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响应面法优化灰色链霉菌产纤维素酶的工艺研究

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基因组学与应用生物学 2019年第3期38卷 1123-1130页

作者：李堆淑商洛学院生物医药与食品工程学院商洛726000

以灰色链霉菌为原料,在单因素试验的基础上,采用响应面法试验,优化灰色链霉菌产纤维素酶活性的发酵条件。结果表明,单因素试验灰色链霉菌产纤维素酶活性的最适发酵条件:碳源为CMC-Na,氮源为明胶,温度为28℃,pH为7.0,转速为130 r/min。... 详细信息

以灰色链霉菌为原料,在单因素试验的基础上,采用响应面法试验,优化灰色链霉菌产纤维素酶活性的发酵条件。结果表明,单因素试验灰色链霉菌产纤维素酶活性的最适发酵条件:碳源为CMC-Na,氮源为明胶,温度为28℃,pH为7.0,转速为130 r/min。响应面法试验优化灰色链霉菌产纤维素酶活性最佳发酵条件为:温度27.7℃,pH值6.9,转数130.3 r/min,在此优化条件下,灰色链霉菌产纤维素平均酶活性为6.103 U/mL(n=3),与模型的预测值(6.217 U/mL)比较接近,误差为1.83%,证明了该响应面模型具有可靠性。

关键词：灰色链霉菌纤维素酶响应面法

超声提取细黄链霉菌胞外多糖工艺与抗氧化活性研究

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食品与发酵工业 2016年第5期42卷 253-258页

作者：李堆淑商洛学院生物医药与食品工程学院陕西商洛726000

以细黄链霉菌胞外多糖的浓度为指标,采用单因素和响应面分析法对细黄链霉菌胞外多糖浓度的提取条件进行优化,然后用邻二氮菲法和DPPH法测定了细黄链霉菌胞外多糖的抗氧化活性。结果表明,影响细黄链霉菌胞外多糖浓度的单因素试验的最佳... 详细信息

以细黄链霉菌胞外多糖的浓度为指标,采用单因素和响应面分析法对细黄链霉菌胞外多糖浓度的提取条件进行优化,然后用邻二氮菲法和DPPH法测定了细黄链霉菌胞外多糖的抗氧化活性。结果表明,影响细黄链霉菌胞外多糖浓度的单因素试验的最佳条件为乙醇体积分数70%,乙醇沉淀时间12 h,超声功率420 W。响应面法优化得到超声波提取细黄链霉菌胞外多糖的最佳工艺为:乙醇体积分数70.32%,乙醇沉淀时间12.06 h,超声功率417.12 W,细黄链霉菌胞外多糖浓度为4.945 g/L,与预测值相差0.142%。细黄链霉菌胞外多糖对·OH和DPPH·均具有较强的抗氧化活性。

关键词：细黄链霉菌胞外多糖响应曲面法抗氧化活性

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生防放线菌代谢产淀粉酶工艺的优化

江苏农业科学 2015年第8期43卷 376-378页

作者：李堆淑商洛学院生物医药与食品工程学院陕西商洛726000

从陕西省商洛市商州区不同植被下采取土样,分离出65株生防放线菌,其中从苜蓿中分离的MX3菌株对黄芩根腐病菌的生防效果最强。采用单因素试验及正交试验对MX3菌株代谢产物产淀粉酶活性进行测定,优化发酵条件。结果表明:单因素试验得出MX... 详细信息

从陕西省商洛市商州区不同植被下采取土样,分离出65株生防放线菌,其中从苜蓿中分离的MX3菌株对黄芩根腐病菌的生防效果最强。采用单因素试验及正交试验对MX3菌株代谢产物产淀粉酶活性进行测定,优化发酵条件。结果表明:单因素试验得出MX3菌株的最佳碳源、氮源分别为玉米粉、酵母膏,最适装液量为125 m L,最适温度为28℃,最适初始p H值为6.0,最适摇床转速为130 r/min,最适发酵时间为6.5 d。由正交试验得到MX3菌株的最佳发酵条件组合为装液量125 m L、p H值7.0、发酵时间5.5 d、摇床转速200 r/min。

关键词：生防放线菌淀粉酶发酵液正交试验发酵条件优化

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响应面法诱变选育生防链霉菌H3高产菌株

食品科技 2016年第9期41卷 34-39页

作者：李堆淑商洛学院生物医药与食品工程学院商洛726000

为了获得生防放线菌高产菌株,以生防链霉菌H3为研究对象,在单因素紫外线、微波、Na NO_2浓度诱变的基础上,采用响应面法分析优化各因素,筛选一株突变株链霉菌对豇豆腐皮镰孢根腐病菌的抑制效果较高。结果表明,出发菌株链霉菌H3对豇豆腐... 详细信息

为了获得生防放线菌高产菌株,以生防链霉菌H3为研究对象,在单因素紫外线、微波、Na NO_2浓度诱变的基础上,采用响应面法分析优化各因素,筛选一株突变株链霉菌对豇豆腐皮镰孢根腐病菌的抑制效果较高。结果表明,出发菌株链霉菌H3对豇豆腐皮镰孢根腐病菌抑制率为34.5%。单因素试验筛选确定最佳诱变的紫外光照时间为20 s,微波加热时间为10 s,Na NO_2浓度为0.2 mol/L。响应面法分析优化各因素,并进行方差分析确定最佳工艺条件是紫外光照时间为18.27 s,微波加热时间为9.26 s,Na NO_2浓度为0.20 mol/L。在此条件下获得了一株突变株链霉菌H3-18对豇豆腐皮镰孢根腐病菌抑制率为79.75%,比出发菌株链霉菌H3对豇豆腐皮镰孢根腐病菌的抑制率提高了56.74%,比实测值(78.85%)提高了1.57%,证实了该模型的有效性。将突变株生防链霉菌H3-18,连续5次传代遗传性能较稳定。

关键词：生防链霉菌H3 豇豆腐皮镰孢根腐病菌响应面法复合诱变

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寡聚糖激发子诱导杨树对溃疡病抗性的研究

寡聚糖激发子诱导杨树对溃疡病抗性的研究

作者：李堆淑西北农林科技大学

学位级别：硕士

寡聚糖作为一种新型诱抗剂,在植物中可作为早期信息分子,对植物的抗病菌侵染、生长发育、形态建成等有着重大影响。在抗病侵染过程中,寡聚糖能激发包括植保素合成在内的多种防御反应。由于寡聚糖无毒、无污染环境,因此近年来国内外对寡... 详细信息

寡聚糖作为一种新型诱抗剂,在植物中可作为早期信息分子,对植物的抗病菌侵染、生长发育、形态建成等有着重大影响。在抗病侵染过程中,寡聚糖能激发包括植保素合成在内的多种防御反应。由于寡聚糖无毒、无污染环境,因此近年来国内外对寡聚糖研究的越来越多,特别是植物病害控制的研究更是热点。本文以杨树溃疡病菌菌丝体细胞壁、壳聚糖、植物细胞壁降解物(寡聚糖)为激发子,以杨树愈伤组织为受体材料,研究了不同类型寡聚糖激发子对杨树愈伤组织抗杨树溃疡病(Dothiorella gregaria)的诱抗效果。并对寡聚糖激发子诱导抗病性的可能生理生化机制进行了探讨。主要取得了以下研究结果: 1、应用酸解加高温高压降解杨树溃疡病菌细胞壁,经90%、70%、50%的乙醇对降解物进行分级沉淀分离,得到三种不同聚合度的寡聚糖激发子A1、A2、A3;壳聚糖经酸解并结合过氧化氢氧化降解得到激发子B;以海带、桔皮和香蕉果皮为原料,用果胶酶降解后,得到三种果胶寡聚糖激发子C1、C2、C3;上述7种激发子经诱导试验均具有激发子活性。 2、通过7种寡聚糖激发子诱导毛白杨愈伤组织对溃疡病抗性实验,筛选出诱导活性较高的3种寡聚糖激发子及其适宜的诱导浓度。3种诱导活性较强的激发子中,A1对溃疡病的诱抗效果为54.8%(A1适宜浓度为20μg/ml);B的诱抗效果为34.7%(B适宜浓度为25μg/ml);C3的诱抗效果为32.3%(C3适宜浓度为50μg/ml)。 3、毛白杨愈伤组织经A1、B、C3 3种激发子诱导处理后HRGP、绿原酸的含量明显增高,HRGP增高了36.8% 48.3%,绿原酸含量增加了97.7%06.3%,诱导效果为A1 > B > C3;HRGP作为植物细胞壁的修饰物能增强细胞壁的抗穿透能力,起到物理抗病作用,绿原酸对多种病原菌具有毒性,起化学抗病作用。 4、3种激发子诱导处理后毛白杨愈伤组织SOD、CAT、POD、PPO、APX、PAL、几丁质酶活性均明显增高,且在诱导2d后的挑战接种互作过程中这些酶的活性在一定时间性内表现出了明显的消长过程,活性峰值均显著高于对照样品的酶活性,表明3种激发子对这些酶均具有明显的诱导作用。 SOD、CAT、POD是植物体内重要的保护酶,对植物与病原菌互作过程中活性氧迸发后的活性氧清除起着重要作用;PAL是植物抗病代谢的关键酶,其活性高低直接影响抗菌物质(如HRGP、绿原酸、植保素等)的含量;几丁质酶则对病原真菌细胞壁具有直接的破坏作用,因此其活性的升高具有明显的抗病作用。激发子对这些酶活性的诱导以及对相关抗菌物质含量的影响,在一定程度上揭示了激发子诱导抗性的生理生化机制。

关键词：杨树愈伤组织寡聚糖激发子诱导抗病性

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寡糖对干旱胁迫下桔梗的诱导效应研究

河南农业科学 2017年第6期46卷 98-103,124页

作者：李堆淑商洛学院生物医药与食品工程学院陕西商洛726000

为了明确寡糖对干旱胁迫下桔梗抗旱作用的机制,以桔梗为材料,采用桔梗种子萌发水培试验和桔梗幼苗盆栽试验,用0、30、60、120 g/L的PEG-6000模拟干旱胁迫,施加不同质量浓度寡糖(0、5、10、50 mg/L)诱导桔梗,研究寡糖对干旱胁迫下桔梗种... 详细信息

为了明确寡糖对干旱胁迫下桔梗抗旱作用的机制,以桔梗为材料,采用桔梗种子萌发水培试验和桔梗幼苗盆栽试验,用0、30、60、120 g/L的PEG-6000模拟干旱胁迫,施加不同质量浓度寡糖(0、5、10、50 mg/L)诱导桔梗,研究寡糖对干旱胁迫下桔梗种子萌发以及桔梗幼苗抗氧化酶活性和MDA含量的影响。结果表明,同一质量浓度的PEG-6000模拟干旱胁迫,在一定质量浓度范围内桔梗种子萌发指标(发芽势、发芽率、发芽指数、根长及芽长)随寡糖质量浓度的增加表现为先增大后减小,寡糖质量浓度为10 mg/L时桔梗种子萌发指标达到最佳。而同一质量浓度寡糖诱导桔梗,PEG-6000溶液浓度越大,桔梗种子萌发所受胁迫越严重。桔梗种子萌发的发芽势、发芽率、发芽指数、根长及芽长之间呈现不同程度正相关。不同质量浓度的寡糖(0、5、10、50 mg/L)分别与30 g/L PEG-6000配施,处理后4~8 d,桔梗幼苗POD和CAT活性、MDA含量均先升高后降低,而SOD活性逐渐升高,寡糖质量浓度为10 mg/L时诱导桔梗幼苗抗旱的效果最佳。POD活性与CAT活性呈现出高度显著正相关(P<0.001),CAT活性与SOD活性呈现出显著正相关(P<0.05),MDA含量分别与POD、CAT、SOD活性呈现出极显著负相关(P<0.01)。

关键词：桔梗寡糖干旱胁迫抗旱性生理指标

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细黄莲霉菌对黄芩种子萌发特性的影响

种子 2015年第9期34卷 24-27页

作者：李堆淑商洛学院生物医药与食品工程学院陕西商洛726000

为了研究细黄链霉菌对黄芩的诱导效应,用不同浓度的细黄链霉菌发酵液浸种处理黄芩种子,探讨细黄莲霉菌对黄芩种子萌发及生长的影响。结果表明,不同浓度的细黄链霉菌发酵液对黄芩种子萌发和幼苗生长都有促生作用,并且影响显著,同一时间... 详细信息

为了研究细黄链霉菌对黄芩的诱导效应,用不同浓度的细黄链霉菌发酵液浸种处理黄芩种子,探讨细黄莲霉菌对黄芩种子萌发及生长的影响。结果表明,不同浓度的细黄链霉菌发酵液对黄芩种子萌发和幼苗生长都有促生作用,并且影响显著,同一时间随着浓度的升高黄芩种子发芽率、发芽指数、幼苗的苗高和干重均先上升后下降,同一浓度随着时间（0～8d）的增加黄芩种子发芽率、发芽指数、幼苗的干重和苗高均一直升高。细黄链霉菌发酵液浓度稀释50倍时,黄芩的促生效果最显著。可见,低浓度的细黄链霉菌发酵液对黄芩植株有明显的化感促进作用,随着发酵液浓度的增加,其对受体的促进作用逐渐减弱。

关键词：细黄链霉菌黄芩促生

水杨酸对铅胁迫下桔梗种子萌发及幼苗生长的影响

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种子 2017年第2期36卷 87-91页

作者：李堆淑商洛学院生物医药与食品工程学院陕西商洛726000

以桔梗种子为材料,用1mmol/L SA、200mg/L Pb2+、1mmol/L SA+200mg/L Pb2+3种溶液分别处理桔梗种子,采用培养皿纸上发芽法培养,研究外源SA缓解桔梗种子萌发和幼苗生长受铅毒害。结果表明,与空白对照(ck)相比,在铅胁迫下桔梗种子的发芽... 详细信息

以桔梗种子为材料,用1mmol/L SA、200mg/L Pb2+、1mmol/L SA+200mg/L Pb2+3种溶液分别处理桔梗种子,采用培养皿纸上发芽法培养,研究外源SA缓解桔梗种子萌发和幼苗生长受铅毒害。结果表明,与空白对照(ck)相比,在铅胁迫下桔梗种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、相对发芽率、相对Pb2+害率、苗鲜重、叶鲜重和根长等指标均明显受到抑制,添加外源SA处理可以显著提高桔梗种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、相对发芽率、相对Pb2+害率、苗鲜重、叶鲜重和根长等指标的增长。添加外源SA可以使铅胁迫的桔梗幼苗中MDA含量减少、叶绿素含量和可溶性糖含量增加、POD酶活性增强,可见外源SA能缓解Pb2+胁迫对桔梗幼苗叶片的质膜伤害,维持膜结构的稳定性,进而缓解铅对桔梗造成的毒害作用。

关键词：水杨酸(SA) 铅胁迫桔梗种子幼苗生长

垃圾堆肥菌剂对桔梗种子萌发及干物质积累的影响

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种子 2018年第2期37卷 90-93页

作者：李堆淑商洛学院生物医药与食品工程学院陕西商洛726000

以桔梗种子为材料,采用水培,在单因素试验的基础上进行正交试验,研究生活垃圾堆肥复合菌(枯草芽孢杆菌∶灰色链霉菌∶酵母菌=1∶1∶1)配施对桔梗种子萌发及干物质积累的影响,来确定堆肥复合菌最佳浓度。结果表明:单因素试验桔梗种子萌... 详细信息

以桔梗种子为材料,采用水培,在单因素试验的基础上进行正交试验,研究生活垃圾堆肥复合菌(枯草芽孢杆菌∶灰色链霉菌∶酵母菌=1∶1∶1)配施对桔梗种子萌发及干物质积累的影响,来确定堆肥复合菌最佳浓度。结果表明:单因素试验桔梗种子萌发的最佳浓度为枯草芽孢杆菌发酵液稀释10倍,灰色链霉菌发酵液稀释20倍,酵母菌发酵液稀释5倍。在正交试验中堆肥复合菌对桔梗种子发芽指数影响的最优为A1B2C2,对桔梗根干物质重量影响的最优为A1B3C3,对桔梗茎干物质重量影响的最优为A1B2C2,对桔梗叶干物质重量影响的最优为A1B3C3。可见,不同配方的施肥可显著提高桔梗种子的发芽,并能增加桔梗幼苗各部分的干物质积累。

关键词：桔梗垃圾堆肥菌剂干物质重量