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马氏珠母贝外套膜外液和珍珠囊液蛋白质组学研究

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马氏珠母贝外套膜外液和珍珠囊液蛋白质组学研究

作者：朱先玉广东海洋大学

学位级别：硕士

本文以我国海水珍珠主要生产贝类之一的马氏珠母贝为研究对象，以与贝壳形成密切相关的外套膜外液（extrapallial fluid）和与珍珠形成密切相关的珍珠囊液（pearl sac fluid）为研究材料，应用一维凝胶电泳和液相色谱串联质谱技术（LC-M... 详细信息

本文以我国海水珍珠主要生产贝类之一的马氏珠母贝为研究对象，以与贝壳形成密切相关的外套膜外液（extrapallial fluid）和与珍珠形成密切相关的珍珠囊液（pearl sac fluid）为研究材料，应用一维凝胶电泳和液相色谱串联质谱技术（LC-MS/MS）联用、二维凝胶电泳（2-DE）和质谱联用、同重同位素相对与绝对定量技术（iTRAQ）和液相色谱串联质谱技术联用等方法，首次对外套膜外液和不同发育时期珍珠囊液蛋白进行了比较分析，结果如下：一维凝胶电泳和液相色谱串联质谱技术联用，对马氏珠母贝外套膜外液、插核30天、90天珍珠囊液蛋白质全谱进行了测定，分别得到了976、2493、2239种蛋白质，共参与了242个已知的代谢途径，COG功能分类显示三样品中分别有6、19、18种蛋白质的功能未知，同时鉴定到四种相同的矿化相关蛋白，十种相同的免疫相关蛋白，每个样品特有的免疫相关蛋白分别有20、37、32种。双向凝胶电泳和质谱技术联用，分离马氏珠母贝外套膜外液和插核30天、60天、90天珍珠囊液蛋白，得到双向电泳图谱，差异点分析得到多个差异点，筛选出感兴趣的十五个点进行质谱鉴定，最后成功鉴定出12个点，鉴定结果主要以肌动蛋白、热休克蛋白70家族、精氨酸激酶家族、肌酸激酶、筑丝蛋白以及微管蛋白家族为主。同重同位素相对与绝对定量技术（iTRAQ）和液相色谱串联质谱技术联用，对马氏珠母贝外套膜外液以及插核30天、60天、90天珍珠囊液蛋白进行了相对和绝对定量分析，共获得1901种蛋白，对这些蛋白进行GO、COG和KEGG注释分析，并对差异蛋白进行了GO和代谢通路富集。以插核30天珍珠囊液为参照，插核60天、90天珍珠囊液和外套膜外液中，分别有128、146、229种差异蛋白，其中有86种差异蛋白是相同的，其中与免疫矿化相关的蛋白有：热休克蛋白家族、钙调蛋白及钙调素类似蛋白、富含半胱氨酸的清道夫受体、钙离子和钙调蛋白依赖性蛋白激酶等;当以外套膜外液作为参照时，插核30天、60天、90天珍珠囊液中，分别有229、201、180种差异蛋白，其中有128种差异蛋白是相同的，免疫矿化相关蛋白有：微管蛋白、钙网蛋白、钙结合家族蛋白、热休克蛋白40A、肌浆网Ca2+-ATP酶、钙依赖性蛋白激酶、钙离子和钙调蛋白依赖性蛋白激酶、钙调蛋白及钙调素类似蛋白等。本研究首次运用三种蛋白质组学研究手段，从不同的方向和角度研究了马氏珠母贝外套膜外液和珍珠囊不同发育时期珍珠囊液蛋白质的表达情况，大大地丰富了马氏珠母贝蛋白质数据资源，为研究珍珠的形成机制以及插核后免疫排异现象提供了宝贵的蛋白质信息，进而为我国珍珠产业的健康发展提供理论支持。

关键词：马氏珠母贝珍珠囊液外套膜外液蛋白质全谱双向凝胶电泳同重同位素相对与绝对定量

蔓越莓水提物促进淋巴细胞增殖并增强其对膀胱癌细胞的杀伤能力

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免疫学杂志 2019年第7期35卷 561-566,586页

作者：吴小萍朱先玉李雪森西南医科大学基础医学院肿瘤医学研究所 646000 西南医科大学基础医学院免疫教研室 646000 美国加州大学尔湾分校泌尿系 92697

目的研究蔓越莓水提物对淋巴细胞的作用以及经蔓越莓处理的淋巴细胞对膀胱癌的抑制作用。方法运用CCK8细胞活性检测法、BrdU细胞增殖检测法以及细胞杀伤实验等方法研究蔓越莓水提物在体外对淋巴细胞的促增殖作用和淋巴细胞对膀胱癌细胞... 详细信息

目的研究蔓越莓水提物对淋巴细胞的作用以及经蔓越莓处理的淋巴细胞对膀胱癌的抑制作用。方法运用CCK8细胞活性检测法、BrdU细胞增殖检测法以及细胞杀伤实验等方法研究蔓越莓水提物在体外对淋巴细胞的促增殖作用和淋巴细胞对膀胱癌细胞的抑制杀伤作用。在此基础上,以UPⅡ-SV40T转基因膀胱癌小鼠为模型,喂养蔓越莓水提物,通过H&E染色,Ki67免疫组化及细胞杀伤等试验研究蔓越莓水提物对于淋巴细胞的影响及其对膀胱癌的抑制作用。结果本研究用蔓越莓水提物在体外处理小鼠淋巴细胞,发现蔓越莓水提物可以促进淋巴细胞增殖,并提高淋巴细胞对膀胱癌细胞的杀伤作用。体内试验证实,自由摄取含蔓越莓水提物饮水的实验组,小鼠的膀胱质量显著低于普通灭菌水喂养的对照组,同时膀胱癌上皮细胞癌变情况优于对照组。进一步试验发现,实验组血液和脾脏中自然杀伤细胞比例增大,实验组脾脏淋巴细胞对膀胱癌细胞的杀伤作用显著高于对照组。结论蔓越莓水提物促进淋巴细胞的增殖,提高机体杀伤肿瘤细胞的能力,在体内抑制膀胱上皮细胞的癌变和肿瘤的生长,可能对膀胱癌具有预防和治疗作用。

关键词：蔓越莓淋巴细胞自然杀伤细胞膀胱癌

番茄红素改善BTBR小鼠社交障碍及降低海马炎症

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陆军军医大学学报 2023年第14期45卷 1483-1492页

作者：李江辉李达兵朱先玉陈梅范晓棠毛苹苏西南医科大学基础医学院肿瘤医学研究所四川泸州646000 陆军军医大学(第三军医大学)医学心理系军事认知心理学教研室重庆400038 西南医科大学基础医学院基础医学院生理学教研室四川泸州646000

目的研究番茄红素(Lycopene,Lyc)对BTBR T^(+)Itpr3^(tf)/J(BTBR)自闭症模型小鼠海马组织中炎症水平、社交缺陷、认知障碍和重复刻板行为的影响。方法7~8周龄成年雄性健康C57BL/6(C57)与BTBR小鼠随机数字表法分为4组(n=8):C57+Veh组、C5... 详细信息

目的研究番茄红素(Lycopene,Lyc)对BTBR T^(+)Itpr3^(tf)/J(BTBR)自闭症模型小鼠海马组织中炎症水平、社交缺陷、认知障碍和重复刻板行为的影响。方法7~8周龄成年雄性健康C57BL/6(C57)与BTBR小鼠随机数字表法分为4组(n=8):C57+Veh组、C57+Lyc组、BTBR+Veh组、BTBR+Lyc组。C57+Lyc组和BTBR+Lyc组小鼠予以番茄红素(20 mg/kg)灌胃,1次/d,共7 d;C57+Veh组小鼠和BTBR+Veh组小鼠给予等体积的玉米油。给药7 d后开始三箱社交、雌雄交互、理毛、埋珠、开场实验、新物体识别、筑巢和Y迷宫等行为实验。结束后立即收取脑组织样本,进行RT-qPCR、Western blot实验。结果行为学结果显示:三箱社交实验中,BTBR+Veh组小鼠在陌生物体所在的箱体时间更多,表现出对陌生物体更偏好(P<0.05);而Lyc治疗后小鼠表现出对陌生小鼠更偏好(P<0.05)。理毛、埋珠实验中,BTBR+Veh组小鼠较C57+Veh组小鼠的重复刻板行为显著增多(P<0.05),Lyc治疗后显著减少了BTBR小鼠的重复刻板行为(P<0.05)。BTBR+Veh组小鼠较C57+Veh组小鼠海马组织中NLRP3炎症小体在mRNA和蛋白水平均显著增高(P<0.05);白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-18、IL-6、核因子κB(nuclear factor kappaB,NF-κB)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在mRNA水平显著增高(P<0.05);Lyc治疗后BTBR小鼠各炎症因子均显著降低(P<0.05)。结论番茄红素治疗通过降低BTBR小鼠海马中NLRP3炎症小体的水平,改善BTBR小鼠三箱社交缺陷和重复刻板行为。

关键词：番茄红素自闭症 NLRP3炎症小体海马社交障碍

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深秋将至

小康 2021年第25期 7-7页

作者：朱先玉杭州市

马上就要入秋了,这是丰收的季节,每年都非常喜爱看《小康》杂志的总结报道,今年也格外的期待,也非常期待杂志会有更多的创新,更多的新栏目,新版块。

关键词：新栏目《小康》杂志深秋

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几丁质脱乙酰酶的特点及应用

渔业研究 2019年第2期41卷 167-174页

作者：朱先玉丛海花尹恒大连海洋大学食品科学与工程学院辽宁大连116023 中国科学院大连化学物理研究所天然产物与糖工程课题组辽宁省碳水化合物重点实验室辽宁大连116023

几丁质是渔业生产过程中废弃虾蟹壳的主要组成成分。传统生产几丁质、壳聚糖和壳寡糖的方法是化学消化法,此方法的主要问题是环境污染严重,随着人们环保意识的提高,该方法已难以持续。此外由于化学法生产的壳聚糖和壳寡糖难以控制其聚... 详细信息

几丁质是渔业生产过程中废弃虾蟹壳的主要组成成分。传统生产几丁质、壳聚糖和壳寡糖的方法是化学消化法,此方法的主要问题是环境污染严重,随着人们环保意识的提高,该方法已难以持续。此外由于化学法生产的壳聚糖和壳寡糖难以控制其聚合度、脱乙酰度和脱乙酰模式,因此很难研究壳寡糖的结构与功能之间的关系。几丁质脱乙酰酶(Chitin deacetylase EC 3.***.1.41)是一种可在温和条件下将几丁寡糖转化为壳寡糖的酶,利用此酶规模化生产具有特定乙酰化模式的壳寡糖已成为一个很重要的研究方向。鉴于该酶对于产业发展的重要性,本文对目前已经研究的几丁质脱乙酰酶的来源、结构特征、催化机制、脱乙酰化模式及几丁质脱乙酰化酶的应用等方面进行了综述。

关键词：几丁质壳寡糖几丁质脱乙酰酶脱乙酰模式应用

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车坛“四佳丽”安全性能大比拼

汽车与安全 2003年第9期 4-9页

作者：朱先玉

近年的车坛新车迭出,就像热闹的T形台,美车如云,你方唱罢我登台,价格在10万元左右的经济型轿车的竞争更是达到了白热化的程度。上海大众的POTO,长安福特的嘉年华,南京菲亚特的西耶那、派力奥近年在车坛崭露头角,让人产生眼睛为之一亮... 详细信息

近年的车坛新车迭出,就像热闹的T形台,美车如云,你方唱罢我登台,价格在10万元左右的经济型轿车的竞争更是达到了白热化的程度。上海大众的POTO,长安福特的嘉年华,南京菲亚特的西耶那、派力奥近年在车坛崭露头角,让人产生眼睛为之一亮的感觉,无论从造型、配置还是从价格来看,这四档车都比较接近,堪称车坛的“四佳丽”。

关键词：派力奥 POL 嘉年华安全性能安全气囊上海大众

人TAGLN基因及基因启动子的生物信息学分析

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基因组学与应用生物学 2022年第2期41卷 435-444页

作者：王历朱先玉杨家磊王文君蔺艳杨茂杨文理西南医科大学基础医学院肿瘤医学研究所泸州646000 西南医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室泸州646000

人TAGLN基因编码的蛋白参与细胞骨架重构,在肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和转移等生物学过程发挥重要作用。为探究TAGLN基因的启动子区、CpG岛、转录因子结合位点、翻译后修饰位点、亚细胞定位及B细胞线性表位,利用多种生物信息学方法在... 详细信息

人TAGLN基因编码的蛋白参与细胞骨架重构,在肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和转移等生物学过程发挥重要作用。为探究TAGLN基因的启动子区、CpG岛、转录因子结合位点、翻译后修饰位点、亚细胞定位及B细胞线性表位,利用多种生物信息学方法在线分析TAGLN基因5′端的启动子、CpG岛、转录因子结合位点、翻译后修饰位点和亚细胞定位及B细胞线性表位。结果表明,Promoter 2.0未显示明显的启动子序列;其余3种软件显示人TAGLN基因5′调控区2000 bp含启动子序列,但核心启动子区不同且对应不同的转录本;4种软件均未发现CpG岛,但均显示有一处CpG集中分布区域;AliBaba2.1和PROMO数据库预测与TAGLN基因启动子区的共同转录因子结合位点17个;JASPAR获得6个与转录方向一致(正链)的转录因子;SwissRegulon显示第1个启动子结合的转录因子JUNB、SMAD4、SMAD1和SMAD3与转录方向一致;人TAGLN基因编码的蛋白主要定位于细胞质和细胞核,可被磷酸化、乙酰化、泛素化和甲基化等翻译后修饰调控,有9个B细胞线性表位(抗原表位)热点片段。生物信息学软件能预测人TAGLN基因的启动子区、CpG岛、转录因子结合位点、翻译后修饰位点、亚细胞定位及B细胞线性表位,可以高效地获得TAGLN基因的相关信息,为深入研究该基因对乳腺癌的影响及作用机制和抗体开发等提供理论依据。

关键词： TAGLN基因启动子生物信息学翻译后修饰肌动蛋白结合蛋白乳腺癌

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四门GOL与两门GOL:各分秋色

汽车与安全 2003年第10期 14-19页

作者：朱先玉

如果要问哪个公司在中国汽车市场赚取的利润最高?哪个公司最敢与中国的消费者叫板?非上海大众莫属。是上海大众用国外七十年代的老车型——普桑车在中国赚取了大把大把的银子;是上海大众在中国轿车市场刚刚出现降价潮时,不仅声言自己决... 详细信息

如果要问哪个公司在中国汽车市场赚取的利润最高?哪个公司最敢与中国的消费者叫板?非上海大众莫属。是上海大众用国外七十年代的老车型——普桑车在中国赚取了大把大把的银子;是上海大众在中国轿车市场刚刚出现降价潮时,不仅声言自己决不降价,而且还对其他企业的降价行为冷嘲热讽。然而,经

关键词： GOL 上海大众

具Cauchy-Ventcel边界的阻尼波方程的对数衰减性（英文）

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控制理论与应用 2019年第11期36卷 1879-1885页

作者：付晓玉柳絮朱先政四川大学数学学院四川成都610064 东北师范大学数学与统计学院吉林长春130024

本文研究有界区域上具Cauchy-Ventcel边界条件的波动方程的解的衰减性质.在不要求耗散区域满足几何控制条件的情形下,得到了波方程的对数衰减结果.主要结果的证明依赖于具Cauchy-Ventcel边界条件的椭圆方程的插值不等式以及关于该椭圆... 详细信息

本文研究有界区域上具Cauchy-Ventcel边界条件的波动方程的解的衰减性质.在不要求耗散区域满足几何控制条件的情形下,得到了波方程的对数衰减结果.主要结果的证明依赖于具Cauchy-Ventcel边界条件的椭圆方程的插值不等式以及关于该椭圆方程的预解式估计.为得到期望的插值不等式,本文采用的工具是整体Carleman估计.

关键词：对数衰减波方程 Cauchy-Ventel边界 Carleman估计