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乙肝患者血清HBV cccDNA的临床意义

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实用医学杂志 2013年第3期29卷 395-397页

作者：朱锦宏吴晓蔓广州医学院第二附属医院检验科 510260

目的:探讨血清HBVcccDNA与肝组织HBVcccDNA、血清HBVDNA的关系及临床意义。方法:采用荧光定量PCR(FQ-PCR),对69例乙肝携带者、慢乙肝、乙肝肝硬化及肝癌血清及15例肝组织的HBVcccDNA、HBVDNA进行检测,化学发光免疫分析定量检测血清HBsA... 详细信息

目的:探讨血清HBVcccDNA与肝组织HBVcccDNA、血清HBVDNA的关系及临床意义。方法:采用荧光定量PCR(FQ-PCR),对69例乙肝携带者、慢乙肝、乙肝肝硬化及肝癌血清及15例肝组织的HBVcccDNA、HBVDNA进行检测,化学发光免疫分析定量检测血清HBsAg。结果:(1)肝组织HBVcccDNA阳性检出率为86.7%,高于血清HBVcccDNA阳性检出率(66.7%,P<0.05);(2)血清中HBVcccDNA与肝组织HBVcccDNA水平呈正相关(r=0.72,P<0.05);(3)血清HBVcccDNA拷贝数随HBVDNA水平升高而增大,且两者水平呈正相关(r=0.82,P<0.05);且HBVDNA高水平组(HBVDNA≥105copies/mL)的血清HBVcccDNA的阳性检出率(96.6%)高于低水平组(103copies/mL≤HBVDNA<1×105copies/mL)(67.5%)(P<0.05);(4)血清HBVcccDNA检出率随着病程进展而升高,在乙肝携带者、慢乙肝、乙肝肝硬化及肝癌中检出率分别为33.3%、83.3%、87.0%、87.5%,具有显著差异(P<0.05)。结论:血清HBVcccDNA可间接反映患者肝组织内HBVcccDNA情况,且与血清HBV复制指标HBVDNA显著相关;并与乙肝不同病程有关。

关键词：肝炎病毒,乙型 HBV cccDNA HBV DNA 肝组织乙型患者

乙型肝炎病毒大蛋白对于判定HBV复制情况的意义

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广东医学 2011年第18期32卷 2395-2397页

作者：朱锦宏吴晓蔓广州医学院第二附属医院检验科广州510260

目的探讨乙型肝炎病毒大蛋白LHBs对判定乙型肝炎病毒(HBV)复制的临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)对221例HBV感染者血清LHBs及HBV血清标志物进行检测,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对HBV DNA进行平行检测。结果 (1)在22... 详细信息

目的探讨乙型肝炎病毒大蛋白LHBs对判定乙型肝炎病毒(HBV)复制的临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)对221例HBV感染者血清LHBs及HBV血清标志物进行检测,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对HBV DNA进行平行检测。结果 (1)在221例HBV感染者中,LHBs、HBeAg与HBVDNA的总符合率分别为74.66%、53.40%;(2)LHBs阳性率随HBV DNA拷贝数的增加呈上升趋势,HBV DNA阳性率为77.38%,LHBs阳性率为83.71%,差异有统计学意义(2=14.92,P0.05;2=2.78,P>0.05)。结论血清LHBs能反映乙型肝炎患者体内HBV复制程度,其灵敏度高于HBeAg,是作为判定HBV复制情况的一个较好的血清学指标。

关键词：乙型肝炎 HBV DNA 乙型肝炎病毒大蛋白 HBeAg

黄芩苷联合顺铂对人肝癌细胞HepG2.0的生长抑制作用

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广东医学 2014年第19期35卷 2986-2989页

作者：刘荣静袁伟曦朱锦宏习浩林艳芬广州医科大学附属第二医院检验科广州510260 广州医科大学金域检验学院广州510182

目的探讨黄芩苷联合顺铂对人肝癌细胞Hep G2.0的生长抑制作用,并初步探讨其抑癌机制。方法设置阴性对照组（仅加含10%小牛血清的DMEM培养液的Hep G2.0细胞）、阳性对照组（12μg/m L顺铂处理的Hep G2.0细胞）,及设置不同浓度单药黄芩苷... 详细信息

目的探讨黄芩苷联合顺铂对人肝癌细胞Hep G2.0的生长抑制作用,并初步探讨其抑癌机制。方法设置阴性对照组（仅加含10%小牛血清的DMEM培养液的Hep G2.0细胞）、阳性对照组（12μg/m L顺铂处理的Hep G2.0细胞）,及设置不同浓度单药黄芩苷、单药顺铂及黄芩苷联合顺铂,分别作用于人肝癌细胞Hep G2.0,采用CCK-8法检测细胞活性,以细胞生长抑制率反映各药对人肝癌细胞Hep G2.0的抑制作用;利用流式细胞仪检测经联合药物作用24 h后的人肝癌细胞Hep G2.0的细胞周期的改变。结果（1）1.0-4.0 mg/m L黄芩苷单药、2.0-4.0μg/m L顺铂单药分别作用于人肝癌细胞Hep G2.0,均有明显生长抑制作用（P〈0.05）,但两者之间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）黄芩苷0.5 mg/m L联合顺铂3.0-4.0μg/m L对人肝癌细胞Hep G2.0有协同抑制作用,黄芩苷1.0-4.0 mg/m L联合顺铂0.5-4.0μg/m L对人肝癌细胞Hep G2.0有协同抑制作用;且3.0-4.0 mg/m L黄芩苷与0.5-4.0μg/m L顺铂联合应用有明显协同作用;协同指数在0.37-0.97之间;黄芩苷2.0 mg/m L联合顺铂1.0μg/m L对人肝癌细胞Hep G2.0的生长抑制率为50%。（3）黄芩苷2.0 mg/m L联合顺铂1.0μg/m L作用于人肝癌细胞Hep G2.0,对比阴性对照组,G0/G1期比例增大,S期和G2/M期比例减少。结论通过将不同浓度药物作用于人肝癌细胞Hep G2.0后筛选出的最适联合用药量,可以减少顺铂用量,其机制可能与阻滞人肝癌细胞Hep G2.0的细胞周期于G0/G1期有关。

关键词：黄芩苷顺铂人肝癌细胞HepG2.0 生长抑制作用细胞周期

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乙型肝炎病毒C基因多态性及其蛋白特性分析

中华医院感染学杂志 2013年第17期23卷 4095-4098页

作者：李晓飞丁谦谦楼莲青叶韦纬朱锦宏义乌市中心医院感染科浙江义乌322000

目的调査中学生人群乙型肝炎病毒（HBV）C基因多态性及其乙型肝炎病毒C蛋白（HBc）特性变化，为了解乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）变异提供理论依据。方法采用HBV-C基因特异性引物对23份义乌地区大学生HBV携带者（血清学检测为大三阳... 详细信息

目的调査中学生人群乙型肝炎病毒（HBV）C基因多态性及其乙型肝炎病毒C蛋白（HBc）特性变化，为了解乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）变异提供理论依据。方法采用HBV-C基因特异性引物对23份义乌地区大学生HBV携带者（血清学检测为大三阳患者）血清标本进行PCR扩增鉴定，并取21份PCR检测阳性产物直接测序；进一步用Vector NTI8.0和DNA Star软件分析HBV-C基因多态性及HBc蛋白特性的变化。结果23份标本中，HBV-C DNA阳性率91. 30% ;与标准基因序列（Gen Bank X01587）比较，HBV-C基因同源性为93. 3%-95.1%;分别形成54种突变模式，其中一处由于核苷酸的改变，翻译的氨基酸也发生了相应的改变，此处氨基酸序列的第130处脯氨酸（P）突变为苏氨酸（T），其余标本均为同义突变；但突变处编码蛋白在亲水性、表面可及性及抗原性与标准株相比较无明显变化。结论义乌市大学生HBV携带者HBV-C基因序列有一定程度的变异。

关键词：乙型肝炎病毒 C基因突变多态性

乙型肝炎病毒x蛋白介导微RNA-143在乙型肝炎相关肝癌患者中的表达及临床作用

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中华临床实验室管理电子杂志 2022年第4期10卷 222-226页

作者：朱锦宏李雪燕吴红林桢周强冀天星广州医科大学附属第二医院检验科广东广州510260

目的探讨乙型肝炎(乙肝)相关肝病患者血清中乙型肝炎病毒x(HBx)蛋白与微RNA-143(miR-143)的相关性及在乙肝相关肝癌中的临床诊断价值。方法收集乙肝相关肝病患者血清169例,按乙肝病程进展分为慢性乙肝组78例、乙肝相关肝硬化组53例及乙... 详细信息

目的探讨乙型肝炎(乙肝)相关肝病患者血清中乙型肝炎病毒x(HBx)蛋白与微RNA-143(miR-143)的相关性及在乙肝相关肝癌中的临床诊断价值。方法收集乙肝相关肝病患者血清169例,按乙肝病程进展分为慢性乙肝组78例、乙肝相关肝硬化组53例及乙肝相关肝癌组38例,同时收集20例健康人群血清设为正常对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清HBx蛋白及乙肝两对半指标;实时荧光定量PCR(qPCR)检测血清miR-143及HBV DNA含量;全自动化学发光免疫分析仪(CLIA)检测血清甲胎蛋白(AFP)含量。结果miR-143与AFP表达量在HBx蛋白阳性组的表达水平均高于HBx蛋白阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);HBx蛋白阳性检出率及miR-143表达量在HBV DNA高水平组较HBV DNA正常组、低水平组和中水平组的高,差异具有统计学意义(P<0.05);HBx蛋白阳性检出率在肝硬化组和肝癌组明显高于正常对照组和慢性乙肝组,血清miR-143及AFP表达量在肝癌患者中显著高于正常对照组、慢性乙肝组和肝硬化组,差异具有统计学意义(P<0.05);miR-143相对表达量在HBx蛋白阳性肝癌患者组中明显高于HBx蛋白阴性肝癌患者组,差异具有统计学意义(P<0.05);血清miR-143与HBx蛋白水平呈正相关(P<0.05)。结论HBx蛋白与miR-143表达密切相关,呈一种剂量依赖关系,miR-143可能参与了HBx蛋白介导的乙肝肝癌进展的过程,两者在慢性乙肝发展成肝癌的进程中起着重要的作用,为乙肝肝癌诊疗提出一种新的思考方向。

关键词：乙型肝炎病毒x蛋白微RNA-143 乙肝相关肝癌

黄芩苷对人肝癌细胞HepG2.0的抑瘤作用

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广东医学 2013年第10期34卷 1493-1495页

作者：习浩刘荣静麦飘予朱锦宏邓小燕谢煜文广州医学院第二附属医院检验科广州510260 广州医学院检验系广州510182 广东省广州市白云区钟落潭镇卫生院 510550

目的研究黄芩苷对人肝癌细胞系HepG2.0的生长抑制作用并初步探讨其作用机制。方法将黄芩苷配制成0.5、1.0、2.0、4.0、5.0、6.0、8.0、10.0 mg/mL的工作浓度处理HepG2.0e肝癌细胞,于37℃、5%CO2培养后分别在12、24、48、72 h于倒置显微... 详细信息

目的研究黄芩苷对人肝癌细胞系HepG2.0的生长抑制作用并初步探讨其作用机制。方法将黄芩苷配制成0.5、1.0、2.0、4.0、5.0、6.0、8.0、10.0 mg/mL的工作浓度处理HepG2.0e肝癌细胞,于37℃、5%CO2培养后分别在12、24、48、72 h于倒置显微镜下观察细胞形态变化;采用CCK-8法检测上述各种浓度黄芩苷在处理HepG2.0细胞株48 h后的生长抑制率,观察其对细胞株增殖抑制作用;采用流式细胞技术检测经4.0 mg/mL(IC50)黄芩苷处理、48 h培养的HepG2.0细胞株,观察各细胞周期所占百分比,分析其对HepG2.0细胞周期的影响。并与阴性对照组(只加含10%小牛血清的DMEM培养液的HepG2.0细胞)、阳性对照组(12μg/mL顺铂处理的HepG2.0细胞)、空白组(仅有10%小牛血清DMEM培养液)比较。结果 (1)1.0～10.0 mg/mL黄芩苷对人肝癌HepG2.0细胞增殖均具有明显抑制作用,与阳性对照组对比差异有统计学意义(P0.05),当黄芩苷浓度为10.0 mg/mL时,其对肿瘤细胞的生长抑制率最高,为96.25%;黄芩苷作用48 h的半数抑制浓度约为4.0 mg/mL。(2)4.0 mg/mL黄芩苷能使处于G0～G1、G2～M期的细胞减少,S期细胞显著增加。结论黄芩苷对人肝癌HepG2.0细胞生长具有明显抑制作用,其机制可能与影响细胞增殖周期有关。

关键词：黄芩苷人肝癌细胞HepG2 0 抑瘤作用

新生儿大肠埃希菌败血症的药敏分析及ESBLs基因分型

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中华医院感染学杂志 2012年第12期22卷 2495-2497页

作者：朱锦宏王瑶瑶金小珍义乌市中心医院感染科浙江义乌322000 义乌市中心医院新生儿科浙江义乌322000 义乌市中心医院检验科浙江义乌322000

目的探讨医院新生儿大肠埃希菌败血症的耐药性,并对产ESBLs大肠埃希菌进行基因分型。方法采用MicroScanWalkaway 96SI全自动微生物分析仪对45株新生儿败血症分离的大肠埃希菌进行鉴定及药敏试验,PCR检测大肠埃希菌的ESBLs基因分型,并采... 详细信息

目的探讨医院新生儿大肠埃希菌败血症的耐药性,并对产ESBLs大肠埃希菌进行基因分型。方法采用MicroScanWalkaway 96SI全自动微生物分析仪对45株新生儿败血症分离的大肠埃希菌进行鉴定及药敏试验,PCR检测大肠埃希菌的ESBLs基因分型,并采用SPSS13.0进行统计分析。结果 45株大肠埃希菌对亚胺培南敏感性最高,为100.0%,产ESBLs检出率高达57.8%,产ESBLs的大肠埃希菌对氨曲南、头孢菌素类几乎全部耐药,对含酶抑制剂类药物、碳青霉烯类和头霉素类抗菌药物敏感率较高(73.1%～92.3%);对26株产ESBLs菌株进行基因分型,发现11株携带有TEM基因,12株CTX-M-14基因型,两株CTX-M-1基因型,5株SHV基因型,同时部分菌株携带有≥2种β-内酰胺酶基因。结论医院新生儿败血症分离大肠埃希菌耐药性严重,以产ESBLs株为主,其主要基因型为CTX-M基因,但也存在TEM、SHV等多种基因型。

关键词：败血症大肠埃希菌耐药性超广谱β-内酰胺酶

医院与社区获得性肺炎患者大肠埃希菌的耐药性分析

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中华医院感染学杂志 2012年第11期22卷 2428-2430页

作者：朱锦宏王瑶瑶金小珍义乌市中心医院感染科浙江义乌322000 义乌市中心医院新生儿科浙江义乌322000 义乌市中心医院检验科浙江义乌322000

目的分析医院内获得性肺炎患者与社区获得性肺炎患者分离大肠埃希菌的耐药性及其耐药谱的变化,为临床预防感染以及合理用药提供依据。方法回顾性调查医院2008年6月-2011年12月获得性肺炎患者痰标本,对分离大肠埃希菌的药敏试验结果进行... 详细信息

目的分析医院内获得性肺炎患者与社区获得性肺炎患者分离大肠埃希菌的耐药性及其耐药谱的变化,为临床预防感染以及合理用药提供依据。方法回顾性调查医院2008年6月-2011年12月获得性肺炎患者痰标本,对分离大肠埃希菌的药敏试验结果进行统计分析;并对医院获得性肺炎与社区肺部感染患者分离的病原菌及耐药性进行分析。结果从351份标本中分离出大肠埃希菌73株,分离率为20.80%,大肠埃希菌对亚胺培南的体外抗菌性最好,敏感率为100.00%;医院内获得性肺炎患者分离大肠埃希菌对阿米卡星、妥布霉素、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率分别为45.65%、50.00%、26.09%,而社区获得性肺炎患者分离大肠埃希菌对阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶、妥布霉素的耐药率分别为7.41%、14.81%、22.22%、18.52%;医院内获得性肺炎患者分离大肠埃希菌产ESBLs检出率为73.91%,显著高于社区获得性肺炎患者的25.93%(P<0.01)。结论大肠埃希菌在肺炎患者中的分离率及耐药率较高,其中医院内获得性肺炎患者分离菌株的耐药性严重;对多药耐药菌的感染应以预防为主,建立耐药监控体系,加强耐药性监测,合理选用抗菌药物,以减少耐药菌株的出现。

关键词：大肠埃希菌医院内获得性肺炎耐药性超广谱β-内酰胺酶

miR-143在乙型肝炎相关肝病患者血清中的表达及意义

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广东医学 2016年第8期37卷 1164-1168页

作者：朱锦宏王春苗吴茂峰吴晓蔓广州医科大学附属第二医院检验科广州510260 广东省人民医院(广东省医学科学院)检验科广州510080

目的探讨乙型肝炎（乙肝）相关肝病患者血清中miR-143的表达水平与HBV DNA、甲胎蛋白（AFP）定量水平的关系,研究其在乙肝相关肝病患者中的价值。方法随机选取乙肝患者共计169例,且入选患者均被告知并签署知情同意书。其中慢性乙肝78例... 详细信息

目的探讨乙型肝炎（乙肝）相关肝病患者血清中miR-143的表达水平与HBV DNA、甲胎蛋白（AFP）定量水平的关系,研究其在乙肝相关肝病患者中的价值。方法随机选取乙肝患者共计169例,且入选患者均被告知并签署知情同意书。其中慢性乙肝78例（慢乙肝组）,肝硬化53例（乙肝肝硬化组）,肝细胞癌（乙肝肝癌组）38例,正常对照组20例。采用荧光定量PCR检测血清miR-143和HBV DNA,ELISA检测乙肝血清标志物（HBV-M）,化学发光免疫分析技术定量检测血清AFP水平,罗氏C8000全自动生化分析仪检测肝功能指标丙氨酸氨基转移酸（ALT）。结果乙肝肝癌组miR-143相对表达量为4.23±1.08,较乙肝肝硬化组（2.37±0.97）、慢乙肝组（1.21±0.58）及正常对照组（1.53±0.36）显著升高（P〈0.05）,且miR-143相对表达量随着病程进展而有升高趋势。血清miR-143表达水平在TNM分期Ⅲ期的乙肝肝癌患者较Ⅰ-Ⅱ期患者高（P〈0.05）,而在患者不同年龄、性别、肿瘤大小、癌栓间差异无统计学意义（P〉0.05）。血清miR143、HBV DNA、AFP在乙肝肝癌患者的表达量显著高于其他3组（P〈0.05）。乙肝肝癌患者中血清miR-143与HBV DNA、ALT、AFP水平均呈正相关（r=0.63,P〈0.05;r=0.67,P〈0.05;r=0.88,P〈0.05）。结论 miRNA-143与乙肝相关肝病患者病情进展有密切关系,可作为一种潜在的HBV相关肝癌诊断的生物学标记物。

关键词： miR-143 HBV DNA microRNA 乙型肝炎相关肝癌