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载脂蛋白E缺乏对视神经脊髓炎体外模型损伤的影响

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载脂蛋白E缺乏对视神经脊髓炎体外模型损伤的影响

作者：李一锋广西医科大学

学位级别：硕士

目的:从视神经脊髓炎(NMO)患者体内提取自身抗体免疫球蛋白G(NMO-IgG),用NMO-IgG和补体诱导离体脊髓切片制作NMO体外模型,并探索载脂蛋白E(ApoE)缺乏对NMO体外模型损伤的影响。方法:将7日龄的正常基因型(WT)及ApoE基因敲除(ApoE-/-)的C5... 详细信息

目的:从视神经脊髓炎(NMO)患者体内提取自身抗体免疫球蛋白G(NMO-IgG),用NMO-IgG和补体诱导离体脊髓切片制作NMO体外模型,并探索载脂蛋白E(ApoE)缺乏对NMO体外模型损伤的影响。方法:将7日龄的正常基因型(WT)及ApoE基因敲除(ApoE-/-)的C57BL/6J小鼠脊髓切片培养7天后,将两种基因型的脊髓片再随机分为实验组及对照组。实验组加入从视神经脊髓炎患者体内提取出的NMO-IgG及正常人补体血清;对照组不加NMO-IgG,余同实验组,继续培养24小时。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)浓度,分别用免疫荧光漂染法和改良的厚组织片免疫荧光法检测脊髓片水通道蛋白4(AQP4)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、离子钙接头蛋白(Iba1)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、人神经丝蛋白L(NFL)的表达,并根据脊髓片AQP4和GFAP缺失面积比例计算损伤积分。结果:ELISA检测结果显示,各组间LDH表达水平无统计学差异(p>0.05);两种免疫荧光方法比较,改良过的厚组织片免疫荧光法效果较免疫荧光漂染法操作更简单、抗体用量更少、图片背景更干净;免疫荧光结果显示,与相应的对照组比较,ApoE基因敲除小鼠造模组(NMO-ApoE-/-组)和正常基因型小鼠造模组(NMO-WT组)均出现明显的AQP4、GFAP、MBP和NFL缺失和损伤积分增高(p0.05);NMO-WT组的IBA1表达较正常对照组升高(p一步活化,进而加重NMO的严重程度。

关键词：载脂蛋白E 视神经脊髓炎体外模型

Enterobacter aerogenes EB-06的筛选及其暗发酵产氢过程特征分析

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Enterobacter aerogenes EB-06的筛选及其暗发酵产氢过程特征分析

作者：李一锋华东理工大学

学位级别：硕士

随着社会的持续发展,环境污染和能源短缺问题日渐突出,寻找一种清洁、可再生的新型能源是当务之急。H2具有清洁、可再生、燃烧值高等优点,可以作为未来理想的能源形式之一。目前,在众多制氢方法中,生物制氢具有产氢速度快、设备简易、... 详细信息

随着社会的持续发展,环境污染和能源短缺问题日渐突出,寻找一种清洁、可再生的新型能源是当务之急。H2具有清洁、可再生、燃烧值高等优点,可以作为未来理想的能源形式之一。目前,在众多制氢方法中,生物制氢具有产氢速度快、设备简易、可利用可再生资源和废弃物等特点,深具产业化前景。然而,到目前为止尚未实现生物制氢过程产业化,主要原因仍与生物制氢技术成本较高、效率较低等因素有关。因此筛选具有较高转化率和利用更广发底物的产氢微生物是生物制氢的重要研究方向。本文以上海市植物园河底污泥为基质进行产氢发酵菌的筛选,使用了厌氧平板技术,经过初筛和复筛得到16株产氢菌,最终得到体积产氢量相对较高的一株菌株EB-06,经形态学、生理生化实验及16S rDNA序列分析后获悉其属于肠杆菌属的产气肠杆菌,命名为*** EB-06,并进一步开展后续实验。为了优化培养条件和培养基组分,首先对EB-06菌株利用葡萄糖产氢特性进行了考察。实验证明,在厌氧条件下的产氢得率要比有氧条件下的高2.3倍;菌体生长和产氢的最适温度分别为37℃和41℃。通过分批培养,可以得到细菌细胞生长的最适pH为偏碱性,其体积产氢量最适pH在8.0左右,为51.08mmol/L培养基;而产氢得率最高为0.86molH2/mol Glucose时的pH值为5.0左右。产氢得率随着初始葡萄糖浓度的增加而降低,当初始葡萄糖的浓度为lOg/L时,EB-06产氢得率最大为0.53 mol H2/mol Glucose,高浓度的初始葡萄糖浓度会抑制产氢得率。当葡萄糖的浓度为20g/L时,EB-06暗发酵体积产氢量和比产氢速率最佳,分别为47.00mmol/L和9.40mmolH2/gDCW·h。Fe2+是通过作为金属酶的电子传递作用来影响代谢产氢的,实验得到最佳的Fe2+离子添加量为50mg/L。碳源类型实验结果显示,EB-06菌株几乎可以利用所有常见的单糖、双糖以及某些多糖,其中产氢量最多的是甘油。产气肠杆菌可以利用甘油发酵产生H2和乙醇,因此重点考察了EB-06利用甘油发酵产氢的优化条件及产氢特性,该过程不仅可以得到清洁能源—H2,而且还可以处理生物柴油工业的副产物—甘油。本文采用了单因素实验研究了初始pH值、初始甘油浓度、接种量以及C/N比对EB-06菌株发酵甘油产氢的特性的影响关系。研究结果表明,当初始pH值为7.0时,发酵液的最大体积产氢量为83.76mmol/L;在初始甘油浓度为40g/L时获得最高的比产氢速率41.47mmol H2/gDCW·h;通过探究不同接种量对产氢得率的影响,发现接种量较大时(4%)的产氢得率是接种量较小时(0.5%)的2倍;实验证明C/N比也是影响产氢得率的一个重要得因素,体积产氢量随着C/N比(g/g)的降低而增加。正交实验获得了最佳产氢得率条件为:初始甘油浓度为10g/L,初始pH为5.0,C/N比为5/3时,是大产氢得率为1.07mol H2/mol Glycerol。此结果已经十分接近文献公开报道的产气肠杆菌的最高产氢得率1.12molH2/mol Glycerol。

关键词：暗发酵制氢条件优化菌种筛选 Enterobater aerogenes 甘油利用

利用RNA干扰抑制MCF-7细胞中CTCF基因的表达

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利用RNA干扰抑制MCF-7细胞中CTCF基因的表达

作者：李一锋陕西师范大学

学位级别：硕士

CCCTC-binding factor (CTCF)是一个广‘泛表达并具有11个锌指(ZF)结构的核蛋白,CTCF最初是作为接合于鸟类和哺乳类MYC基因启动子上的转录因子被发现的。CTCF作为真核生物中非常重要的转录因子参与多方面的基因调节,包括基因激活、抑制... 详细信息

CCCTC-binding factor (CTCF)是一个广‘泛表达并具有11个锌指(ZF)结构的核蛋白,CTCF最初是作为接合于鸟类和哺乳类MYC基因启动子上的转录因子被发现的。CTCF作为真核生物中非常重要的转录因子参与多方面的基因调节,包括基因激活、抑制、沉默、绝缘。同样它还参与调节印迹基因的表达和X-染色体失活作用。近来研究发现CTCF在介导远距离染色质之间以及染色质内部相互作用中起到了非常重要的作用,这些研究还进一步说明CTCF是一个非常重要的染色质绝缘子蛋白,它可能在介导远距离染色质之间相互作用中起到一个中枢的作用。由于RNAi具有基因敲除的功能,借助RNAi机制,研究人员得以迅速简便地降低细胞中某个特定基因的表达,实现类似“基因敲除”的效果,从而分析目标基因的表达改变对细胞产生的影响,来进一步研究目标基因的未知功能。本课题采用RNA干扰的方法对细胞中CTCF基因进行沉默,通过建立CTCF基因沉默的细胞系为以后比较CTCF在沉默之前和沉默之后对由CTCF介导的染色质之间的相互作用关系的研究奠定了一个坚实的基础。其技术路线为首先选择CTCF基因mRNA不同的4个靶位点设计不同的敲除载体(pSilencer1～4),然后通过转染、抗生素加压筛选的方法获得稳定转染敲除载体的4株细胞系,最后利用蛋白免疫印迹和荧光定量PCR的方法来检测稳定转染敲除载体的细胞和野生型细胞之间CTCF的蛋白表达水平和mRNA表达水平。从而分析RNA干扰对CTCF的敲除效率。同时本课题还成功构建了一个CTCF拯救载体这为以后的CTCF拯救实验打下了基础。结果稳定转染敲除载体的细胞与野生型的细胞相比细胞内CTCF的蛋白水平和mRNA水平都在下调,但是发现CTCF并没有完全被沉默。还发现mRNA靶位点跨内含子的敲除效率明显高于靶位点位于外显子内部的敲除效率,其中靶位点在外显子内部越是靠近5’端敲除效率越明显。

关键词： CTCF RNA干扰转染敲除效率

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GMSK在短波跳频通信系统中的应用研究

GMSK在短波跳频通信系统中的应用研究

作者：李一锋太原理工大学

学位级别：硕士

跳频技术是扩频技术的一种，是一种新的通信方式。跳频通信具有良好的抗干扰性，低截获概率及组网能力，因此跳频技术的一出现，便在军事领域得到了极大的发展。采用跳频技术的短波超短波电台在军事通信中得到了广泛应用，极大地提高了... 详细信息

跳频技术是扩频技术的一种，是一种新的通信方式。跳频通信具有良好的抗干扰性，低截获概率及组网能力，因此跳频技术的一出现，便在军事领域得到了极大的发展。采用跳频技术的短波超短波电台在军事通信中得到了广泛应用，极大地提高了军事装备的抗截获和抗干扰能力，保证了军事指挥系统的安全和有效性。目前，军事通信传递的信息，已从发送简单的指挥命令发展到诸如雷达探测的数据、计算机计算结果、高速图像传真信息和数字话音加密信息等一些要求较高的数字数据信息。传统调制方式由于频谱利用率不高而不适合跳频系统的高速数据传输。因而，研究适合于跳频通信特点的具有高效频谱利用率的调制方式具有重要的意义。在各种调制方式中，高斯最小频移键控(Gaussian Minimum Shift Keying)具有极好的频谱利用率、功率效率和可以采用非相干解调等优点，己经广泛应用于无线通信系统，尤其是移动通信领域。本文将GMSK调制技术引入到短波跳频系统中，以实现高速数据传输。首先在分析几种数字调制技术的基础上，研究了GMSK调制技术的产生、解调方法及其特性，并设计了基于直接数字合成(Direct Di gital Synthesis)技术的GMSK调制的硬件实验电路;建立了短波(shortwave frequency-hopping)跳频

关键词：短波跳频高斯最小频移键控直接数字合成软判决 Viterbi算法

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无人值守箱式自动过分相及其监控系统的研制

无人值守箱式自动过分相及其监控系统的研制

作者：李一锋西南交通大学

学位级别：硕士

交流电气化铁路通常每隔20-30km就有一个分相区,而自动过分相装置是使机车能安全快速的通过分相区的重要设备。目前国内外自动过分相主要有地面、机车、柱上三种方案,其中地面方案牵引力和速度损失最小,最适合高速铁路的运行。无人值守... 详细信息

交流电气化铁路通常每隔20-30km就有一个分相区,而自动过分相装置是使机车能安全快速的通过分相区的重要设备。目前国内外自动过分相主要有地面、机车、柱上三种方案,其中地面方案牵引力和速度损失最小,最适合高速铁路的运行。无人值守箱式自动过分相方案是在对地面方案进行改进后提出的一种新方案,这种方案可以大幅度减少运营成本和工程费用,并便于集中管理。本文首先进行了方案的整体设计,包括设计可靠的换相开关方案、传感器布置方案,以及二次监控系统方案。二次监控系统包括开关控制、本地监控、远程监控三个部分,它选用西门子PLC作为控制器,触摸屏作为本地监控设备,并通过光纤通讯完成远程监控。对于没有敷设光纤以太网的铁路线,采取分散监控方式,用PLC的RS-485接口与监控机进行串行通信;对于已铺设光纤以太网的铁路线,采用了西门子的工业以太网解决方案及OPC技术进行集中监控。在监控方案制定以后,本文研制了可编程控制器的开关控制和通信程序,触摸屏监控画面,并对两种远程监控方案分别设计了监控软件。

关键词：自动过分相装置监控系统可编程序控制器触摸屏工业以太网远程监控 OPC

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有机胺对螺旋藻生长及固碳效果的影响

高校化学工程学报 2017年第2期31卷 377-386页

作者：王兆印李一锋张旭朱明龙谭文松生物反应器工程国家重点实验室华东理工大学上海200237

采用微藻培养来降低空气中二氧化碳含量是当前研究的热点。然而,以气态CO_2为碳源的微藻培养过程中,普遍存在传质和固碳速率较低等问题。研究发现有机胺类物质如MEA(乙醇胺)、DEA(二乙醇胺)、MDEA(N-甲基-二乙醇胺)、TEA(三乙醇胺)等能... 详细信息

采用微藻培养来降低空气中二氧化碳含量是当前研究的热点。然而,以气态CO_2为碳源的微藻培养过程中,普遍存在传质和固碳速率较低等问题。研究发现有机胺类物质如MEA(乙醇胺)、DEA(二乙醇胺)、MDEA(N-甲基-二乙醇胺)、TEA(三乙醇胺)等能够显著提高CO_2的气液传质速率。而针对有机胺类物质影响微藻培养及固碳效率的公开报道却并不多。研究以钝顶螺旋藻(FACHB-901)利用低含量CO_2气体为碳源的培养过程为对象,系统研究了有机胺类物质的种类(MDEA、MEA、DEA、TEA)及其添加策略对螺旋藻生物量和固碳速率的影响关系。研究结果表明,在改良的Zarrouk培养基中添加了1 mmol·L^(-1) MDEA可以使培养基中溶解性无机碳(DIC)含量达到297.4 mg·L^(-1)。而添加1mmol·L^(-1) TEA可以得到最佳的螺旋藻生物量(0.894 g·L^(-1))和固碳速率(139.3 mg·(L·d)^(-1))。同时,研究获得螺旋藻培养过程中TEA的最优添加策略为:延滞期添加5 mmol·L^(-1)、对数前期补加1 mmol·L^(-1)、对数后期补加2 mmol·L^(-1)。最终,通过TEA优化的添加策略获得了螺旋藻的生物量(1.248 g·L^(-1))和固碳速率(191.4 mg·(L·d)^(-1),比对照组分别提高了25.6%和41.2%。

关键词：钝顶螺旋藻有机胺类物质优化策略微藻培养固碳

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载脂蛋白E缺乏对视神经脊髓炎体外模型的损伤影响

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中华神经科杂志 2018年第2期51卷 111-117页

作者：廖韦静李一锋唐玉兰范丽君黄帆广西医科大学第一附属医院神经内科南宁530021

目的探索载脂蛋白E（ApoE）缺乏对视神经脊髓炎（NMO）体外模型的损伤影响。方法将7 d龄的野生型及ApoE基因敲除（ApoE－/－）的C57BL/6J小鼠脊髓切片培养7 d后，将两种基因型的脊髓片按照随机数字表法随机分为实验组及对照组。实验... 详细信息

目的探索载脂蛋白E（ApoE）缺乏对视神经脊髓炎（NMO）体外模型的损伤影响。方法将7 d龄的野生型及ApoE基因敲除（ApoE－/－）的C57BL/6J小鼠脊髓切片培养7 d后，将两种基因型的脊髓片按照随机数字表法随机分为实验组及对照组。实验组加入从NMO患者血清提取出的自身抗体免疫球蛋白G（NMO－IgG）及正常人补体血清；对照组不加NMO－IgG，余处理方式与实验组相同，继续培养24 h。用免疫荧光法检测脊髓片水通道蛋白4（AQP4）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、离子钙接头蛋白（IBA1）、髓鞘碱性蛋白（MBP）、人神经丝蛋白L（NFL）的表达水平，并根据脊髓片AQP4和GFAP缺失面积比例计算损伤积分。结果与相应的对照组相比，ApoE基因敲除小鼠造模组（NMO－ApoE－/－组）和野生型小鼠造模组（NMO－WT组）均出现明显的AQP4、GFAP、MBP和NFL缺失（NMO－ApoE－/－组上述各项指标缺失面积百分比分别为83.88%±5.01%、82.44%±6.11%、45.02%±5.11%、54.65%±7.66%，相应对照组对应指标分别为10.44%±4.07%、5.73%±0.82%、9.12%±1.41%、5.72%±0.81%, t＝34.143、37.269、20.300、19.051，均P〈0.05；NMO－WT组上述指标缺失面积比例分别为77.74%±6.75%、75.62%±5.76%、37.60%±4.88%、46.29%±4.98%，相应对照组对应指标分别为9.31%±2.97%、5.80%±0.82%、9.10%±1.63%、5.80%±0.81%，t＝27.828、35.934、16.613、24.057，均P〈0.05），且NMO－ApoE－/－组染色缺失的程度较NMO－WT组严重（t＝2.194、2.436、3.149、2.746，均P〈0.05），两组损伤积分均较各自对照组明显增高，均出现IBA1表达上调（NMO－WT组及对照组：19.88±1.11与11.18±0.65，t＝25.270，P〈0.05），且NMO－ApoE－/－组的IBA1表达水平较NMO－WT组更高（25.81±1.61与19.88±1.11，t＝9.101，P〈0.05）。结论在补体存在的情况下，从NMO患者血清提取出的NMO－IgG可以诱导离体组织产生NMO样损伤。ApoE缺失可能会促进小胶质细胞进一步活化，加重NMO模型的星型胶质细胞损伤程度。

关键词：载脂蛋白E类视神经脊髓炎体外模型

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语文不应是“断章”

语文教学通讯（小学）（C） 2005年第12期 57-58页

作者：李一锋浙江省瑞安市塘下镇中心小学

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基于中国传统文化的企业文化建设途径

中外企业家 2016年第20期 132-133页

作者：李一锋中船重工第七〇三研究所

任何一个企业,其生存和发展都与它自身的文化条件及所处的文化环境密不可分,企业文化是企业生存的基础、行为的准则、成功的保证。基于此,着重阐述传统文化中儒、道二家思想对企业文化建设的积极作用,同时简要分析了传统文化对企业文化... 详细信息

任何一个企业,其生存和发展都与它自身的文化条件及所处的文化环境密不可分,企业文化是企业生存的基础、行为的准则、成功的保证。基于此,着重阐述传统文化中儒、道二家思想对企业文化建设的积极作用,同时简要分析了传统文化对企业文化建设的消极影响。我国企业在创建组织文化中要吸收传统文化中的精华,抛弃糟粕,使传统文化在企业文化建设中发挥应有的作用。

关键词：传统文化企业文化文化建设