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缺氧诱导因子1α的RNAi表达载体构建及其在前列腺癌PC-3细胞研究中的作用

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生物医学工程学杂志 2011年第1期28卷 129-134页

作者：刘荣福耿爱民李博安厦门大学附属第一医院泌尿外科厦门361003 福建医科大学福州350005 厦门大学生命科学院厦门361003

本研究根据***载体的特有结构,构建缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的RNA干扰(RNAi)表达载体,将其与GFP共转染前列腺癌PC-3细胞36 h后转染效率为(87.15±2.36)%;通过与对照组的比较,质粒转染PC-3细胞48 h后可显著降低胞内HIF-1αmRNA及蛋白的... 详细信息

本研究根据***载体的特有结构,构建缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的RNA干扰(RNAi)表达载体,将其与GFP共转染前列腺癌PC-3细胞36 h后转染效率为(87.15±2.36)%;通过与对照组的比较,质粒转染PC-3细胞48 h后可显著降低胞内HIF-1αmRNA及蛋白的表达;利用重组质粒的嘌呤霉素的抗药性,加药筛选2周,可观察到单克隆生成;收集稳定转染得到的pSUPER-siHIF-1α/PC-3细胞株,再次通过West blot检测到PC-3细胞的HIF-1α蛋白表达亦显著降低。结果表明,利用RNAi技术可成功构建抑制前列腺癌HIF-1α表达的si RNA重组表达载体,为研究HIF-1α在前列腺癌发病机理及增殖、转移中的功能奠定了基础,同时可以用于其在其他肿瘤的功能研究。

关键词：缺氧诱导因子1 αRNAi载体前列腺癌PC-3细胞研究作用

从以意拳状态缓解大鼠应激探讨“守神治神”的理论与实验研究

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从以意拳状态缓解大鼠应激探讨“守神治神”的理论与实验研究

作者：李博安北京中医药大学

学位级别：硕士

本课题探讨了“守神治神”在中国传统操作性治疗方法(尤其是针灸和外气之类)中的作用，以及从现代医学的角度如何理解医患交流中医生的主观能动性和治疗的有效性? 本论文包含两个部分。第一部分是理论探讨，包括对《黄帝内经》中有关针... 详细信息

本课题探讨了“守神治神”在中国传统操作性治疗方法(尤其是针灸和外气之类)中的作用，以及从现代医学的角度如何理解医患交流中医生的主观能动性和治疗的有效性? 本论文包含两个部分。第一部分是理论探讨，包括对《黄帝内经》中有关针灸医生“守神”、“治神”论述的分析讨论;以及对国外相关科研文献中，有关针灸随机对照试验方法论问题的分析。第二部分是实验研究，包括对“意拳”师感知和缓解大鼠应激能力的测试报告、初步的数据分析结果和讨论。第一部分的重点所在是通过对中医经典和现代文献的分析研究，认为“守神治神”对针灸操作具有重要意义，并对现代针灸研究方法论提出了质疑。全文即以此为基础，确定了实验的设计、指导原则等。针灸疗法是《黄帝内经》中运用的主要治疗手段。从《黄帝内经》中可以看出，古人认为“守神”、“治神”是针灸疗法产生良好疗效的关键所在。通过它能达到“上工十全九”《灵枢·邪气藏府病形》的水平。《内经》中“用针之要，无忘其神”《灵枢·官能》、“凡刺之法，必先本于神”《灵枢·本神》、“凡刺之真，必先治神”《素问·宝命全形论》等，皆在于强调“守神”、“治神”对于提高针灸疗效发挥的重要性。现代医学的认识与《内经》的观点有所冲突。《内经》所讲的“守神”、“治神”可以看作是医患交流，而西医认为医患交流不过是一种心理暗示，仅发挥“安慰剂效应”。针灸作为中国传统操作性疗法中“守神治神”最具代表性的治疗方法，在西方医学界里研究最多的，也最受到这样的质疑。从本论文的第二篇综述中可以看出，由于针灸疗效的发挥并无明确和特异的机制、操作治疗中具有大量的医患交流成分，并且因为已有的针灸临床试验缺乏西医所认为的可靠方法论和阳性结果，所以西医中的保守派认为针灸治疗只不过是发挥安慰剂作用而已。第二部分为实验研究。本课题在探索“守神治神”对中国传统操作性疗法有效性的影响时，进行了一项用以意拳状态缓解大鼠应激的实验，并对操作者的诊断性评价进行了量化分析，从而揭示了操作者之间治疗方式的差异。分析结果证实了实验操作中所观察的治疗方式差异，即各拳师对实验的态度和投入精力程度差异对疗效具有显著意义。实验方案即以意拳状态作为操作性疗法，测试意拳师感知和缓解大鼠应激状态的能力。各种中国传统操作性疗法对“守神治神”的要求是一样的：即每一种疗法的治疗作用是通过具体的物理性手段(如手法和针器)来发挥的，其中“守神治神”的性质及提高疗效的作用仍然是一致的。因此选用意拳状态作为操作性疗法来探索“守神治神”对疗效的影响能代表它在一系列中国传统操作性疗法中，特别是针灸的作用。实验设计的关键在于采用了动物模型做实验，排除了患者信念治疗的基本暗示，从而可以较精确的评估意拳状态的实际治疗作用。从以意拳状态缓解大鼠应激探讨“守神治神”的理论与实验研究实验结果证明:意拳状态对缓解大鼠应激具有一定的疗效一一实验组的雌性和雄性大鼠的血清肾上腺酮恢复状态均优于对照组。说明其疗效并非由语言和社交性心理暗示而引起。此外，通过本实验的量化评价结果，还提示拳师之间对实验的态度和投入精力程度有显著差异。继而发现，态度较好和投入精力较大的那一位拳师的疗效较显著。此结果支持意拳疗效受操作者主观能动性影响的观点。因此，初步结论是曾接受意拳训练的医生具备某种特殊治病的能力，而这个能力可能在操作者全面发挥其主观能动性的条件下更好地发挥治疗作用。也就是说具备较高的意拳训练水平的人在对病人保持良好的态度和当时达到全神贯注的基础上，他的干预能发挥更好的治疗作用。通过以上实验的初步结果，为了提高中国传统操作性疗法的疗效，在培养针推专业学生的基本素质时应当重新考虑“守神治神”的重要性;为了评估传统操作性疗法的实际疗效，用随机对照试验时不要限制医生全面发挥他的主观能动性。本课题的理论探讨与实验研究结果虽然证明传统的“守神治神”具有安慰剂之外的治疗作用，但是要进一步深入认识这一问题，尚要经过大量深入的实验研究工作，才能得出较全面的结论。同时在一定程度上，这也表明利用随机对照试验的方法评估传统操作性疗法(如针灸)的有效性是否合理还需要进一步地探讨。

关键词：安慰剂效应,操作性疗法,守神治神,实验研究,医患交流,意拳,意拳状态

pcDNA3.1-HIF-1 α重组质粒的构建及其初步鉴定

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中国老年学杂志 2011年第10期31卷 1806-1808页

作者：刘荣福占鹏程李博安厦门大学附属第一医院泌尿外科福建厦门361003 福建医科大学厦门大学生命科学院

目的探讨HIF-1α与前列腺癌发病机制之间相关性提供研究工具。方法采用Trizol法裂解细胞,提取HIF-1α且以该RNA为模板逆转录为cDNA,然后行PCR处理扩增HIF-1α基因功能片段区域,克隆至真核表达载体pcDNA3.1上,转化至大肠杆菌DH-5α,小提... 详细信息

目的探讨HIF-1α与前列腺癌发病机制之间相关性提供研究工具。方法采用Trizol法裂解细胞,提取HIF-1α且以该RNA为模板逆转录为cDNA,然后行PCR处理扩增HIF-1α基因功能片段区域,克隆至真核表达载体pcDNA3.1上,转化至大肠杆菌DH-5α,小提质粒,酶切凝胶电泳鉴定,序列测定,经鉴定为正确序列后中抽质粒,采用Fugene试剂转染至前列腺癌细胞PC-3,经G418筛选,建立稳定表达HIF-1α的前列腺癌细胞系pcDNA3.1-HIF-1α-PC-3,采用Western印迹鉴定重组质粒的表达。结果 PCR扩增基因片段大小为2.89 kb,克隆至真核载体pcDNA3.1,酶切凝胶电泳可见两个条带,大小大约为5.3 kb和2.89 kb,与预期的大小相符合,序列测定与Genbank公布的一致,Western印迹验证其在细胞内能表达。结论重组质粒pcDNA3.1-HIF-1α能够在前列腺癌PC-3表达,构建成功,为研究HIF-1α与前列腺癌提供了一个工具。

关键词： HIF-1α 重组质粒构建鉴定

缺氧诱导因子-1α对低氧状态下前列腺癌PC-3细胞株增殖及侵袭的影响

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中华泌尿外科杂志 2011年第9期32卷 599-602页

作者：刘荣福占鹏程李博安厦门大学附属第一医院泌尿外科 361003 杭州市萧山区第一人民医院泌尿外科厦门大学生命科学院肿瘤细胞工程实验室

目的研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）对低氧状态下前列腺癌PC-3细胞株增殖及侵袭的影响。方法利用转染试剂Fermentas将人HIF-1α重组表达质粒pcDNA3．1—HIF--1α转染PC-3细胞株后，低氧环境培养，采用G418筛选，建立稳定表达HIF-1α... 详细信息

目的研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）对低氧状态下前列腺癌PC-3细胞株增殖及侵袭的影响。方法利用转染试剂Fermentas将人HIF-1α重组表达质粒pcDNA3．1—HIF--1α转染PC-3细胞株后，低氧环境培养，采用G418筛选，建立稳定表达HIF-1α基因的细胞株，分别命名为pcD—NA3.1-HIF-1α-PC-3、pcDNA3．1-PC-3及PC-3组。采用RT—PCR和蛋白质印迹法检测3组细胞HIF-1α mRNA和蛋白的表达情况；噻唑盐法测定细胞生长；transwell小室检测侵袭能力。结果与pcDNA3．1-PC-3组和PC-3组相比，pcDNA3．1-HIF--1α-PC-3组细胞内HIF-1αmRNA条带增强不明显，pcDNA3．1-HIF-1α—PC-3组细胞内HIF-1α蛋白的条带明显增强，HIF-1α过表达的PC-3细胞增殖速度明显增快，侵袭细胞数明显增多。结论HIF--1α过表达对PC-3细胞株的增殖及侵袭具有促进作用。

关键词：缺氧诱导因子-1α 低氧状态前列腺癌细胞PC-3 增殖侵袭

Pygo2转基因小鼠模型的建立及表型的初步分析

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厦门大学学报（自然科学版） 2010年第2期49卷 266-271页

作者：袁圆阳骆启聪李超李博安厦门大学生命科学学院细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建厦门361005

主要通过建立Pygo2转基因小鼠的模型对其表型进行初步分析.首先构建K14-2×flag-Pygo的转基因构件,经酶切、纯化后构建Pygo2转基因小鼠.出生后的仔鼠用PCR和Western方法检测基因型,并通过进一步的免疫组化验证Pygo2基因的表达.PCR检测获... 详细信息

主要通过建立Pygo2转基因小鼠的模型对其表型进行初步分析.首先构建K14-2×flag-Pygo的转基因构件,经酶切、纯化后构建Pygo2转基因小鼠.出生后的仔鼠用PCR和Western方法检测基因型,并通过进一步的免疫组化验证Pygo2基因的表达.PCR检测获得7只转基因阳性鼠,6只Western检测为阳性.对转基因小鼠子代的胚胎和成体进行免疫组化证明,Pygo2基因在皮肤和乳腺组织中有过量表达.转基因小鼠的皮肤、乳腺以及鼠尾椎骨等组织出现了异常的表型.乳腺中有肿瘤组织的形成,且Pygo2在肿瘤中有大量表达.该模型的成功建立为进一步研究Pygo2的功能奠定了基础.

关键词： Pygo2 转基因小鼠表型

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腹针教学方法思考

腹针教学方法思考

首届全国腹针学术研讨会会议

作者：李博安

本论文浅谈薄氏腹针教学方法特点和培养针灸人才的优势。笔者从个人的体会肯定教学内容标准化和规范化的意义。薄教授对学习针灸全部过程的高度概括,即"针刺容易取穴难,取穴容易辨证难,辨证容易补泻难,补泻容易调气难" 作为分析腹针教... 详细信息

本论文浅谈薄氏腹针教学方法特点和培养针灸人才的优势。笔者从个人的体会肯定教学内容标准化和规范化的意义。薄教授对学习针灸全部过程的高度概括,即"针刺容易取穴难,取穴容易辨证难,辨证容易补泻难,补泻容易调气难" 作为分析腹针教学方法各阶段的学习内容的出发点。最后,为了使学员操作技能达到"调气"的水平,则笔者提出补充"修身"的建议。

关键词：腹针教学方法修身

来源： cnki会议评论

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中药养生事典

南海东北部大陆坡地震反射异常体的属性分析与岩性识别

丛书名：同仁堂养生馆

2005年

作者：李成卫李博安《同仁堂养生馆》编委会编

本书共分3章，内容包括：中药养生总论、根据体质选择中药养生法、常见病中药养生法。

ISBN: (纸本)7200058157

本书共分3章，内容包括：中药养生总论、根据体质选择中药养生法、常见病中药养生法。

关键词：中草药养生中医

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热带海洋学报 2022年第1期41卷 204-214页

作者：李博安胡善政阎贫于俊辉王潇唐群署中国科学院边缘海与大洋地质重点实验室南海海洋研究所南海生态环境工程创新研究院广东广州510301 南方海洋科学与工程广东省实验室(广州) 广东广州511458 中国科学院大学北京100049 东方地球物理公司西南物探分公司四川成都610213 中海石油(中国)有限公司海南分公司海南海口570311

南海北缘属于非火山型大陆边缘。过去的研究在洋陆转换带北部的地震剖面上曾观测到一些疑似岩席和火山体的高振幅异常体,但对这些高振幅异常体的属性却缺乏进一步的研究。本文在南海东北部大陆坡上的两个多道地震剖面(SO1E和SOY)中也发... 详细信息

南海北缘属于非火山型大陆边缘。过去的研究在洋陆转换带北部的地震剖面上曾观测到一些疑似岩席和火山体的高振幅异常体,但对这些高振幅异常体的属性却缺乏进一步的研究。本文在南海东北部大陆坡上的两个多道地震剖面(SO1E和SOY)中也发现了一个长度超过15km、厚度约为1.2km的巨大高振幅异常体,它为研究者提供了一个探究洋陆转换带北部是否存在岩浆活动的机会。本研究对该高振幅异常体进行了速度分析与AVO(amplitude variation with offset)分析。结果表明,与周围岩层相比,该高振幅异常体内部有较高的P波速度和泊松比。结合区域地质背景和异常体内部的反射特征及大小形状,推测该高振幅异常体为火成侵入岩,并将其进一步归类为岩盖,揭示了中新世以后南海北部洋陆转换带北部曾发生过多期次的岩浆活动。

关键词：南海东北部岩盖速度分析 AVO分析

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基于多层级视频Transformer的视觉自动定位方法

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工程科学与技术 2024年

作者：邹琦萍李博涛陈赛安郭茜张桃红广西高校人工智能与信息处理重点实验室(河池学院) 北京科技大学计算机与通信工程学院材料领域知识工程北京市重点实验室

工业自动化产线中，设备的异常检测直接决定加工质量，由机械臂和搭载于机械臂前端的工业相机构成的视觉系统可以有效监测此类异常。本文使用六轴机械臂搭载工业相机对工件表面进行成像，获取由模糊到清晰再到模糊的视频序列，以此选出... 详细信息

工业自动化产线中，设备的异常检测直接决定加工质量，由机械臂和搭载于机械臂前端的工业相机构成的视觉系统可以有效监测此类异常。本文使用六轴机械臂搭载工业相机对工件表面进行成像，获取由模糊到清晰再到模糊的视频序列，以此选出最清晰的视频帧作为自动加工中有聚焦要求的距离指导，以进行聚焦异常修正，从而实现自动定位。本文提出一种基于多层级视频Transformer算法的视频分类模型Multi-level Video Transformer用于高语义级别的视频表征学习，并最终用于选出视频序列中成像最清晰的帧。首先，提出一种具有多种感受野的token划分方法Multi-level Tokenization（MLT），能够将原始视频数据按2D Patch、3D Patch、Frame和Clip四个层级划分成token序列，并在加入位置编码之后送入本文提出的Multi-level Encoder（MLE）进行注意力的计算。为了缓解多层级的tokens带来的计算代价和收敛速度慢的问题，MLE引入一种逐层的可变形注意力机制Level-wise Learnable Attention（LWLA），以一种可学习的方式代替全局注意力进行特征相似性的计算。最终，该方法的三个版本的模型在本文的视频数据集上分别取得了87.2%、88.6%、88.9%的分类准确率，在与同参数量级的主流视频Transformer实验对比中均实现了最优的性能，有效地完成了从视频序列中选择出最清晰帧的任务，能够为下游视觉任务的性能提供强有力的保障。

关键词：视频Transformer 视频分类视觉自动定位可变形注意力