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秦川牛Snail1克隆、表达特性分析及其对牛脂肪细胞增殖的作用研究

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中国农业科学 2024年第13期57卷 2674-2686页

作者：朱炳霖于嘉莉陈嘉玥田媛万媛刘晨阳王晓宇王苗力成功西北农林科技大学动物科技学院国家肉牛改良中心

【目的】肉牛肌内脂肪沉积与牛肉的风味、多汁性和嫩度密切相关。脂肪沉积过程表现为脂肪细胞的增殖（数量增多）和分化（脂质生成），受到了多基因协同调控。前人研究发现，小鼠中Snail1可以参与肌肉发育和脂质稳态调控，但其在牛脂肪... 详细信息

【目的】肉牛肌内脂肪沉积与牛肉的风味、多汁性和嫩度密切相关。脂肪沉积过程表现为脂肪细胞的增殖（数量增多）和分化（脂质生成），受到了多基因协同调控。前人研究发现，小鼠中Snail1可以参与肌肉发育和脂质稳态调控，但其在牛脂肪生成过程中的作用仍未知，有待进一步研究。【方法】以秦川牛为研究对象，克隆得到Snail1 CDS区序列，构建Snail1时空表达谱，运用生物信息学软件对其功能结构及靶基因进行预测。进一步，通过RNAi干扰结合CCK8、EdU、细胞流式及实时荧光定量PCR等方法探究Snail1对牛脂肪细胞增殖的影响。【结果】秦川牛Snail1与NCBI公布序列相比存在2处碱基同义突变，其在秦川牛新生牛肺、肾周脂肪、小肠呈现较高丰度表达；而在成年牛中，Snail1在肾周脂肪组织中的表达量最高，背最长肌中的表达量次之，肺脏组织中的表达量最低。生物信息学分析发现，Snail1启动子区存在1个651 bp CpG岛及C/EBP、PPARα等与脂肪生成相关的转录因子结合位点。CKⅠ(Ser92/96)、CKⅡ（Ser25/119,Thr89）、CDK1(Ser13/104/112/119/143/183/214/221)、CDK5(Ser105/107）等多个细胞周期相关激酶可能参与了Snail1蛋白的磷酸化修饰。通过对牛已注释基因启动子区提取、靶基因预测及KEGG动态网络构建发现，成脂相关的MAPK、PI3K-Akt、mTOR等信号通路为Snail1参与脂肪生成相关的潜在节点信号通路。进一步，通过RNAi干扰试验对其功能研究表明，Snail1下调促进了牛前体脂肪细胞的增殖，增加了复制期阳性细胞的比例（P<0.01）且促进了G1/S细胞周期转换。RT-qPCR和Western-blot检测表明，干扰Snail1显著上调了促增殖调控基因CCNB1、CCND2、CDK2、CDK4(P<0.05)和蛋白的表达。【结论】Snail1在新生牛肾周脂肪及成年牛肾周脂肪和背最长肌中表达量相对较高。干扰Snail1促进了牛前体脂肪细胞的增殖、G1/S细胞周期转变和CCNB1、CCND2、CDK2、CDK4等增殖相关基因表达；CKⅠ、CKⅡ、CDK1/5等多个细胞周期相关激酶可能通过磷酸化修饰Snail1蛋白进而参与细胞增殖调控，而MAPK、PI3K-Akt、mTOR等为Snail1影响牛脂肪细胞增殖潜在的关键节点通路。研究结果为进一步探究Snail1参与牛脂肪生成作用机制奠定了基础。

关键词：牛 Snail1 脂肪沉积 KEGG动态网络 RNAi 细胞增殖

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进击的小周老师

中学生天地（初中综合版）（A版） 2024年第10期 42-45页

作者：徐亦可朱大风(图) 浙江省杭州高级中学不详

开学后的某天中午,我从食堂回来,正和好友旁若无人地大声说笑,猛然间发现不知从哪里冒出来一位高挑美女。她翻着三分无奈、四分不屑的白眼,审视着吵闹如一锅粥的班级。虽然烫着凸显成熟的大波浪卷发,但尚显稚嫩的脸庞暴露了她比我们大... 详细信息

开学后的某天中午,我从食堂回来,正和好友旁若无人地大声说笑,猛然间发现不知从哪里冒出来一位高挑美女。她翻着三分无奈、四分不屑的白眼,审视着吵闹如一锅粥的班级。虽然烫着凸显成熟的大波浪卷发,但尚显稚嫩的脸庞暴露了她比我们大不了几岁的事实——看起来实在缺乏威力,于是我们吵闹依旧。

关键词：小周食堂四分

共读《乡土中国》之“法” “无讼”的可能性

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十几岁 2024年第18期 18-22页

作者：朱来青肖中(统筹) 北京中学

法治秩序的建立不能单靠制定若干法律条文和设立若干法庭,重要的还得看人民怎样去应用这些设备。更进一步,在社会结构和思想观念上还先得有一番改革。——《乡土中国·无讼》内容简述《无讼》一章,重在探讨法律如何下乡、法治秩序如何... 详细信息

法治秩序的建立不能单靠制定若干法律条文和设立若干法庭,重要的还得看人民怎样去应用这些设备。更进一步,在社会结构和思想观念上还先得有一番改革。——《乡土中国·无讼》内容简述《无讼》一章,重在探讨法律如何下乡、法治秩序如何取代礼治秩序等社会命题。费孝通认为,民众对讼师和讼事由贬至褒的态度的转变,体现了社会性质由礼治社会到法治社会的转变。

关键词：法治秩序无讼礼治社会《乡土中国》讼师礼治秩序乡土中国法治社会

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基于多尺度驱动因子的乡村聚落分区优化

价值工程 2024年第29期43卷 59-61页

作者：朱芷晴广州市城市规划勘测设计研究院有限公司广州510060 广东省城市感知与监测预警企业重点实验室广州510060 广州市资源规划和海洋科技协同创新中心广州510060

在城镇化高速发展背景下,乡村衰退是必然现象。乡村聚落分区是在乡村衰退趋势下促进乡村地区发展的有效手段,因此把握乡村发展演化规律,因地制宜地制定分区策略尤为重要。本研究以江苏省为例,采用一种基于多尺度驱动因子的渐进式分区方... 详细信息

在城镇化高速发展背景下,乡村衰退是必然现象。乡村聚落分区是在乡村衰退趋势下促进乡村地区发展的有效手段,因此把握乡村发展演化规律,因地制宜地制定分区策略尤为重要。本研究以江苏省为例,采用一种基于多尺度驱动因子的渐进式分区方法将江苏省乡村聚落划分为城乡融合区、集聚提升区、弹性发展区和搬迁撤并区,并根据各类型区域乡村发展特点,因地制宜地提出乡村聚落重构的优化策略。

关键词：乡村聚落多尺度分区优化

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那年烟花特别多

中学生天地（初中综合版）（A版） 2024年第2期 30-31页

作者：蔡芸朱大凤(图) 瑞安市安阳高级中学不详

寒冬的夜空,烟花齐放,无比绚烂,人群欢呼。每当此时,我都会想起在天上的祖父。母亲生产住院,无人照料的我便被寄养在祖父家。祖父待我极好,只是那时我从未意识到。祖父家有一个后院,院中有一棵大树。每次祖父费大劲做好饭菜唤我去吃时,... 详细信息

寒冬的夜空,烟花齐放,无比绚烂,人群欢呼。每当此时,我都会想起在天上的祖父。母亲生产住院,无人照料的我便被寄养在祖父家。祖父待我极好,只是那时我从未意识到。祖父家有一个后院,院中有一棵大树。每次祖父费大劲做好饭菜唤我去吃时,我却不愿乖乖听话。

关键词：烟花寄养听话

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逃避可耻但有用?

中学生天地（高中综合版）（B版） 2024年第10期 34-37页

作者：重炮朱大凤(图) 不详

“逃避可耻但有用”,这是我一直以来信奉的人生信条。记得小时候,我不小心将母亲珍藏的玉镯打碎,哭喊着向她讨饶,得到的却是劈头盖脸的一通打骂。从那时起,我的心中便萌生了一个念头:如果我不小心犯了错误,却不告诉任何人,是否就能免于... 详细信息

“逃避可耻但有用”,这是我一直以来信奉的人生信条。记得小时候,我不小心将母亲珍藏的玉镯打碎,哭喊着向她讨饶,得到的却是劈头盖脸的一通打骂。从那时起,我的心中便萌生了一个念头:如果我不小心犯了错误,却不告诉任何人,是否就能免于受罚呢?随着时光的流逝,这个古怪的念头在我的心底逐渐生根并茁壮成长。就这样,我怀着一腔青涩懵懂,跌跌撞撞地来到了我的15岁。一我们这一届赶上了文理分科的末班车,高一下学期,宿舍成员将面临大洗牌。上学期期末,听闻我的室友纷纷选择了文科,几乎没有任何的犹豫,我在志愿表上的“理科”一栏重重地打上了钩。就这样,我巧妙地避开了那五名令我感到不快的室友,开始憧憬全新的宿舍生活。

关键词：文理分科人生信条宿舍成员宿舍生活茁壮成长逃避大洗牌

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宁陕：“三举措”确保优抚资金发放到位

宁陕：“三举措”确保优抚资金发放到位

猪流行性腹泻病毒非结构蛋白Nsp8与宿主细胞互作蛋白的筛选与鉴定

西北信息报

作者：贺孝辉唐慧

本报讯（记者贺孝辉通讯员唐慧）为进一步做好优抚对象优待抚恤工作，近年来，宁陕县财政局坚持效率优先、准确到位、公开透明，多举措做好优抚资金发放，确保优抚对象待遇及时落实到位，保障各类退役士兵的基本生活，提高优抚对象... 详细信息

本报讯（记者贺孝辉通讯员唐慧）为进一步做好优抚对象优待抚恤工作，近年来，宁陕县财政局坚持效率优先、准确到位、公开透明，多举措做好优抚资金发放，确保优抚对象待遇及时落实到位，保障各类退役士兵的基本生活，提高优抚对象生活质量。坚持效率为先，确保资金保障。......

关键词：优抚对象退役士兵

来源： cnki报纸评论

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微生物学报 2024年第10期64卷 3932-3944页

作者：涂赟于瑞明张莉萍王永录潘丽刘霞杜晓华刘新生甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730046

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是一种能引起严重腹泻、脱水的肠道病毒,PEDV的广泛流行对生猪养殖产业造成巨大经济损失,目前仍无有效的预防和治疗手段。Nsp8是一种参与PEDV复制的重要非结构蛋白,其存在相互... 详细信息

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是一种能引起严重腹泻、脱水的肠道病毒,PEDV的广泛流行对生猪养殖产业造成巨大经济损失,目前仍无有效的预防和治疗手段。Nsp8是一种参与PEDV复制的重要非结构蛋白,其存在相互作用的宿主蛋白尚不清楚。【目的】筛选与PEDV Nsp8互作宿主蛋白,初步探究互作宿主蛋白对PEDV复制的影响,为寻找PEDV新的关键性治疗靶点提供理论基础。【方法】利用真核表达载体pcDNA3.1(+)成功构建PEDV Nsp8真核表达质粒,通过免疫共沉淀、质谱分析及激光共聚焦等技术筛选能够与其相互作用的宿主蛋白,进一步在LLC-PK细胞中通过过表达、敲低等方法探究互作宿主蛋白对PEDV复制的影响。【结果】质谱检测筛选到Nsp8潜在互作宿主蛋白36个,验证了宿主蛋白热休克蛋白成员8(heat shock protein member 8,HSPA8)与Nsp8相互作用,在LLC-PK细胞中过表达HSPA8能够剂量依赖性抑制Nsp8蛋白过表达,而且在蛋白质和转录水平显著剂量依赖性抑制PEDV复制;干扰内源性HSPA8表达能够显著促进PEDV复制,TCID50和间接免疫荧光试验检测(indirect immunofluorescent assay,IFA)结果进一步证明了HSPA8抑制PEDV复制。【结论】本研究筛选出PEDV Nsp8的互作宿主蛋白HSPA8,并且证明HSPA8能显著抑制PEDV复制,为设计以HSPA8为靶点的预防或治疗药物提供新思路。

关键词：猪流行性腹泻病毒 Nsp8 免疫共沉淀技术 HSPA8

质量管理对消毒供应室手术室器械清洗质量的影响

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中国医疗器械信息 2024年第4期30卷 166-169页

作者：朱幼莲上海市嘉定区中心医院上海201800

目的:分析质量管理在消毒供应室手术室中对器械清洗质量的影响。方法:对本院消毒供应室在2022年1月~2022年12月负责清洗包装的4833件手术室器械作为观察组观察对象,同期另选4833件手术室器械作为对照组观察对象,对照组实施常规管理,观... 详细信息

目的:分析质量管理在消毒供应室手术室中对器械清洗质量的影响。方法:对本院消毒供应室在2022年1月~2022年12月负责清洗包装的4833件手术室器械作为观察组观察对象,同期另选4833件手术室器械作为对照组观察对象,对照组实施常规管理,观察组实施质量管理,对比两组管理相关数据。结果:观察组手术室器械清洗、包装、灭菌、放发、表格记录合格率、工伤、设备、布局、流程、环境评分均高于对照组(P<0.05);观察组手术室器械管理中出现的器械运输不及时、器械数目有误、器械损坏及器械遗失、工作人员手细菌量、空气中细菌量、器械表面细菌量均低于对照组(P<0.05)。结论:质量管理在消毒供应室的应用可以有效提高手术室器械的清洁和包装质量,以及环境卫生监测结果,降低器械丢失和损坏的概率,工作人员对质量管理非常满意。

关键词：质量管理消毒供应室手术室器械清洗质量影响