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鼠TNF家族的B细胞活化因子ORF基因的克隆及原核表达

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中国生物制品学杂志 2010年第9期23卷 970-973页

作者：弓莉王元占杨培梁刘谋荣朱玉峰曾俊岭吴湘慧南方医院实验动物研究中心广州510515

目的克隆鼠TNF家族的B细胞活化因子(Bcell activating factor of TNF family,BAFF)ORF基因,并进行原核表达及纯化。方法提取鼠新鲜脾脏组织总RNA,经RT-PCR扩增BAFF ORF基因,测序后,克隆入载体pMAL-c2x,构建重组表达质粒pMAL-c2x/BAFF O... 详细信息

目的克隆鼠TNF家族的B细胞活化因子(Bcell activating factor of TNF family,BAFF)ORF基因,并进行原核表达及纯化。方法提取鼠新鲜脾脏组织总RNA,经RT-PCR扩增BAFF ORF基因,测序后,克隆入载体pMAL-c2x,构建重组表达质粒pMAL-c2x/BAFF ORF,转化大肠杆菌Rosseta(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经亲和层析纯化后,进行Western blot分析。结果 RT-PCR扩增得到约930bp的cDNA,其序列与GenBank中登录的鼠BAFF ORF cDNA序列的同源性达99.9%;重组表达质粒pMAL-c2x/BAFF ORF经酶切鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为76500,IPTG终浓度为0.9mmol/L,诱导时间为4h,目的蛋白的表达量最高,破菌上清和沉淀中均可见目的蛋白条带,可溶性蛋白的表达量占全菌总蛋白的49%;纯化的重组蛋白纯度可达90%,含量为0.9mg/ml,且具有良好的反应原性。结论已成功克隆了鼠BAFF ORF基因,并进行了原核表达及纯化,为进一步研究其生物功能奠定了基础。

关键词： TNF家族的B细胞活化因子克隆,分子原核细胞基因表达

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实验动物麻醉过深的救治及预防

实验动物科学 2009年第1期26卷 61-62,64页

作者：杨培梁王元占朱玉峰吴湘慧曾俊岭刘谋荣弓莉南方医科大学南方医院科研处广州510515 南方医科大学南方医院实验动物研究中心广州510515

在进行医学动物实验时,为了减少实验动物的痛苦、保障动物实验的顺利进行以及保护实验操作者的人身安全,对实验动物进行麻醉是必要步骤之一。然而医学实验者在麻醉时常遇到实验动物麻醉过深的问题,其后果轻则可影响实验进程和部分实验指... 详细信息

在进行医学动物实验时,为了减少实验动物的痛苦、保障动物实验的顺利进行以及保护实验操作者的人身安全,对实验动物进行麻醉是必要步骤之一。然而医学实验者在麻醉时常遇到实验动物麻醉过深的问题,其后果轻则可影响实验进程和部分实验指标,重则导致实验动物的死亡。尤其是价格昂贵的大动物和长期实验进程中的实验动物死亡,对整个实验的损失巨大。因此,[第一段]

关键词：实验动物麻醉过深救治预防

血管化组织工程骨修复猕猴胫骨缺损模型的麻醉配合

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养殖与饲料 2013年第10期12卷 14-16页

作者：曾俊岭王元占杨培梁吴湘慧朱玉峰刘谋荣弓莉南方医院实验动物研究中心广州510000

为寻找建立猕猴胫骨缺损及组织工程骨血管化模型的适宜麻醉方法,实验采用盐酸氯胺酮和速眠新复合全麻、术中用3%戊巴比妥钠巩固麻醉效果的复合麻醉方法,对20只猕猴进行了40次的全麻。结果显示:在手术过程中没有出现一例麻醉意外事故。... 详细信息

为寻找建立猕猴胫骨缺损及组织工程骨血管化模型的适宜麻醉方法,实验采用盐酸氯胺酮和速眠新复合全麻、术中用3%戊巴比妥钠巩固麻醉效果的复合麻醉方法,对20只猕猴进行了40次的全麻。结果显示:在手术过程中没有出现一例麻醉意外事故。表明盐酸氯胺酮和速眠新复合全麻、术中用3%戊巴比妥钠巩固麻醉效果的复合麻醉方法,适合建立猕猴胫骨缺损及组织工程骨血管化模型的麻醉。

关键词：猕猴胫骨缺损的动物模型麻醉配合盐酸氯胺酮速眠新戊巴比妥钠

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动物实验伦理学审查在线平台的开发与应用

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