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动物免疫学精品课程建设的探索与实践

黑龙江畜牧兽医 2012年第7期 165-167页

作者：王三虎李任峰河南科技学院动物科学学院河南新乡453003

精品课程建设是高等学校教学质量与教学改革工程的重要组成部分,也是衡量高等学校教学质量和水平的重要标志之一,其导向重在促进教学观念的转变、教学方式的改革和教学理念的更新。文章从转变教育理念、优化教学内容、完善教学体系、改... 详细信息

精品课程建设是高等学校教学质量与教学改革工程的重要组成部分,也是衡量高等学校教学质量和水平的重要标志之一,其导向重在促进教学观念的转变、教学方式的改革和教学理念的更新。文章从转变教育理念、优化教学内容、完善教学体系、改革教学方法、提高教师队伍素质及强化网络课程开发等方面探讨了动物免疫学精品课程建设的经验,以期为其他课程建设提供参考。

关键词：动物免疫学精品课程网络课程建设

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来航鸡FOXL2基因的克隆与原核表达

中国兽医学报 2013年第4期33卷 622-626页

作者：徐萍李任峰赵坤鲁毅王三虎河南科技学院动物科学学院河南新乡453003

根据GenBank已发表的红色原鸡FOXL2基因序列(登录号NM_001012612.1)设计引物,以来航鸡全血为模板,PCR扩增出其基因全长编码区,经BamHⅠ-HindⅢ双酶切后定向克隆于pET28a原核表达载体,获得pET28a-FOXL2重组原核表达载体。将携带有重组原... 详细信息

根据GenBank已发表的红色原鸡FOXL2基因序列(登录号NM_001012612.1)设计引物,以来航鸡全血为模板,PCR扩增出其基因全长编码区,经BamHⅠ-HindⅢ双酶切后定向克隆于pET28a原核表达载体,获得pET28a-FOXL2重组原核表达载体。将携带有重组原核表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)通过0.5mmol/L IPTG进行诱导表达,经过SDS-PAGE电泳检测,显示诱导表达蛋白大小大约为37 000,与预期表达蛋白大小一致。Western blot-ting检测显示该蛋白为His融合蛋白,表明重组原核表达载体在大肠杆菌中成功表达出了目的融合蛋白。为进一步探索该基因的生物学功能奠定了基础。

关键词：来航鸡 FOXL2基因克隆原核表达

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鸡绦虫病的诊治

畜牧与兽医 2006年第11期38卷 45-46页

作者：李任峰王三虎王久长河南科技学院动物科学学院河南新乡453003

2006年6～7月，河南新乡市某鸡场饲养的1000多羽40日龄的蛋鸡发生绦虫病，发病率80％以上，死亡率较低。病鸡精神萎顿，羽毛蓬乱。鸡冠苍白，消瘦，下痢。有时拉血便。严重者食欲不振，两腿瘫痪不能站立，最后衰竭而死。新鲜粪便可见多... 详细信息

2006年6～7月，河南新乡市某鸡场饲养的1000多羽40日龄的蛋鸡发生绦虫病，发病率80％以上，死亡率较低。病鸡精神萎顿，羽毛蓬乱。鸡冠苍白，消瘦，下痢。有时拉血便。严重者食欲不振，两腿瘫痪不能站立，最后衰竭而死。新鲜粪便可见多少不等的白色、小米粒大、长方形的绦虫节片。用吡喹酮治疗后疗效显著，治愈率95％以上。根据流行病学调查、临床症状、剖检变化、触片镜检和治疗结果观察，确诊鸡群感染的是绦虫病。

关键词：鸡绦虫诊治

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多媒体技术在动物免疫学教学中的应用与思考

安徽农业科学 2009年第16期37卷 7784-7785页

作者：李任峰田香勤王三虎河南科技学院动物科学学院河南新乡453003 新乡医学院医学研究中心河南新乡453003

从多媒体在动物免疫学教学中的必要性出发,分析了多媒体的应用优势及存在的不足,并对多媒体在动物免疫学教学中的合理应用进行了探讨。

关键词：多媒体动物免疫学素质教育

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猪新发冠状病毒研究进展

畜牧兽医学报 2020年第10期51卷 2359-2366页

作者：李任峰卢晓辉姜金庆王自良河南科技学院动物科技学院河南省高校动物疫病防控科技创新团队新乡453003 新乡市动物疫病预防控制中心新乡453003

当前,由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)导致的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情正在全球暴发大流行,这也引发业界对于动物源性冠状病毒的高度关注。猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)是近年来新发现的猪冠状病毒,... 详细信息

当前,由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)导致的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情正在全球暴发大流行,这也引发业界对于动物源性冠状病毒的高度关注。猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)是近年来新发现的猪冠状病毒,不但严重危害到养猪业,对公共卫生安全也具有潜在威胁风险。本文结合国内外现有文献,从PDCoV和SADS-CoV的病原学、病毒起源与进化、致病性以及检测诊断技术等方面进行综述,并提出展望,以拓展对SARS-CoV-2的认识,并为PDCoV和SADS-CoV的后续研究提供参考借鉴。

关键词：猪新发冠状病毒猪德尔塔冠状病毒猪急性腹泻综合征冠状病毒

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RNAi的抗病毒机制及应用

生命的化学 2011年第4期31卷 514-518页

作者：鲁毅李任峰徐萍王三虎田献礼河南科技学院动物科学院新乡453003

RNA干扰(RNA interference,RNAi)能够在转录水平、翻译水平和转录后水平上抑制病毒的复制,这为临床治疗病毒性疾病奠定了理论基础。近年来,RNAi技术发展迅速,使得RNAi技术应用于病毒性疾病的治疗成为可能。本文从RNAi抗病毒的作用机制及... 详细信息

RNA干扰(RNA interference,RNAi)能够在转录水平、翻译水平和转录后水平上抑制病毒的复制,这为临床治疗病毒性疾病奠定了理论基础。近年来,RNAi技术发展迅速,使得RNAi技术应用于病毒性疾病的治疗成为可能。本文从RNAi抗病毒的作用机制及RNAi在抗动物病毒性疾病方面的应用等方面进行综述,并对RNAi在抗病毒方面的应用前景进行展望。

关键词： RNA干扰抗病毒

猪δ冠状病毒N蛋白的可溶性表达与生物学活性分析

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中国动物传染病学报 2023年

作者：庞俊增袁嘉康李林岳秦保亮李任峰赵晓会王自良河南科技学院动物科技学院河南省高校动物疫病防控创新团队新乡市动物疫病预防控制中心新乡医学院三全学院

本研究采用RT-PCR扩增猪δ冠状病毒（PDCoV）的核衣壳蛋白（Nucleocapsid，N）基因，构建原核表达质粒pET-32a-N，转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，经IPTG诱导表达，通过Ni-NTA亲和层析对表达蛋白进行纯化，将纯化后的重组蛋白免... 详细信息

本研究采用RT-PCR扩增猪δ冠状病毒（PDCoV）的核衣壳蛋白（Nucleocapsid，N）基因，构建原核表达质粒pET-32a-N，转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，经IPTG诱导表达，通过Ni-NTA亲和层析对表达蛋白进行纯化，将纯化后的重组蛋白免疫小鼠，以PDCoV病毒包被酶标板，采用ELISA方法检测小鼠血清抗体，评价重组蛋白的免疫原性。结果显示，PDCoV重组N蛋白（～58 kDa）在0.2 mmol/L IPTG、20℃条件下诱导12 h表达效果最好，且以可溶性形式存在；表达蛋白经Ni柱纯化后能与抗PDCoV阳性血清发生特异性免疫印迹反应，且能够诱导小鼠产生抗PDCoV特异性抗体，具有良好的免疫原性和反应原性。本研究为下一步建立PDCoV检测方法和开展PDCoV N蛋白功能研究奠定了基础。

关键词：猪δ冠状病毒 N蛋白可溶性表达生物学活性

口蹄疫病毒多抗原基因VP_1-VP_3-3C在大肠杆菌中的融合表达

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湖北农业科学 2005年第2期44卷 17-20页

作者：李任峰何启盖洪琦华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

应用PCR扩增技术获得1564bp的片段,包含口蹄疫病毒VP1全长基因、VP3部分基因和编码3C裂解酶全长基因,连接到pMD-18T载体上,在获得重组质粒pMD-18T-P13C后,进行序列分析;并成功地构建了重组表达质粒PGEX-KG-P13C,将其转化大肠杆菌BL21(D... 详细信息

应用PCR扩增技术获得1564bp的片段,包含口蹄疫病毒VP1全长基因、VP3部分基因和编码3C裂解酶全长基因,连接到pMD-18T载体上,在获得重组质粒pMD-18T-P13C后,进行序列分析;并成功地构建了重组表达质粒PGEX-KG-P13C,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达,收集菌体进行SDS-PAGE电泳。结果表明,P13C基因在大肠杆菌中获得成功表达,其表达产物为分子量83kDa的融合蛋白;能与猪抗FMDV血清发生反应,并为口蹄疫病的诊断及其基因工程疫苗的研究提供了依据。

关键词：口蹄疫病毒基因工程亚单位疫苗诊断抗原

眼针对IBS模型大鼠结肠组织5-HT含量及转化率的影响

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辽宁中医杂志 2010年第11期37卷 2222-2224页

作者：宋士一王德山王艳杰李丹李任峰辽宁中医药大学基础医学院辽宁沈阳110032

目的:研究肠易激综合征(Irritable bowel syndrome,IBS)模型大鼠结肠组织5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)含量、5-HT转化率以及眼针治疗的影响。方法:实验动物分成对照组、IBS模型组、眼针组,采用束缚刺激与应激刺激相结合的方法建... 详细信息

目的:研究肠易激综合征(Irritable bowel syndrome,IBS)模型大鼠结肠组织5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)含量、5-HT转化率以及眼针治疗的影响。方法:实验动物分成对照组、IBS模型组、眼针组,采用束缚刺激与应激刺激相结合的方法建立IBS动物模型并进行眼针治疗。各组采用ELISA法检测结肠组织5-HT和5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)的表达,采用RT-PCR法检测结肠组织5-HT重摄取转运体(serotonin reuptaketransporter,SERT)、色氨酸羟化酶1(Tryptophan hydroxylase1,TPH1)的mRNA表达。结果:与对照组比较,IBS模型组5-HT、5-HIAA水平显著升高,5-HT转化率也显著升高,SERT mRNA表达下调而TPH1mRNA表达上调;与IBS模型组比较,眼针组5-HT和5-HIAA水平明显下降,5-HT转化率显著降低,SERT mRNA表达上调而TPH1mRNA表达下调。结论:5-HT降解与合成分泌的不相匹配可能是IBS模型大鼠5-HT水平升高的重要原因,眼针治疗可有效改善IBS大鼠5-HT代谢,使5-HT恢复至正常水平。

关键词：肠易激综合征 5-羟色胺 5-羟吲哚乙酸眼针