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MIF在不同直径猪卵泡的表达变化规律

中国农业大学学报 2021年第9期26卷 118-123页

作者：陈彦宏曾申明中国农业大学动物科技学院北京100193

为分析巨噬细胞迁移抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)在不同直径健康猪卵泡上的表达变化规律,将收集到的90个健康母猪卵巢,通过ELISA检测不同直径卵泡液中MIF质量浓度,通过实时荧光定量PCR和Western blot检测颗粒... 详细信息

为分析巨噬细胞迁移抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)在不同直径健康猪卵泡上的表达变化规律,将收集到的90个健康母猪卵巢,通过ELISA检测不同直径卵泡液中MIF质量浓度,通过实时荧光定量PCR和Western blot检测颗粒细胞中MIF基因mRNA和蛋白的表达水平,采用免疫荧光检测MIF在颗粒细胞中的分布情况。结果显示:1)中等直径卵泡(3~4mm)液中MIF的质量浓度(54.17±7.86ng/mL)显著高于大卵泡(>6mm,32.29±1.47ng/mL)和小卵泡(1~2mm,38.89±0.98ng/mL)(P<0.05),2)中等直径卵泡颗粒细胞中MIF基因mRNA和蛋白质表达量也显著高于大卵泡和小卵泡的表达量(P<0.05),3)MIF也在不同直径卵泡颗粒细胞中的细胞核和细胞质表达,但多集中于细胞质中。综上,随着猪卵泡发育过程,MIF在中等直径卵泡中表达量最高。本研究为母猪卵泡发育和排卵提供新的线索。

关键词： MIF 卵泡发育颗粒细胞

咪唑诱导的人子宫内膜癌细胞HEC-1B空泡化现象研究

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中国畜牧杂志 2011年第19期47卷 21-24页

作者：张玖航曾申明中国农业大学动物科技学院北京100193

咪唑作为一种弱碱性物质,处理动物子宫内膜细胞后,可诱导其产生空泡化现象,进而影响其生殖生理功能。本研究使用人子宫内膜癌细胞HEC-1B作为模型,使用咪唑处理导致细胞空泡化后探讨空泡化产生的生理机制。通过基因芯片分析、荧光定量PC... 详细信息

咪唑作为一种弱碱性物质,处理动物子宫内膜细胞后,可诱导其产生空泡化现象,进而影响其生殖生理功能。本研究使用人子宫内膜癌细胞HEC-1B作为模型,使用咪唑处理导致细胞空泡化后探讨空泡化产生的生理机制。通过基因芯片分析、荧光定量PCR检测、激光共聚焦显微镜观察等方法进行研究。结果表明:咪唑处理人子宫内膜癌细胞HEC-1B后,空泡型质子泵(V-ATPase)亚基V0D2基因表达量上调。使用荧光定量PCR验证芯片结果,V-ATPase亚基V0D2 mRNA表达量有所上调。对V-ATPase另外一个亚基V1E1基因进行荧光定量PCR,其mRNA表达量也有所上调。使用V-ATPase抑制剂巴弗洛霉素A1和咪唑共同处理人子宫内膜癌细胞HEC-1B后,通过吖啶橙染色,激光共聚焦显微镜观察,咪唑诱导的空泡被显著抑制。上述结果证明了V-ATPase在咪唑诱导的细胞空泡化中的重要作用。

关键词：空泡型质子泵细胞空泡化咪唑人子宫内膜癌细胞HEC-1B

受精液中精子密度及添加单宁酸对猪胚胎体外生产效率的影响

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中国畜牧杂志 2022年第9期58卷 191-194页

作者：林娟纪竺青曾申明中国农业大学动物科学技术学院北京100193

实验旨在研究受精液中精子密度和添加单宁酸(TA)对猪体外成熟卵母细胞体外受精(IVF)后胚胎发育能力的影响,并初步探讨TA提高胚胎生产效率的机理。将猪体外成熟卵母细胞在不同精子密度的受精液[(9.6±0.4)×10^(6)、(5.1±0.2)×10^(6)、... 详细信息

实验旨在研究受精液中精子密度和添加单宁酸(TA)对猪体外成熟卵母细胞体外受精(IVF)后胚胎发育能力的影响,并初步探讨TA提高胚胎生产效率的机理。将猪体外成熟卵母细胞在不同精子密度的受精液[(9.6±0.4)×10^(6)、(5.1±0.2)×10^(6)、(3.7±0.2)×10^(6)、(2.6±0.1)×10^(6)个/mL]内进行IVF,之后依据受精卵体外培养的卵裂率和囊胚率确定受精液中较适宜的精子密度。在确定的适宜精子密度的受精液中分别添加0(对照组)、2、5、10μg/mL TA,分析TA对胚胎发育能力的影响,通过Hoechst 33342荧光染色检测IVF后12 h原核形成情况,并采用考马斯亮蓝G-250染色检测受精液中孵育2 h的精子顶体反应情况。结果表明:(5.1±0.2)×10^(6)个/mL组卵裂率及囊胚率高于(9.6±0.4)×10^(6)个/mL组、(2.6±0.1)×10^(6)个/mL组(P0.05);TA处理组精子的顶体反应率低于对照组(P<0.05)。由此可见,猪卵母细胞IVF时较为适宜的精子密度为5.0×10^(6)个/mL左右,受精液中添加5μg/mL TA可显著提高猪体外生产胚胎的囊胚率和囊胚细胞数。

关键词：精子密度单宁酸胚胎体外生产猪

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小鼠扩张囊胚低渗液处理试验

中国畜牧杂志 1998年第2期34卷 9-10页

作者：朱士恩曾申明张忠诚中国农业大学动物科技学院

为研究解冻后的胚胎膨胀对其发育率的影响，本试验用２０～５０％的低渗ＰＢＳ溶液（即０．２０×、０．２５×、０．３０×及０．５０×），分别将小鼠扩张囊胚在低渗液中处理３０分钟后培养，结果新鲜胚在０．５０×和０．３０×中处... 详细信息

为研究解冻后的胚胎膨胀对其发育率的影响，本试验用２０～５０％的低渗ＰＢＳ溶液（即０．２０×、０．２５×、０．３０×及０．５０×），分别将小鼠扩张囊胚在低渗液中处理３０分钟后培养，结果新鲜胚在０．５０×和０．３０×中处理后的发育率分别为１００％和９１％，０．２０×处理组的发育率降低到５３％。解冻后的胚胎直接用低渗液处理，０．５０×组只有８５％继续发育，低于０．２５×组完全不能发育。而解冻后经培养恢复到扩张囊胚后再做低渗处理，０．３０×组仍有９６％继续发育。

关键词：低渗液膨胀玻璃化扩张囊胚小鼠