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吲哚丙酸抑制小胶质细胞M1极化治疗脊髓损伤

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中国组织工程研究 2024年第31期28卷 5010-5016页

作者：滕益霖席德双冯彦斌梁宇邓豪曾高峰宗少晖广西医科大学第一附属医院脊柱骨病外科广西医科大学第三附属医院脊柱骨病外科广西医科大学再生医学与医用生物资源开发应用省部共建协同创新中心广西医科大学公共卫生学院

背景：吲哚丙酸被证明可减轻糖尿病所致的中枢神经系统炎症，但其能否抑制小胶质细胞M1极化治疗脊髓损伤，目前仍缺乏相关研究。目的：通过细胞实验及动物实验探究吲哚丙酸抑制小胶质细胞M1极化治疗脊髓损伤的机制。方法：(1)体外实验：... 详细信息

背景：吲哚丙酸被证明可减轻糖尿病所致的中枢神经系统炎症，但其能否抑制小胶质细胞M1极化治疗脊髓损伤，目前仍缺乏相关研究。目的：通过细胞实验及动物实验探究吲哚丙酸抑制小胶质细胞M1极化治疗脊髓损伤的机制。方法：(1)体外实验：CCK8法检测BV2细胞活性并筛选最佳的吲哚丙酸使用浓度；然后将BV2细胞分为对照组、单纯给药组(50μmol/L吲哚丙酸)、脂多糖组(100 ng/mL脂多糖)、治疗组(100 ng/mL脂多糖+50μmol/L吲哚丙酸)，采用Griess法检测一氧化氮含量；实时荧光定量PCR、Western Blot检测促炎相关因子的mRNA和蛋白的表达；细胞免疫荧光染色检测诱导型一氧化氮合酶的表达；Seahorse实验检测BV2细胞糖酵解压力水平。(2)体内实验：将30只SD大鼠随机分成3组：假手术组、脊髓损伤组、吲哚丙酸组。采用BBB评分与斜板实验评估大鼠脊髓损伤后功能恢复情况；免疫荧光染色检测脊髓组织中小胶质细胞诱导型一氧化氮合酶的表达情况；ELISA检测脊髓组织中促炎因子白细胞介素1β及肿瘤坏死因子α蛋白表达水平。结果与结论：(1)体外实验：当吲哚丙酸浓度> 50μmol/L时明显抑制BV2细胞活性；吲哚丙酸可通过抑制核因子κB信号通路的激活，进而抑制促炎因子(白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α)及BV2细胞M1极化标志物诱导型一氧化氮合酶的mRNA及蛋白表达水平；吲哚丙酸能明显降低脂多糖诱导BV2细胞的糖酵解水平。(2)体内实验：脊髓损伤大鼠给予吲哚丙酸干预后，BBB评分与斜板实验角度明显增加；脊髓组织中M1极化小胶质细胞的数量显著下降及促炎因子(白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α)蛋白表达水平明显降低。(3)结果说明，吲哚丙酸可通过抑制小胶质细胞M1极化改善炎症微环境促进脊髓损伤后功能恢复。

关键词：吲哚丙酸脊髓损伤小胶质细胞 M1极化促炎因子信号通路

短链脂肪酸通过抑制白细胞介素17A和NF-κB信号通路减轻γδT细胞介导的炎症反应

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实用医学杂志 2024年第8期40卷 1088-1094页

作者：刘槃席德双黄瑞滕益霖刘睿曾高峰宗少晖新乡医学院第三附属医院骨科河南新乡453000 广西医科大学第一附属医院脊柱骨病外科南宁530021 广西医科大学公共卫生学院南宁530021 新乡医学院河南新乡453000

目的探究短链脂肪酸减轻γδT细胞介导炎症反应的作用机制。方法使用一定浓度的短链脂肪酸干预大鼠肠道来源的γδT细胞,CCK-8检测短链脂肪酸对γδT活性的影响,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测白细胞介素17A(IL-17A)因子含量,实时荧光定... 详细信息

目的探究短链脂肪酸减轻γδT细胞介导炎症反应的作用机制。方法使用一定浓度的短链脂肪酸干预大鼠肠道来源的γδT细胞,CCK-8检测短链脂肪酸对γδT活性的影响,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测白细胞介素17A(IL-17A)因子含量,实时荧光定量(RT-q PCR)检测IL-17A因子的表达水平,流式细胞仪分析IL-17+γδT细胞的比例,Western blot研究γδT细胞IL-17A和核转录因子κB(NF-κB)信号通路的影响。结果 CCK-8结果提示乙酸钠的浓度≤0.5 mmol/L,丙酸钠、丁酸钠和混合短链脂肪酸的浓度≤0.25 mmol/L对γδT细胞的增殖无抑制作用(P> 0.05);ELISA和RT-q PCR结果显示,丙酸钠、丁酸钠及混合短链脂肪酸处理的γδT细胞IL-17A的含量较Control组均显著降低。流式细胞检测结果示IL-17+γδT细胞的比例在丙酸钠、丁酸钠、混合短链脂肪酸及TSA干预下均明显下降(P <0.001);Western blot检测发现丙酸钠、丁酸钠和混合短链脂肪酸可抑制IL-17A、IKK的表达及NF-κB磷酸化水平(P <0.05)。结论短链脂肪酸能抑制γδT细胞IL-17A和NF-κB信号通路的激活,从而减轻机体的炎症反应。

关键词：短链脂肪酸 γδT细胞白细胞介素17A 核转录因子κB

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缉“毒”除污的微纳米机器人

大学化学 2024年

作者：曾高峰刘书羽姜满乐王宇徐平王磊哈尔滨工业大学化工与化学学院哈尔滨工业大学数学学院

现代社会中，化学和相关工业的快速发展导致水环境污染问题日益严重，这对水质检测以及水资源的处理技术提出了更高的要求，然而目前尚难以快速、高效地实现对低浓度、痕量的污染物的检测和处理。为此，科学家们设计出一类新型的智能材... 详细信息

现代社会中，化学和相关工业的快速发展导致水环境污染问题日益严重，这对水质检测以及水资源的处理技术提出了更高的要求，然而目前尚难以快速、高效地实现对低浓度、痕量的污染物的检测和处理。为此，科学家们设计出一类新型的智能材料——微纳米机器人。基于微纳米机器人的可控运动性能、精准识别能力、高效吸附效果和原位降解能力，可以对痕量污染物建立高灵敏度的响应，从而实现水中污染物的有效检测与处理。为了能够让广大读者深入理解微纳米机器人在水污染检测和处理领域的发展前沿和未来研究趋势，本文以微纳米机器人组织“污染刺客联盟”为背景，简单有趣地介绍了微纳米机器人在水环境检测、监测和处理方面的应用及其科学机理。

关键词：微纳米机器人痕量污染物毒物污染物检测水处理环境修复

牡荆素对脊髓损伤大鼠运动功能和炎症反应的影响

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广西医科大学学报 2024年第2期41卷 218-224页

作者：谢佩雅粟叶萍韦入菲曾颖虹陈欣颖宗少晖曾高峰广西医科大学药学院南宁530021 广西医科大学公共卫生学院南宁530021 广西医科大学第一附属医院脊柱骨病外科南宁530021

目的:探究牡荆素(VT)对脊髓损伤(SCI)大鼠和脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞的影响。方法:体内实验:将SD大鼠分为假手术组(sham组)、模型SCI组(SCI组)和VT低剂量组、VT中剂量组和VT高剂量组。采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分评估... 详细信息

目的:探究牡荆素(VT)对脊髓损伤(SCI)大鼠和脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞的影响。方法:体内实验:将SD大鼠分为假手术组(sham组)、模型SCI组(SCI组)和VT低剂量组、VT中剂量组和VT高剂量组。采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分评估大鼠的运动功能;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测大鼠炎症因子基因和蛋白表达;苏木精—伊红(HE)染色观察脊髓组织结构。体外实验:将BV2小胶质细胞分为正常对照组(control组)、LPS组、VT低、中、高、剂量组和VT高剂量单独给药组,LPS诱导BV2小胶质细胞活化构建体外神经炎症模型;细胞计数试剂盒(CCK-8)法筛选VT安全浓度范围;RT-qPCR和蛋白质免疫印迹法(western blotting)检测细胞炎症基因和蛋白表达水平。结果:体内实验:与SCI组比较,VT中、高剂量组的BBB评分明显升高,损伤第7天,VT中剂量组评分显著高于VT高剂量组(均P<0.05);VT中剂量组TNF-αmRNA表达较SCI组降低,VT中、高剂量组IL-10 mRNA表达较SCI组显著升高(均P<0.05);VT低剂量组、VT中剂量组和VT高剂量组的TNF-α蛋白水平显著降低(均P<0.05),VT各剂量组的IL-10蛋白水平显著升高(均P<0.05);HE结果显示,sham组脊髓组织结构完整,神经元数量较多、排列较为规则整齐;SCI组脊髓组织炎症细胞浸润,出现较多空洞,神经元减少萎缩且排列不整齐;与SCI组比较,VT治疗组损伤更小,炎症浸润减轻较为明显。体外实验:与LPS组相比,VT各剂量组的TNF-αm RNA表达显著降低(均P<0.05),且成剂量依赖性降低;VT各剂量组TNF-α蛋白表达量降低(均P<0.001)。结论:VT通过抑制大鼠炎症反应,减轻脊髓组织病理学损伤,改善损伤后脊髓局部微环境,从而保护受损脊髓神经元,达到促进运动功能恢复的作用。

关键词：牡荆素脊髓损伤炎症反应神经保护

番茄红素、叶黄素和植物甾醇联合应用对绝经后骨质疏松症小鼠肠道菌群的影响

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广西医科大学学报 2024年第3期41卷 388-397页

作者：粟叶萍谢佩雅韦入菲陈欣颖韦宇杭宗少晖曾高峰广西医科大学公共卫生学院南宁530021 广西医科大学药学院南宁530021 广西医科大学第一附属医院脊柱骨病外科南宁530021

目的:探索番茄红素、叶黄素和植物甾醇联合应用对绝经后骨质疏松症小鼠肠道菌群的影响。方法:采用双侧去卵巢(OVX)法建立绝经后骨质疏松模型,将60只12周龄雌性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(sham组),OVX组,番茄红素、叶黄素和植物甾醇... 详细信息

目的:探索番茄红素、叶黄素和植物甾醇联合应用对绝经后骨质疏松症小鼠肠道菌群的影响。方法:采用双侧去卵巢(OVX)法建立绝经后骨质疏松模型,将60只12周龄雌性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(sham组),OVX组,番茄红素、叶黄素和植物甾醇联合干预低剂量(L)、中剂量(M)、高剂量(H)组,戊酸雌二醇组(E2组),每天1次灌胃给药,持续12周。Micro-CT扫描分析小鼠股骨骨密度(BMD)和骨微结构变化;苏木精—伊红(HE)染色观察各组股骨组织病理学改变;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测股骨中骨钙素(BGP)和抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRAP5b)的表达;16S rDNA扩增子测序检测分析粪便中V3~V4区菌群基因。结果:HE结果显示,OVX组小鼠骨松质结构改变,骨小梁稀疏松散、粗细不匀,大量断裂,骨髓腔间距宽;M组、H组的骨结构改善,且H组接近于sham组;Micro-CT结果显示,与sham组相比,OVX组的BMD、小梁体积百分比(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数(Tb.N)和连接密度(Conn.Dn)显著降低,骨表面积/组织体积(BS/TV)、骨小梁空隙(Tb.SP)、结构模型指数(SMI)显著增加;与OVX组相比,M组和H组BMD、BV/TV、BS/TV、Tb.N、Conn.Dn显著增加,H组Tb.Sp、SMI显著降低;ELISA结果显示,与OVX组相比,M组、H组的BGP显著升高,TRAP5b显著降低。16S r DNA扩增子测序结果显示,在门水平上,H组的疣微菌门相对丰度较OVX组明显增加,拟杆菌门相对丰度较OVX组降低;在属水平上,H组艾克曼菌属、毛螺菌科_NK4A136菌属、双歧杆菌属、回肠杆菌属和毛螺旋菌属的相对丰度较OVX组升高,杜氏杆菌属、乳酸杆菌属、螺杆菌属和另枝菌属的相对丰度较OVX组降低;线性判别分析效应(LEf Se)分析结果显示,H组中的放线菌门、放线菌门未确定菌纲、双歧杆菌目、双歧杆菌属、双歧杆菌科、Ileibacterium valens和回肠杆菌属丰度富集。结论:番茄红素、叶黄素和植物甾醇联合应用可以明显改善OVX小鼠骨微结构,缓解骨丢失,其机制可能与调控肠道菌群结构和丰度相关。

关键词：绝经后骨质疏松症番茄红素叶黄素植物甾醇肠道菌群

miR-497对THP-1巨噬细胞NLRP1表达及胆固醇流出的影响

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中国老年学杂志 2022年第22期42卷 5574-5579页

作者：罗清宇曾高峰黄斌陈孔秦英楠南华大学附属第二医院功能检查科湖南衡阳421000 南华大学附属第二医院心血管内科湖南衡阳421000

目的探讨miR-497对人单核细胞白血病(THP)-1巨噬细胞含有Pyrin结构域NLR家族蛋白(NLRP)1表达及胆固醇流出的影响。方法THP-1巨噬细胞,经佛波酯及氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)处理,转化为泡沫细胞。将miR-497 mimic转染入细胞内,采用油红O... 详细信息

目的探讨miR-497对人单核细胞白血病(THP)-1巨噬细胞含有Pyrin结构域NLR家族蛋白(NLRP)1表达及胆固醇流出的影响。方法THP-1巨噬细胞,经佛波酯及氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)处理,转化为泡沫细胞。将miR-497 mimic转染入细胞内,采用油红O和Dil Ox-LDL染色检测细胞中的脂质积累和胆固醇流出情况,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测NLRP1 mRNA表达水平,Western印迹检测NLRP1、CD36、白细胞介素(IL)-1β及IL-18蛋白水平及荧光素酶报告基因分析miR-497与NLRP1的直接作用。结果油红O染色表明,miR-497 mimic转染后24 h,细胞中脂质储存显著下降(P<0.05)。利用Dil Ox-LDL来追踪Ox-LDL摄取,发现miR-497 mimic转染后24 h和48 h的胆固醇流出量显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,miR-497 mimic转染显著降低了THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞的NLRP1蛋白表达(P<0.05),并且CD36和IL-1β、IL-18等促炎因子蛋白表达显著降低(P<0.05)。NLRP1用荧光素酶报告基因检测miR-497的靶基因,并且与对照组相比,miR-497 mimic可显著抑制NLRP1 mRNA表达(P<0.05)。结论miR-497通过靶向抑制THP-1巨噬细胞NLRP1,促进胆固醇流出。

关键词： miR-497 单核细胞白血病(THP)-1巨噬细胞含有Pyrin结构域NLR家族蛋白(NLRP)1 胆固醇

传统财务会计沿着管理会计方向改革的趋势研究

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中文科技期刊数据库（全文版）经济管理 2022年第8期 20-23页

作者：曾高峰广东省电子职业技术学校广东广州510000

企业在复杂多变的市场环境中承受着巨大的冲击,需要灵活快捷完整的财务管理体系保障企业的正常运营,但目前企业的财务会计工作模式比较单一,输出效果难于达到公司发展需要。基于此,文章首先简要地介绍了财务会计向管理会计方向转型优势... 详细信息

企业在复杂多变的市场环境中承受着巨大的冲击,需要灵活快捷完整的财务管理体系保障企业的正常运营,但目前企业的财务会计工作模式比较单一,输出效果难于达到公司发展需要。基于此,文章首先简要地介绍了财务会计向管理会计方向转型优势,接着分析传统财会所面临的困境,最后重点提出了一些有效的转型策略,以便于后期研究提供相应的参考。

关键词：财务会计管理会计转型策略

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帕罗西汀干预破骨细胞分化的作用机制

中国组织工程研究 2023年第32期27卷 5184-5190页

作者：莫耀民刘槃马瑞鑫曾高峰宗少晖广西医科大学第一附属医院脊柱骨病外科广西壮族自治区南宁市530000 广西医科大学再生医学与医用生物资源开发应用省部共建协同创新中心广西壮族自治区南宁市530000 广西医科大学公共卫生学院广西壮族自治区南宁市530000

背景:破骨细胞过度活化是骨质疏松症发生、发展过程中的关键环节,探究破骨细胞功能、开发具有抑制破骨细胞分化减少骨重吸收的药物,是当前探索骨质疏松症临床治疗的重要手段。目的:基于MAPK/核因子κB信号通路,分析帕罗西汀影响破骨细... 详细信息

背景:破骨细胞过度活化是骨质疏松症发生、发展过程中的关键环节,探究破骨细胞功能、开发具有抑制破骨细胞分化减少骨重吸收的药物,是当前探索骨质疏松症临床治疗的重要手段。目的:基于MAPK/核因子κB信号通路,分析帕罗西汀影响破骨细胞分化的作用机制。方法:①体外实验:采用CCK-8实验检测不同浓度帕罗西汀对小鼠骨髓源性巨噬细胞增殖的影响。在巨噬细胞集落刺激因子和核因子κB受体活化因子配体的诱导下,使用不同浓度帕罗西汀干预破骨细胞分化,抗酒石酸酸性磷酸酶染色确定破骨细胞数目;RT-qPCR检测帕罗西汀对破骨细胞分化相关细胞因子mRNA表达的影响;Western Blot检测帕罗西汀对小鼠骨髓源性巨噬细胞中核因子κB、MAPK信号通路及破骨细胞相关蛋白表达的影响。②体内实验:将40只C57BL/6小鼠按随机数字表分为空白对照组、脂多糖组、帕罗西汀2 mg/kg,5 mg/kg组,每组10只。脂多糖组、帕罗西汀2 mg/kg,5 mg/kg组每2 d颅骨矢状缝皮下注射脂多糖(构建小鼠颅骨骨溶解模型),帕罗西汀两组每次皮下注射脂多糖1 d后注射对应剂量的帕罗西汀,14 d后,分离颅骨进行Micro-CT扫描分析。结果与结论:①体外实验:当帕罗西汀浓度≤5μmol/L时对小鼠骨髓源性巨噬细胞的增殖无影响,浓度大于10μmol/L时抑制细胞的增殖;当帕罗西汀浓度≥0.5μmol/L时,可明显抑制破骨细胞分化的数量及形态,抑制破骨细胞分化c-Fos、Nfatc1、Ctsk、Mmp9、Acp5、Atp6v0d2的mRNA表达水平;0.5μmol/L的帕罗西汀可通过抑制核因子κB、MAPK信号通路的激活,进而抑制破骨细胞相关蛋白c-Fos、Nfatc1、Ctsk的表达;②体内实验:Micro-CT扫描分析结果显示,与脂多糖组比较,帕罗西汀5 mg/kg组可以有效提高骨小梁数量、骨体积分数(P<0.05),降低骨表面积骨体积比、骨小梁分离度(P<0.05);③结果表明,帕罗西汀可以通过抑制破骨细胞分化减少骨的重吸收,具有潜在的治疗骨质疏松症作用。

关键词：帕罗西汀 MAPK 核因子κB 破骨细胞骨质疏松骨髓源性巨噬细胞

山楂叶总黄酮调控星形胶质细胞治疗脊髓损伤的分子机制

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中国组织工程研究 2023年第33期27卷 5327-5333页

作者：马瑞鑫刘槃张琼曾高峰宗少晖广西医科大学再生医学与医用生物资源开发应用省部共建协同创新中心广西壮族自治区南宁市530021 广西医科大学第一附属医院脊柱骨病外科广西壮族自治区南宁市530021 广西医科大学公共卫生学院广西壮族自治区南宁市530021

背景:星形胶质细胞对脊髓损伤后神经元的修复具有重要作用,有研究证明山楂叶总黄酮可促进大鼠脊髓损伤后运动功能恢复,山楂叶总黄酮是否影响星形胶质细胞促进神经元修复仍不清楚。目的:探索山楂叶总黄酮调控星形胶质细胞治疗脊髓损伤的... 详细信息

背景:星形胶质细胞对脊髓损伤后神经元的修复具有重要作用,有研究证明山楂叶总黄酮可促进大鼠脊髓损伤后运动功能恢复,山楂叶总黄酮是否影响星形胶质细胞促进神经元修复仍不清楚。目的:探索山楂叶总黄酮调控星形胶质细胞治疗脊髓损伤的分子机制。方法:构建脊髓星形胶质细胞与脊髓神经元transwell共培养模型,对照组为正常脊髓星形胶质细胞和正常脊髓神经元;损伤组为正常脊髓星形胶质细胞和损伤脊髓神经元;药物组为125μg/mL山楂叶总黄酮干预的正常脊髓星形胶质细胞和损伤脊髓神经元。荧光探针DCFH-DA检测脊髓神经元内活性氧的生成;实时荧光定量PCR检测脑源性神经营养因子、神经生长因子、转录因子4的表达;Western blot检测脑源性神经营养因子、神经生长因子、Wnt/β-catenin通路关键蛋白GSK-3β、phsopho-GSK-3β(ser9)、β-catenin及转录因子4的表达;免疫荧光观察Wnt/β-catenin通路关键蛋白β-catenin的表达。结果与结论:(1)损伤组活性氧生成远高于对照组(P<0.001);药物组活性氧生成低于损伤组(P<0.01),高于对照组(P<0.001);(2)药物组脑源性神经营养因子、神经生长因子基因及蛋白表达高于对照组与损伤组(P<0.01);(3)与对照组、损伤组相比,药物组phsopho-GSK-3β(ser9)蛋白表达增加(P<0.001),β-catenin蛋白表达增加(P<0.001),转录因子4基因及蛋白表达增加(P<0.01);(4)结果表明,山楂叶总黄酮可以减轻脊髓神经元的氧化损伤,激活星形胶质细胞Wnt/β-catenin通路,结合转录因子4启动转录,促进其分泌神经营养因子,实现对脊髓神经元的修复。

关键词：山楂叶总黄酮星形胶质细胞脊髓损伤 Wnt/β-catenin通路脑源性神经营养因子神经生长因子