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基于肠炎沙门菌CZ14-1的减毒疫苗候选株的构建与免疫保护效力的评价

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基于肠炎沙门菌CZ14-1的减毒疫苗候选株的构建与免疫保护效力的评...

作者：朱悦扬州大学

学位级别：硕士

肠炎沙门菌是一种重要的食源性病原菌,宿主谱广泛且具有侵害性,具有重要的公共卫生意义。利用抗生素治疗虽能达到一定的效果,但极易导致多重耐药菌株的产生及肉产品中的药物残留。因此,研制出安全、有效的疫苗是预防和控制畜禽肠炎沙门... 详细信息

肠炎沙门菌是一种重要的食源性病原菌,宿主谱广泛且具有侵害性,具有重要的公共卫生意义。利用抗生素治疗虽能达到一定的效果,但极易导致多重耐药菌株的产生及肉产品中的药物残留。因此,研制出安全、有效的疫苗是预防和控制畜禽肠炎沙门菌病的有效措施。随着基因工程和分子生物学技术的发展,将沙门菌的重要毒力基因敲除,构建沙门菌减毒活疫苗的研究得到了国内外的广泛关注。减毒活疫苗具有使用方便、免疫原性好、毒力弱等优点,即使在“免疫空白期”也能产生良好的免疫保护力。此外,通过基因敲除可获得血清学上的阴性标记,建立区分野毒感染和疫苗接种动物的(Differentiating Infected and Vaccinated Animals,DIVA)检测方法,从而为养殖与生产过程区分疫苗接种动物和野生型细菌感染动物提供依据。本研究联合应用λ-Red同源重组系统和自杀质粒介导的同源重组方法,分别将肠炎沙门菌CZ14-1的毒力相关基因spiC和外膜蛋白相关基因nmpC以及脂多糖O-抗原链合成相关基因rfaL敲除,在构建CZ14-1AspiC单缺失株的基础上构建了两株双基因缺失株CZ14-1ΔspiCΔnmpC与CZ14-1ΔspiCΔrfaL,并评价了两株双基因缺失株生理生化特性以及对不同品种雏鸡的致病性,同时对双缺失株的免疫保护效力进行了初步探究,为肠炎沙门菌减毒活疫苗的研究提供了材料和依据。1.减毒肠炎沙门菌CZ14-1ΔspiCAnmpC与CZ14-1ΔspiCΔrfaL缺失株的构建与鉴定以肠炎沙门菌CZ14-1为模板,通过重组自杀质粒pGMB152-ΔspiC/Cm介导的同源重组系统,敲除肠炎沙门菌CZ14-1的spiC基因,成功构建CZ14-1ΔspiC缺失株。随后利用PCR技术扩增出两端与肠炎沙门菌基因nmpC上、下游序列同源且中间为氯霉素抗性基因的DNA片段和两端与肠炎沙门菌基因rfaL上、下游序列同源且中间为氯霉素抗性基因的DNA片段,电击转化入含有质粒pKD46的CZ14-1ΔspiC中,分别获得替换nmpC和rfaL的阳性克隆(CZ14-1ΔspiCΔnmpC::cat和CZ14-1ΔspiCΔrfaL::cat),再电转入温度敏感性型质粒pCP20以消除氯霉素抗性基因,通过PCR以及测序鉴定,成功构建了肠炎沙门菌双基因缺失株 CZ14-1ΔspiCΔnmpC和CZ14-1ΔspiCΔrfaL。对野生株CZ14-1和缺失株CZ14-1ΔspiCΔnmpC、CZ14-1ΔspiCΔrfaL的体外生长特性、生化特性进行鉴定,结果表明,spiC和nmpC基因的缺失对细菌的生长特性和生化特性无显著影响,但是rfaL基因的缺失会使细菌的生长速度减缓,并且对甘露醇的代谢能力发生了变化。2.减毒肠炎沙门菌CZ14-1ΔspiCΔnmpC和CZ14-1ΔspiCΔrfaL缺失株免疫保护效力的初步研究动物实验结果显示:肠炎沙门菌CZ14-1ΔspiCΔnmpC在3日龄海兰白蛋鸡上的LD50为1.58 X 107CFU,细菌CZ14-1ΔspiCΔrfaL在3日龄海兰白蛋鸡上的LD50为7.76 ×106CFU。与野生株CZ14-1的LD50相比(约为2.24× 104CFU),毒力约下降了 705倍和346倍。细菌CZ14-1ΔspiCΔnmpC在3日龄SPF雏鸡上的LD50为2.57 × 107CFU,细菌CZ14-1ΔspiCΔrfaL在3日龄海SPF雏鸡上的LD50为4.07× 106CFU。与野生株CZ14-1的LD50相比(约为1.26× 104CFU),毒力分别约下降了 2030倍和323倍。与野生株相比,在不同品种的雏鸡上,两株双缺失株的毒力均明显下降。将缺失株CZ14-1ΔspiCΔnmpC和CZ14-1ΔspiCΔrfaZ分别以肌肉注射的途径免疫7日龄的海兰白雏鸡,在14日龄时进行二次免疫,10天后以肌肉注射的方式人工感染野生型菌株 CZ14-1,剂量为 2.0 X 109CFU/只。结果显示,CZ14-1ΔspiCΔnmpC 和 CZ14-1ΔspiCΔrfaL能够对野生株的大剂量攻毒分别产生80%和75%的保护力,未免疫组的存活率仅有5%;且免疫组体重净增量也较未免疫组有明显提高。在体内分布与定植试验中,将野生株和2株双缺失株以肌肉注射的方式接种3日龄的海兰白雏鸡,在肝脏和回肠内,两株缺失株在接种后21天被机体清除。利用间接ELISA检测血清中的IgG抗体,结果显示,两株缺失株在免疫后1周即可在血清中检测到IgG抗体,抗体水平在随后的数周逐渐上升并在免疫后第5周达到高峰。荧光定量PCR检测CZ14-1Δsp/CΔnmpC和CZ14-1ΔspiCΔrfaL在免疫过程中脾脏细胞因子的表达结果显示:与对照组相比,IFN-γ和IL-6表达水平

关键词：肠炎沙门菌CZ14-1 spiC基因 nmpC基因 rfaL基因减毒活疫苗 DIVA 免疫保护效力

“全面二孩”政策下天津市育龄妇女生育意愿的影响因素分析

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“全面二孩”政策下天津市育龄妇女生育意愿的影响因素分析

作者：朱悦天津商业大学

学位级别：硕士

“全面二孩”政策是针对人口老龄化现实问题提出的提高人口出生率的生育政策。在政策实施前,天津市面临着严重的老龄化状况、出生性别比失衡和低出生率的困境。随着“全面二孩”政策的逐步实施,政策中的一些问题逐渐显现,主要是由于妇... 详细信息

“全面二孩”政策是针对人口老龄化现实问题提出的提高人口出生率的生育政策。在政策实施前,天津市面临着严重的老龄化状况、出生性别比失衡和低出生率的困境。随着“全面二孩”政策的逐步实施,政策中的一些问题逐渐显现,主要是由于妇女的生育意愿低下。因此需要提高目标人群生育意愿,确保“全面二孩”政策的实施效果。本文分析了天津市“全面二孩”政策的具体内容,并指出该政策需要进一步完善。为了深入详细研究其存在的问题,本文将研究重点放在对适龄妇女生育意愿进行调查。主要采用随机发放调查问卷,然后对数据进行统计分析,以及对部分适龄生育家庭进行面对面访谈的形式,系统性探究“全面二孩”政策下女性生育意愿较低的原因。通过对以上调查内容的汇总分析,得出以下结论:女性生育意愿不高除了由于政策本身规定与天津市现实错位以外,还受到孩子养育成本过高、医疗教育资源紧缺、一孩态度极端、高龄妇女生育风险大和女性重返就业岗位困难的种种影响。为了提高妇女生育意愿,充分发挥“两孩”政策的实施效果,达到政策目的,本文以政策周期理论、人口适度调控理论和社会福利理论为支撑,依据调查问卷中反映出的问题和面对面访谈中发现的政策不足,针对性的提出了以下几点提高女性生育意愿的对策建议:第一,在政策制定环节中,完善政策制定本身的缺陷和不足,明确相关部门的责任和政策实施细节;第二,在政策执行过程中,通过注重区域生育福利制度的差异性、高龄产妇孕期服务的全程化,逐步健全鼓励育龄妇女生育的制度;通过在政府层面上制定专门法律以及按比例安排女性就业制度,破解妇女就业歧视的问题,使女性在生育后能够顺利重返工作岗位;在家庭和社会层面上关注一孩的身心健康问题以及构建多样化儿童看护体系等。

关键词： “全面二孩”政策生育意愿天津市

产业集聚、人口规模与雾霾污染:基于省际面板数据的实证

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统计与决策 2020年第7期36卷 61-65页

作者：修国义朱悦王俭哈尔滨理工大学经济与管理学院哈尔滨150000

文章基于2005-2016年中国省际面板数据,运用面板门槛模型和空间杜宾模型,研究产业集聚与人口规模交互作用对雾霾污染的影响。结果表明:受人口规模因素影响,产业集聚对雾霾污染存在单一门槛效应;通过Moran散点图及趋势图,发现产业集聚、... 详细信息

文章基于2005-2016年中国省际面板数据,运用面板门槛模型和空间杜宾模型,研究产业集聚与人口规模交互作用对雾霾污染的影响。结果表明:受人口规模因素影响,产业集聚对雾霾污染存在单一门槛效应;通过Moran散点图及趋势图,发现产业集聚、人口规模与雾霾污染具有显著的空间自相关性,且三者具有协同变动趋势,雾霾污染的空间溢出效应愈加强烈;纳入空间权重矩阵后发现,长期内产业集聚与人口规模的相互作用可抑制雾霾污染。对外开放度、产业结构、城市化率以及汽车尾气可加剧雾霾污染,人口素质、地区基础设施以及经济发展水平可对雾霾污染产生控制作用。

关键词：产业集聚人口规模雾霾污染门槛效应空间效应

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嗅鞘细胞修复脊髓损伤轴突髓鞘化的研究与进展

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第B12期12卷 10535-10538页

作者：张勇朱悦沈阳医学院奉天医院骨外二科辽宁省沈阳市110024 中国医科大学附属第一医院骨科辽宁省沈阳市110001

髓鞘的完整性是保证其包裹的轴突具备正常生理功能的前提,脊髓的损伤往往伴有不同程度的髓鞘损伤,因此如何使损伤的轴突重新获得髓鞘化成为损伤轴突再生的关键。早期对嗅鞘细胞的研究表明,嗅鞘细胞可以促进并参与损伤脊髓的髓鞘再生,从... 详细信息

髓鞘的完整性是保证其包裹的轴突具备正常生理功能的前提,脊髓的损伤往往伴有不同程度的髓鞘损伤,因此如何使损伤的轴突重新获得髓鞘化成为损伤轴突再生的关键。早期对嗅鞘细胞的研究表明,嗅鞘细胞可以促进并参与损伤脊髓的髓鞘再生,从而达到使损伤轴突再生,恢复其生理功能目的。然而随研究的广泛深入,近期得出了不同的结论,即嗅鞘细胞并不参与损伤轴突的再次髓鞘化,其促进轴突髓鞘化并生长的机制需进一步研究。

关键词：嗅鞘细胞髓鞘再生修复综述文献

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安多藏区宗教文化研究新馔——读丹曲博士《拉卜楞寺藏传佛教文化论稿》

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世界宗教研究 2011年第5期 184-187页

作者：朱悦梅西北民族大学历史文化学院

安多(Amdo)地区,是青藏高原东部的一个重要藏族文化地区,常与卫藏和川康并列。范围大致相当于青海省的海北、海南、黄南、果洛四个藏族自治州、甘肃省的甘南藏族自治州和四川省的阿坝藏族羌族自治州北部。位处甘南夏河的著名寺院拉卜楞... 详细信息

安多(Amdo)地区,是青藏高原东部的一个重要藏族文化地区,常与卫藏和川康并列。范围大致相当于青海省的海北、海南、黄南、果洛四个藏族自治州、甘肃省的甘南藏族自治州和四川省的阿坝藏族羌族自治州北部。位处甘南夏河的著名寺院拉卜楞,是这个区域中重要的宗教文化中心之一。丹曲博士近期出版的学术新馔

关键词：拉卜楞寺丹曲寺主藏传佛教文化嘉木样活佛文化史安多地区安多藏区博士

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上海软土非饱和压缩特征

同济大学学报（自然科学版） 2011年第10期39卷 1458-1462页

作者：叶为民朱悦铭陈宝叶斌同济大学岩土及地下工程教育部重点实验室上海200092 教育部城市环境可持续发展联合研究中心上海200092

通过室内吸力控制的非饱和1维压缩试验,获得了上海软土在不同吸力下的压缩—回弹—再压缩曲线,进而获取了非饱和土2个重要压缩性指标———回弹指数和压缩指数;分析探讨了基质吸力对非饱和土强度的影响,并采用Alonso弹塑性模型对试验实... 详细信息

通过室内吸力控制的非饱和1维压缩试验,获得了上海软土在不同吸力下的压缩—回弹—再压缩曲线,进而获取了非饱和土2个重要压缩性指标———回弹指数和压缩指数;分析探讨了基质吸力对非饱和土强度的影响,并采用Alonso弹塑性模型对试验实测数据进行了拟合分析,获取了前期固结压力随基质吸力的变化关系曲线.试验结果表明,随着基质吸力的增加,土的压缩性不断降低;当前吸力条件下,孔隙比随竖向压力变化曲线阶段特征明显,包括弹性阶段、弹塑性阶段以及回弹与再压缩阶段;非饱和压缩过程中,前期固结压力随基质吸力减小而减小,土的孔隙比与基质吸力和竖向应力之间呈曲面关系.

关键词：上海软土非饱和土压缩试验吸力

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中性粒细胞/淋巴细胞比值及血小板相关指标与OSAS患者严重程度的...

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作者：朱悦安徽医科大学

学位级别：硕士

目的探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)、血小板平均体积(MPV)在阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)中的临床应用价值。方法采用回顾性病例对照研究,收集于2016年1月-2018年3月于本院门诊、住院期间确诊为OSAS... 详细信息

目的探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)、血小板平均体积(MPV)在阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)中的临床应用价值。方法采用回顾性病例对照研究,收集于2016年1月-2018年3月于本院门诊、住院期间确诊为OSAS的84名患者相关实验室资料,根据呼吸紊乱指数(AHI)分为轻、中、重三组,并收集同期因单纯鼾症于本院就诊的26名病人作为对照组,应用多导睡眠监测仪(PSG)记录患者相关睡眠参数,并检测外周血白细胞细胞(WBC)、中性粒细胞计数(NC)、淋巴细胞计数(LC)、血小板计数(PLT)、血小板分布宽度(PDW)、MPV、NLR、PLR、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、BMI及夜间基础心率等指标。比较4组上述各指标之间有无差异,行二元logistic多因素回归分析,探讨反映OSAS患者严重程度的危险因素,行Pearson检验对NLR、PLR、MPV与AHI进行相关性分析,以ROC曲线评价各指标对OSAS患者的临床应用价值。结果***、PDW、MPV与AHI之间存在显著线性相关性(P<0.05),进一步发现NLR、PDW、MPV与AHI均呈现正相关(r=0.332,P=0.002;r=0.480,P<0.001;r=0.470,P<0.001),而PLR与AHI无明显相关性(r=-0.166,P=0.130)。***预测OSAS的ROC曲线下面积为0.836,最佳截断值为1.685,灵敏度66%、特异度92%、阳性预测值96.5%、阴性预测值45.3%。MPV预测OSAS的ROC曲线下面积为0.733,最佳截断值为11.85,灵敏度51.2%、特异度96.2%、阳性预测值97.7%、阴性预测值62.1%。3.各组间BMI、TC、TG、LDL-C、夜间平均心率、NLR、PDW、MPV、最低氧饱和度、平均氧饱和度之间存在统计学差异(P<0.01)。4.年龄介于40-60岁之间的患者、BMI值较高、夜间心率较快均是OSAS患者的独立危险因素(P<0.05)。结论外周血NLR、MPV对OSAS患者严重程度的判断存在重要的预测价值,可以提示临床医师及时识别高危患者,适时采取干预措施,进一步评估和识别心血管危险因素。以上述生物标记物为指导,在门诊和临床诊疗过程中具有重要的临床辅助诊断价值及较好的应用前景。

关键词：阻塞性睡眠呼吸暂停综合征中性粒细胞/淋巴细胞比值血小板/淋巴细胞比值血小板平均体积

电针背俞穴为主对痰浊中阻型超重及肥胖2型糖尿病患者临床疗效和胰岛素抵抗的影响

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电针背俞穴为主对痰浊中阻型超重及肥胖2型糖尿病患者临床疗效和...

作者：朱悦安徽中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过观察电针胃脘下俞穴、脾俞穴,同时针刺丰隆穴对中医证属痰浊中阻型的超重与肥胖2型糖尿病(T2DM)患者的临床疗效,以及胰岛素抵抗(IR)的影响,为中医治疗此类疾病提供新的临床思路,并增加一定的理论基础与实践经验。方法:采用随... 详细信息

目的:通过观察电针胃脘下俞穴、脾俞穴,同时针刺丰隆穴对中医证属痰浊中阻型的超重与肥胖2型糖尿病(T2DM)患者的临床疗效,以及胰岛素抵抗(IR)的影响,为中医治疗此类疾病提供新的临床思路,并增加一定的理论基础与实践经验。方法:采用随机数字表法,将60例符合纳入标准的研究对象分为观察组和对照组,每组30例。其中,对照组予以常规基础治疗,包括生活方式干预、饮食指导、血糖控制和纠正脂质代谢紊乱等。观察组在对照组治疗基础上加用电针背俞穴为主治疗,取穴:胃脘下俞穴、脾俞穴、丰隆穴。治疗上1次/日,6次/周,每周休息1天,1周为1个疗程,共4个疗程。治疗结束后观察两组患者治疗前后的肥胖指标(体重、BMI)、血糖指标(FPG、2h PG)、血脂指标(TG、LDL-C)、胰岛素指标(FINS、HOMA-IR)和中医证候积分(TCM syndrome)的变化,并对其临床疗效进行评价。结果:(1)一般资料比较:两组患者性别、年龄、病程具有可比性(P>0.05)。(2)基线资料比较:两组患者实验室相关指标(体重、BMI、FPG、2h PG、Hb A1c、TG、LDL-C、FINS、HOMA-IR),中医证候积分均具有可比性(P>0.05)。(3)疗效指标比较:(1)组内比较:两组患者治疗后的各项指标均较治疗前有所下降(P0.05);在降低血脂与改善胰岛素抵抗程度方面,观察组明显优于对照组(P0.05)。结论:电针背俞穴为主能够有效降低痰浊中阻型超重及肥胖T2DM患者的血脂水平,减轻胰岛素抵抗,并显著改善患者中医证候,方法安全有效,值得临床参考。

关键词：电针背俞穴超重及肥胖 2型糖尿病胰岛素抵抗

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数字普惠金融对产业结构升级的影响机制研究

数字普惠金融对产业结构升级的影响机制研究

作者：朱悦江西财经大学

学位级别：硕士

在当今时代,我国用于经济增长的方式较以往相比已经发生很大的变化,不再追求高速增长,着重强调高质量的转变,目前正处于经济转型的重要时间节点。产业结构升级则是实现转变粗放型经济发展方式的重要方法,是提升经济高质量发展的必不可... 详细信息

在当今时代,我国用于经济增长的方式较以往相比已经发生很大的变化,不再追求高速增长,着重强调高质量的转变,目前正处于经济转型的重要时间节点。产业结构升级则是实现转变粗放型经济发展方式的重要方法,是提升经济高质量发展的必不可少的步骤。在经济资源配置的环节中金融处于一个核心地位,在产业结构升级的过程中起到了一个至关重要的作用。但是,通过观察可以看出在传统金融中会出现很多不足之处,尤其金融排斥这个问题十分显眼亟待解决,为了加强金融对实体经济的服务能力,可以采取对供给侧进行结构性改革。数字普惠金融从生产端出发借助于数字技术,这样可以避开传统型金融的弊端,不再受制于时间和空间的约束,促使中小企业和贫困地区的人们都有机会得到相同机会的服务,门槛的水平较低,这样能够大大缓解由于买卖双方沟通不顺畅带来的额外交易成本,同时也能保证中小企业有机会筹集所需的资金,保证它可以有足够的资金对自己产品进行更新和改革,进而促进技术的更新和发展,从而有利于产业结构进行升级。同时,数字普惠金融能够解决低收入群体以及边远地区农民的资金短缺问题,能够为其提供资金支持从而使得个人的收入和消费得到很大的提升,从需求端解决了产业结构升级的难题,使得金融相关的资源得到合理地分配。因此,本文通过数字普惠金融来研究其对产业结构升级具有有何作用,此研究目的具有十分重要的理论与现实意义。本研究的具体内容:首先,研究先对文章的背景和意义进行阐述,结合已有的研究成果,对文章采用的研究思路以及研究方法的原理进行了具体的介绍,提出了本文可能存在的创新点以及研究不足之处,为后文研究做好铺垫。其次,分别对中国数字普惠金融、产业结构升级的概念和理论进行了阐述,理论分析二者之间可能存在的作用机制。随后,构建了数字普惠金融的指标测度、技术进步的指标和产业结构升级测度方式。最后,为了验证数字普惠金融与产业升级之间存在何种关系,利用了面板模型进行检验,同时还进行了异质性检验再次验证两者的关系。此外还将数字普惠金融分为覆盖广度、使用深度和数字化程度三维度,利用中介效用模型实证检验技术进步是否在数字普惠金融三维度影响产业结构升级的过程中是否发挥着中介效应。本文通过理论和实证研究发现:第一,数字普惠金融显著影响着产业结构升级;第二,覆盖广度、使用深度与数字化程度对产业结构升级的积极作用依次递减,两者之间存在一种高度相关性关系,在高教育水平以及高固定资产投入水平地区表现得更为显著;第三,技术进步在覆盖广度、使用深度、数字化程度促进产业结构升级的过程中具有中介效应。根据以上研究结论,本文针对性地提出一些对策建议。

关键词：数字普惠金融产业结构升级技术进步中介效应