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抗人L-PGDS基因工程抗体的构建及表达

抗人L-PGDS基因工程抗体的构建及表达

作者：朱国华南京师范大学

学位级别：硕士

Lipocalin型前列腺素D合成酶(Lipocalin-type Prostagladin D Synthase,L-PGDS)亦称β-trace蛋白,是机体组织屏障的主要成分,属Lipocal in家族。L-PGDS主要分布于哺乳动物的中枢神经系统和雄性生殖器官,并分泌至脑脊液、血清、精液、尿... 详细信息

Lipocalin型前列腺素D合成酶(Lipocalin-type Prostagladin D Synthase,L-PGDS)亦称β-trace蛋白,是机体组织屏障的主要成分,属Lipocal in家族。L-PGDS主要分布于哺乳动物的中枢神经系统和雄性生殖器官,并分泌至脑脊液、血清、精液、尿液、羊水等体液中。L-PGDS是一种双功能蛋白,除催化PGD产生外,亦可结合和运输亲脂/疏水分子。该蛋白具有广泛的生理学作用,它不仅与睡眠诱导、体温调节、感受伤害、气味应答等有关,亦是一种生育相关蛋白,可能参与精子的发生和成熟。研究表明,L-PGDS与许多疾病密切相关,如L-PGDS不同程度地表达于卵巢癌、乳腺癌等组织,病毒性脑膜炎、脑脊膜瘤、椎管狭窄、脑栓塞等病人的CSF中L-PGDS明显升高。为了建立L-PGDS的免疫学检测方法并探讨其在男性生殖系统中的具体功能、代谢过程、作用机制以及与男性不育的关系等,本实验室以毕赤氏酵母表达了人睾丸L-PGDS抗原,成功制备了兔抗人L-PGDS多克隆抗体和鼠抗人L-PGDS单克隆抗体。兔源多抗实际上是多种抗体的混合物,具有不均一性,无论是对抗体分子结构与功能的研究还是临床应用都受到很大限制;而特异性鼠单抗具有异源性,应用于人体研究会引发人抗鼠抗体的毒性反应,并使抗体在体内消除加快等。因此,应用于临床的理想抗体应是人源的,但人一人杂交瘤技术目前尚未突破,且还存在人-人杂交瘤体外传代不稳定、抗体亲合力低及产量不高等问题。目前解决此问题的较好办法之一是研制基因工程抗体,代替鼠源单抗应用于临床。本研究试利用基因工程技术,构建和表达目前研究较多也较成熟的单链抗体、人—鼠嵌合抗体,为L-PGDS的功能性研究以及临床相关疾病的诊断、治疗奠定基础。本研究第一部分首先采用RT-PCR技术,以一组自前导序列的简并引物,从1株稳定分泌抗人L-PGDS单抗的鼠杂交瘤细胞中扩增出抗体的轻链可变区基因2个、重链可变区基因1个:然后分别克隆至pGEM-T载体,并测序。测序结果表明,其中1个V k为鼠骨髓瘤细胞系中固有的无功能基因:另一V k和VH经KabatIg比对分析,与其同源性较高的序列均为鼠免疫球蛋白可变区基因,且碱基序列符合鼠抗体可变区特征。本研究第二部分利用一柔性连接短肽[(Gly)Set],SOE PCR法将上述重、

关键词：前列腺素D合成酶男性生殖单克隆抗体可变区基因克隆基因工程抗体单链抗体原核表达系统人—鼠嵌合抗体真核表达系统酶联免疫吸附试验

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中国公民社会体系发展研究

中国公民社会体系发展研究

作者：朱国华中国科学技术大学

学位级别：硕士

中国公民社会体系是中国独有且显著具有中国特色的社会领域发展新现象;中国公民社会体系分层现象是市民社会发展和公民社会发展历史上独特的现象,是改革开放以来中国社会领域内最重要的变化和最重大的进步。目前,学术界有诸多关于中国... 详细信息

中国公民社会体系是中国独有且显著具有中国特色的社会领域发展新现象;中国公民社会体系分层现象是市民社会发展和公民社会发展历史上独特的现象,是改革开放以来中国社会领域内最重要的变化和最重大的进步。目前,学术界有诸多关于中国非政府组织发展、中国市民社会发展和中国公民社会发展的研究,尚无公开发表的中国公民社会体系及其分层现象的学术研究成果,该研究致力于探究中国非政府组织发展对中国公民社会的影响、中国公民社会体系形成及其分层现象,并运用马克思主义现代公民社会理论做出相应的分析研究和评述评价。第一部分是绪论,主要介绍该研究国内外现状、相关研究的发展趋势、本研究的现实意义、主要研究内容及其内在联系和创新之处。第二部分关于中国公民社会与非政府组织发展问题。按照非政府组织历史发展一般轨迹,农民社会大致对应于农业时代的交换经济,市民社会大致对应于工业时代的市场经济,公民社会大致对应于知识经济时代的社会经济;而社会领域内的发展都是依托广义的非政府组织进化而实现的。改革开放以来,中国非政府组织适应了中国二元经济格局和社会结构分层格局,支撑着社会领域内现代农民社会、现代市民社会和现代公民社会的发展与进步,其与西方国家非政府组织发展模式迥然不同的探索实践对中国公民社会发展路径有着重大而深远的影响。第三部分关于中国公民社会体系及其分层现象。改革开放以来,社会领域非政府组织发展迅猛,现代农民社会不断创新发展,现代市民社会随着中国特色社会主义市场经济制度确立而不断发展壮大,现代公民社会随着科学发展与和谐社会构建而初显端倪,由此中国公民社会体系出现了中国特有的社会领域发展规律的分层现象:社会领域内现代农民社会、现代市民社会与现代公民社会同时存在而逐步演变的分层,这种现象将伴随着中国工业化经济结构转型和现代化社会发展进程以及知识经济时代的很长一段历史进程。第四部分关于中国公民社会体系的历史地位评析与中国公民社会发展前景。中国公民社会体系由改革开放前统一而集中的社会管理体制下的社会组织发展而来,历经改革开放初期社会组织蓬勃发展和现代农民社会大发展以及现代市民社会构建,中国特色社会主义市场经济下现代市民社会制度化发展与全球公民社会运动背景下中国公民社会初始发展几个渐次发展阶段。中国公民社会体系的发展必将成为中国社会领域自治与法治完美结合的里程碑。

关键词：中国公民社会体系中国公民社会公民社会中国非政府组织

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夏秋传染病

夏秋传染病

丛书名：大众知识丛书

1951年

作者：郝甫

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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也谈“有／无标记”的歧解及解决之道

当代语言学 2009年第3期11卷 260-266页

作者：陆丙甫南昌大学 330031

本文讨论了"有/无标记"的各种意义以及密切相关的"默认"、"常态"、default、unspecified及underspecified等概念。在此基础上,认为采用"标志"去称呼狭义的形式标记的处理是比较理想的,并且提出对于描写来说,"初始态"才是最重要而不可缺... 详细信息

本文讨论了"有/无标记"的各种意义以及密切相关的"默认"、"常态"、default、unspecified及underspecified等概念。在此基础上,认为采用"标志"去称呼狭义的形式标记的处理是比较理想的,并且提出对于描写来说,"初始态"才是最重要而不可缺少的概念。因为描写和解释都必须从简到繁不断推进,可以没有终点却不能没有起点。

关键词：有/无标记默认常态初始态描写程序

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包络地形对气候模拟特征的影响

高原气象 1995年第2期14卷 129-140页

作者：钱永甫董梁南京大学大气科学系

本文用ｐ－σ混合坐标系球带模式研究了不同包络度地形对冬夏季气候模拟特征的影响。结果表明，采用较大包络度的地形可在一定程度上改善气候模拟结果，尤其是在冬季。气候模拟特征由海陆和地形的共同作用决定，地形包络度的影响是次要... 详细信息

本文用ｐ－σ混合坐标系球带模式研究了不同包络度地形对冬夏季气候模拟特征的影响。结果表明，采用较大包络度的地形可在一定程度上改善气候模拟结果，尤其是在冬季。气候模拟特征由海陆和地形的共同作用决定，地形包络度的影响是次要的。包络度值要取得恰当，否则反而不利。不同地区可用不同的包络地形。

关键词：数值模拟地形包络度气候模拟

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美国风险沟通研究:学术沿革、核心命题及其关键因素

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国际新闻界 2009年第9期 95-101页

作者：张洁张涛甫复旦大学新闻学院

美国风险沟通研究兴起于20世纪80年代中期。本文探讨了它产生的现实社会文化背景及其学术沿革,试图厘清风险沟通研究与风险管理研究、危机传播研究、公共关系研究的关系。风险沟通的功能定位经历了由"单向告知"到"公共参与"的转变。风... 详细信息

美国风险沟通研究兴起于20世纪80年代中期。本文探讨了它产生的现实社会文化背景及其学术沿革,试图厘清风险沟通研究与风险管理研究、危机传播研究、公共关系研究的关系。风险沟通的功能定位经历了由"单向告知"到"公共参与"的转变。风险沟通的核心命题是"风险=危害+愤怒",该研究非常关注公众的风险感知。风险沟通的关键因素是建立信任,该研究在理论探讨和操作指南两个层面上对信任问题进行了开掘。

关键词：风险沟通危机传播风险感知信任

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塔里木盆地三叠纪重要孢粉类型

微体古生物学报 1999年第4期16卷 393-404页

作者：张璐瑾王鑫甫中国科学院南京地质古生物研究所南京210008

本文着重报道新疆塔里木盆地库车剖面三叠纪俄霍布拉克、克拉玛依和黄山街三个组中的重要孢粉类型，其中包括7个新种和一个新组合。这些孢粉类型对确立其所在层位的地质时代和揭示当时的植被构成具有重要的作用。

关键词：孢粉类型三叠纪塔里木盆地

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成都市城区主要道路绿地植物景观的研究

成都市城区主要道路绿地植物景观的研究

作者：朱国庆西南交通大学

学位级别：硕士

城市道路绿地是在城市交通上发展起来的,它作为城市道路景观、城市绿地系统的一个重要组成部分,在保护和改善城市生态环境、美化城市、塑造城市形象等方面发挥着重要的作用。道路绿化是城市道路绿地系统的重要组成部分,决定城市道路绿... 详细信息

城市道路绿地是在城市交通上发展起来的,它作为城市道路景观、城市绿地系统的一个重要组成部分,在保护和改善城市生态环境、美化城市、塑造城市形象等方面发挥着重要的作用。道路绿化是城市道路绿地系统的重要组成部分,决定城市道路绿地系统生态效益和景观功能的充分发挥。道路绿化也是美化城市生态环境,创造人居最佳环境的重要环节。选择合适的道路绿地植物,构建合理的道路绿化植物群落,能够活化城市道路空间,构筑自然环境与人工环境的高度和谐,形成道路植物群落稳定的生态系统,创造优美的道路绿地景观。本文选取了成都市城区道路作为研究区域,运用植物群落学的方法,对这些成都市道路配置现状进行了调查,主要包括植物群落的种类组成、数量特征、配置方式等内容,并从植物生态学和美学这两个方面进行分析,最后,运用层次分析法(AHP)建立评价模型,对所调查的成都市主要道路从中选取的道路,进行综合评价,分析成都市的主要道路在植物景观营造上的优点,以及不足之处,以期待在未来城市道路建设中的植物景观营造逐步走向完善提供一定的借荐。

关键词：城市道路绿化园林植物植物配置

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海绵窦区显微解剖学研究

海绵窦区显微解剖学研究

作者：朱国臣安徽医科大学

学位级别：硕士

目的探讨海绵窦（cavernous sinus，CS）微血管构筑和为临床CS区手术提供显微解剖学资料。方法①扫描电镜观察6例胎儿CS区铸型标本;②观察2例胎儿CS组织学切片;③观测30例（60侧）成人头颅骨性标本的前床突（anteriorClinoid process，... 详细信息

目的探讨海绵窦（cavernous sinus，CS）微血管构筑和为临床CS区手术提供显微解剖学资料。方法①扫描电镜观察6例胎儿CS区铸型标本;②观察2例胎儿CS组织学切片;③观测30例（60侧）成人头颅骨性标本的前床突（anteriorClinoid process，ACP）和眶上裂（superior orbital fissure，SOF）;④观测15例（30侧）成人颅底标本的CS窦壁及其三角，颈内动脉（internal carotid artery，ICA）及脑神经窦内段;ICA岩骨段水平部、床突间隙、SOF区及Dorello管区等CS毗邻结构。结果①胎儿CS主要由多个血窦组成的海绵样结构及其间的结缔组织共同形成;②Parkinson三角为13.28±3.77mm×15.19±3.84mm×5.52±1.06mm，Mullan三角为15.09±4.12mm×10.91±2.03mm×8.81±2.38mm;60%的CS外侧壁深层不完整，发生在Parkinson三角后部和Mullan三角前部;③海绵窦下动脉供应大部分脑神经窦内段;④ICA与CS外侧壁前份、中份及后份间距分别为1.32±1.12mm，1.92±1.60mm，1.00±0.84mm;⑤滑车神经窦内段行程形状分三型：直型、凸型和交叉型;⑥ICA岩骨段水平部外膝距耳蜗底周前内侧缘2.48±0.23mm;⑦ACP基部宽度9.27±1.25mm，基部至尖端长度6.72±1.43mm;20%床突间隙深层不完整;ICA近环距动眼神经内侧2.55±0.23mm;⑧SOF外侧壁夹角144.27°±20.03°，泪腺神经距SOF外侧端4.17±1.70mm，滑车神经与额神经紧贴Zinn腱环外侧;⑨Dorello管顶与底间最大垂直距离为2.14±0.70mm，展神经经过Dorello管的外1/3或中1/3。结论①胎儿CS形态学性质为静脉网;②CS外侧壁深层不完整与表腔形成有关外，可能与神经间距亦有关;③选择CS外侧入路时Parkinson三角最常用，在CS前半部可联合应用Mullan三角;滑车神经行程形状类型的不同影响Parkinson三角的显露;④床突间隙可与CS相通;床突间隙毗邻结构复杂;⑤海绵窦下动脉是窦内段脑神经的主要供血动脉;⑥随着年龄增长，ICA可在CS内发生扭曲;显露ICA岩骨段水平部时，磨除骨质入点可选择在岩大安徽医科大学硕士学位论文神经沟接近下颌神经的外后方;①SOF区手术应避兔损伤穿行神经和血管;③在Dorello区，展神经易受损伤。

关键词：海绵窦,颈内动脉,脑神经,扫描电镜,显微解剖