞和CD8+T细胞在T淋巴细胞中的百分比,计算CD4+T细胞/CD8+T细胞的比值。ELISA法检测口腔癌患者PD1免疫治疗前后血液中的IFN-γ和IL-2水平。结果经过PD1治疗后,口腔癌患者血液中IFN-γ、IL-2含量、CD4+T细胞百分比及CD4/CD8+T细胞比值都明显升高(P<0.001);在PD1治疗后,口腔癌患者血液中CD8+T细胞百分比的含量显著降低(P<0.001),口腔癌患者在接受PD1免疫治疗之后,患者的免疫功能显著增强。结论运用PD1免疫治疗口腔癌患者,治疗前后患者T细胞免疫功能明显增强,具有一定的临床应用价值与应用前景,为临床上应用针对口腔癌的免疫治疗提供理论依据。

关键词：免疫治疗口腔癌 PD1 T细胞 CD4

口腔癌患者手术前后细胞免疫功能的变化及临床意义

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中国老年学杂志 2018年第4期38卷 827-829页

作者：李天客包阳陈中张素欣尹克河北医科大学第四医院口腔科河北石家庄050071 邢台市人民医院口腔科

目的探讨口腔癌患者手术前后细胞免疫功能的变化及临床意义。方法口腔癌患者30例作为观察组,另选同期健康体检者30例作为对照组;两组在纳入研究24 h内抽取清晨空腹肘静脉血3 ml,观察组在手术结束1 w后再次抽取空腹肘静脉血3 ml,采用流... 详细信息

目的探讨口腔癌患者手术前后细胞免疫功能的变化及临床意义。方法口腔癌患者30例作为观察组,另选同期健康体检者30例作为对照组;两组在纳入研究24 h内抽取清晨空腹肘静脉血3 ml,观察组在手术结束1 w后再次抽取空腹肘静脉血3 ml,采用流式细胞仪检测血清T细胞各亚型及其细胞因子表达情况,对比手术前、后两组T细胞亚群及T细胞内细胞因子水平。结果观察组手术前CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8+水平、白介素(IL)-2阳性、IL-2、CD4双阳性及γ干扰素(INF-γ)、CD4双阳性水平显著低于对照组,CD8+、CD56+及INF-γ阳性水平均高于对照组;手术后,观察组患者CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+水平、IL-2阳性、IL-2、CD4双阳性及INF-γ、CD4双阳性水平均显著上升,CD8^+、CD56^+及INF-γ阳性水平显著降低(P0.05)。结论口腔癌患者机体抵抗免疫抑制功能下降,手术治疗能够改善患者免疫水平及免疫调节功能,改善患者病情。

关键词：口腔癌手术细胞免疫

乙二胺四乙酸和透明质酸对牙周膜成纤维细胞活力和细胞因子表达的影响

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上海口腔医学 2020年第6期29卷 606-610页

作者：郑晶李天客张素欣仇永乐河北医科大学第四医院口腔科河北石家庄050011

目的:研究乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid,EDTA)和透明质酸(hyaluronic acid,HA)对牙周膜成纤维细胞(periodontal ligament fibroblasts,PDLFs)活力和细胞因子表达的影响。方法:选取因正畸拔除的智牙12颗,制备成5 mm×4 mm大小根片,按照处理方式不同分为EDTA组、HA组、EDTA+HA组和未处理组。将其置于孔板中并在根片上接种PDLFs,于接种24、48 h后,采用MTT法检测各组细胞增殖活力,显微镜下观察PDLFs的黏附情况。利用ELLISA法和Western免疫印迹法测定PDLFs产生的炎性细胞因子IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α水平,采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计分析。结果:接种24、48 h后,与未处理组相比,各处理组均能促进PDLFs增殖和黏附,且联合处理促细胞增殖和黏附效果优于单一处理,差异均具有统计学意义(P0.05)。ELLIS A法和Wes tern免疫印迹检测结果显示,各处理组较未处理组均能抑制炎性因子IL-6、IL-1β和TNF-α表达,促进IL-8表达,且EDTA+HA组的作用效果更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:EDTA+HA能显著促进牙周膜成纤维细胞生长和抑制炎性细胞因子表达,可能与其增强成纤维细胞黏附力、提高其生存能力有关。

关键词： EDTA 透明质酸牙周膜成纤维细胞细胞炎性因子