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不同储存期酸奶对小鼠免疫功能的影响

营养学报 2004年第4期26卷 325-326,328页

作者：朱于敏潘道东邹思湘陈伟华南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095 南京师范大学金陵女子学院南京210095

酸奶是以牛乳为原料,经加入特定的微生物发酵制成的产品.酸奶不但含丰富的蛋白质、维生素和微量元素,而且还具有调整胃肠功能、抗菌、降血脂、抗癌等保健功能.近20年来发现,酸奶对体液免疫和细胞免疫具有调节作用[1],且与乳酸菌(1actic ... 详细信息

酸奶是以牛乳为原料,经加入特定的微生物发酵制成的产品.酸奶不但含丰富的蛋白质、维生素和微量元素,而且还具有调整胃肠功能、抗菌、降血脂、抗癌等保健功能.近20年来发现,酸奶对体液免疫和细胞免疫具有调节作用[1],且与乳酸菌(1actic acid bacteria,LAB)密切相关[2].酸奶经冷藏、运输、销售等一段时间,后酸化会导致其中活的乳酸菌数下降.本实验研究灌喂不同储存期酸奶对小鼠免疫功能的影响,旨在为合理储存和消费酸奶提供科学依据.

关键词：储存期酸奶小鼠免疫功能刺激指数

CpG-DNA对金黄色葡萄球菌诱导的大鼠实验性乳腺炎的作用

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中国兽医学报 2007年第2期27卷 240-244页

作者：朱于敏陈伟华邹思湘南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

72只泌乳期SD雌性大鼠随机均分成对照组和试验组(n=36),对照组于产后0h左后腿胫骨前肌内注射0.01mol/L、pH7.2 PBS100μL/只;试验组肌注CpG-DNA 200μg/只。产后72h经乳头管灌注2×1012CFU/mL金黄色葡萄球菌各100μL/侧到第4对乳腺(两侧... 详细信息

72只泌乳期SD雌性大鼠随机均分成对照组和试验组(n=36),对照组于产后0h左后腿胫骨前肌内注射0.01mol/L、pH7.2 PBS100μL/只;试验组肌注CpG-DNA 200μg/只。产后72h经乳头管灌注2×1012CFU/mL金黄色葡萄球菌各100μL/侧到第4对乳腺(两侧)内。分别于灌注前0h,灌注后8、16、24、48和72h(n=6)颈静脉放血处死。结果显示,乳腺组织细菌数在灌注后24h上升至最高,CpG-DNA能显著降低8、16和72h的细菌数。IL-2在不同时间点有显著下降,对照和试验组乳腺组织IL-2分别在16和24h下降至最低。TNF-α在24h达最高,CpG-DNA能显著提高0、24和72h乳腺组织TNF-α水平。CpG-DNA能显著提高血清感染后各时间点及乳腺组织0和16h MPO水平。乳腺组织NAGase和白蛋白在24h上升至最高,血清中24h下降至最低。CpG-DNA能显著降低48和72h乳腺组织NAGase活力,并极显著降低8和72h乳腺白蛋白浓度。上述结果显示,CpG-DNA可促进细胞因子的产生,减少乳腺组织细菌数量,减轻炎症介质对细胞和血-乳屏障完整性的损伤,提示CpG-DNA对金黄色葡萄球菌感染诱发的大鼠乳腺炎有一定的保护作用。

关键词： CpG-DNA 乳腺炎大鼠金黄色葡萄球菌

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猪戊型肝炎病毒防控及研究策略分析

微生物学通报 2009年第1期36卷 130-133页

作者：李震陆海平董世娟朱于敏于瑞嵩上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室上海201106 上海市松江区兽医卫生监督检验所上海201611

戊型肝炎为人畜共患病病原,猪是主要的病毒储库。我国猪场戊肝病毒流行情况复杂,猪感染率高,同一地点存在3型或/和4型两种基因型混合污染。病毒存在基因重组和准种现象,为病毒遗传进化提供了遗传基础。当前猪戊肝感染人的主要媒介为污... 详细信息

戊型肝炎为人畜共患病病原,猪是主要的病毒储库。我国猪场戊肝病毒流行情况复杂,猪感染率高,同一地点存在3型或/和4型两种基因型混合污染。病毒存在基因重组和准种现象,为病毒遗传进化提供了遗传基础。当前猪戊肝感染人的主要媒介为污染的猪肉及其制品,其他感染机制和途径还有待进一步阐明。应加强对猪HEV与猪场其他流行病原体相互关系的研究,同时应加强猪HEV相关信息的积累分析包括对猪HEV感染特性和遗传特性进行实时监测,将猪HEV流行情况纳入兽医公共卫生预警体系,实现常态跟踪。

关键词：戊型肝炎猪流行状况防控策略

CpG-DNA对金黄色葡萄球菌诱导的乳腺炎大鼠的保护研究

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中国农业科学 2007年第1期40卷 183-189页

作者：朱于敏苗晋锋邹思湘陈伟华南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

【目的】建立金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)感染的大鼠乳腺炎模型,并观察CpG-DNA对乳腺的保护作用。【方法】18只雌鼠分3组(n=6),产后72h分别灌注磷酸盐缓冲液(phosphatebuffersolution,PBS)(C组)、2×105CFU·ml-1(L组)和2×1012CFU·ml-1(H组)金葡菌到第四对乳腺内,24h处死。L组乳腺病变轻微,H组腺泡结构破坏严重,并有大量嗜中性粒细胞(polymorphonuclearneutrophils,PMN)浸润;H组乳腺组织TNF-α、IL-6水平显著上升。选择2×1012CFU·ml-1为诱发剂量观察CpG-DNA对乳腺的保护作用:72只雌鼠分成对照和试验组(n=36),对照组产后0h肌注PBS;试验组肌注CpG-DNA,72h后灌注金葡菌到第四对乳腺内。分别于灌注前(定义为0h),灌注后8、16、24、48和72h(n=6)处死。【结果】感染初期试验组乳腺腺泡内PMN较对照组浸润迅速。试验组乳腺组织白细胞介素-6(interleukine-6,IL-6)在16、24和48h显著高于对照组。CpG-DNA能显著提高0、24和72h乳腺组织肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)水平。试验组8、16和72h的乳腺组织金葡菌数显著低于对照组。CpG-DNA能显著提高乳腺组织中其特异性受体TLR-9(toll-likereceptor-9)mRNA表达水平。【结论】CpG-DNA对金葡菌感染诱发大鼠乳腺炎的乳腺有保护作用。

关键词：乳腺炎大鼠模型金黄色葡萄球菌

CpG-DNA对金黄色葡萄球菌诱导的大鼠实验性乳腺炎乳腺的保护作用

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南京农业大学学报 2006年第4期29卷 91-96页

作者：朱于敏刘仪陈伟华邹思湘南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

72只泌乳期SD雌性大鼠随机均分成对照组和试验组(n=36),于产后0 h试验组每只肌注CpG-DNA 200μg,对照组肌注0.01 mol.L-1PBS(pH 7.2)100μL。两组于产后72 h均经乳头管灌注2×***-1金黄色葡萄球菌,每侧各100μL到第4对乳腺内(两侧);分... 详细信息

72只泌乳期SD雌性大鼠随机均分成对照组和试验组(n=36),于产后0 h试验组每只肌注CpG-DNA 200μg,对照组肌注0.01 mol.L-1PBS(pH 7.2)100μL。两组于产后72 h均经乳头管灌注2×***-1金黄色葡萄球菌,每侧各100μL到第4对乳腺内(两侧);分别于灌注前0 h,灌注后8、16、24、48和72 h(n=6)颈静脉放血处死。组织学观察显示,试验组乳腺腺泡内嗜中性粒细胞(PMN)在感染初期较对照组浸润迅速,试验组在72 h时已无PMN浸润,而对照组仍有浸润。与对照组相比,CpG-DNA能显著降低8、16和72 h的乳腺组织细菌数。IL-2水平在灌注后有显著下降,但与对照组相比CpG-DNA极显著提高乳腺组织0 h IL-2水平,显著提高16、24和48 h乳腺组织IL-6水平,显著降低48 h和72 h乳腺组织中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力。上述结果显示,CpG-DNA可促进炎症初期PMN的快速浸润,促进并加速细胞因子的产生及释放,减少乳腺组织细菌数量,减轻炎症介质对细胞的损伤,表明CpG-DNA对金黄色葡萄球菌感染诱发的大鼠乳腺炎有保护作用。

关键词： CpG-DNA 乳腺炎大鼠金黄色葡萄球菌

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戊型肝炎与兽医公共卫生

中国食品卫生杂志 2009年第1期21卷 60-63页

作者：李震朱于敏董世娟周宗清上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海市农业遗传育种重点实验室上海201106

戊型肝炎为人畜共患病,戊肝病毒(Hepatitis E Virus,HEV)为其病原。戊肝病毒分4个基因型,在中国流行或存在的为1、3、4型。基因1型目前在我国只感染人,3型目前刚刚在我国大陆猪场发现,尚未发现感染人。而4型为人畜共同感染。动物中以猪... 详细信息

戊型肝炎为人畜共患病,戊肝病毒(Hepatitis E Virus,HEV)为其病原。戊肝病毒分4个基因型,在中国流行或存在的为1、3、4型。基因1型目前在我国只感染人,3型目前刚刚在我国大陆猪场发现,尚未发现感染人。而4型为人畜共同感染。动物中以猪的感染率和带毒率最高,常通过污染的肉制品造成人员感染和发病。猪与鹿、鸡、鼠等动物共同组成HEV的巨大病毒储库,为HEV的变异进化提供了充分的遗传资源。应加强对猪肉制品和农村地区猪场附近河流湖泊饮用水源的卫生安全管理。同时应加强动物HEV相关信息的收集和分析,将动物HEV的流行情况纳入兽医公共卫生的预警体系,实现动物HEV的常态跟踪和防控。

关键词：肝炎,戊型兽医公共卫生猪

雏番鸭细小病毒vp3基因的原核表达及增殖病毒的检测

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生物工程学报 2015年第1期31卷 65-74页

作者：黄瑜朱于敏董世娟于瑞嵩张源淑李震南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095 上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室上海201106

近年来,番鸭细小病毒出现新的流行趋势,估计与病毒基因变异有关,因此针对新流行毒株研发新的检测方法很有必要。本研究根据番鸭细小病毒(MDPV)2012年分离株SAAS-SHNH的全基因序列,设计了一对特异性引物,利用PCR技术扩增全长vp3基因,经... 详细信息

近年来,番鸭细小病毒出现新的流行趋势,估计与病毒基因变异有关,因此针对新流行毒株研发新的检测方法很有必要。本研究根据番鸭细小病毒(MDPV)2012年分离株SAAS-SHNH的全基因序列,设计了一对特异性引物,利用PCR技术扩增全长vp3基因,经鉴定正确后,进行同源性比对分析,同时将其克隆到PET28a载体,构建成PET28a-VP3原核表达载体,经转化及IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳和Western blotting分析,表达出与预期大小相符的63.1 k Da的蛋白,该蛋白可与临床采集的免疫过MDPV的番鸭血清结合,说明该蛋白可用于MDPV的血清学检测。将纯化后蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔源MDPV-VP3蛋白的多克隆抗体,制备的兔源血清能够与MDPV疫苗弱毒株及J3D6株VP3蛋白发生特异结合;MDPV感染原代鸭胚成纤维细胞(DEF)后,利用兔源血清作为一抗进行免疫荧光分析(IFA)分析,在DEF细胞核和细胞质内均能检测到VP3蛋白,表明利用VP3蛋白制备的抗血清可以用于MDPV免疫荧光分析细胞增殖病毒的检测。这为今后MDPV的快速检测提供了技术基础。

关键词： vp3基因原核表达纯化免疫荧光分析

猪流行性腹泻病毒流行毒株S1片段的克隆表达及其抗体制备

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畜牧与兽医 2015年第12期47卷 103-107页

作者：王国松张明朱于敏于瑞嵩董世娟李震安徽农业大学生命科学学院安徽合肥230000 上海市农业科学院畜牧兽医研究所/上海市农业遗传育种重点实验室上海201106

通过对猪流行性腹泻病毒（PEDV）流行毒株S基因进行序列分析,选取S1蛋白502～641氨基酸位置,根据大肠杆菌密码子偏嗜性进行密码子优化,PCR融合扩增片段,并将其克隆到原核表达载体上,获得重组质粒p ET32a-S417、p XXGST-S417。将获得的... 详细信息

通过对猪流行性腹泻病毒（PEDV）流行毒株S基因进行序列分析,选取S1蛋白502～641氨基酸位置,根据大肠杆菌密码子偏嗜性进行密码子优化,PCR融合扩增片段,并将其克隆到原核表达载体上,获得重组质粒p ET32a-S417、p XXGST-S417。将获得的重组质粒转化到BL21感受态细胞,成功诱导表达、纯化,以GST-S417重组蛋白作为抗原免疫家兔制备多克隆抗体。结果表明：本试验所选区域具有好的抗原免疫原性,制备的多克隆抗体能特异性识别目的蛋白,为PEDV诊断试剂盒和疫苗研制提供了理论依据。

关键词： PEDV S蛋白原核表达多克隆抗体

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B细胞表位作图研究进展

微生物学通报 2017年第9期44卷 2172-2183页

作者：朱睿李震董世娟于瑞嵩朱于敏上海海洋大学水产与生命学院上海201306 上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 上海农业遗传育种重点实验室上海201106

抗原-抗体的特异性结合是由抗体表面的抗原决定簇与抗原表面的表位基序间的特异性互补识别决定的。B细胞表位作图既包括B细胞抗原表位基序的鉴定(即确定抗原分子上被B细胞表面受体或抗体特异性识别并结合的氨基酸基序),也包括绘制抗原... 详细信息

抗原-抗体的特异性结合是由抗体表面的抗原决定簇与抗原表面的表位基序间的特异性互补识别决定的。B细胞表位作图既包括B细胞抗原表位基序的鉴定(即确定抗原分子上被B细胞表面受体或抗体特异性识别并结合的氨基酸基序),也包括绘制抗原蛋白的全部或接近全部的B细胞表位基序在其一级或高级结构上的分布图谱的过程。B细胞表位作图是研发表位疫苗、治疗性表位抗体药物和建立疾病免疫诊断方法的重要前提。目前,已经建立了多种B细胞表位鉴定或绘制抗原蛋白B细胞表位图谱的实验方法。基于抗原-单抗复合物晶体结构的X-射线晶体学分析的B细胞表位作图和基于抗原蛋白或抗原片段的突变体库筛选技术的B细胞表位作图可以在氨基酸水平,甚至原子水平上揭示抗原分子上与单抗特异性结合的关键基序;其它B细胞表位作图方法(如基于ELISA的肽库筛选技术)常常只能获得包含B细胞表位的抗原性肽段,因而,很少用于最小表位基序的鉴定;而改良的生物合成肽法多用于B细胞表位的最小基序鉴定和精细作图。鉴于每种B细胞作图方法都存在各自的优势与不足,B细胞表位作图往往需要多种作图方法的有机结合。本文对目前常用的B细胞表位作图的实验方法及其在动物疫病防控中的应用进行综述,以期为研究者设计最佳的表位作图方案提供参考。

关键词： B细胞表位表位作图表位鉴定