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基因芯片在中医药研究中的应用

中医杂志 2001年第12期42卷 750-751页

作者：李劲平王培训广州中医药大学免疫学与分子生物学技术实验室广州市机场路510405

1995年,斯坦福大学的Schena M和Brown PO等在Science 杂志上发表第一篇基因表达谱芯片以来,在世界上兴起了一股基因芯片的大浪潮,基因芯片技术的开发和利用为AIDS病研究、癌症研究、疾病诊断、基因治疗、中西新药开发、新食品开发以及... 详细信息

1995年,斯坦福大学的Schena M和Brown PO等在Science 杂志上发表第一篇基因表达谱芯片以来,在世界上兴起了一股基因芯片的大浪潮,基因芯片技术的开发和利用为AIDS病研究、癌症研究、疾病诊断、基因治疗、中西新药开发、新食品开发以及生命科学研究提供了一种全新的手段.世界上许多科学家纷纷对基因芯片的出现进行评价,并对基因芯片的应用前景作了一些大胆的预测.1999年Nature Genetics杂志出版增刊,邀请专家学者对基因芯片的发展方向进行探讨.本文就基因芯片在中医药研究中的应用作一介绍,希望能为中医药现代化提供一点有益的思考.1 基因芯片简介基因芯片(Gene chip)又叫DNA微阵列技术(DNA microarray),也称为DNA芯片.是20世纪90年代兴起的一项前沿生物技术,它横跨生命信息、生物物理、生命科学、化学、电子技术、计算机科学、统计学等众多学科.基因芯片是从传统的Southern杂交和Northern杂交基础上发展起来的,指在尼龙膜、玻璃、硅片或瓷片上的一微小区域内(1cm2),将成千上万条DNA探针按一定的规律排列,然后与标记了的待检样品进行杂交(hybriding),通过芯片扫描仪对芯片进行扫描,检测每一点杂交信号的有无及强弱,由相应统计软件进行统计分析,就可以检测出待检样品基因表达的种类和基因的表达量.

关键词：基因表达分型法寡核苷类排列序列分析基因芯片中医药研究应用中医中药

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缺血心肌蛋白质组初步研究

中国病理生理杂志 2005年第2期21卷 331-333页

作者：李劲平吴伟康曾英中山大学基础医学院病理生理教研室广东广州510089 湖南中医学院附一院湖南长沙410007

目的 :研究缺血心肌相关蛋白表达谱。方法 :通过腹腔注射垂体后叶素造成心肌缺血模型 ,取左心室肌进行二维凝胶电泳 ,利用PDQuest7 1 1软件分析实验结果。结果 :心肌组织可得 5 12± 5 2个蛋白点 ,心肌缺血后有 10个蛋白表达发生了显著... 详细信息

目的 :研究缺血心肌相关蛋白表达谱。方法 :通过腹腔注射垂体后叶素造成心肌缺血模型 ,取左心室肌进行二维凝胶电泳 ,利用PDQuest7 1 1软件分析实验结果。结果 :心肌组织可得 5 12± 5 2个蛋白点 ,心肌缺血后有 10个蛋白表达发生了显著变化 (pI/Mr:4 . 72 /46 . 16kD ,5 .6 0 /32 . 35kD ,7 .17/5 3 .14kD ,7 .93/12. 78kD ,6 . 5 9/35 . 72kD ,8 .5 6 /12. 4 7kD ,8. 6 8/37. 4 9kD ,6 . 31/13 .19kD ,6 . 5 1/6 0. 2 9kD ,5. 86 /13. 0 7kD)。其中表达增强的有 6个蛋白 (pI/Mr:4 . 72 /46 . 16kD ,5. 6 0 /32. 35kD ,7 .17/5 3 .14kD ,6. 5 9/35. 72kD ,8 .6 8/37 .4 9kD ,6 . 5 1/6 0 . 2 9kD) ,表达降低的有 4个蛋白 (pI/Mr:7. 93/12 . 78kD ,8. 5 6 /12 . 4 7kD ,6 . 31/13. 19kD ,5 . 86 /13 .0 7kD)。结论 :这些差异表达的蛋白可能在心肌缺血后的保护与损伤中发挥作用。

关键词：心肌缺血电泳,凝胶,双向蛋白质组

壮骨止痛方治疗大鼠去卵巢骨质疏松症的蛋白质组学分析

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中国中医基础医学杂志 2012年第2期18卷 166-168页

作者：杨军莫新民李劲平湖南中医药大学长沙410007 中南大学长沙410208

目的:探讨壮骨止痛方治疗骨质疏松相关蛋白改变谱。方法:利用二维凝胶电泳分离股骨组织的总蛋白,通过软件分析2-DE图谱,比较各组间蛋白的表达量,然后利用MALDI-TOF-MS制作差异蛋白点的肽谱,确定各差异蛋白的种类,通过生物信息学分析所... 详细信息

目的:探讨壮骨止痛方治疗骨质疏松相关蛋白改变谱。方法:利用二维凝胶电泳分离股骨组织的总蛋白,通过软件分析2-DE图谱,比较各组间蛋白的表达量,然后利用MALDI-TOF-MS制作差异蛋白点的肽谱,确定各差异蛋白的种类,通过生物信息学分析所得蛋白的功能。结果:壮骨止痛方能调节骨骼肌的能量代谢、物质转运,对大鼠去卵巢骨质疏松症产生调节作用。

关键词：壮骨止痛方蛋白质组学骨质疏松症

补骨脂定抗实验性绝经后骨质疏松的效应及作用机制研究

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中国中药杂志 2013年第11期38卷 1816-1819页

作者：李劲平王小静曾英林清莫新民刘仕杰杨军中南大学药学院湖南长沙410013 湖南中医药大学湖南长沙410007

目的:观察补骨脂定抗去势雌鼠骨质疏松的疗效,并初步探讨其作用机制。方法:取4月龄清洁级SD雌性大鼠60只,分为5组,分别为假手术组、模型组、补骨脂定低、高剂量组(4,16 ***-1)及阳性对照壮骨止痛胶囊组,每组12只。13周后取血和骨标本检... 详细信息

目的:观察补骨脂定抗去势雌鼠骨质疏松的疗效,并初步探讨其作用机制。方法:取4月龄清洁级SD雌性大鼠60只,分为5组,分别为假手术组、模型组、补骨脂定低、高剂量组(4,16 ***-1)及阳性对照壮骨止痛胶囊组,每组12只。13周后取血和骨标本检测骨密度,骨生物力学,病理形态学,血清E2,CT等指标。结果:补骨脂定能明显增加去势大鼠腰椎和股骨骨密度(P平(P<0.05)。结论:补骨脂定对绝经后骨质疏松症具有良好疗效,其作用机制可能部分通过E2,CT等途径发挥作用。

关键词：骨质疏松症补骨脂定

淫羊霍苷对去卵巢骨质疏松症雌鼠的疗效及机理初步研究

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中国中医基础医学杂志 2012年第3期18卷 271-272,275页

作者：刘仕杰莫新民李劲平杨军张小君湖南中医药大学长沙410007 中南大学药学院长沙410013

目的:观察壮骨止痛方有效成分之一淫羊霍苷对去卵巢骨质疏松症的疗效,并探讨其可能的作用机理。方法:3月龄SD雌性大鼠40只,分为模型组、壮骨止痛方组、淫羊霍苷组和假手术组。结果:淫羊霍苷组能明显增加腰椎骨密度(P0.05)。结论:淫羊霍... 详细信息

目的:观察壮骨止痛方有效成分之一淫羊霍苷对去卵巢骨质疏松症的疗效,并探讨其可能的作用机理。方法:3月龄SD雌性大鼠40只,分为模型组、壮骨止痛方组、淫羊霍苷组和假手术组。结果:淫羊霍苷组能明显增加腰椎骨密度(P平均骨小梁密度(P0.05)。结论:淫羊霍苷能显著提高模型大鼠血清E2、腰椎骨密度和骨小梁的骨密度,改善骨质疏松症的病理形态学改变。其机理可能是通过调节体内雌激素水平,从而调节巨噬细胞向破骨细胞的转化发挥作用。

关键词：骨质疏松症淫羊霍苷机理

稳斑方对模型兔动脉粥样硬化斑块稳定性的影响

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中医杂志 2009年第8期50卷 740-742页

作者：莫新民曾英侯斌谢海波刘锐李劲平湖南中医药大学研究生处湖南中医药大学第一附属医院心内科中南大学药学院

目的观察稳斑方对动脉粥样硬化(AS)模型兔斑块稳定性的影响。方法56只日本大耳白兔随机分成空白组、模型组、他汀组和稳斑方组,每组14只。喂食高脂饲料12周建立兔动脉粥样硬化模型,造模成功后他汀组和稳斑方组分别开始给予相应药物,8周... 详细信息

目的观察稳斑方对动脉粥样硬化(AS)模型兔斑块稳定性的影响。方法56只日本大耳白兔随机分成空白组、模型组、他汀组和稳斑方组,每组14只。喂食高脂饲料12周建立兔动脉粥样硬化模型,造模成功后他汀组和稳斑方组分别开始给予相应药物,8周后处死。检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;取主动脉病理切片,观察斑块面积、脂质核心面积、内膜及中膜厚度、纤维帽厚度。结果稳斑方组血清TC、TG、LDL-C水平显著低于模型组(P平的差异无统计学意义。与模型组比较,稳斑方组主动脉斑块面积、脂质核心面积、内膜厚度、内膜/中膜厚度均减少(P平改善斑块内部结构,对稳定AS斑块有良好疗效。

关键词：稳斑方动脉粥样硬化辛伐他汀动脉斑块

基于雌激素信号通路的壮骨止痛胶囊治法组方机理探讨

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时珍国医国药 2017年第4期28卷 868-871页

作者：曾英章文娟李伟娟李劲平湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 中南大学湘雅药学院湖南长沙410013

目的通过检测壮骨止痛胶囊不同治法配伍对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织E_2和ER_β的影响,探讨壮骨止痛胶囊的治则组方机理,为临床治疗绝经后骨质疏松症的配伍组方提供指导。方法根据壮骨止痛胶囊补益肝肾、活血止痛治法将处方拆方分为补阳... 详细信息

目的通过检测壮骨止痛胶囊不同治法配伍对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织E_2和ER_β的影响,探讨壮骨止痛胶囊的治则组方机理,为临床治疗绝经后骨质疏松症的配伍组方提供指导。方法根据壮骨止痛胶囊补益肝肾、活血止痛治法将处方拆方分为补阳组、补阴组、活血组、阴阳双补组、活血补阳组、活血补阴组。90只8月龄SD雌鼠随机分为假手术组、模型组、壮骨止痛胶囊组、补阳组、补阴组、活血组、阴阳双补组、活血补阳组、活血补阴组,每组10只。假手术组大鼠保留卵巢而只去除卵巢附近部分脂肪组织,其余各组雌鼠双侧去卵巢复制绝经后骨质疏松动物模型,术后1周灌胃给药18周,最后1次给药1 h后腹腔注射水合氯醛麻醉(0.35ml/100g),腹主动脉放血处死,取左股骨检测E_2水平,取右股骨检测骨密度和骨生物力学,快速取右胫骨RT-PCR检测ER_βmRNA的表达,取左胫骨病理切片免疫组化染色检测ER_β蛋白水平。结果活血组对骨密度没有显著影响,但能显著增强骨生物力学,其它配伍组均能显著增加骨密度和改善骨生物力学(P阴阳双补组>活血补阳组>活血补阴组>补阳组>补阴组>活血组。除活血组外的其它各配伍组均显著提高模型大鼠骨组织E_2水平(P阴阳双补组>活血组>活血补阳组>活血补阴组>补阳组>补阴组。结论壮骨止痛胶囊中的活血组药物主要增强骨组织对雌激素的敏感性,补阳组和补阴组药物主要促进机体合成雌激素,提高骨组织的雌激素水平,同时提高骨组织的雌激素敏感性。治疗绝经后骨质疏松治法以补益肝肾为主,辅以活血化瘀,有助于取得更好疗效。

关键词：壮骨止痛胶囊雌激素雌激素信号通路治法

补骨脂素对去势雌鼠E_2、ER_β、TNF-α、IL-17的影响

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中国骨质疏松杂志 2016年第4期22卷 387-392,395页

作者：杨琳曾英李劲平刘珊王文杰杨岩冰莫新民湖南中医药大学长沙410007 中南大学药学院长沙410013

目的观察补骨脂素对去势雌鼠E_2、ER_β、TNF-α、IL-17的影响,探讨补骨脂素防治绝经后骨质疏松的机理。方法选取3月龄雌性SD大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、戊酸雌二醇对照组、壮骨止痛胶囊对照组、补骨脂素高剂量组、补骨脂素低... 详细信息

目的观察补骨脂素对去势雌鼠E_2、ER_β、TNF-α、IL-17的影响,探讨补骨脂素防治绝经后骨质疏松的机理。方法选取3月龄雌性SD大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、戊酸雌二醇对照组、壮骨止痛胶囊对照组、补骨脂素高剂量组、补骨脂素低剂量组,每组12只。除假手术组外,其它大鼠造成双侧去卵巢骨质疏松症病理模型,术后5d拆线后开始给药,连续13周。最后一次给药后次日取血标本采用ELISA检测血清中雌激素(E_2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)的含量。提取左股骨组织mRNA样本进行RT-PCR反应检测骨组织TNF-α、ER_β、IL-17基因的表达。取右股骨脱钙切片免疫组化检测ER_β表达。结果模型组去势雌鼠血清E_2水平显著低于假手术组(P平(P平显著高于模型组(P平与模型组相比无统计学差异(P>0.05)。模型组血清TNF-α、IL-17水平及股骨TNF-α、IL-17mRNA表达显著高于假手术组(P平及股骨TNF-α、IL-17mRNA表达显著低于模型组,股骨ER_β显著高于模型组(P平显著低于模型组(P平及股骨TNF-αmRNA表达显著低于模型组(P平及股骨IL-17mRNA表达非常显著低于模型组(P平显著低于模型组(P平及股骨IL-17mRNA表达显著低于模型组(P平和股骨ER_β水平,降低去势雌鼠骨组织TNF-α、IL-17基因表达和血清TNF-α、IL-17水平发挥抗绝经后骨质疏松症作用。

关键词：绝经后骨质疏松症补骨脂素雌激素雌激素受体β 肿瘤坏死因子α 白细胞介素17

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浅析玉溪市红塔区水资源综合开发利用与保护

企业技术开发（下半月） 2010年第2期29卷 51-52页

作者：李劲平玉溪市红塔区水利局云南玉溪653100

水是自然界一切生命之源，是人类赖以生存和发展必不可少的物质之一。我国是一个水资源严重短缺的国家，由于降雨的时空及区域分部不均，造成了红塔区北片雨量丰沛，而南片干旱少雨的局面。由此造成了南片区需寻求区外补给及修建大量引... 详细信息

水是自然界一切生命之源，是人类赖以生存和发展必不可少的物质之一。我国是一个水资源严重短缺的国家，由于降雨的时空及区域分部不均，造成了红塔区北片雨量丰沛，而南片干旱少雨的局面。由此造成了南片区需寻求区外补给及修建大量引提水工程，以满足该片区生产、生活的需要。对水资源综合利用方面应遵循以下原则：在充分调查的基础上，全面分析水资源的开发利用状况、现有供水设施、饮水安全及供用水现状，采取有效措施，以水资源综合配置为目标，提出水资源综合利用的主要建设项目及内容，不断提高人民群众生活水平和生活质量，保障人民生命安全，为社会经济的发展提供可持续支撑。

关键词：水资源开发玉溪红塔区