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牙龈卟啉单胞菌脂多糖对巨噬细胞中铁死亡相关因子表达水平的影响

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吉林大学学报（医学版） 2022年第5期48卷 1148-1155页

作者：杜雪纯李保胜乔树伟欧燕珍李珍孟维艳吉林大学口腔医院口腔种植科吉林长春130021

目的:探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)对巨噬细胞中铁死亡相关因子表达水平的影响,阐明铁死亡相关因子在牙周炎发病机制中的作用。方法:培养小鼠单核/巨噬细胞系RAW264.7细胞,分为实验组和对照组,实验组加入10 mg·L^(-1) P.g-LPS分... 详细信息

目的:探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)对巨噬细胞中铁死亡相关因子表达水平的影响,阐明铁死亡相关因子在牙周炎发病机制中的作用。方法:培养小鼠单核/巨噬细胞系RAW264.7细胞,分为实验组和对照组,实验组加入10 mg·L^(-1) P.g-LPS分别处理6、12和24 h,对照组不做任何处理。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组RAW264.7细胞中长链酯酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和转铁蛋白受体1(TfR1)mRNA表达水平,2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法检测2组RAW264.7细胞中活性氧(ROS)水平,硫代巴比妥酸(TBA)法检测2组RAW264.7细胞中丙二醛(MDA)水平,亚铁离子荧光探针(FeRhonox-1)法检测2组RAW264.7细胞中亚铁离子(Fe^(2+))水平,Westernblotting法检测2组RAW264.7细胞中ACSL4、GPX4和TfR1蛋白表达水平。结果:与对照组比较,处理6、12和24 h后,实验组RAW264.7细胞中GPX4 mRNA表达水平降低(P<0.05),处理12和24 h后ACSL4和TfR1 mRNA表达水平升高(P<0.05);处理12和24 h后,实验组RAW264.7细胞中ACSL4和TfR1蛋白表达水平升高(P<0.05),GPX4蛋白表达水平降低(P<0.05)。与对照组比较,实验组RAW264.7细胞中ROS、MDA和Fe^(2+)水平升高(P<0.05),且随时间增加呈上升趋势。结论:P.g-LPS诱导下RAW264.7细胞中铁死亡相关因子ACSL4和TfR1表达水平升高,而GPX4表达水平降低,并且呈时间依赖性,提示上述铁死亡相关因子的变化可能与牙周炎发病机制有关。

关键词：巨噬细胞牙龈卟啉单胞菌脂多糖铁死亡活性氧

炎症状态下人牙周膜成纤维细胞中SLC7A11和GPX4的表达水平及其意义

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吉林大学学报（医学版） 2022年第4期48卷 922-928页

作者：乔树伟李保胜李效宇王子璇李碧榕董博孟维艳吉林大学口腔医院口腔种植科吉林长春130021

目的:探讨在牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)刺激的炎症环境下,人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)中溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达的变化,阐明P.g-LPS诱导牙周炎的可能机制。方法:体外提取并培养hPDLFs,采用免... 详细信息

目的:探讨在牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)刺激的炎症环境下,人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)中溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达的变化,阐明P.g-LPS诱导牙周炎的可能机制。方法:体外提取并培养hPDLFs,采用免疫组织化学染色进行鉴定。hPDLFs分为对照组(0 mg·L^(-1) P.g-LPS)、1 mg·L^(-1) P.g-LPS组和10 mg·L^(-1) P.g-LPS组,处理24 h。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、SLC7A11和GPX4 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中SLC7A11和GPX4蛋白表达水平,2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法检测各组细胞中活性氧(ROS)水平。结果:RT-qPCR法检测,与对照组比较,1和10 mg·L^(-1) P.g-LPS组细胞中TNF-α、IL-6和IL^(-1)βmRNA表达水平明显升高(P<0.05),SLC7A11和GPX4 mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,1和10 mg·L^(-1) P.g-LPS组细胞中SLC7A11和GPX4蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。ROS检测,与对照组比较,1和10 mg·L^(-1) P.g-LPS组细胞中ROS水平明显升高(P<0.05)。与1 mg·L^(-1) P.g-LPS组比较,10 mg·L^(-1) P.g-LPS组细胞中上述各检测指标差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:在炎症环境下hPDLFs中SLC7A11和GPX4表达下调,提示SLC7A11和GPX4表达下调可能与牙周炎发病有关。

关键词：牙龈卟啉单胞菌脂多糖人牙周膜成纤维细胞溶质载体家族7成员11 谷胱甘肽过氧化物酶4

不同种植体表面形貌对神经再生影响的初步研究

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不同种植体表面形貌对神经再生影响的初步研究

作者：李保胜吉林大学

学位级别：硕士

研究背景： 20世纪60年代，Branemark提出的骨结合理论奠定了现代口腔种植学的生物学基础。当前，种植义齿已广泛应用于牙列缺损和牙列缺失的修复。20世纪90年代，“骨感知”被提出，它被认为是在缺少牙周本体感受器的情况下机体特殊的... 详细信息

研究背景： 20世纪60年代，Branemark提出的骨结合理论奠定了现代口腔种植学的生物学基础。当前，种植义齿已广泛应用于牙列缺损和牙列缺失的修复。20世纪90年代，“骨感知”被提出，它被认为是在缺少牙周本体感受器的情况下机体特殊的感知功能。天然牙主要是通过牙周膜内的本体感受器感知咬合力，并传导至中枢进而对下颌运动等进行调控，而种植体周围没有牙周膜、且缺乏牙周本体感受器，理论上缺乏与天然牙相似的感知能力，然而研究发现种植义齿患者的触觉、振动觉及实体辨别能力等与天然牙相近。有学者发现在最大咬合力时，种植义齿侧作用于种植体的咬合力明显大于对侧牙列的咬合力。由于种植体周围感知能力的减低，过大的咬合力可能会造成种植体周围骨质的吸收、颞下颌关节病甚至种植体的折断。因此研究种植体植入后神经的再生及重建具有重要意义。关于种植体，其表面特征一直是学科领域的研究热点。许多技术包括光滑表面（S）、电解蚀刻技术（EE）、大颗粒喷砂后酸蚀（SLA）、羟基磷灰石涂层（HA）、钛浆喷涂（TPS）等都被用来优化种植体表面的性质。目的：本实验研究四种种植体表面（S、EE、SLA、HA）对神经再生的影响及神经传导性能，为探讨神经的再生机制提供客观依据。通过结果分析，以期初步推测出更有利于周围神经再生的种植体表面形貌，为种植体材料性能的改进及临床类型的选择提供一定的理论参考。实验方法：纯钛种植体试件经过不同的表面处理得到光滑组、大颗粒喷砂酸蚀组、电解蚀刻组及羟基磷灰石涂层组种植体。种植体制备完成后，使用扫描电子显微镜观察不同种植体表面微形貌的特点。选择三条杂种犬作为实验动物，分别拔除双侧下颌第二、第三前磨牙，同期按一定顺序植入四种种植体。分别于种植体植入后1、2、3个月，使用BL-420E+生物机能实验系统测定在一系列刺激强度下下牙槽神经的感觉神经动作电位的波幅值。最后一次电生理检测完毕后处死动物，进行X线投照，观察种植体植入的位置。采用SPSS19.0统计软件包进行统计分析。结果： 1、在扫描电子显微镜下， S、EE、SLA及HA四种表面的微形貌差异显著，S组缺乏明显的空间立体结构;EE组呈现为均匀的浅凹碗状一级微米孔，在一级微米孔的基础上，布满了二级纳米孔，并且于微米孔最深处，仍可见纳米孔的存在，少数纳米孔相互融合相连成孔;SLA组表面存在大量的凹陷、窝洞及裂隙，形状不规则，大小及深浅不一，边缘较为锐利;HA组表面为大小深浅不一的颗粒状突起，凹陷深浅不一。 2、1个月时，四组SNAP波幅随着刺激强度的增加逐渐增大，且HA组波幅值明显高于EE组、SLA组和S组，P0.05），缺乏统计学意义。 3、2个月和3个月时，四组SNAP波幅均随着刺激强度的增加逐渐增大，当刺激强度≥800mV时，每组的SNAP波幅值均逐渐趋于稳定，且每组之间比较时均无统计学意义（P>0.05）。 4、组内比较时，各组的1个月组分别和其2个月组、3个月组相比差异明显，P0.05，缺乏统计学意义，且1个月组曲线呈逐渐上升趋势，且在同样刺激强度下SNAP值明显低于2个月和3个月组（PEE>SLA=S。表明神经再生的过程可能会被羟基磷灰石涂层或电解蚀刻处理的种植体表面强化。 3、种植术后第2、3个月时神经的再生过程已接近完成，不同的种植体表面对周围神经的最终形成数量或功能无显著影响。

关键词：种植体表面神经再生电解蚀刻下牙槽神经感觉神经动作电位

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基于改进蚁群算法在机器人路径规划上的研究

计算机科学与应用 2022年第9期12卷 2120-2127页

作者：陈范凯李士心李保胜刘宸孟玥天津职业技术师范大学电子工程学院天津

传统蚁群算法由于参数固定化,在机器人路径规划中,无法发挥算法的优越性。本文提出了一种改进的蚁群算法,用于提高算法在路径研究上的效率。通过分析蚁群各阶段的特点,有针对性地调整信息素因子大小,提高算法的性能。引入自适应平衡因... 详细信息

传统蚁群算法由于参数固定化,在机器人路径规划中,无法发挥算法的优越性。本文提出了一种改进的蚁群算法,用于提高算法在路径研究上的效率。通过分析蚁群各阶段的特点,有针对性地调整信息素因子大小,提高算法的性能。引入自适应平衡因子对启发式信息函数进行改进,维持算法平衡。利用随机概率触发随机状况,提高系统的抗干扰能力。通过提出前瞻概率调整蚂蚁节点状态转移方式,扩大搜索空间,提高路径规划的整体效率。实验仿真采用复杂度不同的地图来对比改进前后的蚁群算法。结果表明,改进后的算法不仅提高了算法性能,还可以稳定应对更为复杂的环境,为研究路径规划提供了参考。

关键词：改进蚁群算法机器人路径规划

C5a诱导小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡机制的实验研究

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C5a诱导小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡机制的实验研究

作者：李保胜第三军医大学

学位级别：硕士

在某些类型的急性肺损伤中,肺泡上皮细胞凋亡在急性肺损伤发病机制中具有重要作用。有报道在小鼠鼻内滴入激活Fas的单克隆抗体,激活Fas凋亡通路可导致II型肺泡上皮细胞凋亡,并引起稍后发生的持久的炎症反应和组织损伤。补体激活产物C5a... 详细信息

在某些类型的急性肺损伤中,肺泡上皮细胞凋亡在急性肺损伤发病机制中具有重要作用。有报道在小鼠鼻内滴入激活Fas的单克隆抗体,激活Fas凋亡通路可导致II型肺泡上皮细胞凋亡,并引起稍后发生的持久的炎症反应和组织损伤。补体激活产物C5a是一种重要的前炎症介质,发生严重感染时过度产生的C5a血浆中可以达到10-100nM水平,此时可触发细胞因子/趋化因子瀑布反应,导致全身炎症反应综合症(SIRS),这与器官潜在的损伤和多器官功能不全综合征(MODS)相关。已经证实C5a可影响不同的凋亡信号途径,并对不同类型的细胞产生促进或延迟细胞凋亡的效应,这可能也是C5a造成组织损伤的重要机制之一。calpain对于某些凋亡基因的激活也至关重要,如calpain可裂解并激活Bax并最终介导细胞色素C释放从而诱导细胞凋亡发生;然而另有报道μ-calpain的激活或C5a刺激均导致中性粒细胞的凋亡延迟,所以我们设想在C5a与胞膜上的C5aR结合进行信息的跨膜传导后,calpain在下游的胞内信号传导中发挥一定的作用。本研究将C5a作为刺激因素,观察其对小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的影响,并对其机制进行初探,为急性肺损伤的防治提供实验依据。方法: 1.小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞的分离、纯化、鉴定及原代培养采用胰酶消化法分离昆明小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞,电镜观察和碱性磷酸酶染色法鉴定所得细胞,六孔板中原代培养48小时备用。 2. C5a诱导小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡及检测实验设正常对照(A组)、C5a刺激组和PD150606干预组。正常对照组不加刺激因素。C5a刺激组分两部分,分别以C5a刺激剂量和C5a连续刺激时间作为变量交叉实验:1)固定C5a刺激浓度组(分别编为B、C、D组):C5a刺激时间分别为2h、6h、12h;2)固定时相组(分别编为E、F、G组):均C5a刺激浓度分别为0.1μg/ml、1μg/ml、2μg/ml。PD150606干预组(H组)根据以上两部分的实验结果选择产生最强凋亡事件的条件,与PD150606共同刺激细胞。每个实验组各6孔细胞。各组细胞按计划完成刺激后,采用Annexin-V法进行FITC/PI双染,上流式细胞仪检测细胞的凋亡率。

关键词：急性肺损伤过敏毒素C5a 凋亡钙蛋白酶

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三维环境下无人机路径规划算法研究综述

计算机科学与应用 2022年第5期12卷 1363-1370页

作者：李保胜李士心刘晓倩陈东园天津职业技术师范大学电子工程学院天津

随着无人机技术的发展,无人机已被广泛应用于军事、娱乐、农业、救援、航空航天、电力巡检等领域。其中,无人机路径规划算法研究是保证无人机能否顺利完成任务的关键。目前,无人机路径规划算法主要分为传统的路径规划优化算法、启发式... 详细信息

随着无人机技术的发展,无人机已被广泛应用于军事、娱乐、农业、救援、航空航天、电力巡检等领域。其中,无人机路径规划算法研究是保证无人机能否顺利完成任务的关键。目前,无人机路径规划算法主要分为传统的路径规划优化算法、启发式路径优化算法和群智能仿生路径优化算法等三类。详细阐述了三种算法的分类,深入介绍了各种算法的基本原理、代表性研究及其优缺点,并针对后续研究进行了展望。

关键词：无人机路径规划优化算法混合算法

乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA在慢性乙型肝炎治疗中的分子生物学研究进展

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世界华人消化杂志 2016年第12期24卷 1824-1831页

作者：李保胜孙殿兴中国人民解放军医学院北京市100853 中国人民解放军白求恩国际和平医院全军肝病中心河北省石家庄市050082

在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染过程中,共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)是病毒复制产生的所有RNA和新病毒颗粒合成的模板,而当前的治疗方法很难彻底清除cccDNA.在cccDNA的产生过程中,由病毒前基因... 详细信息

在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染过程中,共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)是病毒复制产生的所有RNA和新病毒颗粒合成的模板,而当前的治疗方法很难彻底清除cccDNA.在cccDNA的产生过程中,由病毒前基因组RNA反转录合成松弛环状(relaxed circular,r c)DNA的细节目前已经比较明确,而对rcDNA转变为cccDNA的过程人们还知之甚少.最近的研究把cccDNA的形成和细胞DNA修复联系起来,并表明此过程是病毒与细胞相互作用的关键环节.本文将综述cccDNA的分子生物学研究进展,分析当前研究中遇到的障碍,并讨论把cccDNA作为治疗慢性乙型肝炎的靶点的前景.

关键词：慢性乙型肝炎共价闭合环状DNA 分子生物学治疗靶点

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基于改进人工蜂群算法的无人机路径规划研究

计算机科学与应用 2022年第9期12卷 2179-2184页

作者：李保胜李士心刘晓倩高雪苹陈东园天津职业技术师范大学电子工程学院天津

针对传统无人机路径规划算法存在收敛速度慢、效率低以及易陷入局部最优的缺点,本文提出了一种改进的人工蜂群路径规划算法。首先利用佳点集的方式生成初代蜜源位置,保证蜜源信息的多样性和均匀性;接着在采蜜蜂搜索机制中引入自适应动... 详细信息

针对传统无人机路径规划算法存在收敛速度慢、效率低以及易陷入局部最优的缺点,本文提出了一种改进的人工蜂群路径规划算法。首先利用佳点集的方式生成初代蜜源位置,保证蜜源信息的多样性和均匀性;接着在采蜜蜂搜索机制中引入自适应动态调节因子,加强了算法前期的全局寻优能力和后期的局部寻优能力;最后,采用大步长搜索机制加强侦查蜂的寻优效果。仿真结果显示,改进后的算法寻优能力得到了显著的提高。

关键词：无人机人工蜂群算法路径规划三维高程图法

C5a在介导肺泡上皮细胞凋亡以及在ALI中所扮演的角色

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第B3期21卷 80-81,84页

作者：李保胜崔社怀吕凤林第三军医大学大坪医院野战外科研究所重庆400042

心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性、进行性缺氧性呼吸衰竭被定义为急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(acute lung injury/acute respiratory distress syndrome, ALI/ARDS), 主要的病因有脓毒症、多发性创伤、误吸和休克等.ALI和A... 详细信息

心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性、进行性缺氧性呼吸衰竭被定义为急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(acute lung injury/acute respiratory distress syndrome, ALI/ARDS), 主要的病因有脓毒症、多发性创伤、误吸和休克等.ALI和ARDS具有性质相同但程度不同的病理生理改变, 严重的ALI被定义为ARDS.在对ARDS早期死亡病人的形态学研究中, 观察到Ⅰ型肺泡上皮细胞(AE1)存在凋亡现象.后继的研究中, 在内毒素(LPS)诱导的小鼠ALI模型, 注射caspase抑制剂可以明显减少凋亡的AEC细胞, 并可显著降低小鼠死亡率[1].在小鼠鼻内滴入激活Fas的单克隆抗体, 激活Fas凋亡通路可导致II型肺泡上皮细胞(AE2)凋亡, 并引起稍后发生的持久的炎症反应和组织损伤, 从而提示: 针对某些类型的ALI, 肺泡上皮凋亡是引起肺部炎症反应的重要因素[2].

关键词：细胞凋亡 C5a 肺泡