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来源于Pseudomonas多巴脱羧酶的异源表达、纯化及酶学性质研究

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生物学杂志 2024年第1期41卷 14-19页

作者：周耀林孙登岳曾志雄李霞齐鲁工业大学(山东省科学院)生物工程学部济南250000 齐鲁工业大学(山东省科学院)生物基材料与绿色造纸国家重点实验室济南250000

将来源于Pseudomonas的多巴脱羧酶(DOPA decarboxylase,DODC)基因序列经过PCR扩增,双酶切,连接到载体CV6-pGEX-6P-1上,经验证、测序成功构建表达载体CV6-pGEX-6P-1-DODC。转入大肠杆菌BL21(DE3)重组表达,表达条件为OD值达到0.6~0.8,异丙基β-D-1-硫代半乳糖苷(IPTG)终浓度为0.1 mmol/L,16℃过夜培养12~16 h。结果表明:在BL21(DE3)大肠杆菌中经诱导表达得到较高表达量的DODC融合蛋白;经过GST-亲和层析、3C蛋白酶切、离子交换层析得到纯度95%以上的DODC纯化蛋白;对DODC的酶学性质进行研究,该酶的最适反应温度为40℃,对温度的影响比较敏感,在20~30℃酶活在80%以上,超过30℃酶活大幅度降低,最适缓冲液为PBS缓冲液,最适反应pH值为7.5,最适底物为左旋多巴(L-DOPA),金属阳离子Ca^(2+)对酶活力有促进作用。序列同源性分析表明,来源于Pseudomonas的DODC属于AAT-Ι超家族,并且预测出该酶的保守催化活性位点为Thr 241。

关键词：多巴脱羧酶(DODC) 异源表达蛋白纯化酶学性质底物特异性

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曾志雄的诗

嘉应文学 2023年第13期 27-29页

作者：曾志雄梅州市作家协会蕉岭县作家协会

关键词：

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复杂施工条件下的地下连续墙施工技术应用

中文科技期刊数据库（引文版）工程技术 2024年第7期 0189-0192页

作者：曾志雄上犹县城发置业有限公司江西赣州341200

地下连续墙施工技术是深基坑支护工程广泛应用的一种技术,该技术应用具有提升基坑防渗性能,构建基坑支护结构的价值,是深基坑施工环节的重要组成部分,受到复杂周边环境及不良地质影响,地下连续墙施工技术应用价值难以得到充分发挥,基坑... 详细信息

地下连续墙施工技术是深基坑支护工程广泛应用的一种技术,该技术应用具有提升基坑防渗性能,构建基坑支护结构的价值,是深基坑施工环节的重要组成部分,受到复杂周边环境及不良地质影响,地下连续墙施工技术应用价值难以得到充分发挥,基坑稳定性随之下降,基于此,本文主要阐述了复杂施工条件下的地下连续墙施工技术应用要点,以期为工程项目建设人员提供参考。

关键词：复杂施工条件地下连续墙施工技术

基于BPNN-PID控制策略的果蔬保鲜环境参数调控优化

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华南农业大学学报 2024年第1期45卷 137-147页

作者：吕恩利蔡晋炜曾志雄蔡威谢伯铭王广海郭嘉明华南农业大学工程学院广东广州510642 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东茂名525000 广东机电职业技术学院广东广州510550

【目的】开发新的控制策略,用于解决传统控制方法果蔬保鲜环境参数因时变性、非线性、滞后性强和惯性大等特点导致的控制精度低、鲁棒性弱等问题。【方法】将传统比例−积分−微分(Proportional-integral-derivative,PID)和BP神经网络(Bac... 详细信息

【目的】开发新的控制策略,用于解决传统控制方法果蔬保鲜环境参数因时变性、非线性、滞后性强和惯性大等特点导致的控制精度低、鲁棒性弱等问题。【方法】将传统比例−积分−微分(Proportional-integral-derivative,PID)和BP神经网络(Back-propagation neural network,BPNN)算法相结合,开发一种基于BPNN-PID的控制策略,通过自主搭建的果蔬保鲜环境调控试验平台和自主设计的控制系统,研究不同控制策略对保鲜环境参数调控效果的影响。【结果】基于BPNN-PID控制策略的果蔬保鲜环境控制系统,环境温度超调量为1.7℃、稳定时间为80 min、稳态误差为±0.2℃,环境相对湿度超调量为2.8%、稳定时间为55 min,相对湿度稳定维持在80%~90%范围内。与传统PID控制策略相比,BPNN-PID控制策略环境温度超调量减小了2.1℃、稳态误差减小了0.3℃、稳定时间缩短了25 min,环境相对湿度超调量减小了2.2%、稳定时间缩短了25 min,环境参数波动幅度均有所降低。【结论】本文开发的果蔬保鲜环境控制系统呈现出良好的动态调整能力,具有较强的鲁棒性,控制性能明显提升,实现了保鲜环境参数的精准控制,满足果蔬保鲜贮藏要求。研究结果为果蔬保鲜环境参数调控提供了参考。

关键词： PID BPNN 控制系统果蔬保鲜环境参数超调量

支气管肺泡灌洗辅助治疗重症肺炎合并呼吸衰竭的疗效及对炎性因子、肺功能的影响

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智慧健康 2024年第4期10卷 84-86,94页

作者：曾志雄李军王盛龙广西柳州市中医医院呼吸与危重症医学科二病区广西柳州545001

目的研究支气管肺泡灌洗辅助治疗重症肺炎合并呼吸衰竭的疗效及对炎症因子、肺功能的影响。方法选取2017年1月—2023年1月本院收治的重症肺炎合并呼吸衰竭的300例患者为研究对象,并按照随机数字法分为两组,对照组(150例)应用常规治疗,... 详细信息

目的研究支气管肺泡灌洗辅助治疗重症肺炎合并呼吸衰竭的疗效及对炎症因子、肺功能的影响。方法选取2017年1月—2023年1月本院收治的重症肺炎合并呼吸衰竭的300例患者为研究对象,并按照随机数字法分为两组,对照组(150例)应用常规治疗,观察组(150例)在对照组基础上加用支气管肺泡灌洗辅助治疗,比较两组治疗前后炎症因子的变化、肺功能的变化以及两组的临床效果。结果治疗后C反应蛋白(CRP)、人白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子(TNF-a)水平明显降低,观察组低于对照组,两组间比较差异显著(P<0.05)。治疗后观察组FEV1和PEF明显升高,观察组高于对照组,两组间比较差异显著(P<0.05)。观察组临床疗效总有效率远高于对照组,两组间比较差异显著(P<0.05)。结论对于重症肺炎并发呼吸衰竭的患者,应用支气管肺泡灌洗辅助治疗能有效缓解机体的炎症情况,从而促进病情转归。

关键词：重症肺炎呼吸衰竭支气管肺泡灌洗炎症因子肺功能

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分娩母猪舍仔猪智能保温控制系统设计

中国农机化学报 2024年第7期45卷 54-59,67页

作者：曾志雄邬锡权代叶罗志杰涂祥吕恩利华南农业大学工程学院广州市510642 农业农村部华南现代农业智能装备重点实验室广州市510630 广州迦恩科技有限公司广州市511363 广东机电职业技术学院广州市510550 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东茂名525000

为解决传统仔猪加热装置难以满足不同日龄仔猪体感温度需求、能耗高等问题,设计一种分娩舍仔猪智能保温控制系统。分娩舍仔猪智能保温控制系统根据猪舍养殖环境因子如温度、相对湿度和风速,推算仔猪当前的体感温度,智能和集群调节保温... 详细信息

为解决传统仔猪加热装置难以满足不同日龄仔猪体感温度需求、能耗高等问题,设计一种分娩舍仔猪智能保温控制系统。分娩舍仔猪智能保温控制系统根据猪舍养殖环境因子如温度、相对湿度和风速,推算仔猪当前的体感温度,智能和集群调节保温设备的输出功率,以满足不同阶段日龄仔猪对体感温度的需求。开展分娩母猪舍仔猪保温控制系统试验,试验结果表明,该系统能够将仔猪体感温度控制在设定温度区间内,体感温度波动范围在±0.75℃内。不同日龄下体感温度数据计算出的变异系数均小于0.1,表现为弱变异性,说明体感温度的离散程度较小,系统控制体感温度效果相对稳定。该研究为分娩母猪舍环境调控提供参考。

关键词：分娩舍仔猪智能保温嵌入式控制集群控制

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器械管理系统在口腔器械包装中的应用效果

中国消毒学杂志 2024年第4期41卷 300-302页

作者：叶凤清杜合英李芸方婷曾志雄林晓旭深圳市人民医院暨南大学第二临床医学院南方科技大学第一附属医院广东深圳518020 中山大学附属第一医院

目的探讨器械管理系统在口腔器械包装中的应用效果。方法选取消毒供应中心2020年7—12月采用纸塑袋包装的口腔器械为对照组,2021年1—6月采用器械管理系统包装的口腔器械为试验组,比较2组包装时间、包装不合格率、器械损坏率及灭菌合格... 详细信息

目的探讨器械管理系统在口腔器械包装中的应用效果。方法选取消毒供应中心2020年7—12月采用纸塑袋包装的口腔器械为对照组,2021年1—6月采用器械管理系统包装的口腔器械为试验组,比较2组包装时间、包装不合格率、器械损坏率及灭菌合格率。结果试验组的平均包装时间(7.21 h/d)、包装不合格率(0.02%)及器械损坏率(0.02%)均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);2组灭菌合格率差异无统计学意义。结论采用器械管理系统包装口腔器械可在保证灭菌效果的同时,缩短包装时间,降低包装不合格率及器械损坏率。

关键词：器械管理系统口腔器械包装时间

深圳市三级甲等医院手术室护士职业暴露情况调查

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中国消毒学杂志 2024年第6期41卷 470-472页

作者：曾志雄叶凤清周思佳林晓旭纪海燕李芸深圳市人民医院广东深圳518020 深圳市人民医院龙华分院

目的了解和分析深圳市三级甲等医院手术室护士职业暴露的发生状况,为相关职业防护管理及培训提供依据。方法便利抽取6家三级甲等医院手术室180名护士进行问卷调查。结果共收集有效问卷174份,问卷有效率为96.7%。发生过职业暴露的护士有... 详细信息

目的了解和分析深圳市三级甲等医院手术室护士职业暴露的发生状况,为相关职业防护管理及培训提供依据。方法便利抽取6家三级甲等医院手术室180名护士进行问卷调查。结果共收集有效问卷174份,问卷有效率为96.7%。发生过职业暴露的护士有114名,其中针刺伤发生率最高(36.2%),其次为碰撞伤(33.9%)和口腔溃疡(23.6%)。手术室护士对职业暴露相关危险因素认知情况中等,平均得分范围为3.77~4.72。结论深圳市手术室护士职业暴露损伤发生率相对较高,对职业暴露认知有待进一步加强,管理人员应强化职业防护措施培训,降低职业暴露风险。

关键词：手术室职业暴露防护行为护士横断面调查

来源于糖丝菌双(2-羟乙基)对苯二甲酸酯水解酶的酶学性质表征及降解特性分析

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生物工程学报 2023年第5期39卷 2027-2039页

作者：张洁单瑞达李霞曾志雄孙登岳齐鲁工业大学(山东省科学院)生物工程学院山东济南250000 齐鲁工业大学(山东省科学院)生物基材料与绿色造纸国家重点实验室山东济南250000

聚对苯二甲酸乙二醇酯[poly(ethylene terephthalate),PET]降解酶的发掘是国内外研究的热点。双(2-羟乙基)对苯二甲酸酯[bis-(2-hydroxyethyl)terephthalic acid,BHET]是PET降解过程的一种中间化合物,会与PET竞争酶的底物结合位点,从而抑制PET进一步降解。因此,探寻新型BHET降解酶,对进一步提高PET的降解效率具有促进作用。本研究通过基因挖掘发现了一种来源于浅黄糖丝菌(Saccharothrix luteola)参与PET降解过程的水解酶基因sle(ID:CP064192.1,5085270–5086049),其编码的蛋白质可以将BHET水解为单(2-羟乙基)对苯二甲酸酯[mono-(2-hydroxyethyl)terephthalate,MHET]和对苯二甲酸(terephthalic acid,TPA)。将BHET水解酶(Sle)通过重组质粒在大肠杆菌(Escherichia coli)中异源表达,结果表明,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导终浓度为0.4 mmol/L,诱导时长为12 h,诱导温度为20℃时蛋白的表达量最高。通过镍亲和层析、阴离子交换层析和凝胶过滤层析3步分离纯化,获得了高纯度的Sle重组蛋白;同时对其酶学性质进行了表征,Sle最适温度和pH分别为35℃和8.0,在25–35℃和pH 7.0–9.0区间内能保持80%以上的残余酶活,且金属离子Co^(2+)能提高酶活力;进一步通过同源序列及Sle复合物结构分析得知,该酶属于二烯酸内酯水解酶(dienelactone hydrolase,DLH)家族,具备该家族典型的催化三联体,预测其催化位点分别为S129、D175和H207,并初步分析了其催化机理。最后,利用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)鉴定了该酶能够特异性降解BHET生成MHET和TPA,属于BHET降解酶。本研究为生物酶法高效降解PET塑料提供了新的酶资源。

关键词：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET) 双(2-羟乙基)对苯二甲酸酯(BHET)降解酶分离纯化酶学性质