检索结果-南通市图书馆

下调REV3L基因表达逆转结肠癌细胞耐药性的实验研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

下调REV3L基因表达逆转结肠癌细胞耐药性的实验研究

作者：李利坚(Lizzie) 宁夏医科大学

学位级别：硕士

目的探讨靶向下调跨损伤DNA合成途径(Translesion DNA Synthesis,TLS)中关键基因REV3L对人结肠癌细胞耐药性的逆转作用。方法利用RNA干扰技术靶向下调REV3L基因在人高分化耐奥沙利铂结肠癌细胞系(THC8307/L-OHP)中的表达,以实时荧光定量... 详细信息

目的探讨靶向下调跨损伤DNA合成途径(Translesion DNA Synthesis,TLS)中关键基因REV3L对人结肠癌细胞耐药性的逆转作用。方法利用RNA干扰技术靶向下调REV3L基因在人高分化耐奥沙利铂结肠癌细胞系(THC8307/L-OHP)中的表达,以实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和免疫细胞化学分别从m RNA及蛋白水平检测REV3L基因下调情况。以基因低表达具有统计学显著性的细胞为实验组。运用甲基噻唑蓝四氮唑盐法(MTT)、流式细胞术、细胞形态学等方法,检测实验组和两个对照组肿瘤细胞耐药增敏、耐药性相对逆转的情况以及细胞凋亡等指标。结果转染质粒m U6pro-si REV3的耐药性结肠癌细胞其REV3L基因表达被成功抑制,检测相关指标结果显示:①实验组细胞对奥沙利铂的敏感性增强,耐药系数明显低于空白对照组和阴性对照组;②实验组细胞基因调控后,耐药性的相对逆转率显著高于阴性对照组;③实验组细胞的细胞凋亡率显著高于两个对照组(P<0.05);各项检测指标,两个对照组比较,存在差异但无统计学意义。结论下调REV3L基因的表达,显著逆转了人结肠癌细胞的耐药性并促进了癌细胞的凋亡,故REV3L可作为肿瘤基因治疗潜在靶点和耐药性基因逆转点的重要候选。

关键词： REV3L基因 RNA干扰耐药性结肠癌细胞系(THC8307/L-OHP) 流式细胞术耐药性逆转

REV3 and p53 are mutually regulated to affect colon cancer cell growth and apoptosis

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

Science Bulletin 2015年第10期60卷 972-974,I0008页

作者：尹明伟隋御辛淑文李利坚金彩霞李元杰徐方 Laboratory Medicine Ningxia Medical University School of Basic Medical Sciences Ningxia Medical UniversityKey Laboratory of Reproduction and Heredity Medical School Tongji University Translational Medicine Research Center

REV3 encodes a catalytic subunit of DNA polymerase ; required for translesion DNA synthesis. The inhibition of REV3 expression induces persistent DNA damage and growth arrest in the G1 phase, which is initiated by p53 activation. We speculated thatp53 plays a critical role in regulating apoptosis and cell growth through inhibition of REV3. In this study, we found that experimental suppression of REV3 induced apoptosis and arrested colon cancer at the G1 phase. Surprisingly, suppression of p53 promoted REV3 expression and the accumulation of S-phase cells, suggesting that excessive REV3 activity interferes with replicative DNA synthesis. The above observations collectively reveal genetic interactions between REV3 andp53 in the regulation of apoptosis and cell growth in colon cancer cells.

关键词： RNA interference Human colon cancer cells REV3 p53 Apoptosis Growth arrest

医防合作在骨关节结核发现及治疗过程中的临床意义

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

现代医院 2013年第9期13卷 154-156页

作者：李利坚梅州市梅江区慢性病防治站广东梅州514011

目的骨关节结核起病隐匿,易被误诊,患者不能坚持长疗程的抗结核治疗。摸索及总结出行之有效的模式对骨关节结核发现、规范化治疗显得尤为重要,从而提高其治愈率,降低致残率,恢复劳动力。方法与综合医院之间进行有效的沟通,并达成合作共... 详细信息

目的骨关节结核起病隐匿,易被误诊,患者不能坚持长疗程的抗结核治疗。摸索及总结出行之有效的模式对骨关节结核发现、规范化治疗显得尤为重要,从而提高其治愈率,降低致残率,恢复劳动力。方法与综合医院之间进行有效的沟通,并达成合作共识。在综合医院及其下属门诊、药店发放骨关节结核转介卡,如所有出现关节红肿、疼痛、流脓或畸形等骨关节病变情况的患者,立即在其所属区域医院或转送到我站进行结核方面的检查或筛查,一旦确诊,由我站进行规范化治疗。而我站的结核病患者中若有合并骨关节结核可疑症状者,同样开具转介卡到综合医院进行外科方面的处理,处理完毕后,及时再转我站继续进行抗结核治疗。这种医防包围式的治疗服务模式我们称之为医防合作模式。我站从2009年开始推行此模式进行骨关节结核患者的管理,现将2006～2008年在我站治疗的骨关节结核患者病例数设为对照组,将2009～2011年在我站治疗的骨关节结核患者病例数设为观察组。对疗程结束后的转归情况进行评价。结果对照组早期发现并确诊28例,早期发现率48.3%;治愈26例,治愈率44.8%;畸形15例,畸形率25.9%;致残11例,致残率19%;失败6例,失败率10.3%。观察组:早期发现并确诊63例,早期确诊率84%;治愈55例,治愈率73.3%;畸形12例,畸形率16%;致残5例,致残率6.7%;失败3例,失败率4%。结论在骨关节结核的治疗管理模式上,实施医防合作的模式能达到早期发现、早期治疗、提高治愈率、降低致畸残率、提高社会劳动能力的重要意义。

关键词：骨关节结核医防合作早期发现率治愈率

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

hMMS2基因对结肠癌细胞耐药逆转的影响

遗传 2014年第4期36卷 346-353页

作者：张蕾隋御王婷李利坚李元杰金彩霞徐方宁夏医科大学检验学院宁夏生殖与遗传重点实验室银川750004 同济大学医学院转化医学研究中心上海200072

为探讨hMMS2(Human methyl methanesulfonate sensitive mutant 2)基因对人结肠癌细胞耐药逆转的影响,文章以人高分化耐奥沙利铂结肠癌细胞(THC8307/L-OHP)为实验材料,采用脂质体-质粒转染技术构建了带有干扰目的基因hMMS2的miRNA片段... 详细信息

为探讨hMMS2(Human methyl methanesulfonate sensitive mutant 2)基因对人结肠癌细胞耐药逆转的影响,文章以人高分化耐奥沙利铂结肠癌细胞(THC8307/L-OHP)为实验材料,采用脂质体-质粒转染技术构建了带有干扰目的基因hMMS2的miRNA片段并携带绿色荧光蛋白标记重组质粒(pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-MMS2)的细胞系,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫荧光技术(Immunostaining technique)检测该细胞系的干扰效率。选择hMMS2低表达具有统计学意义的上述细胞系作为实验组细胞,同时将未曾作过处理的THC8307/L-OHP细胞作为空白对照组,转染绿色荧光蛋白空质粒(pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR)的THC8307/L-OHP细胞作为阴性对照组,以噻唑蓝比色分析实验(MTT colorimetric analysis assay)、克隆形成实验(Colony formation assay)对3组细胞的存活率和克隆形成率进行检测,结果显示:实验组细胞的奥沙利铂半数抑制浓度(Half inhibition concentration,IC50)、耐药指数(Resistance index,RI)及克隆形成率(Colony-forming efficiency,CFE)均比对照组细胞明显降低(P<0.05),而相对逆转率(Relative reverse efficiency,RRE)增高(P<0.05),提示实验组细胞增殖能力减弱;以罗丹明123实验(Rhodamine 123 assay)结合倒置荧光显微镜、流式细胞仪检测技术等观测细胞的凋亡变化,结果显示,实验组细胞的凋亡率较对照组细胞显著增高(P<0.05);两对照(空白、阴性)组间并无细胞增殖或凋亡的显著性差异。研究结果提示:下调hMMS2基因表达可逆转人高分化耐奥沙利铂结肠癌细胞对L-OHP的耐药性并促进结肠癌细胞的凋亡。

关键词： RNA干扰铂类耐药 hMMS2 人高分化耐奥沙利铂结肠癌细胞(THC8307/L-OHP) 细胞凋亡

传统孝文化与新农村建设中的社会养老保险体制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

安徽农业科学 2009年第29期37卷 14405-14408页

作者：向安强李利坚郑庭义李思思华南农业大学公共管理学院广东广州510642

在厘清中国传统孝文化内涵的基础上,分析了以孝文化为背景的传统农村养老保险制度。介绍了传统农村养老保险制度在新时期凸显出的缺陷,在此基础上,从法律法规、财政扶持、监督管理等方面探讨了构建新型农村养老保险制度的路径。

关键词：孝文化养老模式农村养老保险政府责任

不同治疗方案对病灶超过一个肺野的初治涂阴肺结核的疗效观察

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

国际医药卫生导报 2012年第13期18卷 1885-1887页

作者：李利坚梅州市梅江区慢性病防治站 514011

目的关注并探讨病灶超过一个肺野的初治涂阴肺结核的最佳治疗方案，从而提高整体治愈率，降低涂阴转阳性率，降低复发率。方法将2005年1月1日至2011年6月30日在本站登记的病：吐超过一个肺野的428例初治涂阴肺结核患者（重症涂阴除外）... 详细信息

目的关注并探讨病灶超过一个肺野的初治涂阴肺结核的最佳治疗方案，从而提高整体治愈率，降低涂阴转阳性率，降低复发率。方法将2005年1月1日至2011年6月30日在本站登记的病：吐超过一个肺野的428例初治涂阴肺结核患者（重症涂阴除外）随机分为治疗组212例和对照组216例，两组：荏性别和年龄上差异没有显著性。治疗组在强化期应用四联抗结核药即2HRZS或2HRZE，对照组则在强化期采用三联抗结核药即2HRZ。继续治疗期则均采用4HR的方案。至疗程结束时，X线正侧位片影像下或CT扫描下与治疗前片对比病灶吸收面积达80％以上、边缘清楚，密度增高、呈纤维化或钙化现象，症状改善明显，血沉指数在除外其它原因后下降至正常，治疗过程中痰查抗酸杆菌一直阴性未见阳转的判定为疗效显著。反之，影像学上对比治疗前片病灶吸收不明显或者面积在80％以下，边缘不甚清晰、密度仍旧高低不一或者是仍为硬结病灶，没有纤维化或钙化现象，症状改善不明显，血沉指数至疗程结束时在除外其它干扰因素后仍无法下降至正常，或者治疗过程中痰菌呈现阳转的任一项指标判定为疗效较差。结果治疗组212例患者，疗效显著的184例，疗效显著率占86．8％，疗效较差28例，占13．2％，而对照组216例患者，疗效显著的126例，占58．3％，疗效较差的有90例，占41．7％。结论在病灶超过一个肺野的初治涂阴肺结核患者的治疗问题上，强化期应用四联抗结核药的疗效要远远高于应用三联抗结核药的疗效。

关键词：初治涂阴肺结核治疗方案疗效治愈率

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

广州大桥拓宽工程年内不动工 006

南方日报

作者：刘静李利坚

本报讯从2002年开始，就一直有关于广州大桥要拓宽一倍、由4车道增到8车道的这种说法。早在2004年，市政园林局就有关广州大桥勘察设计及设计咨询进行公开招标，但广州大桥的改造一直未见动作。近日，记者从广州市市政园林局招?

关键词：

来源： cnki报纸评论

在线全文

cnki报纸

学校读者我要写书评

暂无评论

干扰REV3L基因表达逆转结肠癌的耐药性

基础医学与临床 2013年第5期33卷 542-547页

作者：李利坚隋御周翔王婷张蕾李元杰徐方宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学宁夏回族自治区生殖与遗传重点实验室宁夏银川750004

目的探讨跨损伤DNA合成途径(TLS)关键基因REV3L的靶向下调对人耐药结肠癌细胞系耐药性的逆转作用。方法用RNA干扰技术(RNAi)沉默REV3L基因在人耐奥沙利铂结肠癌细胞系(THC8307/L-OHP)中的表达,以实时荧光定量PCR和免疫细胞化学检测REV3... 详细信息

目的探讨跨损伤DNA合成途径(TLS)关键基因REV3L的靶向下调对人耐药结肠癌细胞系耐药性的逆转作用。方法用RNA干扰技术(RNAi)沉默REV3L基因在人耐奥沙利铂结肠癌细胞系(THC8307/L-OHP)中的表达,以实时荧光定量PCR和免疫细胞化学检测REV3L基因mRNA及蛋白均低表达的细胞作为实验组。运用四甲基噻唑蓝(MTT)、流式细胞术和细胞形态学的方法检测肿瘤细胞耐药系数变化、耐药性相对逆转率及细胞凋亡的情况。结果转染mU6pro-siREV3质粒的实验组细胞REV3L基因的表达被成功抑制。基因低表达的细胞耐药系数明显低于空白对照组和阴性对照组,相对耐药逆转率显著高于阴性对照组(P<0.05)。细胞凋亡指标显示实验组细胞凋亡率显著高于两对照组(P<0.05)。结论下调REV3L基因的表达,可逆转人结肠癌细胞的耐药性并促进细胞凋亡,REV3L可以作为肿瘤基因治疗的潜在靶点。

关键词： REV3L RNAi 人耐药性结肠癌细胞系(THC8307 L—OHP) 耐药性逆转细胞凋亡

下调REV3通过激活p53诱导结肠癌细胞THC-8307凋亡

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

宁夏医科大学学报 2015年第3期37卷 237-241,F0004页

作者：尹明伟辛淑文隋御李利坚金彩霞李元杰徐方宁夏医科大学检验学院银川750004 宁夏医科大学生殖与遗传重点实验室银川750004 同济大学医学院转化医学研究中心上海200072

目的利用RNA干扰(RNA interference,RNA i)技术下调结肠癌细胞THC-8307中REV3表达,观察细胞凋亡并探讨p53在该凋亡过程中的作用。方法以人高分化结肠癌细胞系(THC-8307)为研究对象,进行REV3及p53干扰质粒的转染。通过实时荧光定量PCR技... 详细信息

目的利用RNA干扰(RNA interference,RNA i)技术下调结肠癌细胞THC-8307中REV3表达,观察细胞凋亡并探讨p53在该凋亡过程中的作用。方法以人高分化结肠癌细胞系(THC-8307)为研究对象,进行REV3及p53干扰质粒的转染。通过实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)和免疫荧光技术检测干扰效率。利用流式细胞仪检测细胞凋亡率,以qRT-PCR和Western blot检测各组p53的表达量。同时,对REV3及p53进行两质粒共转染实验,同时下调REV3和p53后两组细胞的凋亡率。结果下调REV3诱导THC-8307细胞早期凋亡率和晚期凋亡率明显增加(P<0.01),且实验组p53表达量明显增高;REV3-p53同时下调与REV3单独下调相比,细胞凋亡率明显减低。结论下调REV3通过激活p53诱导结肠癌细胞THC-8307凋亡。

关键词： RNA干扰人高分化结肠癌细胞THC-8307 REV3 p53 细胞凋亡