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酸性环境中砂岩强度、变形性质的实验研究

酸性环境中砂岩强度、变形性质的实验研究

作者：朱运明西安理工大学

学位级别：硕士

实际酸性或碱性环境中的岩体力学性质的逐渐劣化问题，是评价与估算岩体工程设计寿命与使用年限的根本问题;其本质是岩体化学与力学的交叉混合影响作用问题，具有深远的理论意义与广阔的实用前景。本文选择具体的、重要的环境岩土工... 详细信息

实际酸性或碱性环境中的岩体力学性质的逐渐劣化问题，是评价与估算岩体工程设计寿命与使用年限的根本问题;其本质是岩体化学与力学的交叉混合影响作用问题，具有深远的理论意义与广阔的实用前景。本文选择具体的、重要的环境岩土工程问题，即酸性环境中岩体强度特性与变化规律进行了模拟试验分析研究。针对钙质胶结为主的长石砂岩，用不同PH值的缓冲溶液模拟酸性环境，通过对这种化学溶蚀砂岩样的单轴压缩试验和CT试验结果的分析，研究探索了酸性水溶液中砂岩样的力学性质及其变化规律;结合岩样的化学成分和结构特征，分析探索了其力学性质变化的化学作用机理;将酸液对砂岩的钙质胶结物CaCO的溶蚀看作是岩石的一种损伤，以化学动力学理论为基础，通过EDTA滴定试验测定了 CaCO的溶蚀速率，进而提出了砂岩的化学损伤模型及损伤演化律;应用提出的化学损伤模型与用实验得出的岩石变形模量值与强度值进行了对比验证，并与传统的CT数损伤模型进行了比较，证明了其合理性与精度;本模型从细观上描述岩石宏观力学性质的劣化，只有时间和PH值两个变量，只要测定胶结物的种类与初始含量及溶液PH值就可以预测任意时刻岩石的强度。最后，论述了溶质在大体积实际岩体中的运移过程及不同边界条件下考虑渗流与弥散效应的实际岩体的化学损伤强度的预测方法;为预测某一实际岩体工程的使用寿命与服务期限提供了一套分析理论与分析预测方法。

关键词：砂岩样,酸性环境,化学损伤

北京棒杆菌（Corynebacterium pekinense）天冬氨酸激酶定点突变及功能分析

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北京棒杆菌（Corynebacterium pekinense）天冬氨酸激酶定点突变...

作者：朱运明吉林农业大学

学位级别：硕士

天冬氨酸激酶(Aspartate kinase,AK)是一种控制生物合成工业中重要天冬氨酸族氨基酸的关键酶,受支路代谢终产物调控。本研究通过改善AK活力,达到解除其在天冬氨酸族氨基酸代谢途径中受代谢产物的反馈抑制,以实现工业中天冬氨酸族氨基酸... 详细信息

天冬氨酸激酶(Aspartate kinase,AK)是一种控制生物合成工业中重要天冬氨酸族氨基酸的关键酶,受支路代谢终产物调控。本研究通过改善AK活力,达到解除其在天冬氨酸族氨基酸代谢途径中受代谢产物的反馈抑制,以实现工业中天冬氨酸族氨基酸的高产。具体方法:利用饱和定点突变在已构建的pET-28a-AK基因重组的基础上,对北京棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)中AK基因进行空间改造,成功获得高活力突变体,并对其进行功能性分析。结果如下:1.由Blast比对可知,北京棒杆菌(Corynebacterium pekinense)中AK与谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)中AK序列同源性高达99%。本研究以Cg-AK晶体结构为模板,序列比对找出Cp-AKα亚基调控区域处的保守残基,这些残基通过氢键和范德华力与配体赖氨酸相互作用形成网状结构,具有稳定赖氨酸抑制剂的作用。我们推测,破坏残基与配体赖氨酸间的相互作用,可能在一定程度上解除赖氨酸和苏氨酸在Cp-AK中的协同抑制。根据上述推测,我们通过多重序列比对找到Cp-AKα亚基调控区域相关保守残基M372、G377和V378,并对其进行饱和定点突变,通过高通量筛选获得具有高活力的突变体,分别为M372R、M372G、M372D、M372I、G377D、G377K、G377F、G377Y、V378F、V378D和V378H。将上述突变体转入E.coli(BL21)中异源表达,并经诱导、纯化、10%SDS-PAGE和Western blotting验证结果表明,Cp-AK分子量为48kDa。2.对M372位点四种突变体M372D、M372G、M372I、M372R的AK动力学研究表明:Vmax较WT AK分别提高7.74倍、6.54倍、33.59倍、3.86倍;n值分别为1.1、1.5、1.9和1.6,均低于WT的n值,表明经突变后AK的正协同性降低。突变后Km值较WT AK均有些升高。因此,选择Vmax最大的突变株M372I做酶学性质研究。结果表明:M372I AK最适反应pH为8.0,较WT pH 8.5降低;最适反应温度为30℃,较WT最适温度有提高;在最适条件下的稳定性与WT AK相比提高2.0h;K+在高浓度10mmol/L时对酶有激活作用,其相对酶活为176.8±4.1%,而Mg2+、Mn2+和Fe3+在低浓度为0.2mmol/L时,酶活力提高,其相对酶活分别为154.9±4.3%、132.9±2.5%和117.1±3.6%;除glycerol、iso-Propyl alcohol、acetonitrile和n-butanol浓度为1%时对M372I表现出激活作用外,其它有机溶剂均对M372I AK表现抑制活力的作用。M372I AK中赖氨酸的抑制作用被解除,尤其在低浓度下可促进其活力,甲硫氨酸也在一定程度上对M372I AK活力表现出激活作用。3.对G377位点四种突变体G377D、G377F、G377Y、G377K的AK动力学研究表明:Vmax较WT AK分别提高1.93倍、9.16倍、6.55倍、7.22倍;n值分别为1.1、1.0、1.3和1.3,均低于WT的n值,表明经突变后AK的正协同性降低。突变后Km值较WT AK均有些升高。因此,选择Vmax最大的突变株G377F做酶学性质研究。结果表明:最适反应pH为9.0,较WT pH 8.5提高;最适反应温度为25℃,与WT相同;在最适条件下的稳定性与WT AK相比提高2.6h;K+、Ca2+、Mn2+、Cu2+和Fe3+在低浓度为0.2mmol/L时,对酶有激活作用;除glycerol、iso-Propyl alcohol、acetonitrile和n-butanol浓度为1%时对G377F AK表现出激活作用外,其它有机溶剂均对G377F AK表现抑制活力的作用。赖氨酸对G377F AK的抑制作用被解除,并且在浓度0.2mmol/L和1mmol/L下可促进其活力,其相对活力分别为111.5±1.5%和101.4±0.8%,甲硫氨酸也在一定程度上对G377F AK活力表现出激活作用。4.对V378位点三种突变体V378F、V378D和V378H的AK动力学研究表明:Vmax较WT AK分别提高1.93倍、5.86倍、2.01倍;n值分别为1.0、1.1和1.0,均低于WT的n值,表明经突变后AK的正协同性降低。比较野生型和三种突变体AK的Km值可知,经突变后V378D和V378F使酶与底物的亲和力增强,而V378H使酶与底物亲和力降低。因此,选择Vmax最大的突变株V378F做酶学性质研究。结果表明:最适反应pH为8.0,较WT pH 8.5降低;最适反应温度为28℃,较WT最适温度偏高;在最适条件下的稳定性与WT AK相比提高1.7h;K+、Zn2+、

关键词：北京棒杆菌天冬氨酸激酶饱和定点突变功能分析空间结构改造

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酸性环境中钙质胶结砂岩的化学损伤模型

岩土工程学报 2003年第4期25卷 395-399页

作者：李宁朱运明张平葛修润中科院寒区旱区环境与工程研究所冻土工程国家重点实验室甘肃兰州730000 西安理工大学岩土工程研究所陕西西安710048 上海交通大学岩土力学与工程研究所上海200030

针对大部分工程中常见的砂岩最可能、最不利的化学环境———酸性环境中的力学性质的衰变、弱化问题,对钙质胶结长石砂岩进行了室内不同pH值溶液的模拟试验,对所得到的抗压强度试验及CT扫描试验结果进行了分析与总结,发现砂岩中主要胶结... 详细信息

针对大部分工程中常见的砂岩最可能、最不利的化学环境———酸性环境中的力学性质的衰变、弱化问题,对钙质胶结长石砂岩进行了室内不同pH值溶液的模拟试验,对所得到的抗压强度试验及CT扫描试验结果进行了分析与总结,发现砂岩中主要胶结物CaCO3的溶解是岩石强度和变形衰减的主要原因,在此基础上利用化学动力学理论和损伤力学理论提出了可应用于酸性溶液的岩石化学损伤强度模型,并用室内实验结果对所提模型进行了检验与验证。

关键词：酸性环境钙质胶结砂岩化学损伤模型浸蚀化学动力学 CT检测

北京棒杆菌天冬氨酸激酶突变体R169H的构建及酶学性质表征

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微生物学报 2014年第6期54卷 663-669页

作者：李慧颖朱运明闵伟红詹冬玲任军吉林农业大学食品科学与工程学院小麦和玉米深加工国家工程实验室吉林长春130118

【目的】提高北京棒杆菌(Corynebacterium pekinense)中天冬氨酸激酶(aspartokinase,AK)活力。【方法】利用定点突变技术对AK基因进行突变,并将突变体转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中异源表达。重组菌经超声破碎后、利用镍柱对AK... 详细信息

【目的】提高北京棒杆菌(Corynebacterium pekinense)中天冬氨酸激酶(aspartokinase,AK)活力。【方法】利用定点突变技术对AK基因进行突变,并将突变体转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中异源表达。重组菌经超声破碎后、利用镍柱对AK进行纯化,并经SDS-PAGE和Western blot验证。通过检测酶活力比较突变体和野生型动力学变化并研究突变体和野生型的部分酶学性质。【结果】成功构建突变体R169H。经验证知,AK分子量为48kDa。突变体R169H的Vmax为226.3 U/mg·s-1,较野生型提高2.3倍。最适反应温度为26℃,与野生型经验值相同;最适反应pH为9.0,较野生型经验值8.0有所提高;在最适温度和pH值下的半衰期为5.5 h,比野生型的4h稳定性要好;代谢产物赖氨酸、苏氨酸和蛋氨酸在低浓度时对AK均具有激活作用。【结论】突变体中R169与E92间氢键消失,能够影响亚基间聚合度,降低酶对底物的亲和力,减弱代谢产物对AK的反馈抑制作用,从而使R169H中AK的Vmax提高2.3倍。

关键词：北京棒杆菌天冬氨酸激酶突变酶学性质

锦葵色素葡萄糖苷和锦葵色素半乳糖苷抑制内皮细胞氧化应激作用

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食品科学 2016年第17期37卷 201-206页

作者：朱运明黄午阳闵伟红隋中泉李春阳江苏省农业科学院农产品加工研究所江苏南京210014 吉林农业大学食品科学与工程学院吉林长春130118 上海交通大学农业与生物学院上海200240

目的:研究血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)中活性氧(reactive oxygen species,ROS)、黄嘌呤氧化酶-1(xanthine oxidase-1,XO-1)、血红素氧化酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性的影响,确定最佳AngⅡ诱导浓度,探讨不同浓度锦葵色素葡萄糖苷(malvidin-3-glucoside,Mv-3-glc)和锦葵色素半乳糖苷(malvidin-3-galactoside,Mv-3-gal)对AngⅡ诱导的血管内皮细胞氧化应激的抑制作用机理。方法:通过体外培养HUVEC,采用酶联免疫吸附分析法分别测定HUVEC中SOD活力、XO-1和HO-1含量,并采用荧光探针方法检测细胞中ROS水平变化。结果:在HUVEC中,AngⅡ可诱导XO-1的表达,抑制HO-1的表达,AngⅡ在浓度10-2 μmol/L时对HUVEC氧化应激诱导最为显著。不同浓度的Mv-3-glc、Mv-3-gal及其混合物均可显著抑制AngⅡ诱导的内皮细胞氧化应激,通过抑制XO-1蛋白过表达,增加HO-1和SOD表达量,改善细胞抗氧化防御系统,从而减少细胞内ROS水平,达到氧化保护作用,且Mv-3-glc比Mv-3-gal抗氧化活性更强。结论:锦葵色素葡萄糖苷和锦葵色素半乳糖苷具有抑制内皮细胞氧化应激的作用。

关键词：锦葵色素葡萄糖苷锦葵色素半乳糖苷内皮细胞血管紧张素Ⅱ 活性氧氧化应激

天冬氨酸激酶突变体G277K中AK基因的克隆表达及酶学性质表征

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食品科学 2014年第11期35卷 149-154页

作者：任军闵伟红詹冬玲方丽李慧颖朱运明吉林农业大学食品科学与工程学院小麦和玉米深加工国家工程实验室吉林长春130118

通过序列比对和晶体结构分析发现,天冬氨酸激酶(aspartokinase,AK)的G277位点高度保守,并与抑制剂Thr通过氢键相连,对其进行定点突变和酶学性质表征。结果表明:突变体G277K的AK最适反应条件是30℃、pH 8.5;动力学实验结果显示突变体AK... 详细信息

通过序列比对和晶体结构分析发现,天冬氨酸激酶(aspartokinase,AK)的G277位点高度保守,并与抑制剂Thr通过氢键相连,对其进行定点突变和酶学性质表征。结果表明:突变体G277K的AK最适反应条件是30℃、pH 8.5;动力学实验结果显示突变体AK的正协同效应降低,趋向于米氏酶,参数S0.5、nH、酶比活力、Vmax分别是7.05 mmol/L,1.24、964.3 U/mg、32.143 U/(mg·min);热稳定性实验显示,其30℃半衰期为2.3 h,3 h后酶活力丧失80%左右;Ni2+在低浓度时表现出显著的激活效应;有机溶剂丙三醇、异丙醇和二甲基亚砜的体积分数为1%时,对AK的酶活力有很好的激活作用,表明突变体AK对一些有机溶剂有一定的抗性;低浓度的赖氨酸和蛋氨酸对AK有激活作用。

关键词：天冬氨酸激酶克隆表达定点突变酶学性质

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趣味教学法在语文教学中的运用

中华活页文选（教师） 2012年第5期 54-56页

作者：朱运明江苏省高邮市菱塘民族初中

所谓“趣味教学法”，简言之，就是在教学过程中，针对学生与书本之间存在的“敌对状态”，采用活泼的、吸引人的形式，消除其紧张、疲劳、压抑、厌学心理，变被动为主动，从而轻松愉快地完成学习任务的一种方法。它可激励学生求知，增... 详细信息

所谓“趣味教学法”，简言之，就是在教学过程中，针对学生与书本之间存在的“敌对状态”，采用活泼的、吸引人的形式，消除其紧张、疲劳、压抑、厌学心理，变被动为主动，从而轻松愉快地完成学习任务的一种方法。它可激励学生求知，增进知识记忆，融洽师生关系，提高教学效率。

关键词：趣味教学法语文教学融洽师生关系激励学生教学过程厌学心理学习任务知识记忆

引取回乡风情之水,浇灌校本课程之花——回民文化在校本课程中的开发和利用

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中华活页文选（教师） 2015年第4期 60-62页

作者：朱运明江苏省高邮市菱塘民族初中

2001年6月，国务院发布了《基础教育改革和发展的决定》，同时，教育部印发了《基础教育课程纲要》，进一步加强了“实行国家、地方、学校三级课程管理”“学校在执行国家课程和地方课程的同时，应适应当地社会、经济发展的情况，结合... 详细信息

2001年6月，国务院发布了《基础教育改革和发展的决定》，同时，教育部印发了《基础教育课程纲要》，进一步加强了“实行国家、地方、学校三级课程管理”“学校在执行国家课程和地方课程的同时，应适应当地社会、经济发展的情况，结合本校的传统和优势，学生的兴趣和需要，开发或选用适合本校的课程。”

关键词：开发和利用校本课程回民文化基础教育改革风情三级课程管理国家课程 2001年

浅谈散文教学中的审美教育——以朱自清《背影》为例

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中华活页文选（教师） 2019年第4期 65-67页

作者：朱运明江苏省高邮市菱塘教育中心校

《义务教育语文课程标准(2011年版)》明确指出:“语文教学的重要内容之一,就是培养学生高尚的道德情操和健康的审美情趣,形成正确的价值观和积极的人生态度。”可见对学生进行审美教育是语文教学中的重要目标之一。语文教材中的散文作... 详细信息

《义务教育语文课程标准(2011年版)》明确指出:“语文教学的重要内容之一,就是培养学生高尚的道德情操和健康的审美情趣,形成正确的价值观和积极的人生态度。”可见对学生进行审美教育是语文教学中的重要目标之一。语文教材中的散文作品通过美的语言创造美的意境,塑造美的形象,其中蕴含着丰富的美育因素。本文以朱自清的散文《背影》为例,谈谈如何对初中生进行审美教育。

关键词：教学教育散文语文审美