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气相色谱中保留值与进样量的关系

分析化学 2003年第10期31卷 1164-1168页

作者：李蓉李琎陈国亮李华儒耿信笃现代分离科学研究所现代分离科学研究所西安710069 西北大学化学工程系

提出了测量气相色谱中吸附等温线的新方法 ,用不同进样量下测定的容量因子计算平衡时气固两相组分浓度。利用建立的方法分别测量了正己烷、正壬烷和正十一烷在邻苯二甲酸二辛酯 (DOP)、阿皮松 L(Apiezon)和 β ,β′ 氧二丙腈 ... 详细信息

提出了测量气相色谱中吸附等温线的新方法 ,用不同进样量下测定的容量因子计算平衡时气固两相组分浓度。利用建立的方法分别测量了正己烷、正壬烷和正十一烷在邻苯二甲酸二辛酯 (DOP)、阿皮松 L(Apiezon)和 β ,β′ 氧二丙腈 (ODPN)柱上的吸附等温线 ,讨论了色谱峰形状与吸附等温线的对应关系。研究了气相色谱中进样量对保留值的影响 ,利用佛伦德利希 (Freundlich)吸附等温式导出了描述保留值与进样量关系的数学表达式。理论和实验证明 ,保留值与进样量具有良好的对数线性关系。

关键词：保留值容量因子吸附等温线进样量

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利用离子交换色谱快速纯化α－淀粉酶

色谱 1994年第2期12卷 89-91页

作者：李汉李华儒西北大学分离科学研究室

本文开发了一个用强阴离子高效液相色谱分离纯化α－淀粉酶的的新方法。详细讨论了纯比的最佳条件＊在给定的条件下纯化工业α－淀粉酶，其活性回收率达９６％，比活性为３８８ｕ／ｍｇ蛋白，纯化倍数提高３０倍，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ... 详细信息

本文开发了一个用强阴离子高效液相色谱分离纯化α－淀粉酶的的新方法。详细讨论了纯比的最佳条件＊在给定的条件下纯化工业α－淀粉酶，其活性回收率达９６％，比活性为３８８ｕ／ｍｇ蛋白，纯化倍数提高３０倍，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，得到分子量分别为５８Ｋ和３３Ｋ两条α－淀粉酶谱带。此法纯化α－淀粉酶简单，快速，效率高。不仅能纯化工业粗酶，也可纯化其它来源的α－淀粉酶。

关键词：离子交换色谱淀粉酶提纯

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蛋白质在疏水色谱法中的热行为

色谱 1996年第3期14卷 172-175页

作者：陈国亮李华儒西北大学化工系

考察了一系列标准蛋白质在疏水色谱法中的热行为；研究了柱温变化对蛋白质和小分子保留值的影响。实验结果表明，每个蛋白质的保留值－温度曲线上都有一个固定的热变性转变温度。在这个温度以下，除热稳定性较高的溶菌酶外，蛋白质的保... 详细信息

考察了一系列标准蛋白质在疏水色谱法中的热行为；研究了柱温变化对蛋白质和小分子保留值的影响。实验结果表明，每个蛋白质的保留值－温度曲线上都有一个固定的热变性转变温度。在这个温度以下，除热稳定性较高的溶菌酶外，蛋白质的保留值都随柱温的升高而线性地增加。在转变温度以上，保留值随柱温升高会迅速增大或减小。与蛋白质相反，小分子的保留值随柱温的升高会不断地减小。研究了柱温变化对酶活性的影响，并与酶的静态热失活进行了比较。发现仅在室温下疏水色谱法才具有温和的分离条件，在较高柱温下疏水固定相可以诱导蛋白质变性。柱温对蛋白质活性的影响取决于固定相疏水性的强弱。通常，在给定温度下疏水性越强，酶越容易失活。测定了不同柱温下α－淀粉酶在疏水色谱法中的Ｚ值（ｌｇｋ′对作图的斜率）。分析了较高柱温下导致蛋白质保留值的增长是由于蛋白质的构象变化。

关键词：蛋白质柱温影响疏水色谱

利用高效弱阴离子交换色谱法纯化超氧化物歧化酶

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色谱 1995年第4期13卷 241-243,249页

作者：郑莹周信基李华儒中科院化工冶金研究所西北大学化工系

利用高软弱阴离子交换色谱法简化了超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的纯化手续。在丙酮沉淀后，仅用一步色谱分离就能使来自牛血的Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ达到电泳纯，活性回收率为８６．４％，比活为７７１１Ｕ／ｍｇ，纯化倍数提高至５２倍。此... 详细信息

利用高软弱阴离子交换色谱法简化了超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的纯化手续。在丙酮沉淀后，仅用一步色谱分离就能使来自牛血的Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ达到电泳纯，活性回收率为８６．４％，比活为７７１１Ｕ／ｍｇ，纯化倍数提高至５２倍。此外，详尽讨论了色谱分离的条件。

关键词：离子交换色谱超氧化物歧化酶牛血色谱分离

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利用尺寸排阻色谱法研究蛋白质的变性

高等学校化学学报 1997年第5期18卷 701-705页

作者：陈国亮李蓉李华儒西北大学化工系西安710069

通过比较蛋白质变性时的色谱行为和生物物理特性，提出利用尺寸排阻色谱法研究蛋白质变性时的构象变化．根据色谱参数中的保留时间，比较蛋白质变性时体积的相对变化；利用色谱峰数，确定形成变体的数目；根据峰形和峰数的变化，描述蛋... 详细信息

通过比较蛋白质变性时的色谱行为和生物物理特性，提出利用尺寸排阻色谱法研究蛋白质变性时的构象变化．根据色谱参数中的保留时间，比较蛋白质变性时体积的相对变化；利用色谱峰数，确定形成变体的数目；根据峰形和峰数的变化，描述蛋白质的伸展程度；利用不同波长下峰高的变化，推断蛋白质变性时芳香族氨基酸残基的暴露情况．利用建立的尺寸排阻色谱法观察了液体和固体α－淀粉酶在低温下放置时的变性情况，讨论了变性时间和变性温度对强白质展开行为的影响．

关键词：蛋白质变性构象变化尺寸排阻色谱色谱法 SEC

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色谱纯化后α—淀粉酶活性和回收率的测定

西北大学学报（自然科学版） 1991年第2期21卷 93-98页

作者：李华儒党鸿喜西北大学现代分离科学研究室

研究出用分光光度法测定色谱纯化后的α—淀粉酶的活性和回收率。详细地讨论了反应条件。与3.5-二硝基水杨酸法相比,该法比较简单、迅速、重现性高。对6次测量的平均偏差不超过8.4％。这个方法也可以用来测定其他来源α-淀粉酶的活性。

关键词：色谱 α-淀粉酶生物活性回收率

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蛋白质在疏水色谱中的变性热力学

化学学报 1998年第8期56卷 807-811页

作者：边六交陈国亮李蓉李华儒西北大学化工系西安710069

研究21～80℃温度范围内一些蛋白质和小分子在疏水相互作用色谱中的热行为.利用Van＇t Hoff作图(lnk＇-1/T)测定蛋白质分子的热力学参数(△H°,△S°和△G°),根据标准熵变(△S°)和标准自由能变(△G°)判断蛋白质在色谱过程中的构象变... 详细信息

研究21～80℃温度范围内一些蛋白质和小分子在疏水相互作用色谱中的热行为.利用Van＇t Hoff作图(lnk＇-1/T)测定蛋白质分子的热力学参数(△H°,△S°和△G°),根据标准熵变(△S°)和标准自由能变(△G°)判断蛋白质在色谱过程中的构象变化,通过△H°-△S°的线性关系估计蛋白质变性时的“补偿温度”(β),鉴定蛋白质在疏水相互作用色谱中保留机理的同一性.

关键词：蛋白质热力学参数构象变化疏水色谱变性

硅胶基质弱阳离子交换剂的合成及蛋清中溶菌酶的分离

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分析化学 1999年第5期27卷 517-522页

作者：李蓉陈国亮雷建都李宝璋李华儒西北大学化学工程系西北大学化学工程系西安 710069

用间接法合成了硅胶基质弱阳离子交换剂(XIDACE-WCX),详细研究了合成填料的色谱性能,并与商品柱(Shim-Pack WCX—1和Poly CATA)进行了比较。结果表明:合成柱比商品柱具有较高的分辨能力。通过考察合成填料的疏水性、蛋白质的保留值与等... 详细信息

用间接法合成了硅胶基质弱阳离子交换剂(XIDACE-WCX),详细研究了合成填料的色谱性能,并与商品柱(Shim-Pack WCX—1和Poly CATA)进行了比较。结果表明:合成柱比商品柱具有较高的分辨能力。通过考察合成填料的疏水性、蛋白质的保留值与等电点(pI)的关系、流动相的pH值和盐浓度对蛋白质保留行为的影响,论证了合成填料的离子交换特征。利用合成的色谱填料从蛋清中分离出纯度较高的溶菌酶(在排阻色谱上仅显示一条谱峰),酶在柱上的活性回收率为107％。

关键词：硅胶基质弱阳离子交换剂蛋清溶菌酶高效液相色谱法

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胍变蛋白的构象变化及尺寸排阻色谱行为

色谱 1998年第3期16卷 232-234页

作者：陈国亮邸泽梅李蓉李华儒西北大学化工系

通过比较６种天然和变性蛋白的色谱行为，提出在不含盐酸胍的非变性体系中利用尺寸排阻色谱法研究蛋白质的构象变化。根据色谱峰数可以判断蛋白质变性时形成变体的数目；利用峰高可以描述蛋白质变性的完全程度；根据不同波长下峰高的变... 详细信息

通过比较６种天然和变性蛋白的色谱行为，提出在不含盐酸胍的非变性体系中利用尺寸排阻色谱法研究蛋白质的构象变化。根据色谱峰数可以判断蛋白质变性时形成变体的数目；利用峰高可以描述蛋白质变性的完全程度；根据不同波长下峰高的变化可以推断蛋白质表面氨基酸残基暴露情况；利用保留时间可以比较各种变体相对体积的大小。

关键词：尺寸排除色谱变性蛋白质性盐酸胍构象变化